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苦瓜多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的影响

粮油食品科技 2022年第1期30卷 105-112页

作者：阿尔祖古丽·阿卜力米提李敬双金鑫于洋锦州医科大学食品科学与工程学院辽宁锦州121001 锦州医科大学畜牧兽医学院辽宁锦州121001

以苦瓜多糖(mCP)为研究对象,在细胞和分子水平上探讨其对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用机制。以空白组和左旋咪唑组为对照,小鼠脾淋巴细胞经不同质量浓度(40,80,160,320μg/mL)的mCP体外刺激,检测mCP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,腹腔巨... 详细信息

以苦瓜多糖(mCP)为研究对象,在细胞和分子水平上探讨其对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用机制。以空白组和左旋咪唑组为对照,小鼠脾淋巴细胞经不同质量浓度(40,80,160,320μg/mL)的mCP体外刺激,检测mCP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,腹腔巨噬细胞的吞噬活性,淋巴细胞上清液中IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12分泌与mrna表达水平。分析发现,与空白组相比,随浓度的升高细胞增殖指数倍数增长(PmCP能不同程度的促进细胞增殖、不同程度的增强巨噬细胞的吞噬能力(Pmrna表达显著上升,最高表达水平分别为空白组的9.18、7.53、9.37、8.95倍,存在显著性差异(PmCP能有效提高细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌和mrna表达水平,促进细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬活性,从而提高机体免疫功能。

关键词：苦瓜多糖脾淋巴细胞细胞增值巨噬细胞细胞因子 m rna

基于大鼠心肌circrna/lncrna调控的cerna网络分析热习服防护热损伤的效应及机制研究

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基于大鼠心肌circRNA/lncRNA调控的ceRNA网络分析热习服防护热损...

作者：陈家俊军事科学院

学位级别：硕士

研究背景:目前,我军实行全域机动作战,涉及到急进热区环境。东南沿海和南沙诸岛是我国重要的军事战略要地,常年高温、高湿、紫外线强烈。在这种环境下作业极易发生热损伤,尤其重症中暑,是威胁高温环境作业人员的主要热损伤,致死率与致... 详细信息

研究背景:目前,我军实行全域机动作战,涉及到急进热区环境。东南沿海和南沙诸岛是我国重要的军事战略要地,常年高温、高湿、紫外线强烈。在这种环境下作业极易发生热损伤,尤其重症中暑,是威胁高温环境作业人员的主要热损伤,致死率与致残率高,严重影响军人健康和战斗力生成。因此提高热环境下的耐热能力对减缓热损伤至关重要。目前,热习服（heat acclimation,HA）是高温暴露的有效保护手段之一,通过改善体温调节和减少心血管紧张,使机体作业能力及热舒适度提高,保护关键器官免于热损伤,但具体分子机制尚未完全阐明。HA的机制主要涉及神经突触可塑性及细胞保护,离子通道、神经递质、受体、热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）、热休克因子1（heat shock factor 1,HSF1）、缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）等因子参与调节,但尚未发现HA中的特异性分子。近年来,随着测序技术的发展,对环状rna（circular rna,circ rna）、长链非编码rna（long non-coding rna,lnc rna）、微小rna（micro rna,mi rna）和m rna等研究发现非编码rna（non-coding rna,nc rna）具有作为新一类生物标志物的潜力。然而关于HA防护热应激（heat stress,HS）过程中nc rnas表达情况及基于circ rna/lnc rna调控的竞争性内源rna（competing endogenouse rna,ce rna）调控网络仍不清楚。因此,阐明nc rnas在HA/HS中的作用及可能的调控通路对于深入认识热习服分子机制,靶向防护热损伤具有重要意义。研究目的:本研究通过建立大鼠和细胞水平HA/HS模型,探究HA对HS的防护效应,并借助高通量测序技术,筛选与HA/HS相关的nc rnas,并构建差异表达circ rna/lnc rna调控的ce rna网络。为研究HA/HS密切相关nc rnas的生物学功能和调控机制提供理论基础。研究方法:1.大鼠和心肌细胞（H9C2）HA/HS模型建立及HA防护HS效应研究（1）大鼠HA/HS模型的建立:SPF级SD大鼠随机分为4组:对照组（C组）、热习服组（HA组）、热应激组（HS组）和热习服+热应激组（HA+HS组）,C组置于普通动物房饲养,HA组每天置于（35±0.5）℃,湿度为（60±5）%的热舱中2 h（15:00～17:00）,连续30 d,HA+HS组和HS组在HA结束后第2 d置于（42±0.5）℃,湿度为（60±5）%的热舱中30 min（8:00～8:30）,连续3 d。细胞HA/HS模型的建立:H9C2细胞分为4组:C组（37℃）、HA组（39.5℃,3h/d,连续3 d）、HS组（44℃、2 h）、HA+HS组（细胞经3 d HA后,随后进行HS）。（2）大鼠HA/HS期间体重和肛温的测定:HA期间,每天固定时间测量C组和HA组体重及采食情况,在实验第0、1、10、20、30 d测量C组和HA组HA前后的肛温;HS期间,测量HS组和HA+HS组HS第1、2、3 d前后的体重及肛温。（3）苏木精-伊红（Hematoxylin-Eosin,H＆E）染色观察大鼠心肌组织病理学改变。（4）利用Cell Counting Kit 8（CCK-8）法检测H9C2细胞的各组细胞活力。（5）酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清和H9C2细胞中炎性因子及氧化应激水平。2.大鼠心肌rna测序（rna sequencing,rna-seq）及功能分析（1）HA/HS模型建立后,收集大鼠心肌组织,提取总rna,使用Illumina Nova 6000进行全基因组测序,筛选HA/HS相关差异表达circ rnas、lnc rnas、mi rnas和m rnas,并利用RT-q PCR进行验证。（2）利用GO富集分析和KEGG通路分析对差异表达的circ rnas、lnc rnas、mi rnas和m rnas进行功能注释。3.构建HA/HS相关的特异ce rna网络（1）利用皮尔逊相关系数和rna之间的相互结合关系构建circ rnas和lnc rnas调控的ce rna网络。（2）利用GO富集分析和KEGG通路分析对circ rnas和lnc rnas调控的ce rna网络进行功能注释。研究结果:1.HA防护HS效应研究（1）HA期间:与C组相比,在第10、20、30 d HA后,HA组体重增长量较C组显著降低（P＜0.01）,HA组平均日增量和平均日采食量显著降低（P＜0.05）,料重比升高,饲料转化率降低,与HA 1 d相比,HA组10 d后肛温逐渐降低并趋于稳定;HS期间:与HS组相比,HA+HS组体重丢失率显著降低（P＜0.01）

关键词：热习服热应激 rna测序 circ rna lnc rna mi rna m rna ce rna调控网络

基于TCGA数据库挖掘胰腺癌预后相关甲基化位点

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南京医科大学学报（自然科学版） 2020年第8期40卷 1135-1139,1162页

作者：时国东陈群胡青桥卢诚袁昊孟令东黄徐敏陆怡超沈鹏张奕晗张凯张静静苗毅蒋奎荣南京医科大学第一附属医院胰胆中心江苏南京210029 南京医科大学第一附属医院核医学科江苏南京210029 南京同仁医院普外科江苏南京211102

目的:通过对肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库内胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adrenocarcinoma,PDAC)相关数据的研究,从全基因组水平发现影响PDAC预后的甲基化位点及基因。方法:从TCGA网站下载2016年1月28日更新... 详细信息

目的:通过对肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库内胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adrenocarcinoma,PDAC)相关数据的研究,从全基因组水平发现影响PDAC预后的甲基化位点及基因。方法:从TCGA网站下载2016年1月28日更新版本的有关PDAC的临床数据、甲基化数据(基于Illumina methylation 450芯片)及转录组数据(基于Illumina Hiseq测序)。纳入兼具预后数据和甲基化数据的患者179例,应用Cox比例风险模型分析每个位点甲基化水平与PDAC患者总体生存率的关系。进一步纳入兼有甲基化数据及转录组数据的患者173例,分析甲基化水平与对应mrna表达水平的关系。最后分析mrna表达水平与PDAC患者总体生存率的关系。结果:用于甲基化预后分析的179例患者年龄为(64.64±10.96)岁,用于相关性分析和m rna预后分析的173例患者年龄为(64.46±10.91)岁,两者中位生存时间均为20.1个月。本研究发现的与PDAC预后关系最显著的前20个甲基化位点中,11个位点的高甲基化水平为PDAC预后的危险因素,9个为保护因素。位于ZNF438基因5′UTR区的cg01656216探针靶向的位点与PDAC预后相关最显著(HR=0.37,95%CI:0.24~0.56,P=4.11×10-6)。进一步发现8个位点甲基化水平与相应mrna表达水平呈负相关(rm rna表达水平还与预后有关(HR=1.66,95%CI:1.06~2.61,P=0.027;HR=1.86,95%CI:1.21~2.88,P=0.005)。结论:通过对TCGA数据库PDAC样本的分析发现,PKP3和EFNB2基因的甲基化水平与PDAC预后相关,可进一步发掘其作为PDAC预后相关生物标志物的潜能。

关键词：胰腺导管腺癌 TCGA 甲基化 m rna 预后

lncrna-mirna-mrna轴与心血管疾病发病相关性的研究进展

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南京医科大学学报（自然科学版） 2021年第10期41卷 1552-1557,1564页

作者：苏忆玲陆齐南通大学附属医院心内科江苏南通226000

长链非编码rna(long noncoding rna,lncrna)是从哺乳动物基因组中转录出来缺乏蛋白质编码潜力的核酸分子,主要从表观遗传学、转录调控和转录后调控3个方面实现基因表达调控,或者直接参与调节蛋白质活性。随着测序技术的进展,发现lncrna... 详细信息

长链非编码rna(long noncoding rna,lncrna)是从哺乳动物基因组中转录出来缺乏蛋白质编码潜力的核酸分子,主要从表观遗传学、转录调控和转录后调控3个方面实现基因表达调控,或者直接参与调节蛋白质活性。随着测序技术的进展,发现lncrna可以充当微小rna(microrna,mirna)的竞争性内源rna,再进一步调节mrna的表达。目前研究证实lncrna-mirna-mrna轴与心血管疾病的发病机制密切相关,文章介绍该轴在心血管疾病发病中的最新进展。

关键词：心血管疾病 lncrna mirna m rna

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FGF3在大肠癌中的表达及临床意义研究

FGF3在大肠癌中的表达及临床意义研究

作者：王安磊河北医科大学

学位级别：硕士

目的:大肠癌是全世界最常见的高发恶性肿瘤之一,近年来大肠癌的发病率呈现出上升趋势。大肠癌的发病原因复杂并未完全阐明,但多数学者认为大肠癌的发生是由多种因素及多种基因相互作用而逐步发展的结果。目前有大量研究表明,人类多数肿... 详细信息

目的:大肠癌是全世界最常见的高发恶性肿瘤之一,近年来大肠癌的发病率呈现出上升趋势。大肠癌的发病原因复杂并未完全阐明,但多数学者认为大肠癌的发生是由多种因素及多种基因相互作用而逐步发展的结果。目前有大量研究表明,人类多数肿瘤的发生、发展过程均与FGF3成纤维细胞生长因子3基因表达相关,并与肿瘤的恶性分化及预后有关。本实验通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测大肠癌患者癌组织和其对应癌旁组织中FGF3 mrna的相对表达量水平,通过对实验数据及临床病理资料的分析,研究FGF3 mrna与大肠癌之间的关系,为深入了解FGF3在大肠癌发病过程中发挥的作用提供理论依据。方法:1收集2015年9月016年10月51对来自河北医科大学第一医院普外科大肠癌及对应癌旁组织手术标本。大肠癌组织定义为病理证实的无坏死、穿孔及溃疡的原发大肠癌组织;癌旁组织定义为距离肿瘤边缘5cm以上的病理证实的非癌组织,并且无坏死、穿孔及溃疡的大肠组织。新鲜组织标本离体后迅速置于冷处理后的1.5ml EP管中,并放入-80℃超低温冰箱中保存。51名患者术前从未进行任何方案的化学治疗和放射治疗。2大肠癌组织及癌旁组织中总rna的提取是严格按照美国Invirotrogen公司Trizol试剂说明书步骤方法进行提取操作。然后按照美国genecopoeia公司反转录试剂盒说明书步骤进行反转录,获得cDNA。3应用real-time PCR方法检测51对大肠癌组织及对应癌旁组织的CT值,以GAPDH为内参,用2-△CT方法计算FGF3mrna在大肠癌组织、癌旁组织中的相对表达量。比较两组间表达差异,然后再以不同的病理资料进行分组,比较不同组之间癌组织相对表达量的差异。4采用SPSS19.0及GraphPad Prism 5.0统计软件,对实验结果进行分析,计量资料以中位数(四分位数)表示,两组间配对样本采用非参数检验。以P0.05,见fig.2、table.1)。3以性别分组,51例直肠癌患者分为男性组和女性组,分别为33名男性患者和18名女性患者,男性组大肠癌组织中FGF3的相对表达量为0.00040(0.00011,0.00146),女性组大肠癌组织中FGF3的相对表达量为0.00057(0.00017,0.00246),女性组癌组织中FGF3的相对表达量稍高于男性组,但无统计学差异(p>0.05,见fig.3、table.1)。451例直肠癌患者包括22名有淋巴结转移的患者和29名无淋巴结转移的患者,其中有淋巴结转移的患者组大肠癌组织中FGF3的相对表达量为0.00057(0.00011,0.00178),无淋巴结转移的患者组大肠癌组织中FGF3的相对表达量为0.00040(0.00014,0.00157),有淋巴结转移的患者组大肠癌组织中FGF3的相对表达量稍高于无淋巴结转移的患者组,两组之间无统计学差异(p>0.05,见fig.4、table.1)。5按照大肠癌dukes分期为51个大肠癌患者分组,可分为a期,b期,c期,d期。其中a期和b期的大肠癌患者有28人,c期和d期的大肠癌患者有23人。a期和b期的患者直肠癌组织相对表达量为0.00048(0.00017,0.00177),c期和d期的患者直肠癌组织相对表达量为0.00054(0.00011,0.00155),两组之间无统计学差异(p>0.05,见fig.5、table.1)。6以大肠癌肿瘤位置分组,其中直肠癌有31人,结肠癌20人,直肠癌组相对表达量为0.00054(0.00011,0.00137),结肠癌组相对表达量为0.00044(0.00013,0.00269),直肠癌组相对表达量稍高于结肠癌组,两组之间无统计学差异(p>0.05,见fig.6、table.1)。结论:1FGF3在51例患者癌旁组织中的表达明显高于大肠癌组织,提示FGF3的表达差异可能与大肠癌的发生与发展具有相关性。2 FGF3在51例患者大肠癌组织中表达水平的高低与患者平均年龄、性别、区域淋巴结转移情况、大肠癌的Dukes分期、肿瘤位置并无明

关键词：大肠癌 FGF3 m rna real-time PCR Dukes分期

从mrna水平筛选两种自身免疫性疾病（SLE和RA）的分子标志物

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从mRNA水平筛选两种自身免疫性疾病（SLE和RA）的分子标志物

作者：邴鹏飞苏州大学

学位级别：硕士

自身免疫性疾病已经被世界卫生组织于1999年列为继心血管疾病、癌症后危险人类健康的第三大杀手。其具有患病率高,致残率高,治疗费用高的特点。多数疾病发病机制不明,但目前普遍认为它们受遗传因素和环境因素共同影响。近年来芯片技术... 详细信息

自身免疫性疾病已经被世界卫生组织于1999年列为继心血管疾病、癌症后危险人类健康的第三大杀手。其具有患病率高,致残率高,治疗费用高的特点。多数疾病发病机制不明,但目前普遍认为它们受遗传因素和环境因素共同影响。近年来芯片技术越来越多的应用于复杂疾病发病机制的研究,发现了很多疾病相关的标志物。本研究中,我们关注两种常见自身免疫性疾病:系统性红斑狼疮(SLE)和类风湿性关节炎(RA),旨在筛选疾病相关的m rna标志物。本研究分为以下两部分:第一部分,利用公开的m rna基因表达数据库,在多种不同类型的生物标本中筛选SLE的基因标志物。第二部分,通过征集RA样本和健康对照、运用rna芯片技术检测外周血单个核细胞中转录组m rna表达,统计分析检验基因差异表达情况,结合功能富集分析、蛋白质交互作用分析,筛选与RA有关的m rna标志物。并在血浆中验证、评价其分泌蛋白是否可作为潜在的分类诊断标志物。第一部分目的:系统系红斑狼疮是复杂的自身免疫性疾病。基因表达检测技术对很多不用类型的SLE相关标本进行了研究。但是,不同研究标本中是否存在共同的标志基因尚不清楚。本研究试图在不同类型的SLE研究标本中发现共同的标记基因,以便为进一步的临床转化应用研究提供线索。方法:依托于三种与SLE相关的血源标本(单核细胞,外周血单个核细胞,全血)所产生的4个芯片基因表达公众数据库,我们用三个统计量(FC,t-test p值,假阳性率调节的p值)分别在不同的数据库中分析筛选差异表达基因。针对不同标本共享的差异表达基因,我们进行了GO富集分析和PPI(蛋白质交互作用)功能分析。结果:我们鉴定了10个在不同标本中都存在差异表达即与SLE有关的基因,(IFI6,IFI27,IFI44L,OAS1,OAS2,EIF2AK2,PLSCR1,STAT1,rnaSE2和GSTO1)。三个基因在所有研究标本中都检测显著上调(IFI6,IFI27和IFI44L)。其表达值的改变在单核细胞中最显著,在单核细胞、单个核细胞、全血中的改变范围分别为8.82-251.66,3.73-74.05,1.19-1.87。除rnaSE2和GSTO1以外的8个基因之间、与已知的SLE易感基因之间存在相互作用,参与免疫反应、rna和蛋白的代谢、细胞死亡等生物学过程。结论:我们的研究结果表明在不同的SLE研究标本中存在共同的SLE标志基因。本研究鉴定的10个基因可望作为SLE的诊断和治疗标志物,值得深入研究。目的:类风湿性关节炎是一种常见的能导致病人丧失劳动能力的自身免疫性疾病。本研究旨在筛选鉴定类风湿性关节炎的生物标志物并探讨其作用机制。材料和方法:征集类风湿性关节炎患者(n=28)和年龄、性别匹配的健康对照个体(n=18)作为发现组样本;获取外周血单个核细胞,提取细胞rna进行基因表达芯片检测,获取m rna表达值;统计分析检测差异表达m rna;对差异表达的m rna进行基因功能注释、聚类分析、及蛋白-蛋白交互作用分析。针对编码分泌型蛋白的差异表达基因,在验证组样本中进行细胞m rna的RT-PCR验证(n=70)和血清蛋白的ELISA验证(n=80),并对经验证的基因及其编码蛋白进行ROC分析。结果:在发现组样本中,我们鉴定了181个差异表达基因(差异倍数大于2,Bonferroni校正后p值m,CKLF,GUSB,FAm3C和ANXA7)进行RT-PCR验证。其中两个基因(CKLF和GUSB)经RT-PCR验证在RA患者中存在显著上调(FC=1.9和2.3,pm3C经RT-PCR和ELISA验证在RA患者的细胞和血浆中均存在显著下调(p=0.026),方向与发现组样本的表达芯片分析结果相反。采用以上3个基因或其编码的血浆蛋白在发现组和验证组样本中进行ROC分析,AUC分别为0.933和0.748。结论:在RA病例和对照中,血液单个核细胞转录组表达谱存在显著差异。经验证和评价,三个编码分泌型蛋白的基因(CKLF、GUSB、FAm3C)具有较好区分病例对照的能力。以上三个血清蛋白,特别是FAm3C,可望作为RA分子标志物,在独立大样本中验证其分类诊断价值。

关键词：系统性红斑狼疮基因表达 mrna 免疫细胞类风湿性关节炎单个核细胞 m rna 血清蛋白标志物

结合WGCNA构建与猪肌肉脂肪酸相关的调控网络

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山西农业科学 2021年第6期49卷 765-771页

作者：刘娟王舒左周路畅蔡春波杨阳赵燕高鹏飞山西农业大学动物科学学院山西太谷030801

试图通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建与猪脂肪酸性状相关的关键调控网络,旨在为提高猪肉质品质提供信息。基于猪种质资源发掘与创新利用-山西省科技创新重点团队前期猪肌肉组织的转录组测序数据进行分析,采用WGCNA划分模块,Cytos... 详细信息

试图通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建与猪脂肪酸性状相关的关键调控网络,旨在为提高猪肉质品质提供信息。基于猪种质资源发掘与创新利用-山西省科技创新重点团队前期猪肌肉组织的转录组测序数据进行分析,采用WGCNA划分模块,Cytoscape软件插件Clue GO对重要模块进行富集分析并筛选重要模块,利用Cytoscape软件可视化共表达网络。结果表明,分析聚类得到15个模块,对各个模块进行富集分析,发现mEgreen模块和mEyellow模块与脂肪酸的分解代谢通路、PPAR信号通路等显著相关,这些通路均在脂肪酸组成中有重要作用。分别从每个模块筛选出10条核心基因,mEgreen模块核心基因为NDUFB7、CPT2、NDUFB3、ATP5O、NDUFAB1、CPOX、ATP5A1、mRm1、NDUFV1和ETFA,模块中还有7条lncrnas;mEyellow模块核心基因为PSTPIP2、PGm1、UBE2D4、PGAm2、WWP1、DENND5A、ACTR1B、mACROD1、CAND2和PYGm,模块中还有9条lncrnas。研究采用WGCNA获得了影响猪脂肪酸组成的关键因子,结果可为解析猪肉质性状形成的分子机制提供理论参考。

关键词：脂肪酸加权基因共表达网络(WGCNA) m rna lncrna 猪

探究白血病患者骨髓中不同指标具体表达及其临床意义

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临床医药文献电子杂志 2016年第53期3卷 10551-10552页

作者：徐宁贺其图包头市中心医院包头医学院包头医学院第一附属医院

目的探究白血病患者骨髓中的CYR61（富含半胱氨酸蛋白61）、CTGF（结缔组织生长因子）、VEGF-C（血管内皮生长因子-C）、VEGFR-2（血管内皮生长因子受体-2）等指标的具体表达水平及其临床意义。方法选取2012年6月;014年6月包头医学院第... 详细信息

目的探究白血病患者骨髓中的CYR61（富含半胱氨酸蛋白61）、CTGF（结缔组织生长因子）、VEGF-C（血管内皮生长因子-C）、VEGFR-2（血管内皮生长因子受体-2）等指标的具体表达水平及其临床意义。方法选取2012年6月;014年6月包头医学院第一附属医院血液科收治的白血病患者（病例组）74例和营养性贫血患者（对照组）12例作为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应方法测定对患者的CYR61、CTGF、VEGF-C、VEGFR-2 m rna指标进行测定,观察分析两组患者的富含半胱氨酸蛋白61、结缔组织生长因子、血管内皮生长因子-C、血管内皮生长因子受体-2等指标水平。结果病例组患者的上述指标表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 CYR61、CTGF及VEGF-C、VEGFR-2在白血病发病中具有互相作用,对白血病的发展、转移及浸润有促进作用。

关键词： CYR61 CTGF VEGF-C VEGFR-2 m rna 白血病表达水平临床意义

探讨Notch信号通路对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞mrna影响

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现代养生 2015年第16期 64-65页

作者：孟凡兵范东旭刘丽金松吉林省长春市解放军461医院黑龙江省佳木斯市佳木斯大学附属第一医院血管外科黑龙江省人民医院血管外科

目的:探讨Notch信号通路对体外培养糖尿病大鼠血管平滑肌细胞的m rna水平的影响。方法:本课题从不同梯度浓度γ-分泌酶抑制剂(DAPT)干预Notch信号通路后对Dm大鼠VSmCs基因影响进行论述。结果:通过实时定量PCR方法分析得出,加γ-分泌酶... 详细信息

目的:探讨Notch信号通路对体外培养糖尿病大鼠血管平滑肌细胞的m rna水平的影响。方法:本课题从不同梯度浓度γ-分泌酶抑制剂(DAPT)干预Notch信号通路后对Dm大鼠VSmCs基因影响进行论述。结果:通过实时定量PCR方法分析得出,加γ-分泌酶抑制剂(DAPT)的培养基的Dm大鼠血管平滑肌细胞(VSmCs)溶解温度峰值Tm进行检测得出:溶解曲线呈单峰,溶解温度在86.0℃-84.0℃之间,溶解温度变化小,表明为特异性扩增。结论:实验结果显示DAPT干预Notch信号通路后,对体外培养的Dm大鼠VSmCs的m rna有抑制趋势,复制率下降,使其溶解温度峰值前移,溶解曲线呈单峰,将会导致进一步细胞凋亡。

关键词： PCR 糖尿病大鼠 DAPT 血管平滑肌细胞 m rna