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The association of lumican polymorphisms and high myopia in a Southern Chinese population

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International Journal of Ophthalmology(English edition) 2017年第10期10卷 1516-1520页

作者： Gui-Fang Wang Qing-Shan Ji Bing Qi Guo-Cheng Yu Lian Liu Jing-Xiang Zhong Department of Ophthalmology Loudi Central Hospital of Hunan Department of Ophthalmology the First Affiliated Hospital of Jinan University Department of Ophthalmology the Affiliated Anhui Provincial Hospital of Anhui Medical University

AIM：To investigate the correlation between lumican（LUM）gene and high myopia in a Southern Chinese ***：The study comprised of 95 high myopia patients with a spherical equivalent≤-6.5 diopters（D）.The control group recruited 95 individuals with a spherical equivalent ranging from-0.5 D to＋0.5 *** sequencing was used to detect the single nucleotide polymorphisms（SNPs）of LUM gene in coding *** distributions were tested for Hardy-Weinberg *** and allelic frequencies were analyzed through Chi-square test or Fisher’s exact ***：We identified 3 SNPs of the LUM gene：LUM c.32（rs577456426）,LUM c.507（rs17853500）and LUM c.849（rs181915277）.Among the three SNPs,the genotype and allele frequencies of rs17853500 showed a significant difference between patients and control subjects（P〈0.05）.However,there were no significant differences in rs181915277and rs577456426 between the two groups（P〉0.05）.CONCLUSION：LUM c.507 polymorphism may be a risk factor for the pathogenesis of high myopia in the Southern Chinese population.

关键词： lumican sclem high myopia single nucleotidepolymorphisms

Construction of adenovirus vectors encoding the lumican gene by gateway recombinant cloning technology

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International Journal of Ophthalmology(English edition) 2016年第9期9卷 1271-1275页

作者： Gui-Fang Wang Bing Qi Lei-Lei Tu Lian Liu Guo-Cheng Yu Jing-Xiang Zhong Department of Ophthalmology the First Affiliated Hospital of Jinan University

AIM： To construct adenovirus vectors of lumican gene by gateway recombinant cloning technology to further understand the role of lumican gene in myopia. METHODS： Gateway recombinant cloning technology was used to construct adenovirus vectors. The wild-type （wt） and mutant （mut） forms of the lumican gene were synthesized and amplified by polymerase chain reaction （PCR）. The lumican cDNA fragments were purified and ligated into the adenovirus shuttle vector pDown- multiple cloning site （MCS）-/internal ribozyme entry site （IRES）/enhanced green fluorescent protein （EGFP）. Then the desired DNA fragments were integrated into the destination vector *** yielding the final expression constructs ***-CMV〉wt-lumican/IRES/ EGFP and ***-cytomegalovirus （CMV）〉mutlumican/IRES/EGFP, ***： The adenovirus plasmids ***-CMV〉 wt-lumican/IRES/EGFP and ***-CMV 〉mutlumican/IRESlEGFP were successfully constructed by gateway recombinant cloning technology. Positive clones identified by PCR and sequencing were selected and packaged into recombinant adenovirus in HEK293 cells. CONCLUSION： We construct adenovirus vectors containing the lumican gene by gateway recombinant cloning technology, which provides a basis for investigating the role of lumicangene in the pathogenesis of high myopia.

关键词： myopia lumican adenovirus vector gateway recombinant cloning technology

lumican蛋白在胰腺导管腺癌间质中的表达及其与Ki-67、VEGF及突变型P53表达的相关性

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世界华人消化杂志 2012年第12期20卷 1018-1024页

作者：袁菲周尘飞金晓龙上海交通大学医学院附属瑞金医院病理科上海市200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院外科上海消化外科研究所上海市200025

目的:观察细胞外基质蛋白lumican在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDA)中表达特征,分析lumican与Ki-67、VEGF、突变型P53等肿瘤恶性表型相关分子的关联.方法:采用免疫组织化学染色(IHC)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR... 详细信息

目的:观察细胞外基质蛋白lumican在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDA)中表达特征,分析lumican与Ki-67、VEGF、突变型P53等肿瘤恶性表型相关分子的关联.方法:采用免疫组织化学染色(IHC)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PDA原发灶及对应癌旁胰腺组织中lumican表达.IHC检测PDA原发灶Ki-67、VEGF及突变型P53表达.用SPSS软件行统计学分析.结果:PDA原发灶中,lumican表达在mRNA及蛋白质水平均明显高于癌旁胰腺组织.就该蛋白在癌灶中的分布特性而言,lumican蛋白主要定位于癌间质,阳性表达率为83.0%(83/100).低分化PDA中,癌间质过表达lumican与TNM分期相关(x2=6.446,Plumican与临床病理特征无关,而与Ki-67(r=-0.28,P=0.017)、VEGF(r=-0.264,P=0.025)及突变型P53(r=-0.253,P=0.032)表达呈明显负相关.结论:lumican在PDA原发灶中表达高于癌旁胰腺组织,主要分布于癌间质.lumican在癌间质过表达与低分化PDA的TNM分期相关,与高、中分化PDA的Ki-67、VEGF及突变型P53表达呈负相关.

关键词：胰腺导管腺癌 lumican 肿瘤微环境

lumican Inhibits Angiogenesis by Effecting the Invasion of Endothelial Cells

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Lumican Inhibits Angiogenesis by Effecting the Invasion of E...

lumican基因过表达对肺腺癌细胞A549转移的影响及机制探讨

中国生理学会基质生物学专业委员会成立大会暨第一次全国基质生物学学术会议

作者： Xinhui Fang Ling Ma Haiying Ma Xiaomei Lu Yunan Jin Lili Du Yanqiu Yu Department of Cardiology The First Affiliated Hospital of China Medical UniversityPeople's Republic of China Department of Pathophysiology China Medical UniversityPeople's Republic of China Department of Pathophysiology China Medical University

Background:lumican,a class Ⅱ small leucine-rich proteoglycans,have been designated key roles in extracellular matrix *** number of evidence shows that lumican,as an important modulator of biological functions,suppresses *** tested its effects on angiogenesis in vitro and vasculogenesis in vivo and roles on the control of biological behavior of human umbilical vein endothelial cells(HUVEC).Materials and methods:Effect of lumican on vascular development in vivo was evaluated by measuring large vessel structure and liver small vessel density both lumican over-expression mice and wild-type *** angiogenesis in vitro by aortic ring assays in *** in proliferation,adhesion,migration by lumican were analyzed in ***:we found lumican suppressed capillary tube formation in aortic ring assays,but there were not dramatical difference in vivo vascular development between lumican overexpressed mice and wildtype *** lumcan inhibited HVUEC invasion and adhesion on 3.5 h time point but not proliferation and ***:Altogether,our results suggest that lumcan inhibits angiogenesis in vitro by effecting endothelial cells *** vivo,a complicated environment inwhere abundant promoters and inhibitors of angiogenesis coexist,effects of lumican can not be observed.

关键词： lumican Vasculogenesis Angiogenesis human umbilical vein endothelial cells

来源： cnki会议评论

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中国细胞生物学学报 2013年第9期35卷 1287-1293页

作者：周坤王耕潘俊峰葛明建湖北医药学院附属太和医院内分泌血管外科十堰442000 重庆医科大学附属第一医院胸心外科重庆400016

基膜聚糖(lumican)广泛分布于人体各组织,并在多种恶性肿瘤组织中异常表达,在肿瘤的迁移、黏附和转移灶的形成等过程中起重要作用。该研究首先构建稳定过表达lumican基因的细胞株,采用Transwell小室、黏附、血管形成及动物实验检测各组... 详细信息

基膜聚糖(lumican)广泛分布于人体各组织,并在多种恶性肿瘤组织中异常表达,在肿瘤的迁移、黏附和转移灶的形成等过程中起重要作用。该研究首先构建稳定过表达lumican基因的细胞株,采用Transwell小室、黏附、血管形成及动物实验检测各组细胞侵袭、迁移,同、异种细胞间黏附及血管形成能力,研究其对肺腺癌细胞A549转移能力的影响;并通过Western blot检测RhoC、p-Akt、MMP-2、VEGF蛋白的表达,探讨其可能机制。结果发现,与空载体组和(或)对照组比较,实验组细胞侵袭、迁移能力增强(P0.05)。该研究表明,lumican基因在肺腺癌细胞A549中过表达能促进细胞的转移,其机理可能与RhoC蛋白表达增高有关。

关键词： lumican 肺腺癌转移 RhoC

白细胞介素1β与机械牵拉共同作用角膜成纤维细胞CollagenⅠ及lumican的表达

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中国组织工程研究 2018年第25期22卷 4077-4082页

作者：冯鹏飞李晓娜容烁陈维毅王晓君太原理工大学应用力学与生物医学工程研究所山西省材料强度与结构冲击重点实验室山西省太原市030024

背景:继发性圆锥角膜是角膜屈光手术后的并发症之一,但其发生机制尚不清楚。目的:探讨白细胞介素1β与机械牵拉对角膜成纤维细胞CollagenⅠ和lumican表达的影响。方法:体外培养角膜成纤维细胞,对其施加不同幅度(5%,10%,15%)的机械牵拉... 详细信息

背景:继发性圆锥角膜是角膜屈光手术后的并发症之一,但其发生机制尚不清楚。目的:探讨白细胞介素1β与机械牵拉对角膜成纤维细胞CollagenⅠ和lumican表达的影响。方法:体外培养角膜成纤维细胞,对其施加不同幅度(5%,10%,15%)的机械牵拉和不同质量浓度的白细胞介素1β,共同作用12,24,36 h,通过实时荧光定量PCR检测CollagenⅠ和lumican m RNA的表达变化。结果与结论:(1)白细胞介素1β单独作用12 h使CollagenⅠα1的表达降低(Plumican的表达升高(Plumican表达升高(Plumican表达降低(Plumican表达升高(Plumican表达升高;(5)结果提示,白细胞介素1β能抑制CollagenⅠ的合成,而促进lumican的表达。低幅度机械牵拉能促进角膜成纤维细胞胶原的合成,中高幅度机械牵拉抑制其胶原的合成。两者共同作用能抑制角膜成纤维细胞胶原合成且促进lumican的表达。

关键词：角膜成纤维细胞白细胞介素1β 机械牵拉 CollagenⅠ lumican 国家自然科学基金角膜成纤维细胞白细胞介素1β 胶原Ⅰ型组织工程

lumican对胃腺癌腺细胞生物学特性影响及临床意义

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Lumican对胃腺癌腺细胞生物学特性影响及临床意义

作者：孔凡志苏州大学

学位级别：硕士

肿瘤微环境在肿瘤的发生、发展和转移的各个阶段中都起着至关重要的作用。其中细胞外基质蛋白是肿瘤微环境的重要组成部分,在肿瘤中常常发现基质蛋白有异常表达,其有助于肿瘤的进展和转移,近年来研究显示,lumican的表达与许多恶性肿瘤... 详细信息

肿瘤微环境在肿瘤的发生、发展和转移的各个阶段中都起着至关重要的作用。其中细胞外基质蛋白是肿瘤微环境的重要组成部分,在肿瘤中常常发现基质蛋白有异常表达,其有助于肿瘤的进展和转移,近年来研究显示,lumican的表达与许多恶性肿瘤的生长和转移相关,但其在肿瘤发生发展中的确切作用还不明确。因此我们探讨了SLRP家族成员lumican在胃腺癌发生发展中的作用,从而进一步来理解lumican与人类肿瘤的关系。应用RT-PCR、荧光定量PCR、免疫印迹及免疫组织化学技术,在mRNA及蛋白水平检测了lumican在胃腺癌组织中的表达情况;应用慢病毒载体系统建立了lumican过表达和特异性干扰细胞株,利用CCK-8实验,平板克隆及裸鼠皮下成瘤实验,分析了过表达或干扰lumican表达对胃腺癌细胞生长的影响;Transwell及Matrigel胶穿实验,分析了其对胃腺癌细胞迁移和侵袭的影响;流式细胞术检测了lumican表达上调或下调时胃腺癌细胞失巢凋亡率的改变,及lumican上调时胃腺癌细胞周期的改变;免疫印迹技术和细胞免疫荧光检测了smad2、samd3及samd4的表达和活化。同时我们还构建了Lumcian重组蛋白pQE30-Hlumican(分子量约40kDa)原核表达载体系统及V152-Hlumican(分子量约55kDa)真核表达载体系统,利用CCK-8实验,分析了两种重组蛋白对胃腺癌细胞生长的影响;通过Transwell实验,分析了两种重组蛋白对胃腺癌细胞迁移能力的影响。流式细胞术检测了V152-Hlumican重组蛋白对胃腺癌细胞失巢凋亡的影响;软琼脂克隆形成实验观察了其对胃腺癌细胞非锚定生长的影响;裸鼠皮下成瘤实验观察了其对胃腺癌细胞体内生长的影响。研究结果表明：胃腺癌组织中lumican mRNA表达水平显著高于癌旁正常粘膜组织,差异有统计学意义(Plumican蛋白在胃腺癌组织的表达率显著高于癌旁正常粘膜(91.67%比7.5%,P0.05);而与胃腺癌的浸润深度(Plumican表达强阳性、阳性、弱阳性和阴性患者的总体生存率分别为：48.17%、53.56%、68.48%和89.48%,随着其表达增强,生存率逐渐减小,差异有统计学意义(Plumican过表达能够显著增强胃腺癌细胞内核心蛋白的表达,而其糖基化蛋白增强不明显;lumican表达受干扰后,核心蛋白表达明显下降,而其糖基化蛋白下降不明显。lumican过表达能够抑制胃腺癌细胞在体内外的生长,抑制胃腺癌细胞迁移和侵袭,增加失巢凋亡率,同时lumican基因过表达能够减缓细胞周期进展,一定程度引起G1期的阻滞。lumican表达受干扰后,胃腺癌细胞生长得到促进,迁移、侵袭和抗失巢凋亡能力增强。Lumcian可能通过抑制smad4的表达,及smad2和smad3的活化来调控胃腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和抗失巢凋亡。pQE3O-Hlumican重组蛋白可抑制胃腺癌细胞的增殖及迁移。V152-Hlumican重组蛋白可促进胃腺癌细胞的增殖及迁移,增强胃腺癌细胞的抗失巢凋亡能力。我们的研究结果发现lumican核心蛋白及糖基化蛋白均在胃腺癌组织中高表达,Lumcian核心蛋白具有抑制胃腺癌细胞生长、迁移和侵袭的作用,而lumican糖基化形式的蛋白可促进胃腺癌的增殖、迁移和侵袭的作用。lumican及其糖基化修饰在胃腺癌发生发展中发挥着重要作用。

关键词：胃腺癌 lumican 增殖迁移侵袭预后

lumican对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制的研究

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Lumican对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制的研究

作者：段绍毅广西医科大学

学位级别：硕士

目的我们在前期的实验发现中发现并证实lumican在胃癌组织及细胞中表达高于正常组织及细胞,且Integrin alpha 5(整合素5)与胃癌的发生与发展有重要关系。本实验旨在进一步探索在干预lumican基因表达后对胃癌AGS和HGC-27细胞株生物学行... 详细信息

目的我们在前期的实验发现中发现并证实lumican在胃癌组织及细胞中表达高于正常组织及细胞,且Integrin alpha 5(整合素5)与胃癌的发生与发展有重要关系。本实验旨在进一步探索在干预lumican基因表达后对胃癌AGS和HGC-27细胞株生物学行为的影响及其涉及的机制和Integrin alpha 5调控关系。方法我们通过GEPIA2软件对肿瘤基因组图谱项目数据库中的胃癌组织标本和正常胃组织的m RNA表达数据进行分析,确定lumican在癌组织及正常组织的表达差异,同时对其进行生曲线分析,然后我们对收集来的10对胃癌组织与癌旁组织进行荧光定量PCR分析。在前期的实验中筛选出了最有效的lumican-si RNA,与此同时我们选择lumican过表达质粒对胃癌AGS和HGC-27进行干预,且在转染24-48小时时干预lumican的效果最佳,因此选择此si RNA和过表达质粒对胃癌AGS和HGC-27细胞进行实验。利用Lipofectamine3000形成的脂质体将lumican-si RNA和lumican过表达质粒瞬时转染胃癌AGS和HGC-27细胞。转染24小时后,用CCK-8法和EDU分别检测抑制和加强lumican表达后细胞增殖情况;用Transwell及人工基质胶检测细胞迁移和侵袭能力的变化;用Annexin V-PE和7-AAD双染进行流式细胞技术检测,观测2株细胞不同处理组的凋亡变化情况;免疫荧光检测并确认lumican在2株细胞的表达部位;Western blot检测粘着斑激酶FAK、磷酸化粘着斑激酶p-FAK和整合素5(Integrin alpha 5)表达情况。最后我们用Western blot和q PCR分别检测在前期实验中对整合素5(Integrin alpha 5)进行干预的胃癌稳转株AGS和MKN-28细胞的lumican表达情况。结果1.数据库和10对组织样本PCR验证结果:在肿瘤基因组图谱项目数据库中的408例胃癌组织样本和211例正常组织样本中,lumican表达在胃癌组织中明显富集(Plumican表达组的生存时间较高表达组明显延长(Plumican在胃癌组织中表达显著高于正常胃组织(Plumican-si RNA转染组的胃癌AGS细胞和HGC-27细胞在各个时间点(24小时、48小时和72小时)的增值率均低于阴性对照组(Plumican过表达组的胃癌AGS和HGC-27细胞在各个时间点(24小时、48小时和72小时)的增值率均显著高于阴性对照组(Plumican-si RNA转染组中胃癌AGS细胞和HGC-27细胞的新生细胞增殖率明显低于阴性对照组(Plumican-si RNA组中胃癌AGS细胞和HGC-27细胞发生迁移的细胞数量显著低于相应的阴性对照组(Plumican-si RNA组侵袭穿越基质胶的细胞数显著下降(Plumican-si RNA组的凋亡率相较于其阴性对照组无显著差异(P>0.05);同样在2株细胞的过表达组中,凋亡率相比于阴性对照组无明显差异(P>0.05)。7.免疫荧光结果:DAPI染核提示胃癌AGS细胞和HGC-27细胞的状态良好,符合实验要求,lumican在细胞膜上大量表达。*** blot结果:相较于各对照组,胃癌AGS细胞和HGC-27细胞中lumican-si RNA组的FAK蛋白表达无明显变化,p-FAK蛋白表达均显著降低(P<0.05),而Integrin alpha 5蛋白表达无明显差异;胃癌AGS和HGC

关键词： lumican 胃癌细胞增殖细胞侵袭迁移 Integrin alpha5 FAK/p-FAK

lumican在前列腺癌中的表达及相关性研究

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Lumican在前列腺癌中的表达及相关性研究

作者：贺正恺天津医科大学

学位级别：硕士

目的：本研究通过检测前列腺癌（PCa）中lumican的表达情况,研究lumican在前列腺癌癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系,探讨其在前列腺癌发生、增殖、侵袭、转移中的作用,为前列腺癌的诊断、恶性行为评估以及预后判... 详细信息

目的：本研究通过检测前列腺癌（PCa）中lumican的表达情况,研究lumican在前列腺癌癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系,探讨其在前列腺癌发生、增殖、侵袭、转移中的作用,为前列腺癌的诊断、恶性行为评估以及预后判断提供新的标志物,以及理论依据和研究基础。方法：随机选取2002年12月至2007年12月在天津医科大学第二医院接受前列腺癌（PCa）根治手术患者的存档蜡块50例,病理证实均为前列腺癌。选取正常肾组织24例。采用免疫组织化学两步法（S-P法）检测前列腺癌（PCa）及正常前列腺组织中lumican的表达情况并与肿瘤的复发、分级、分期以及患者年龄、预后等临床病理资料相联系进行统计学分析。结果： 1. lumican在前列腺癌（PCa）组织中的阳性表达率为78%,明显高于BPH组织中的阳性表达率（54%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。 2.通过对lumican与临床病理参数之间关系的分析显示：lumican在＜66岁年龄组和≥65岁间的表达差异无统计学意义（P=0.851）;在不同病理分级的前列腺癌组织中,lumican在高分化前列腺癌组织中的阳性表达率为44.4%（4/9）,在中分化前列腺癌组织中阳性表达率为92%（23/25）,在低分化前列腺癌组织中阳性表达率为44.4%（4/9）,三者差异显著（P＜0.05）,在两两比较中,中分化组与低分化组间差异有统计学意义（P＜0.05）,其余两组间差异无统计学意义（P＞0.05）,该结果提示lumican表达增多与肿瘤分化不良有关;在不同分期的前列腺癌组织中,lumican在Ⅰ+Ⅱ期组中的阳性表达率为65.9%（25/44）,在Ⅲ+Ⅳ期组中的阳性表达率为100%（6/6）,两组间差异有统计学意义（P=0.041）,提示lumican表达增多与前列腺癌临床分期级别成正比;骨转移组与无骨转移组中,lumican在骨转移组的阳性表达率为100%（8/8）,在无骨转移组的阳性表达率为64.3%（27/42）,二者之间的差异有统计学意义（P＜0.05）,这表明lumican表达的增多与前列腺癌的转移有关。结论：在前列腺癌组织中lumican的表达明显高于正常前列腺组织,且lumican表达的增多与年龄无关,但是与肿瘤临床分期、病理分级以及浸润转移密切相关。提示Lumicna阳性表达率越高,则前列腺癌发生的机率越高,越具有侵袭性,肿瘤的预后也越差。因此lumican可作为早期检测前列腺癌,并为诊断提供一种新方法,其表达水平可作为评估肿瘤细胞的转移潜能、判断预后的一个较好的临床指标。

关键词：蛋白聚糖 lumican 免疫组织化学前列腺癌肿瘤