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Quantitative detection of ing1 mRNA under different gene regulation based on molecular beacon

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Chinese Science Bulletin 2006年第17期51卷 2059-2064页

作者： LIU Bin1,2,3,4, WANG Kemin1,2,3,4, XIAO Zhiqiang5,6, WANG Wei1,3,4, TAN Weihong1,2,3,4, SUN Yi5,6, TANG Hongxing1,3,4 & YANG Xiaohai1,3,41. State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics, Hu- nan University, Changsha 410082, China 2. Life Science and Biotechnology Institute, Hunan University, Chang- sha 410082, China 3. Chemistry and Chemical Engineer College, Hunan University, Changsha 410082, China 4. Hunan Engineering Research Center for Bio-Nanotechnology, Hunan University, Changsha 410082, China 5. Medical Experiment Research Center, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410008, China 6. Key Laboratory of Cancer Proteomics of Chinese Ministry of Health, Changsha 410008, China State Key Laboratory of Chemo/Biosensing and Chemometrics Hunan University Changsha China Life Science and Biotechnology Institute Hunan University Changsha China Chemistry and Chemical Engineer College Hunan University Changsha China Hunan Engineering Research Center for Bio-Nanotechnology Hunan University Changsha China Medical Experiment Research Center Xiangya Hospital Central South University Changsha China Key Laboratory of Cancer Proteomics of Chinese Ministry of Health Changsha China

The effects of drug treatment, gene transfection, and p53 RNA interference (RNAi) on level of ing1 mRNA in tumor cells were quantitatively detected with the help of ing1 molecular beacon (MB)/cRNA standard curve based on MB detection technology. Results showed that the level of ing1 mRNA could be upregulated by 5-FU treatment or ing1 transfection in low expression cell line of MCF-7 and be inhibited by silencing p53 with RNAi technology in normal expression cell line of CNE2. The level of ing1 varied from 7.7×10?16 to 53.4× 10?16 mol/μg total RNA of tumor cells. The results not only provided evidence for the regulation effects of gene expression but also were applied to investigat- ing the interaction of multigenes on signal transduc- tion pathway.

关键词： ing1 RT-PCR 定量分析分子信号 mRNA

miR-24-3p promotes colon cancer progression by targeting ing1

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Signal Transduction and Targeted Therapy 2020年第1期5卷 1037-1039页

作者： Zhiying Gao Likun Zhou Shiyu Hua Huan Wu Laizhi Luo Libo Li Shuping Wang Yanqing Liu Zhen Zhou Xi Chen State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology Collaborative Innovation Center of Chemistry for Life SciencesJiangsu Engineering Research Center for MicroRNA Biology and BiotechnologyNJU Advanced Institute for Life Sciences(NAILS)School of Life SciencesNanjing UniversityNanjingJiangsu 210046China Research Institute of Medicine and Pharmacy Qiqihar Medical UniversityQiqiharHeilongjiang 161006China The Department of Ultrasound of Sun Yat-Sen Memorial Hospital Sun Yat-Sen UniversityGuangzhouGuangdong 510000China The Sixth Clinical Medical College of Capital Medical University Beijing 100029China The First Hospital of Qiqihar Qiqihar Medical UniversityQiqiharHeilongjiang 161006China

Dear Editor,Activation or upregulation of oncogenes and/or loss of function or downregulation of tumour suppressors are central to the processes involved in the transformation from normal colonic mucosa to malignant *... 详细信息

关键词： ing1 tumour colon

ing1家族各异构体抑制HeLa细胞增殖的分子机制研究

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生物化学与生物物理进展 2008年第5期35卷 512-520页

作者：李娜张英涛薛丽香童坦君北京大学医学部药学院北京100083 北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京大学衰老研究中心北京100083

ing1(inhibitor of growth 1)是一个候选抑癌基因家族,p47ing1a、p33ing1b和p24ing1c是其三种剪接异构体.通过MTT法和流式细胞术研究ing1a、ing1b和ing1c对HeLa细胞增殖的影响,结果发现三者均可将HeLa细胞阻滞于G0/G1期并抑制细胞生长.... 详细信息

ing1(inhibitor of growth 1)是一个候选抑癌基因家族,p47ing1a、p33ing1b和p24ing1c是其三种剪接异构体.通过MTT法和流式细胞术研究ing1a、ing1b和ing1c对HeLa细胞增殖的影响,结果发现三者均可将HeLa细胞阻滞于G0/G1期并抑制细胞生长.采用PCR方法构建ing1a和ing1b的PHD结构域缺失体1a!C和1b!C,进而使ing1a,ing1b、ing1c、1a△C和1b△C在HeLa细胞中过表达.采用Western blot检测上述HeLa细胞中p16INK4a、PTEN/p27Kip1和p53/p21Waf1的表达变化,结果发现ing1a、ing1b、ing1c和1a△C均可促进p16INK4a的表达,其中ing1c的促进作用最为显著,1b△C则略微抑制了p16INK4a的蛋白质表达.利用荧光素酶分析初步确定1a△C可增强p16INK4a启动子活性而促进p16INK4a的转录,1b△C则抑制了p16INK4a启动子活性.上述结果阐释了ing1家族各成员对HeLa细胞增殖的影响及其分子机制,从而确定了各异构体功能的异同及它们所调控的重要基因.首次发现除p53/p21Waf1通路外,ing1家族各异构体还可通过上调p16INK4a和PTEN的表达而抑制肿瘤细胞生长,并且ing1a的PHD结构域删除体可以增强p16INK4a的转录,这为研究ing1家族抑制肿瘤细胞生长的分子机制提供了新的线索.

关键词： ing1 p16^INK4a p53 PHD结构域

抑癌基因ing1在鼻咽癌中的表达及突变分析

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湖南大学学报（自然科学版） 2002年第1期29卷 18-23页

作者：刘斌高志华徐静关勇军何春梅刘选明陈主初中南大学肿瘤研究所湖南长沙410078 中南大学湘雅医学院病理科湖南长沙410078 湖南大学生物技术研究院湖南长沙410082

本研究运用免疫组化技术、逆转录 - PCR( RT- PCR) ,PCR- SS-CP技术对鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞系中 ing1的表达和突变进行检测 .结果发现 3 0例鼻咽癌标本中 ing1蛋白表达下调率为 70 % ( 2 1/ 3 0 ) ;ing1m RNA表达明显下调率为 4 6% ( ... 详细信息

本研究运用免疫组化技术、逆转录 - PCR( RT- PCR) ,PCR- SS-CP技术对鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞系中 ing1的表达和突变进行检测 .结果发现 3 0例鼻咽癌标本中 ing1蛋白表达下调率为 70 % ( 2 1/ 3 0 ) ;ing1m RNA表达明显下调率为 4 6% ( 12 / 2 6) ,6例鼻咽癌细胞系中有 2例鼻咽癌细胞系表达明显下调 ,而 11例 ( 4 2 .5 % ) NPC组织及其它 4例细胞系表达与正常水平相当 ,另有 3例 ( 11.5 % )鼻咽癌组织过表达 ;单链构像多态性分析 ( SSCP)在鼻咽癌及鼻咽癌细胞系中均未发现突变 .结果表明ing1基因的转录及翻译表达水平与鼻咽癌的发生 /发展呈负相关。

关键词： ing1 鼻咽癌逆转录聚合酶链式反应单链构像多态性抑癌基因基因表达基因突变

肿瘤生长抑制基因ing1在基底细胞上皮瘤中的表达及突变分析

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中华皮肤科杂志 2003年第11期36卷 616-618页

作者：陈斌 Eric I.Campos Gang Li 210029 南京医科大学第一附属医院皮肤科加拿大大不列颠哥伦比亚大学医学系皮肤科 210029

目的研究肿瘤生长抑制基因ing1在基底细胞上皮瘤中是否存在过度表达及基因突变。方法搜集了54份基底细胞上皮瘤标本,运用免疫组织化学染色,DNA单链构象多态性分析(SSCP)及DNA序列测定的方法研究ing1基因在基底细胞上皮瘤中的表达及突变... 详细信息

目的研究肿瘤生长抑制基因ing1在基底细胞上皮瘤中是否存在过度表达及基因突变。方法搜集了54份基底细胞上皮瘤标本,运用免疫组织化学染色,DNA单链构象多态性分析(SSCP)及DNA序列测定的方法研究ing1基因在基底细胞上皮瘤中的表达及突变情况。结果免疫组化显示ing1基因在25%(6/24)基底细胞上皮瘤标本中过度表达。SSCP及DNA序列测定结果显示54例基底细胞上皮瘤标本中仅1例标本(1.8%)发生实质突变。突变发生在ing1基因编码区exon2,因而可能影响所有ing1异构体结构,并影响PHD锌指基序的功能。结论ing1基因在基底细胞上皮瘤中无明显过度表达及突变。

关键词：基底细胞上皮瘤 ing1 肿瘤生长抑制基因基因表达基因突变

ing1与Cyclin E在肝细胞肝癌中的表达水平及关系

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广东医学 2011年第17期32卷 2289-2291页

作者：陈红跃张大高宗跃河南省中医院外三科郑州450002 郑州大学第一附属医院小儿外科郑州450052 河南省中医院外二科郑州450002

目的探讨ing1与Cyclin E在肝细胞肝癌(HCC)中的表达水平及关系。方法免疫组化SP法检测48例HCC组织、21例癌旁组织和13例正常肝组织中ing1与Cyclin E的表达水平。结果 ing1在HCC组织中的表达水平明显低于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05),Cy... 详细信息

目的探讨ing1与Cyclin E在肝细胞肝癌(HCC)中的表达水平及关系。方法免疫组化SP法检测48例HCC组织、21例癌旁组织和13例正常肝组织中ing1与Cyclin E的表达水平。结果 ing1在HCC组织中的表达水平明显低于癌旁组织和正常肝组织(Ping1可能通过影响Cyclin E的表达在肝细胞肝癌的发生发展中发挥重要作用。

关键词：肝细胞肝癌 ing1 Cyclin E

基于分子信标对肿瘤细胞ing1转录水平调控的定量检测

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科学通报 2006年第11期51卷 1264-1268页

作者：刘斌王柯敏肖志强王炜谭蔚泓孙懿唐红星羊小海湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室中南大学湘雅医院医学实验研究中心

利用分子信标检测技术,结合建立的ing1分子信标／cRNA杂交标准曲线,定量检测了药物处理,基因转染和p53 RNA干扰(RNAi)等对肿瘤细胞ing1 mRNA表达水平的影响．结果发现:在低表达ing1的肿瘤细胞系MCF-7中,5-FU处理和ing1基因稳定转染均能... 详细信息

利用分子信标检测技术,结合建立的ing1分子信标／cRNA杂交标准曲线,定量检测了药物处理,基因转染和p53 RNA干扰(RNAi)等对肿瘤细胞ing1 mRNA表达水平的影响．结果发现:在低表达ing1的肿瘤细胞系MCF-7中,5-FU处理和ing1基因稳定转染均能诱导细胞中ing1 mRNA表达水平升高;在ing1表达水平正常的CNE2肿瘤细胞中,利用RNAi沉默p53表达引起ing1 mRNA表达水平降低．这些细胞中ing1 mRNA表达水平在7．7×10-16-53．4×10-16mol／μg总RNA．该方法不仅能从转录水平上为基因表达调控效果提供定量依据,而且有望用于信号通路途径中多基因转录水平的相互调节研究．

关键词：分子信标 ing1 RT-PCR 定量检测

抑癌基因ing1 mRNA在大肠癌中的表达、突变分析及其意义

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中华普通外科杂志 2002年第5期17卷 275-277页

作者：王自强蔡志民余佩武第三军医大学西南医院普外科重庆400038

目的　探讨人大肠癌组织中ing1基因表达及突变水平与大肠癌临床病理特征的关系。方法　选择人大肠癌组织标本及正常对照 5 2例 ,应用逆转录PCR法检测ing1mRNA的表达 ,用DNA单链多态性分析法检测基因突变情况 ;同时应用免疫组化方法检测... 详细信息

目的　探讨人大肠癌组织中ing1基因表达及突变水平与大肠癌临床病理特征的关系。方法　选择人大肠癌组织标本及正常对照 5 2例 ,应用逆转录PCR法检测ing1mRNA的表达 ,用DNA单链多态性分析法检测基因突变情况 ;同时应用免疫组化方法检测大肠癌中p5 3蛋白的表达情况。结果　ing1mRNA在大肠癌中的表达较正常组织明显减弱 ,其低表达与肿瘤的Dukes分期及淋巴结转移显著相关 (P≤ 0 0 1) ,ing1mRNA的表达水平与p5 3蛋白表达呈显著正相关 (P≤ 0 0 1) ,ing1基因在大肠癌中的突变率极低。

关键词：结直肠癌抑癌基因 ing1 基因突变

进展期胃癌的证素特征与抑癌基因ing1甲基化间的关系

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进展期胃癌的证素特征与抑癌基因ING1甲基化间的关系

作者：林明生福建中医药大学

学位级别：硕士

目的：研究进展期胃癌的证素分布特征,检测胃癌组织中抑癌基因ing1启动子区域甲基化状况并与癌旁组织作对比,探讨进展期胃癌的证素特征与胃癌组织中抑癌基因ing1甲基化状况的关系,阐明胃癌中、西医发病机制及相互间的关联。方法：对60... 详细信息

目的：研究进展期胃癌的证素分布特征,检测胃癌组织中抑癌基因ing1启动子区域甲基化状况并与癌旁组织作对比,探讨进展期胃癌的证素特征与胃癌组织中抑癌基因ing1甲基化状况的关系,阐明胃癌中、西医发病机制及相互间的关联。方法：对60例进展期胃癌患者的四诊资料进行规范化采集,将采集资料进行证素辨证,所得出的数据进行统计分析,得出进展期胃癌的主要病位、病性证素。同时,收取60例进展期胃癌患者的癌组织和癌旁组织(距癌灶5cm以上),采用甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR, MSP)方法检测癌组织和癌旁组织中抑癌基因ing1的甲基化状况。结果：1.年龄分布特点：以60-69岁居多,男性多于女性,男女比例为3：1。2.证素分布特点：主要病位证素是胃,其次为脾、肝、肾;主要病性证素是气虚,其次为湿、血瘀、痰、气滞。3.胃癌组织中抑癌基因ing1的甲基化阳性率是71.67%(43/60),而相应的癌旁组织中是25.00%(15/60),抑癌基因ingl的甲基化状况在胃癌组织和癌旁组织间的差异具有统计学意义(p1)。胃癌组织中抑癌基因ing1的甲基化状况与患者年龄、性别、肿瘤分期、淋巴结转移及肿瘤部位关系不显著(p>0.05)。4.病位证素“胃”,病性证素“气虚”、“血瘀”、“痰”与胃癌组织中抑癌基因ing1的甲基化状况有关(Ping1的甲基化状况关系不显著(p>0.05)。结论：1.进展期胃癌患者的主要病位证素是胃,其次为脾、肝、肾;病性证素以气虚为主,湿、血瘀、痰、气滞也较多见。提示进展期胃癌的发病机制为本虚标实,本虚以气虚为主,标实以湿、血瘀、痰、气滞为主,临床治疗本病可在扶正的基础上,给予祛湿、化瘀、化痰、理气等治法。2.胃癌组织中抑癌基因ing1的甲基化阳性率明显高于癌旁组织,提示抑癌基因ing1的甲基化与胃癌的发生发展有关。3.进展期胃癌患者的证素特征与抑癌基因ing1的甲基化状况有关,胃癌中西医间的发病机制存在关联。

关键词：进展期胃癌证素 ing1 甲基化