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计算机工程 2002年第3期28卷 22-23,26页

作者：詹俊鹄周兴社蔡皖东西北工业大学计算机科学与工程系西安710072

介绍了所设计实现的基于的群集系统,它保证了系统级和应用级的高可用性,同时具备负载均衡功能;此外,还实现Linuxhaecs了与当前主流数据库集成的工具,探索出一套高可用平台与数据库应用结合的方法。

关键词： Linux 高可用性负载均衡群集系统 haecs 计算机网络

Inhibitory Effect of Tanshinones on TNF-α-induced Inflammation in Human Aortic Endothelial Cells

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Medicinal Plant 2018年第3期9卷 25-30页

作者： Ziru ZHANG Mingyi MA Longru SUN Department of Natural Products Chemistry School of Pharmaceutical SciencesShandong University

[Objectives] To study the anti-inflammatory activity and mechanism of tanshinone I,cryptotanshinone and 15,16-dihydrotanshinone I on haecs induced by TNF-α. [Methods]Vitamin E was used as a positive control and TNF-α-induced human aortic endothelial cells( haecs) were selected as the inflammation model cells. The m RNA levels of IL-6,ICAM-1,VCAM-1,and NF-κB were analyzed by quantitative RT-PCR. The protein expression of NF-κB,ICAM-1,VCAM-1 and phosphorylation of ERK1/2 were determined by Western blot. The adhesion of U937 to haecs was assessed by BCECF/AM labeling assay. [Results] TNF-α-induced over-expression of IL-6,NF-κB,ICAM-1,and VCAM-1 in haecs were down-regulated by tanshinone I( TAN),cryptotanshinone( CPT) and 15,16-dihydrotanshinone I( DHT) both in m RNA and protein levels,respectively. Meanwhile 15,16-dihydrotanshinone I and cryptotanshinone could inhibit phosphorylation of ERK1/2 and tanshinone I inhibited U937 adhesion to haecs significantly. [Conclusions] Tanshinones could inhibit TNF-α induced inflammatory responses on haecs and the mechanism might be related to inhibition of phosphorylation of ERK1/2 and blocking NF-κB signaling pathway.

关键词： Tanshinones haecs Anti-inflammatory effects NF-κB

人羊膜上皮细胞上清液对人肝癌BEL-7402细胞的体外抗肿瘤作用

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基础医学与临床 2016年第1期36卷 62-67页

作者：王华侨李天明罗宏武中南大学湘雅三医院肝胆外科湖南长沙410013

目的探讨人羊膜上皮细胞(h AECs)上清液对体外培养的肝癌细胞系BEL-7402细胞迁移、增殖与凋亡的影响。方法 BEL-7402细胞随机分为5组,其中对照组不加h AECs上清液,其余4组加入体积分数分别为6.25%、12.5%、25%和50%的h AECs上清液作用2... 详细信息

目的探讨人羊膜上皮细胞(h AECs)上清液对体外培养的肝癌细胞系BEL-7402细胞迁移、增殖与凋亡的影响。方法 BEL-7402细胞随机分为5组,其中对照组不加h AECs上清液,其余4组加入体积分数分别为6.25%、12.5%、25%和50%的h AECs上清液作用24 h后,通过划痕实验、MTT试验和流式细胞术检测BEL-7402细胞迁移、增殖和凋亡;Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达量。结果 h AECs上清液能剂量依赖性地抑制BEL-7402细胞迁移、增殖并诱导凋亡(P<0.05);25%和50%h AECs上清液组BEL-7402细胞caspase-3和caspase-8蛋白的切割片断蛋白定量明显高于对照组(P<0.05)。结论 h AECs上清液对体外培养的BEL-7402细胞具有一定的抗肿瘤作用。

关键词： haecs BEL-7402细胞细胞迁移细胞增殖细胞凋亡

经颈动脉注射人羊膜上皮细胞对大鼠MCAO模型的疗效研究

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经颈动脉注射人羊膜上皮细胞对大鼠MCAO模型的疗效研究

作者：王昊邈第二军医大学

学位级别：硕士

研究背景及目的:脑卒中是一类严重危害人类健康的高致残、致死类疾病,其中缺血性脑卒中占80%。而神经元在缺血缺氧环境中24-48小时便会凋亡,急救的窗口期只有3-6小时,但在现实生活中,绝大多数的患者从发病送至医院后的时间过长,使其丧... 详细信息

研究背景及目的:脑卒中是一类严重危害人类健康的高致残、致死类疾病,其中缺血性脑卒中占80%。而神经元在缺血缺氧环境中24-48小时便会凋亡,急救的窗口期只有3-6小时,但在现实生活中,绝大多数的患者从发病送至医院后的时间过长,使其丧失了最佳手术及溶栓时机。目前国内外热衷于研究通过干细胞移植治疗促进缺血性脑卒中患者神经功能的恢复,但是长期以来传统干细胞治疗却存在诸多障碍,如细胞来源,安全性,免疫排斥,以及伦理道德等诸多问题限制了干细胞治疗的发展。羊膜上皮细胞(Amniotic Epithelial Cell)来源于羊膜上皮层,单层排列生长在面向羊水的一面,是受精卵发育至第8天,所形成的囊胚内细胞团分化而来,因此保留了胚胎干细胞的特性,且具有多能干性,分化能力及可塑性较强。同时,羊膜上皮细胞具有干细胞旁分泌功能,能表达多种细胞因子和营养因子。可促进神经细胞生长,对于神经损伤修复具有较好疗效。其端粒酶活性较弱,因此自身增殖能力非常有限,无致瘤性。并且不表达HLA,无同种异体移植免疫原性。同时该类细胞能分泌表达多种抗炎症因子和相关蛋白,具有治疗炎症、纤维化的潜能。该细胞来源于新生儿产后废弃物羊膜,容易大量获得细胞,易于质量控制,不会带来伦理学问题。综上所述,人羊膜上皮细胞具有以下几个有点:1.无免疫源性、移植不需要配型;2.可以分泌多种神经递质及神经营养因子;3.具有向三个胚层分化的潜能;4.无致瘤性;5.来源广泛、无伦理问题。早在1996年Sakuragawa就提出:人羊膜上皮细胞可以作为神经元和胶质细胞的祖细胞,因为它能表达这两类细胞的分子标志物。目前,已经有越来越多的研究结果表明,人羊膜上皮细胞在体外很容易诱导分化为神经细胞,也可不经体外诱导分化,直接移植到生物体内治疗神经损伤及神经退行性疾病。因此,在治疗神经系统疾病及神经损伤方面,羊膜上皮细胞显然具有更大的向神经细胞分化的潜能。如上所述,在特定的体内微环境如通过脑室内、脑组织内和脊髓蛛网膜下腔注射,羊膜上皮细胞具有通过向神经细胞分化、向损伤部位迁移、修复神经系统损伤的作用,这也是其应用于神经系统疾病和损伤治疗的另一个作用机理。羊膜上皮细胞作为滋养层应用于临床的典型例子是维持角膜缘干细胞(Limbal stem cells,LSCs)的生长。20世纪90年代,人们主要通过外科移植羊膜或者角膜活体组织治疗眼表疾病。查阅相关文献发现,羊膜上皮细胞经侧脑室注射已证实可以恢复脑卒中大鼠部分神经功能。虽然haecs在基础研究领域受倍受关注,但绝大部分的研究成果尚未应用到临床,但极其有望成为治疗某些疾病,如神经系统疾病、心脏疾病、肝脏疾病等的侯选细胞,用于细胞治疗或组织再生。综上所述,我们进行假设,在动物试验中,与对照组相比,移植羊膜上皮细胞的sd大鼠行为学评分有改善,脑组织切片观察发现人羊膜上皮细胞可以向靶器官聚集、迁移,并且向神经细胞定向分化,是脑梗面积减少,脑脊液中炎症相关因子明显降低。本项目具有双重的研究意义,一方面探索人羊膜上皮细胞对缺血性脑卒的治疗效果并探讨其机制,目前尚无经颈动脉移植在缺血性脑卒中动物模型及临床试验中的疗效研究,另一方面,该研究具有很高的临床应用价值,人羊膜上皮细胞可以作为一种新型的治疗方法引入临床治疗中,具有创伤性低、受众广泛、预期疗效好等优势。第一部分:大鼠大脑中动脉梗阻(mcao)模型的建立及经颈动脉注射人羊膜上皮细胞(haecs)的疗效分析目的:建立大鼠大脑中动脉梗阻模型并通过颈动脉注射人羊膜上皮细胞来观察其初步疗效方法:1)、选取体重、性别相匹配的sd大鼠随机分为mcao+haecs(实验组)、mcao组,建立大脑中动脉缺血再灌注模型。2)、分离人羊膜上皮细胞并体外培养。3)、mcao模型建立后实验组sd大鼠经颈动脉注射一定量人羊膜上皮细胞。4)、通过longa评分、改良神经功能缺损评分(mnss)量表及平衡木行走试验(beamwalking)记录术后1、3、7、14、28天后大鼠行为学评分。结果:sd大鼠建模后出现明显神经功能障碍表现;经颈动脉注射人羊膜上皮细胞后实验组大鼠较对照组脑缺血再灌注后行为学评分有明显改善。结论:人羊膜上皮细胞经mcao模型大鼠颈动脉注射后,能够改善其大脑缺血再灌注后的神经功能缺损症状。第二部分:人羊膜上皮细胞(haecs)经颈动脉注射改善大鼠mcao模型脑缺血症状的机制研究目的:研究人羊膜上皮细胞经颈动脉注射改善大鼠脑缺血再灌注后神经功能的作用机制。方法:1)、通过ttc染色观察大鼠脑梗死面积变化。2)、使用携带绿色荧光蛋白(gfp)基因的慢病毒感染人羊膜上皮细胞,经mcao大鼠颈动脉注射后,荧光显微镜观察其是否通过血脑屏障进入缺血区域。3)、通过tunel法从细胞水平观察神经细胞凋亡情况。4)、取大鼠脑脊液,通过eli

关键词： MCAO haecs 颈动脉脑缺血行为学

白花丹参药材的热处理工艺、酚酸类成分分析及抗炎机制研究

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白花丹参药材的热处理工艺、酚酸类成分分析及抗炎机制研究

作者：夏宏蕊山东大学

学位级别：硕士

白花丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge *** Wu and Li,miss.)为唇形科植物丹参(Savil miltiorrhiza Bunge)的白花变型,主产于山东莱芜、章丘、泰安等地。白花丹参除作为丹参药材使用,用于治疗心脑血管疾病,如冠心病、心绞痛、高血压、高... 详细信息

白花丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge *** Wu and Li,miss.)为唇形科植物丹参(Savil miltiorrhiza Bunge)的白花变型,主产于山东莱芜、章丘、泰安等地。白花丹参除作为丹参药材使用,用于治疗心脑血管疾病,如冠心病、心绞痛、高血压、高血脂、中风等疾病外,在当地还用于治疗血栓闭塞性脉管炎。2002年作为一个新品种被《山东省中药材标准》收录。白花丹参与丹参一样,主要含有脂溶性的丹参酮类和水溶性的酚酸类成分,其中以丹酚酸B的含量最高,而丹酚酸A的含量都非常低。但是,很多学者的研究结果证明丹酚酸A的生物活性强于丹酚酸B,具有较大的开发应用前景。本文对白花丹参药材中的酚酸类成分进行含量测定,实验过程中采用超声波法提取药材,应用HPLC法对主要酚酸类成分进行含量测定,结果表明,白花丹参药材中主要含有大量丹酚酸B,并未检测到丹酚酸A。在此含量测定的基础上,本文对白花丹参药材中丹酚酸A的转化工艺进行了研究。通过对白花丹参药材在高温、高压、高湿条件下进行处理,采用不同pH值水溶液浸湿药材,在不同温度下加热不同的时间,来考察不同的处理条件对原药材中丹酚酸B转化为丹酚酸A的影响。结果发现,对原药材进行处理的条件不同,丹酚酸B能够转化为丹酚酸A的量也不同。实验结果表明,采用pH =1的盐酸水溶液湿润药材,在120℃下加热4 h时,丹酚酸B转化为丹酚酸A的量最大,处理过的药材中丹酚酸A的含量也最高。处理过的白花丹参药材中主要酚酸类成分为丹酚酸A。本文采用正交设计试验对丹酚酸A的提取工艺进行了考察,确定了最佳提取工艺条件:12倍量的75%乙醇,在30℃条件下超声提取40min,提取3次。在对白花丹参药材进行高温、高湿、高热的处理过程中,丹酚酸B除转化为丹酚酸A外,还生成了其他的酚酸类成分。本文对处理过的药材中酚酸类成分进行了 LC-MS分析,并对其中主要的酚酸类成分进行了分离和结构鉴定,从中分离得到并鉴定了 7个已知化合物,分别为:丹参素甲酯(methyl 3,4-dihydroxy-phenyl lactate)、阿魏酸(ferulic acid)、迷迭香酸-3-O-葡萄糖苷(rosmarinic acid-3-O-glucoside)、迷迭香酸(rosmarinic acid)、异丹酚酸 A(isosalvianolic acid A)、丹酚酸 A(salvianolic acid A)、丹酚酸C(salvianolicacid C),其中丹参素甲酯、阿魏酸、异丹酚酸A、丹酚酸A和丹酚酸C均为药材处理后产生的。本文对分离得到的三种酚酸类成分丹酚酸A、丹酚酸C和迷迭香酸抑制肿瘤坏死因子(TNF-α诱导的人主动脉内皮细胞(haecs)炎症反应及机制进行了研究。试验方法主要包括:三种酚酸类化合物对U937细胞与haecs粘附实验的影响;DCFH-DA法检测细胞内ROS的表达量;RT-PCR法检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞间粘附分子-1(VCAM-1)、人白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、P选择素(P-selectin)和核因子κB(NF-κB)的mRNA表达水平;ELISA法检测IL-6和MCP-1 的蛋白表达水平;Western Blot 法检测 ICAM-1、VCAM-1、RAGE、P-selectin和NF-1κB的蛋白表达水平。结果表明,这三种酚酸类化合物能够抑制TNF-α诱导的相关炎性因子的表达,并有效抑制ROS的过量表达以及U937细胞与haecs的粘附,均具有较好的抗炎活性,而这种抗炎机制很有可能是通过抑制ROS的产生、抑制NF-κB信号通路来实现的。

关键词：白花丹参丹酚酸A 转化抗炎活性 haecs

人羊膜上皮细胞对小鼠心肌重构的保护作用及其机制研究

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人羊膜上皮细胞对小鼠心肌重构的保护作用及其机制研究

作者：王佳楠南昌大学

学位级别：硕士

实验目的:心肌重构的出现是多种心血管疾病向心衰发生发展的结构基础,由此继发的致死率仍居高不下。心肌重构通常起因于心肌细胞坏死、功能减退和数量减少以及细胞间基质大量胶原纤维沉积等所致的结构和功能改变,因而寻找有效的防治手... 详细信息

实验目的:心肌重构的出现是多种心血管疾病向心衰发生发展的结构基础,由此继发的致死率仍居高不下。心肌重构通常起因于心肌细胞坏死、功能减退和数量减少以及细胞间基质大量胶原纤维沉积等所致的结构和功能改变,因而寻找有效的防治手段是至关重要的。近年来,学者们发现干细胞疗法对心肌重构的防治具有积极作用。人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,haecs)具有胚胎干细胞样分化能力和成体干细胞样免疫调节特性,是再生医学领域内较为理想的种子细胞,目前已广泛用于多种疾病的临床前研究,然而应用haecs在心肌重构中的作用尚不明确。本研究旨在探究haecs对心肌重构的保护作用及其机制。实验方法:***的分离、培养与鉴定首先从新鲜胎盘中剥离出羊膜层,用胰酶消化获得细胞,然后用无血清培养基培养至P代。之后通过细胞流式术、细胞免疫荧光、细胞体内外致瘤性检测以及成骨分化实验鉴定细胞表型。2.心肌重构模型的建立及haecs的移植采用8-10周C57BL/6雄性小鼠,分为对照组(假手术组),TAC模型组和AEC治疗组,每组8-10只小鼠。利用主动脉弓缩窄术构建心肌重构模型。造模一周后,利用超声成像系统检测缩窄处的血流峰值速度,以缩窄处血流峰值速度急剧升高作为手术成功的标准。造模两周后,AEC组采用尾静脉注射haecs至小鼠体内,之后每周注射一次,注射剂量为8×10/200μL,共注射5次。3.超声成像系统检测小鼠心脏功能造模8周后,利用小动物活体超声成像系统对小鼠心脏的长短轴切面和主动脉弓部进行图像采集,通过分析超声数据评估小鼠心脏功能情况。***和Masson染色造模8周后,收取小鼠心脏组织进行固定、脱水、包埋和切片。再通过HE和Masson染色评估小鼠心肌纤维化的程度。5.心脏组织中细胞凋亡、血管分布情况利用免疫组织化学检测心脏组织中Bcl2、Bax的表达情况;利用组织免疫荧光检测血管分布情况。6.心肌细胞与人脐静脉内皮细胞的细胞活力、凋亡、迁移及成管检测氧/血清不足条件(hypoxia and serum deprivation,H/SD)下构建心肌细胞(H9C2)与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤模型。CCK8检测H9C2与HUVEC细胞的细胞活力;线粒体膜电位试剂盒检测H9C2与HUVEC细胞的凋亡情况;划痕及成管实验检测HUVEC的迁移及管腔形成情况。实验结果:***的形态与鉴定首先从羊膜组织分离获得haecs,经过传代培养,在显微镜下观察到haecs呈典型的鹅卵石形态;成骨分化诱导实验表明haecs具有分化能力;细胞流式术鉴定显示,haecs表达CD29、CD90、CD73、CD105,不表达CD34、CD45、HLA-DR;细胞免疫荧光鉴定显示,haecs表达OCT4和E-cadherin;体内外致瘤性检测证明了haecs无致瘤性。2.成功构建模型造模一周后通过超声成像系统检测到小鼠心脏主动脉弓缩窄部位处的血流峰值速度急剧升高,说明手术造模成功。***能有效减缓心肌重构,改善心脏功能造模8周后收取小鼠心脏组织,对心脏体重比数据比较分析,结果表明AEC组较TAC组能有效降低心脏肥大程度;超声图像结果显示,AEC组较TAC组小鼠左心室扩张程度得到明显改善;心脏功能指标分析结果显示AEC组较TAC组LVEF和LVFS均显著升高;除LVAWs无显著性差异外,LV mass、LVAWd、LVPWs、LVPWd、LVIDs及LVIDd均显著降低;HE染色结果显示AEC组较TAC组小鼠心肌细胞肥大和排列紊乱有一定程度的改善;Masson染色结果显示AEC组较TAC组能有效减少心肌纤维化面积;此外Western blot及Q-PCR结果显示AEC组较TAC组Vimentin和ANP蛋白表达均显著降低,COL1、COL3、Vimentin、BNP和ANP基因表达也显著降低。***减轻心肌重构组织中心肌细胞的凋亡免疫组织化学分析显示AEC组与TAC组相比能有效减轻心脏中心肌细胞的凋亡。体外H/SD条件下,线粒体膜电位试剂盒与CCK8试剂盒检测结果显示H/SD组的H9C2细胞的活力降低,细胞凋亡较为明显;AEC细胞分泌物(H/SD-CM)能明显提高H9C2细胞的活力,减少H/SD诱导的细胞凋亡。***促进心肌重构组织中血管形成组织免疫荧光结果显示AEC组的心脏组织中血管形成数较TAC组明显增加;体外H/SD条件下,线粒体膜电位试剂盒与CCK8试剂盒检测结果显示H/SD组HUVEC细胞的活力下降,细胞凋亡较为显著;H/SD-CM组明显提高了HUVEC细胞的活力,且减少了细胞的凋亡;成管形成实验结果显示H/SD组管腔形成数较少,H/SD-CM组管腔形成数则明显增加;划痕实验结果显示H/SD

关键词： haecs 心肌重构干细胞治疗保护机制

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企业级集群服务器技术研究

企业级集群服务器技术研究

作者：谭毅西北工业大学

学位级别：硕士

随着Internet的高速发展，网络用户急剧增加，原有的服务器技术已经不能满足巨量的网络访问。集群技术是解决上述问题的有效方法。然而现在的主流商用集群均为国外产品，由于价格以及安全等方面的原因，不能从根本上满足我国政府和企业... 详细信息

随着Internet的高速发展，网络用户急剧增加，原有的服务器技术已经不能满足巨量的网络访问。集群技术是解决上述问题的有效方法。然而现在的主流商用集群均为国外产品，由于价格以及安全等方面的原因，不能从根本上满足我国政府和企业信息化的要求。本文研究了目前通用的负载均衡集群，并在该框架内实现了haecs（High Available Enterprise Cluster Server）商用集群系统，基于廉价的以太网和通用PC或工作站，在开放的Linux系统上实现了虚拟服务平台，具有理论意义以及很大的应用价值。本论文重点研究了基于LVS的负载均衡集群技术，并利用LVS实现了一种面向企业应用的集群软件haecs，主要完成了以下工作：（1）深入研究了Netfilter结构以及LVS技术。通过对Netfilter结构和LVS功能和研究以及对IP报文分发以及连接状态保持等原理的剖析，并在LVS的基础上搭建了一个模拟环境。同时认识到LVS存在着安装管理困难，无法监控节点的服务等诸多缺陷。（2）研究和分析了负载均衡集群的体系结构。理解了此类集群各个组成部分的工作原理和过程，对各个部分如何协同工作并为用户提供虚拟服务的工作机理有了清晰的认识。（3）针对LVS存在的缺陷以及对负载均衡集群整体的性能要求，详细分析了实现企业级集群haecs的方法。从数据结构、算法实现到程序流程都进行了深入的研究和分析。（4）设计和实现了haecs系统结构和基本功能。完成了Linux系统上的图形管理控制界面，以及真实服务节点的服务功能监控模块，监控模块不仅能够监控服务器的状态，还可以监控服务模块的状态，一旦服务失效能够及时地将该服务器从集群节点中删除，在监控状态中，模块可以定时采集服务器的状态信息，根据各个服务器的状态，采用负载加权算法来动态的管理集群，实现集群的智能管理。并按照软件工程规则进行了功能测试和应用模式测试。在系统的设计，实现过程中还解决了Linux系统的配置，软件的评估测试等诸多问题。系统地实现利用标准C开发，完全符合POSIX规范，可以在多个Linux版本上使用。基于上述技术开发的产品已经投入市场，经过了某企业用户的测试以及使用，得到了用户的好评并取得了较好的经济效益。

关键词：集群 LVS Cluster haecs Linux Netfilter

硫辛酸抑制高糖诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激和细胞凋亡

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硫辛酸抑制高糖诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激和细胞凋亡

作者：李默大连医科大学

学位级别：硕士

目的:作为一种由多种原因引起的以慢性高血糖为特征的终身代谢性疾病,糖尿病已经成为21世纪人类所面临的最具挑战性的疾病之一。长期持续的血糖增高会导致大血管、微血管损害而导致心、脑、肾、周围神经、眼睛、足等发生病变。据估计,... 详细信息

目的:作为一种由多种原因引起的以慢性高血糖为特征的终身代谢性疾病,糖尿病已经成为21世纪人类所面临的最具挑战性的疾病之一。长期持续的血糖增高会导致大血管、微血管损害而导致心、脑、肾、周围神经、眼睛、足等发生病变。据估计,糖尿病患者中75%的死亡率都是由于心血管疾病所引起的。越来越多的研究表明炎症和氧化应激在糖尿病血管系统并发症的形成和发展的起着重要作用。α-硫辛酸(LA),是一种线粒体中的辅酶,因有很强的还原性,被称为“万能抗氧化剂”。本课题通过高浓度葡萄糖诱导人主动脉内皮细胞损伤,建立糖尿病细胞模型,用不同剂量的α-硫辛酸进行干预处理,探讨α-硫辛酸对高糖诱导的人主动脉内皮细胞炎症反应和氧化应激作用的影响并揭示其相关机制。方法:体外建立高糖(30mM)诱导的人主动脉细胞(haecs)损伤模型,分别加入不同浓度硫辛酸(50,100,200μM)。用还原性谷胱甘肽(GSH)测试盒检测细胞中GSH的含量。采用流式细胞技术检测硫辛酸对高糖诱导的haecs内活性氧(ROS)产生量的影响。利用蛋白质印迹法(Western Blot)方法检测haecs中NADPH氧化酶-4(Nox4)、p22phox、Caspase-3、Bcl-2蛋白的表达水平,细胞色素C的线粒体释放以及Nuclear Factor-κB(NF-κB)信号通路的激活情况。采用实时荧光测定PCR(Real-time RT-PCR)检测Nox4、p22phox mRNA的表达水平。结果:1.与空白组相比较,高糖诱导后haecs中GSH含量明显降低(phaecs中ROS的过量产生(phaecs中ROS过量产生,抑制还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)家族中Nox4、p22phox亚基的mRNA和蛋白的过量表达;硫辛酸能够显著降低高糖诱导的Caspase-3的表达,抑制由高糖导致的Bcl-2蛋白表达量的下降。硫辛酸抑制NF-κB信号通路的转录活性,同时还可以抑制haecs中细胞色素C的线粒体释放,由此来抑制高糖诱导的人主动脉内皮细胞的氧化应激和炎症反应以及抑制细胞凋亡。我们推测硫辛酸可能是通过阻断Nox4的表达来抑制细胞中ROS的过量产生,并通过影响NF-κB信号通路的转录活性从而减弱高糖诱导的haecs中的氧化应激和炎症反应。

关键词：硫辛酸高糖 haecs Nox4