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Identification of differentially expressed genes of primary spermatocyte against round spermatid isolated from human testis using the laser capture microdissection technique

引用

Cell Research 2004年第6期14卷 507-512页

作者： S.S.KOIDE 1230 York Avenue Center for Biomedical Research Population Council NY 10021 New York USA

The method of laser capture microdissection (LCM) combined with suppressive subtractive hybridization (SSH) was developed to isolate specific germ cells from human testis sections and to identify the genes expressed during differentiation and development. In the present study, over 10,000 primary spermatocytes and round spermatid cells were successfully isolated by LCM. Using the cDNAs from primary spermatocytes and round spermatids, SSH cDNAs library of primary spermatocyte-specific was constructed. The average insert size of the cDNA isolated from 75 randomly picked white clones was 500 bp, ranging from 250 bp to 1.7 kb. Using the dot-blot method, a total of 421 clones were examined, resulting in the identification of 390 positive clones emitting strong signals. Partial sequence of cDNAs prepared from each clone was determined with an overall success rate of 84.4%. Genes encoding cytochrome c oxidase II and the rescue factor-humanin.were most frequently expressed in primary spermatocytes, suggesting th

关键词： laser capture microdissection suppressive subtractive hybridization spermatogenesis cytochrome c oxidase Ⅱ humanin.

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