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山东医药 2015年第2期55卷 1-4页

作者：邵晓冬张永国陈江王金玲郭晓钟任丽楠沈阳军区总医院沈阳110016

目的探讨胃癌细胞herg mRNA、herg蛋白表达及herg电流强度的变化的临床意义。方法培养胃癌细胞(胃癌细胞系SGC7901、MGC803、AGS、MKN45)及永生化胃上皮细胞(GES),取对数生长期细胞用于实验。采用RT-PCR法检测herg mRNA表达,Western blo... 详细信息

目的探讨胃癌细胞herg mRNA、herg蛋白表达及herg电流强度的变化的临床意义。方法培养胃癌细胞(胃癌细胞系SGC7901、MGC803、AGS、MKN45)及永生化胃上皮细胞(GES),取对数生长期细胞用于实验。采用RT-PCR法检测herg mRNA表达,Western blot法检测herg蛋白表达,采用全细胞膜片钳技术测定SGC7901及GES的herg电流强度。结果 herg mRNA及其蛋白在4种胃癌细胞系中均有表达,AGS中herg蛋白表达量低于其他三种细胞系(P均herg mRNA及其蛋白表达。在SGC7901中检测到herg电流,GES中未记录到herg电流。结论 herg mRNA及其蛋白在胃癌细胞系SGC7901、MGC803、AGS、MKN45表达增高,SGC7901中存在herg电流。herg蛋白可能参与了胃癌的发生,并与胃癌恶性程度有关。

关键词：胃肿瘤胃癌 herg基因 herg蛋白 herg电流延迟整流钾通道肿瘤形成过程

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IRE1-XBP1通路在herg-A561V突变蛋白转运中的作用研究

IRE1-XBP1通路在HERG-A561V突变蛋白转运中的作用研究

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作者：应雨晨宁波大学

学位级别：硕士

长QT综合征的显著特点是QT间期延长,这大大增加了心源性猝死的风险。LQT2是LQT综合征的众多亚型之一,它由KCNH2基因的功能失活突变(LOF)引起的。herg是电压门控钾离子通道的α亚单位,KCNH2基因突变导致herg蛋白的发生错误折叠。突变的h... 详细信息

长QT综合征的显著特点是QT间期延长,这大大增加了心源性猝死的风险。LQT2是LQT综合征的众多亚型之一,它由KCNH2基因的功能失活突变(LOF)引起的。herg是电压门控钾离子通道的α亚单位,KCNH2基因突变导致herg蛋白的发生错误折叠。突变的herg蛋白与细胞质中正确折叠的蛋白质不同,内质网(ER)中的蛋白质质量控制系统会抑制herg通道从内质网输出。未折叠的herg通道在ER中出现时触发未折叠蛋白质反应(UPR)。IRE1-XBP1是UPR的一个主要分支,并且在我们之前A561Vherg突变相关研究中,它也被A561V-herg突变所激活,我们推测IRE1-XBP1通路在herg-A561V突变蛋白转运中发挥关键作用。槲皮素是一种广泛存在的黄酮类化合物,其抗炎和抗氧化作用在某些蛋白质错误折叠疾病中已被证实,有助于缓解蛋白质错误折叠疾病的相应症状。在酵母菌中,槲皮素可以上调中IRE1-XBP1通路活性。因此,我们假设槲皮素可以通过IRE1-XBP1途径改善herg蛋白转运。为了验证这一的假设,我们在HEK293细胞系中转染A561V-herg杂合质粒,构建了LQT2模型。进行相关的试验后,免疫荧光分析表明,XBP1和XBP1s主要分布在细胞核内。通过westernblot分析和细胞质膜蛋白分离实验,我们发现证槲皮素能增加细胞内herg蛋白的表达,并促进herg蛋白向细胞膜的转运。然而,在IRE1-XBP1通路活性被抑制后,herg蛋白表达量下降。进一步在杂合突变细胞中进行24小时时间梯度实验,并检测磷酸化IRE1、XBP1s和herg的表达量,我们发现在早期ERS期(4–6小时),IRE1α/XBP1s通路活性上升,此时随着通路活性上升herg通道表达量增加。全细胞膜片钳记录实验表明槲皮素处理可以增加herg通道的最大尾电流密度。以上的实验结果表明,IRE1α/XBP1s通路在ERS早期短暂增加了herg蛋白的表达,促进herg蛋白折叠转运,此外我们首次发现槲皮素可以改善herg的转运障碍,增加其尾电流密度,但是这些作用与IRE1-XBP1通路活性的无明显关联。

关键词：长QT综合征 herg蛋白内质网应激 IRE1 XBP1 槲皮素

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人类eag相关基因在喉癌病变组织中的表达

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2015年第24期29卷 2160-2163页

作者：梁大帅王丽萍季文樾中国医科大学附属盛京医院耳鼻咽喉科沈阳110004

目的:研究人类eag相关基因(herg基因)及其表达的herg蛋白在喉癌中的表达情况。方法:应用免疫组织化学方法和real-time PCR技术对30例喉癌组织标本及20例癌旁2cm黏膜组织中的herg基因及herg蛋白的表达进行检测。结果:1免疫组织化学分析h... 详细信息

目的:研究人类eag相关基因(herg基因)及其表达的herg蛋白在喉癌中的表达情况。方法:应用免疫组织化学方法和real-time PCR技术对30例喉癌组织标本及20例癌旁2cm黏膜组织中的herg基因及herg蛋白的表达进行检测。结果:1免疫组织化学分析herg蛋白在喉癌组织的阳性率为76.7%(23/30),而在癌旁2cm黏膜组织中的阳性率为10.0%(2/20),两者比较差异有统计学意义(Pherg基因的mRNA表达是癌旁2cm黏膜组织的3.25倍。结论:herg基因在喉癌中呈高水平表达可能与肿瘤的发生、发展有关。

关键词：喉肿瘤人类eag相关基因 herg蛋白免疫组织化学 real-time PCR

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