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iaam基因对不同遗传背景棉花品种纤维品质及衣分的影响

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河北农业大学学报 2019年第2期42卷 36-40页

作者：王士杰赵红霞朱继杰和剑涵李妙王国印贾晓昀河北省农林科学院粮油作物研究所/河北省作物遗传育种实验室河北石家庄050035

以转iaam基因的种质材料IF1-1为供体,将iaam基因转育到衣分和纤维细度有待改良的不同遗传背景的86个品系(种)中。通过对自交和回交群体目标性状的研究分析,结果表明:iaam基因能够显著改良马克隆值(P=0.0449~*),由原来的5.39降为5.20,降... 详细信息

以转iaam基因的种质材料IF1-1为供体,将iaam基因转育到衣分和纤维细度有待改良的不同遗传背景的86个品系(种)中。通过对自交和回交群体目标性状的研究分析,结果表明:iaam基因能够显著改良马克隆值(P=0.0449~*),由原来的5.39降为5.20,降幅为0.19;对衣分的改良效果不显著;纤维长度和比强度略有提高,子指略微降低,无显著影响;iaam基因与衣分、纤维长度和比强度呈正相关,与子指呈负相关但不显著,与马克隆值呈显著性负相关(R=-0.221~*)。iaam基因对马克隆值的改良效果明显,且对其它性状和纤维品质未造成不利影响,在未来高品质棉花育种中能发挥重要作用。

关键词： iaam基因遗传背景衣分纤维品质

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iaam基因转化‘美人指’葡萄的研究

iaaM基因转化‘美人指’葡萄的研究

作者：周蓓蓓南京农业大学

学位级别：硕士

本研究以‘美人指’葡萄(Vitis vinifera L'Manicure Finger')为材料,在已建立的‘美人指’葡萄不定芽再生体系的基础上,采用农杆菌介导法以及花粉管通道法,将iaam基因导入‘美人指’葡萄中,以期获得定向改良目的性状的‘美人指’葡萄... 详细信息

本研究以‘美人指’葡萄(Vitis vinifera L'Manicure Finger')为材料,在已建立的‘美人指’葡萄不定芽再生体系的基础上,采用农杆菌介导法以及花粉管通道法,将iaam基因导入‘美人指’葡萄中,以期获得定向改良目的性状的‘美人指’葡萄新种质。本实验系统探讨了影响‘美人指’葡萄遗传转化效率的因子,优化了农杆菌介导法的主要技术参数,研究结果如下：1.以‘美人指’葡萄茎段、叶柄、叶片为农杆菌介导转化iaam基因的受体,对影响遗传转化的一系列因子：农杆菌浸染时间、共培养时间、卡那霉素选择压、头孢霉素浓度等进行了研究。结果表明：农杆菌侵染4min,共培养3d,卡那霉素选择压3mg/L,头孢霉素浓度250mg／L为最佳的农杆菌介导‘美人指’葡萄的遗传转化体系。2.通过超声波辅助农杆菌介导法,对‘美人指’葡萄遗传转化体系进行研究,以期提高转化效率。利用GUS瞬时表达的方法研究了不同处理功率、时间、外植体类型及AS浓度对‘美人指’葡萄遗传转化效率的影响。结果表明,外植体茎段在含75mg／LAS农杆菌悬浮液中侵染4min,并在此期间,用功率为90w的超声波处理14s,获得最佳GUS瞬时表达率42.8%。3.采用优化的农杆菌介导转化体系,对‘美人指’葡萄进行转化,共获得7株抗性苗。利用GUS组织化学染色、PCR扩增及RT-PCR检测,结果表明,2株抗性植株GUS染色和PCR检测呈阳性,其中1株通过RT-PCR检测,初步证实iaam基因已经整合到‘美人指’葡萄基因组中,并得到了表达。4.以‘美人指’葡萄花序为转化iaam基因的受体,利用花粉管通道法对‘美人指’葡萄进行转化,胚培养共获得了19株单株。利用GUS组织化学染色、PCR扩增的方法进行检测,结果表明,3株GUS染色呈阳性,GUS阳性率为15.8%,同时3株GUS阳性植株均通过了PCR检测,初步证实iaam基因已经整合到‘美人指’葡萄基因组中。

关键词： ‘美人指’葡萄 iaam基因农杆菌介导花粉管通道法检测

外源iaam基因对陆地棉色素腺体形态建成、棉酚代谢及其基因表达的影响

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外源iaaM基因对陆地棉色素腺体形态建成、棉酚代谢及其基因表达的...

作者：刘慧浙江大学

学位级别：硕士

基因工程技术已成为作物品种改良的常规技术。IF11为转iaam基因的棉花种质系,该基因通过产生色氨酸单加氧酶,从而提高胚珠中的IAA含量,最终提高IF11的衣分,改良马克隆值。本实验室研究发现,IF11种质系各器官中的生长素含量都有显著提高... 详细信息

基因工程技术已成为作物品种改良的常规技术。IF11为转iaam基因的棉花种质系,该基因通过产生色氨酸单加氧酶,从而提高胚珠中的IAA含量,最终提高IF11的衣分,改良马克隆值。本实验室研究发现,IF11种质系各器官中的生长素含量都有显著提高,且外源基因导入或IAA含量提高显著地影响了 IF11体内的棉酚代谢,降低了 IF11棉酚的贮存能力。本研究主要以IF11种质系以及其受体材料冀棉14为材料,研究iaam基因转入受体后对于棉仁、花瓣、萼片、铃壳、苞叶、上部叶、中部叶、下部叶等各器官色素腺体大小、密度和棉酚及其旋光体含量的影响,并研究iaam基因对于色素腺体形成及棉酚合成相关基因在各个器官表达的影响,为进一步利用该种质系提供依据。主要结果如下:(1)系统地比较了转iaam基因的IF11种质系与受体亲本冀棉14之间各器官的色素腺体密度和大小、左右旋棉酚含量和总棉酚含量。结果表明,IF11大多数器官的色素腺体较冀棉14稀小,但中部叶除外;IF11大部分器官的总棉酚含量小于冀棉14,IF11的左旋棉酚含量普遍低于冀棉14,但右旋棉酚含量却普遍高于冀棉14。说明IF11色素腺体和棉酚含量的降低与外源iaam基因的导入和IAA上调密切相关,IAA含量上调可能会影响到色素腺体的形态建成和棉酚的合成。(2)系统地观察了 6份陆地棉各器官的色素腺体表现,并测定其棉酚及其旋光体的含量。结果表明,低酚棉全株无色素腺体,而有酚棉各器官的色素腺体表现有明显差异,其中棉仁色素腺体最密,苞叶最稀;铃壳的色素腺体最大,花瓣和棉仁最小。有酚棉中,棉仁的总棉酚含量最高(0.8823%～1.2371%),左旋棉酚占37.90%～49.68%;苞叶的总棉酚含量最低(0.0271%～0.0335%)。低酚棉各器官中也存在着一定量的棉酚及其旋光体,但其含量显著低于有酚棉,其中棉仁的总棉酚含量仅为0.011%。(3)系统地分析了 6份陆地棉各器官的色素腺体表现与棉酚及其旋光体含量之间的相关性。结果表明,有酚棉的色素腺体密度与大小之间呈极显著负相关,与总棉酚及其旋光体含量之间呈极显著正相关;色素腺体密度与棉酚旋光体含量之间呈极显著的正相关,而色素腺体大小与右旋棉酚含量之间呈显著的负相关,与左旋棉酚含量和总棉酚含量没有显著的相关性。各器官中,棉仁与花瓣的总棉酚含量存在着高度的相关性。因此,可以通过花瓣的棉酚含量来判断棉仁的棉酚含量。(4)采用荧光定量PCR技术,系统地分析了色素腺体形成和棉酚合成相关基因在IF11及其受体材料中的表达情况。结果表明,色素腺体形成基因GoPGF在IF11大部分组织中的相对表达量最大,棉酚合成基因HMG1和和HMG2在IF11根中的相对表达量与冀棉14无显著差异,CYP706B1、GhCPR1和GhCPR2基因在IF11根中的相对表达量与冀棉14差异显著,且较于冀棉14有显著降低。说明iaam基因的导入并没有影响到色素腺体的形成,但影响到了根部的棉酚合成,从而导致IF11的棉酚含量降低。

关键词： iaam基因 IF11种质系陆地棉色素腺体左右旋棉酚相关性分析表达分析

转iaam基因棉花纤维起始与发育的生物特性研究

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转iaaM基因棉花纤维起始与发育的生物特性研究

作者：刘天雄浙江大学

学位级别：硕士

棉花产量和纤维品质的同步提高一直都是育种实践中的重点和难点。IF-11种质系是具有我国内自主权的转iaam因棉花种质系,具有高衣分和纤维品质优良等特点。研究该种质系在纤维品质性状和产量性状形成的遗传、组织学和生理生化特点,对于... 详细信息

棉花产量和纤维品质的同步提高一直都是育种实践中的重点和难点。IF-11种质系是具有我国内自主权的转iaam因棉花种质系,具有高衣分和纤维品质优良等特点。研究该种质系在纤维品质性状和产量性状形成的遗传、组织学和生理生化特点,对于该材料的育种利用以及棉花纤维发育和产量形成的理论基础具有一定的意义。本研究以IF-11为材料,以及遗传背景亲本和陆地棉标准系TM-1等为材料,从性状遗传、纤维细胞启始发育、花器各组织器官几种内源激素含量的动态变化等方面研究IF-11高衣分和优良纤维品质的遗传基础,纤维起始发育的组织学基础和生理生化基础,主要结果如下：(1)选用加性-显性-母体遗传模型研究了IF-11纤维品质性状和产量性状的遗传特点。结果表明,转iaam基因的IF-11种质系在纤维品质和产量性状方面具有特殊遗传特性,两类性状都以加性效应为主。其中纤维长度和衣分的加性效应和显性效应都达到了极显著或显著水平;衣分、马克隆值和单铃重的加性效应达到极显著水平;断裂纤维强度的显性效应达到了极显著水平。纤维品质性状中受加性效应控制的有纤维长度和马克隆值,断裂纤维强度受显性效应控制。产量性状中单铃重和衣分都以加性效应为主。此外,断裂纤维强度的母体效应达到显著水平。除纤维整齐度和伸长率性状外,所测性状的广义遗传率都达到了极显著水平。衣分性状的遗传力最大,可以在早期世代对其进行遗传改良。遗传相关上,纤维马克隆值与衣分呈极显著负相关,说明该性状可实现衣分和马克隆值的同步改良。(2)利用扫描电镜和石蜡切片技术从显微结构和超微结构上观察该种质纤维发育初期的组织学特性,并比较以该种质为亲本的杂种F1与亲本的纤维起始情况。结果表明,开花前后1F-11胚珠表面的突起伸长较非转基因对照1F-11(无)更快,突起密度更大,形状更规则,胚珠体积更大,且伸长期纤维更细。以IF-11为亲本的F1胚珠表面纤维密度有较强的超亲优势。(3)用酶联免疫吸附法测定IF-11和其它品种在纤维发育期的IAA、GA、ZR和ABA四种激素含量,以寻找不同激素的动态变化与纤维起始分化的关系。结果表明,IF-11棉铃(蕾)中IAA、GA、ZR和ABA这四种激素主要集中在棉铃壳和棉仁中,说明纤维发育受这两个器官中激素动态变化的影响较大,且与这两个器官中的几种激素含量的变化存在着较密切的关系。不同品种棉铃几种内源激素平均含量结果表明：IF-11在GA和IAA含量上与TM-1有极显著差异,与遗传背景品种J-14和IF-11(无)有显著差异。棉铃各器官不同激素平均含量结果表明,IAA和GA的动态变化与纤维发育进程较为同步,但GA有一定的波动。ZR和ABA含量随着纤维发育而下降,其中ZR在纤维发育前期表现活跃,特别是在TM-1中。IF-11在棉铃(蕾)不同组织器官内的几种内源激素含量的变化特点与其纤维起始发育特点密切相关。

关键词：棉花 IF-11种质系 iaam基因纤维品质产量性状纤维起始遗传效应激素动态变化

转iaam基因对‘B0011’及‘华杂棉H318’产量与纤维品质的影响

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转iaaM基因对‘B0011’及‘华杂棉H318’产量与纤维品质的影响

作者：刘宏伟华中农业大学

学位级别：硕士

棉花是我国的重要经济作物之一,棉花产量和纤维品质是评价棉花品种的重要指标。通过基因工程鉴定棉花高产优质基因,并导入优良育种品系是棉花分子育种定向改良棉花产量与纤维品质的重要手段。iaam基因在棉花胚珠表皮的特异表达能显著增... 详细信息

棉花是我国的重要经济作物之一,棉花产量和纤维品质是评价棉花品种的重要指标。通过基因工程鉴定棉花高产优质基因,并导入优良育种品系是棉花分子育种定向改良棉花产量与纤维品质的重要手段。iaam基因在棉花胚珠表皮的特异表达能显著增强棉花衣分(Zhang et al.2011)。本研究以转iaam基因的高衣分品系‘THL’为外源iaam基因的供体亲本,以综合性状优良的‘华杂棉H318’母本‘B0011’为回交亲本,通过4代回交和1代自交,获得了回交群体。利用SSR分子标记检测了这些株系的基因组回复率,并结合田间农艺性状考察获得具有外源iaam基因的‘B0011’改良的株系。在此基础之上通过选株、自交和卡那霉素抗性鉴定获得了4个株系,以这4个株系作为亲本与‘华杂棉H318’的另一亲本‘4-5’杂交获得改良的‘华杂棉H318’。研究取得的主要研究结果如下:***代4个株系(A-26、A-65、A-84和A-88)的回复率的检测。利用覆盖棉花全基因组的608对SSR分子标记对4个株系的基因背景进行筛选,有41个多态性标记入选。筛选结果:理论上BCF的遗传回复率为96.88%。四个株系中,A-26、A-65、A-84和A-88平均遗传背景回复率分别为95.83%、95.94%、94.31%和94.49%,比理论值低1.05%、0.94%、2.57%和2.39%。4个株系的遗传回复率均比理论值低,可能的原因是供体染色体上的连锁累赘未被回交去除降低了回复率。2.对BCF代4个‘B0011’改良后的株系(B-26、B-65、B-84和B-88)的田间农艺性状和纤维品质进行了调查分析。结果表明,在田间农艺性状方面,4个株系在果枝数、单铃重上与‘B0011’无显著差异,B-88在单株成铃数上显著低于‘B0011’,B-84在衣分上显著低于‘B0011’。纤维品质上在上半部平均长度、断裂比强度和马克隆值上4个株系比‘B0011’要好,其中B-26在马克隆值和断裂比强度上显著优于‘B0011’。农艺性状上4个株系接近‘B0011’,但iaam在衣分上对‘B0011’无显著改善,而在纤维品质上能够改善上半部平均长度、断裂比强度和马克隆值。3.鉴定‘华杂棉H318’改良后的杂交系Z-66阳、Z-66阴、Z-67、Z-68和Z-69中FBP-iaam基因的表达。以杂交系中Z-66阴性材料为对照,取当天开花的胚珠提取总RNA,利用RT-PCR检测改良的杂交种中iaam基因的表达。结果表明4个杂交系中,Z-66、Z-67和Z-68相对表达较高,Z-69表达较弱。4.对4个杂交系(Z-66阴、Z-66阳、Z-67、Z-68和Z-69)和对照‘华杂棉H318’的产量及产量相关性状,田间农艺性状和棉花纤维品质进行了调查分析。结果表明,4个杂交系产量均低于‘华杂棉H318’,但无显著差异;衣分上,4个杂交系显著高于对照;田间农艺性状上与‘华杂棉H318’相近,纤维品质上,Z-67显著优于‘华杂棉H318’,其它材料接近‘华杂棉H318’。此外,Z-66杂交系中有含有iaam的阳性植株和不含iaam的阴性植株,阴性植株在考种花和大样衣分上比阳性植株低但不显著,而在马克隆值和断裂比强度上,阳性材料高于阴性材料,且在马克隆值上有显著差异。综上,iaam在衣分对‘华杂棉H318’有改善,并能够改善马克隆值和断裂比强度。

关键词： iaam基因 B0011品系 ‘华杂棉H318’ 产量性状农艺性状纤维品质

利用转iaam基因种质IF-11改良棉花纤维产量与品质的研究

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利用转iaaM基因种质IF-11改良棉花纤维产量与品质的研究

作者：肖钦之浙江大学

学位级别：硕士

棉花是一种重要的经济作物,同时提高棉纤维产量与品质是一直是研究的一个难点问题。转iaam基因的棉花IF-11种质系具有的一个明显特点是其衣分的值较高,所以,研究该种质系与在改良其他优势品种的纤维产量与品质方面的作用,对于该材料的... 详细信息

棉花是一种重要的经济作物,同时提高棉纤维产量与品质是一直是研究的一个难点问题。转iaam基因的棉花IF-11种质系具有的一个明显特点是其衣分的值较高,所以,研究该种质系与在改良其他优势品种的纤维产量与品质方面的作用,对于该材料的育种利用及提高棉纤维产量、改善纤维品质具有重要理论与实际意义。本实验采用IF-11为亲本,与鄂抗10选、TM-1、冀棉14、优质-1及IF-11无,等分别进行正、反交,通过对亲本材料及其F1代材料主要农艺性状、产量性状、品质性状及光合速率和DNA甲基化等方面的研究,进一步了解转iaam基因的IF-11种质和其他一些品种杂交后的F1代材料的表现。主要结果如下：(1)IF-11不会明显的影响株高、第一果枝位等农艺性状,原有品种农艺性状可继续保持。利用IF-11作为父本对衣分较低品种提高衣分具有较明显的作用,在单铃重方面,除鄂抗10选/IF-11F1稍低于母本外,其他4个正交F1均有较明显的增加,单铃重增加的主要原因为衣分增加。TM-1/IF-11、IF-11.无)/IF-11.冀棉14/IF-11和优质-1/IF-11的F1代籽棉产量分别比母本提高了24.26%、16.08%、9.95%和1.49%;皮棉产量的变化趋势与籽棉产量相似,且增产幅度超过籽棉。(2)在纤维品质的改良上,IF-11对麦克隆值具有较明显的改良作用。正交F1代材料中,除TM-1/IF-11较母本略有提高外,其他组合的F,代的均比其对应的母本要低。反交F1的马克隆值与其各自的父本相比,均表现出降低的趋势。马克隆值的降幅虽然没有达到统计意义上的显著水平,但这一降低,使各参试材料这一指标的等级提高了一个档次。(3)利用IF-11种质的正、反交F1代中,在内围有效铃数、单铃重、籽棉产量、皮棉产量等方面多数表现出正向中亲优势与正向高亲优势。(4)棉花品种冀棉14与IF-11杂交后,正反交F1非甲基化比例均明显高于双亲,母本甲基化比例明显低于父本,杂交F1代甲基化比例均高于双亲。父本的甲基化遗传频率高于母本,反交F1代的甲基化类型遗传频率高于正交F1。反交F1代是由IF-11作为母本,其DNA甲基化遗传频率高于IF-11作为父本的DNA甲基化遗传频率。推断iaam基因可能对DNA甲基化的遗传起增强作用。

关键词： iaam基因 IF-11种质系农艺性状产量性状纤维品质性状 DNA甲基化

外源iaam基因对于转基因棉花体内的激素、棉酚和根系分泌物的影响

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外源iaaM基因对于转基因棉花体内的激素、棉酚和根系分泌物的影响

作者：季灵艳浙江大学

学位级别：硕士

转基因技术在棉花育种中的应用已较为广泛,但外源基因对转基因受体本身影响的研究却较少。IF-11种质系是具有我国自主知识产权的转iaam基因棉花种质系,由于该基因上调植株体内生长素含量,使种子表皮纤维数量增加而显著提高其衣分并改善... 详细信息

转基因技术在棉花育种中的应用已较为广泛,但外源基因对转基因受体本身影响的研究却较少。IF-11种质系是具有我国自主知识产权的转iaam基因棉花种质系,由于该基因上调植株体内生长素含量,使种子表皮纤维数量增加而显著提高其衣分并改善纤维细度,实现产量和品质性状的同步提高。研究该种质系生长素外的其它生理性状变化,以探究外源基因的导入是否有对该受体产生额外影响,对于该材料的育种利用以及转基因技术对生物体影响均具有一定的意义。本研究以IF-11为材料,以从中分离出来的无iaam基因材料1F-11(无)、遗传背景品种冀棉14和陆地棉标准系TM-1为对照,从内源激素含量、左右旋棉酚含量、根系分泌物成份、种子萌发和化感作用等方面探讨IF-11由于外源基因的导入造成的生理性状变化。主要结果如下： (1)利用酶联免疫法测定了四个材料种仁、根、茎、叶、花蕾的内源激素含量。结果表明,IF-11显著地提高了各器官中的生长素含量,但各器官中的赤霉素、脱落酸和玉米素核苷含量也与其它三个材料有显著的差异。产生变化的原因可能是iaam基因的导入引起了棉株体内激素交联部分正负调节因子的调节变化。 (2)利用柱前衍生化-高效液相色谱法测定了四个材料各主要器官的左右旋棉酚含量。结果表明,棉花植株几个器官的棉酚含量最高的是种仁,为0.344～1.282%;其次是叶片,为0.221～0.539%,最低的是茎,为0.031～0.063%。转iaam基因材料IF-11的种仁和叶片的棉酚总含量分别为0.344%和0.221%,显著低于其余参试材料。参试材料间,根系和茎杆的总棉酚含量未有明显差异。说明外源基因的导入或IAA含量的提高显著地影响了IF-11体内的棉酚代谢,降低了IF-11的棉酚的贮存能力。 (3)参试材料各器官的左右旋棉酚含量有较大的差异,其中种仁中左右旋棉酚含量分别为0.195～0.589%和0.149～0.693%,叶片分别为0.127～0.214%和0.094～0.325%,茎分别为0.014～0.029%和0.017～0.034%,根系分别为0.055～0.077%和0.063～0.090%。IF-11种仁和叶片中左旋棉酚比例高于右旋,而其余参试材料则是右旋棉酚含量高于左旋棉酚。除TM-1的根系外,四个参试材料茎和根系中的左旋棉酚含量均低于右旋棉酚。 (4)利用气相色谱法-质谱法分析了四个材料的根系分泌物成份,结果表明,IF-11的根系分泌物物质含有更多的亲水性基团,这点说明了IF-11根系分泌物的水溶性更高,且有羟基的这些物质更容易在土壤中转化其它醛酮类物质,起到化感作用。此外,IF-11根系分泌物中含有的糖类较少,说明IF-11的根系分泌物成份对土壤根际微生物的生长有一定的抑制作用。菌丝生长实验表明,IF-11根系分泌物的抑菌效果较好,但与IF-11(无)的差异并不大。根据本试验结果还无法推断根系分泌物是其抗枯萎病的原因。 (5)种子发芽试验结果表明,IF-11由于外源基因的导入或IAA含量的上调以及由此引起的多种生理生化效应,其发芽率和发芽势显著低于从中分离出来的无基因对照。采用浸种后再发芽或者脱绒后发芽的方法可以在一定程度上提高其发芽率。化感试验表明,IF-11的种子浸提液对中棉所49种子的发芽有明显的促进作用,且促进作用效果优于从中分离出来的无基因对照。这说明IF-11的种子浸提液更具有化感作用。

关键词：棉花 IF-11种质系 iaam基因左右旋棉酚内源激素根系分泌物发芽化感作用

农杆菌介导iaam基因创造单性结实酸浆种质资源

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农杆菌介导iaaM基因创造单性结实酸浆种质资源

作者：王蕾东北农业大学

学位级别：硕士

本文研究通过农杆菌介导转化iaam基因，使iaam基因在酸浆果实中特异表达，提高果实中生长素浓度，创造遗传稳定的酸浆单性结实品种，为酸浆单性结实育种提供了新的种质资源。本研究获得的主要结果如下：1、以MS为基本培养基，采用TDZ、6... 详细信息

本文研究通过农杆菌介导转化iaam基因，使iaam基因在酸浆果实中特异表达，提高果实中生长素浓度，创造遗传稳定的酸浆单性结实品种，为酸浆单性结实育种提供了新的种质资源。本研究获得的主要结果如下：1、以MS为基本培养基，采用TDZ、6-BA、NAA等多种激素不同配比的组合，同时对酸浆的外植体筛选、再生芽的伸长和生根进行了研究。经过对比试验，确定了最佳再生体系。筛选出酸浆高效的再生培养基为：MS+TDZ 1.0mg／L+NAA 0.5mg／L+蔗糖20g／L+琼脂8g／L;生根培养基为MS+NAA 0.5 mg／L+蔗糖30g／L+琼脂8g／L，生根苗移栽存活率达到90％以上。同时还研究了不同的外植体类型、外植体种类以及激素浓度对再生的影响，发现叶片是最佳的外植体，TDZ对酸浆的诱导有很大的影响，并且不同基因型对TDZ浓度的响应不同。2、本试验明确了不同酸浆品种不定芽分化及生根培养分别用以筛选转化植株的卡那霉素浓度，并通过侵染试验对比转化率，建立农杆菌侵染苦职叶片的遗传转化受体体系：70mg／L的Km是苦职叶片外植体筛选培养的临界耐受浓度，20mg／L Km是苦职生根筛选培养的临界浓度;培养基中浓度为350mg／L的头孢霉索能够很好的抑制农杆菌的生长，且对叶片外植体的再生率和不定芽影响最小，可作为苦职的抑菌性抗生素。3、在建立苦职遗传受体体系的基础上，通过GUS组织染色法研究了影响转化效果的各因子，建立高效苦职的遗传转化体系：以预培养24h的苦职叶片为转化材料，用OD600为0.6的携带有iaam基因的农杆菌菌液侵染8min，24℃接种在附加100μmol／L乙酰丁香酮、pH为5.4的共培养基上共培养2d，延迟培养2d，用选择压为70mg／L的Km连续筛选直至不定芽生成，待不定芽长至1cm左右时转入附加20mg／L Km的生根培养基中，继续筛选，并对生根抗性植株进行了PCR和Southern blotting检测，其中28.2％的被检植株产生Southern杂交信号，证明iaam基因已整合到苦职基因组中，外源基因主要是多拷贝插入。

关键词：酸浆再生体系 iaam基因遗传转化

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具有iaam基因抗虫陆地棉新品系的选育

江西农业学报 2020年第8期32卷 23-26页

作者：陈旭升赵亮狄佳春江苏省农业科学院经济作物研究所/农业农村部长江下游棉花与油菜重点实验室江苏南京210014

分析了3个转iaam基因抗虫陆地棉新品系的主要经济性状,结果显示:品系WU024的籽、皮棉产量最高,分别为236.5、113.6 kg/667 m 2,分别比对照WT118增产8.4%、24.3%,衣分高达48.0%,但纤维品质一般。品系U0005的纤维品质在3个品系中表现最好... 详细信息

分析了3个转iaam基因抗虫陆地棉新品系的主要经济性状,结果显示:品系WU024的籽、皮棉产量最高,分别为236.5、113.6 kg/667 m 2,分别比对照WT118增产8.4%、24.3%,衣分高达48.0%,但纤维品质一般。品系U0005的纤维品质在3个品系中表现最好;但衣分较低,为38.2%,籽棉产量比对照增产、皮棉产量比对照减产。品系SR006的纤维品质中等,衣分达43.9%;籽棉产量比对照减产,但皮棉产量比对照增产。陆地棉导入外源iaam基因,可使马克隆值明显变低,3个转iaam基因品系WU024、U005、SR006的马克隆值分别为3.5、3.7、3.3,低于常规对照WT118的马克隆值。对转iaam基因核心品系SR006的抗棉铃虫特性进行检测,其生物学抗虫性表现正常,对棉铃虫达抗性级别。

关键词：陆地棉 iaam基因新品系生物学抗虫性