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lncrna runx1-it1和miR-195在NSCLC组织中的表达及临床意义

重庆医学 2024年第3期53卷 394-398,404页

作者：秦少文张方琪中部战区总医院呼吸与危重症医学科武汉430070 中国人民解放军联勤保障部队第九八七医院呼吸与危重症医学科陕西宝鸡721000

目的探讨长链非编码RNA(lncrna)runx1-it1和miR-195在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其意义。方法收集2017年5月至2019年5月于武汉某三级甲等医院接受手术治疗的106例NSCLC患者的NSCLC组织及癌旁组织,经实时荧光定量PCR(qPCR)检测ln... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncrna)runx1-it1和miR-195在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其意义。方法收集2017年5月至2019年5月于武汉某三级甲等医院接受手术治疗的106例NSCLC患者的NSCLC组织及癌旁组织,经实时荧光定量PCR(qPCR)检测lncrna runx1-it1和miR-195表达水平,分析其与临床病理特征及预后的关系。结果与癌旁组织比较,NSCLC组织lncrna runx1-it1表达水平明显升高(3.65±0.33 vs.1.04±0.09),miR-195表达水平明显降低(0.46±0.05 vs.1.06±0.11),差异有统计学意义(Plncrna runx1-it1高表达患者中有淋巴结转移(69.49%vs.29.79%)、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期(72.88%vs.51.06%)、低-中分化(50.85%vs.27.66%)的比例明显高于低表达患者(Plncrna runx1-it1高表达患者2年总生存率为35.60%(21/59),低表达患者3年总生存率为64.40%(38/47);miR-195高表达患者3年总生存率为68.75%(33/48),低表达患者3年总生存率为31.25%(15/58)。多因素Cox回归分析结果显示,有淋巴结转移(HR=2.216,95%CI:1.614~4.037)、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期(HR=1.627,95%CI:1.369~3.162)、低-中分化(HR=1.948,95%CI:1.572~4.712)、lncrna runx1-it1高表达(HR=3.087,95%CI:1.228~4.086)、miR-195低表达(HR=3.227,95%CI:1.936~6.641)是NSCLC患者预后的独立危险因素(Plncrna runx1-it1高表达、miR-195低表达预示NSCLC患者预后较差。

关键词： lncrna runx1-it1 miR-195 非小细胞肺癌预后临床意义

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lncrna runx1-it1对恶性多形性腺瘤miR-195/CyclinD1的调控作用探讨

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上海口腔医学 2023年第1期32卷 85-90页

作者：魏军水孙鑫徐金标陈逸达台州市第一人民医院口腔科浙江台州318020

目的 :探讨恶性多形性腺瘤(malignant pleomorphic adenoma, MPA)细胞中长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncrna)runx1-it1对微小RNA-195(microRNA-195, miR-195)/细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控作用。方法:收集手术切除的MPA组织及癌旁组织,检测lncrna runx1-it1、miR-195、CyclinD1 mRNA的表达水平,分析三者与MPA临床病理的关系。培养MPA细胞系SM-AP1,转染阴性对照(NC)siRNA、lncrna runx1-it1 siRNA、miRNC、miR-195抑制物,检测细胞增殖水平A490及miR-195、CyclinD1的表达水平,分析lncrna runx1-it1靶向miR-195、miR-195靶向CyclinD1的关系。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果 :MPA中lncrna runx1-it1、CyclinD1的表达水平显著高于癌旁组织,miR-195的表达水平显著低于癌旁组织(Plncrna runx1-it1与miR-195呈负相关、与CyclinD1呈正相关,miR-195与CyclinD1呈负相关。肿瘤直径≥3 cm、复发、远处转移的MPA癌组织中,lncrna runx1-it1、CyclinD1表达更高(Plncrna runx1-it1后,SM-AP1细胞的A490水平、CyclinD1表达水平降低,miR-195表达水平增加(Plncrna runx1-it1通过直接靶向作用于SM-AP1细胞中的miR-195,miR-195通过直接靶向作用于SM-AP1细胞中的CyclinD1。抑制miR-195后,敲低lncrna runx1-it1降低A490水平及CyclinD1表达水平的作用减弱(Plncrna runx1-it1可能通过调控miR-195/CyclinD1表达,参与MPA的发生、发展。

关键词：恶性多形性腺瘤 lncrna runx1-it1 miR-195 CyclinD1 增殖靶基因

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长链非编码RNA runx1-it1对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移的影响及其作用机制

长链非编码RNA RUNX1-IT1对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移的影响及其...

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作者：王雪中国医科大学

学位级别：硕士

目的:口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是头颈部恶性肿瘤中一种最常见的侵袭性肿瘤,好发于舌、颊、颌骨和牙龈等部位。其恶性程度高、局部浸润强、易发生颈部及远处淋巴结转移。目前手术仍为主要治疗方式,但大多数患... 详细信息

目的:口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是头颈部恶性肿瘤中一种最常见的侵袭性肿瘤,好发于舌、颊、颌骨和牙龈等部位。其恶性程度高、局部浸润强、易发生颈部及远处淋巴结转移。目前手术仍为主要治疗方式,但大多数患者术后易复发,预后差,死亡率高。因此探索OSCC潜在的分子机制和寻找新的治疗靶点是非常重要的。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncrna)是一种没有编码蛋白能力的RNA,其长度大于200 nt,广泛存在于人类基因组内,常定位于细胞浆内或核内。到目前为止,已有多种lncrna能够通过调控细胞增殖、周期、凋亡和转移等生物学行为,参与癌症的发生和发展。除此之外,lncrna在OSCC的发生发展过程中起到了至关重要的作用。研究报道runx1是runx转录因子家族的重要成员之一,可以调控肿瘤细胞的血管形成、迁移、侵袭等生物学行为。lncrna runx1-it1是runx1的内含子转录本1,位于染色体21q22.12区域。目前lncrna runx1-it1在胃癌和结直肠癌中发挥调控作用,然而lncrna runx1-it1在OSCC中的表达情况及具体机制尚未见报道。本研究拟通过检测lncrna runx1-it1在OSCC组织和细胞系CAL27、SCC25中的表达,并分析lncrna runx1-it1的表达水平与OSCC患者临床病理资料的关系,进一步的体外功能实验探索lncrna runx1-it1对CAL27细胞生物学行为的影响和可能的机制。研究方法:(1)收集47例OSCC患者癌组织和癌旁正常组织标本。(2)人口腔鳞癌细胞系(CAL27和SCC25)和正常角质细胞系HaCaT的培养。(3)应用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测lncrna runx1-it1在47例OSCC组织和细胞系(CAL27和SCC25)中的表达。非参数检验分析lncrna runx1-it1的表达水平和临床病理资料的关系。(4)将lncrna runx1-it1的过表达和沉默载体分别转染CAL27细胞。(5)CCK8检测CAL27细胞增殖的变化。(6)流式细胞术检测CAL27细胞周期以及细胞凋亡的情况。(7)Transwell检测CAL27细胞迁移的变化。(8)分别采用qRT-PCR和Western Blot方法检测CAL27细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物m RNA和蛋白的表达水平(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、Vimentin),以反映lncrna runx1-it1对CAL27细胞EMT的影响。Western Blot方法检测CAL27细胞中PCNA、Cyclin D1和MMP2蛋白的水平。结果:(1)QRT-PCR结果显示:lncrna runx1-it1在OSCC组织和细胞系(CAL27和SCC25)中的表达水平与癌旁正常组织(P1)和正常角质细胞系(P1)相比显著增高。非参数检验分析发现lncrna runx1-it1的相对表达水平和淋巴结转移显著相关(Plncrna runx1-it1过表达和沉默载体后,CAL27细胞中lncrna runx1-it1的表达水平显著增高(P1)和降低(P1)。(3)过表达的lncrna runx1-it1促进CAL27细胞的增殖(P1),沉默的lncrna runx1-it1抑制CAL27细胞的增殖(P1)。(4)lncrna runx1-it1的过表达促进CAL27细胞周期从G1期向S期分化(P1),而lncrna runx1-it1的沉默使CAL27细胞周期阻滞于G1期(P1)。(5)QRT-PCR和Western Blot结果显示:在CAL27细胞中过表达lncrna runx1-it1后,与对照组相比,实验组E-cadherin的mRNA和蛋白水平均显著下调;N-cadherin、β-catenin、Vimentin的mRNA和蛋白水平均显著上调,促进了EMT;沉默lncrna runx1-it1后,结果与之相反,EMT发生了逆转。此外,PCNA、Cyclin D1和MMP2的蛋白水平均在lncrna runx1-it1过表达后显著上调(P1),在lncrna runx1-it1沉默后显著下调(P1)。结论:(1)lncrna runx1-it1在OSC

关键词： lncrna runx1-it1 口腔鳞状细胞癌增殖迁移上皮间质转化

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