检索结果-南通市图书馆

转gna基因小麦新株系的分子检测和抗蚜虫性鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

麦类作物学报 2005年第3期25卷 7-10页

作者：徐琼芳田芳陈孝李连城林志姗莫英徐惠君刘燕许为钢杜丽璞辛志勇中国农业科学院作物科学研究所农业部作物遗传育种重点实验室北京100081 中国农业科学院植物保护研究所北京100081 河南省农业科学院小麦研究所郑州450006

为了进行抗蚜虫转基因小麦的研究,将人工合成的雪花莲凝结素(Galanthusnivlisagglutinin,gna)基因通过基因枪转入优质小麦品种郑州9405的幼胚愈伤组织,经过在选择培养基上多次筛选,从360块被轰击的愈伤组织中再生到1株Bialaphos(除草剂... 详细信息

为了进行抗蚜虫转基因小麦的研究,将人工合成的雪花莲凝结素(Galanthusnivlisagglutinin,gna)基因通过基因枪转入优质小麦品种郑州9405的幼胚愈伤组织,经过在选择培养基上多次筛选,从360块被轰击的愈伤组织中再生到1株Bialaphos(除草剂)抗性植株,命名为G郑州9405。通过连续2代对转化株系进行PCR、Southern检测和蚜虫抗性鉴定,证明gna基因已经整合到了郑州9405基因组中。目前已经获得了纯合稳定的转基因株系,并在河南农业科学院小麦所进行了环境释放试验。

关键词：小麦 gna基因遗传转化蚜虫抗性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

转抗蚜gna基因苜蓿的研究

植物保护 2004年第6期30卷 23-26页

作者：卢广张青文田颖川中国农业大学昆虫学系北京100094 中国科学院微生物研究所北京100080

将雪花莲凝集素基因gna插入双元载体pBI121中的GUS基因的上游,得到植物表达载体pLG66m。gna与GUS基因构成融合基因,共用一个CaMV35S启动子。将该表达载体导入农杆菌LBA4404,得到LBA4404／pLG66m菌株。利用LBA4404／pLG66m菌株培养液直... 详细信息

将雪花莲凝集素基因gna插入双元载体pBI121中的GUS基因的上游,得到植物表达载体pLG66m。gna与GUS基因构成融合基因,共用一个CaMV35S启动子。将该表达载体导入农杆菌LBA4404,得到LBA4404／pLG66m菌株。利用LBA4404／pLG66m菌株培养液直接浸泡萌动的苜蓿种子,组织学检测表明GUS在种苗上3 d的瞬时表达效率超过90％。待苜蓿长出第3片真叶后检测,GUS表达效率明显下降。gna基因在种苗期间的短期表达也积累gna毒蛋白在苜蓿体内的含量,为苜蓿在苗期抗蚜起到一定作用。

关键词：苜蓿种子 gna基因 GUS基因苗期种苗毒蛋白菌株培养组织学检测体内融合基因

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

将gna基因导入莴苣(***)及其表达的研究

复旦学报（自然科学版） 1998年第4期37卷 564-568页

作者：郭文俊李瑶唐克轩董铮叶明鸣沈大棱复旦大学遗传学研究所

将含CaMV35S启动子的雪花莲凝集素基因置换Ti质粒载体pBI121中的GUS基因得到了pBIgna质粒，将其导入农杆菌LBA4404，得到LBA4404（pBIgna）菌株．通过该农杆菌介导转化莴苣子叶，筛选得到了17个具有卡那霉素抗性的转化子，其中3个转化子... 详细信息

将含CaMV35S启动子的雪花莲凝集素基因置换Ti质粒载体pBI121中的GUS基因得到了pBIgna质粒，将其导入农杆菌LBA4404，得到LBA4404（pBIgna）菌株．通过该农杆菌介导转化莴苣子叶，筛选得到了17个具有卡那霉素抗性的转化子，其中3个转化子PCR鉴定的结果为阳性，用Western杂交检测了这3个转化子中的gna含量，结果表明第2号转化子中的gna表达量为可溶性蛋白总量的0．4％．由于gna在0．1％浓度时就对包括蚜虫在内的刺吸式昆虫具有显著的毒杀作用，因此推测此转基因莴苣可能具有抗蚜虫能力．另用DotWestern杂交检测LBA4404（pBIgna）中gna的表达量，排除了农杆菌污染的可能．

关键词：莴苣 gna基因基因表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农杆菌介导gna基因对水稻的遗传转化

复旦学报（自然科学版） 2000年第3期39卷 277-281页

作者：刘志学何艺园曹清玉王卉徐亚南马向前唐克轩复旦大学遗传学研究所上海大学生命科学学院上海201800 复旦大学生命科学学院

在 pCAMBIA330 0质粒中插入带有RSs 1启动子的gna基因 ,并利用农杆菌介导的遗传转化将其导入水稻的微不定芽受体 ,得到了再生植株 .PCR ,Southernblot和Westernblot的检测结果初步证明gna基因已经整合到水稻的基因组中并得到了表达 .

关键词：农杆菌 gna基因遗传转化水稻介导

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻转gna基因后代对褐飞虱的抗性研究

作物学报 2004年第4期30卷 371-375页

作者：左示敏张平祝树德陈宗祥田文忠朱祯潘学彪扬州大学江苏扬州225009 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101

利用改进的稻飞虱抗性鉴定技术和程序 ,对转gna基因的水稻后代进行了连续世代 (T0 ～T3)的抗性鉴定 ,获得1 7份优良抗性纯合系 ,其抗性多数介于抗虫对照 (IR36 )与各自受体亲本之间。方差分析结果表明 ,转基因材料R5 0 7、R81 8与各受... 详细信息

利用改进的稻飞虱抗性鉴定技术和程序 ,对转gna基因的水稻后代进行了连续世代 (T0 ～T3)的抗性鉴定 ,获得1 7份优良抗性纯合系 ,其抗性多数介于抗虫对照 (IR36 )与各自受体亲本之间。方差分析结果表明 ,转基因材料R5 0 7、R81 8与各受体亲本间在稻飞虱抗性水平上存在极显著的差异。它们与抗性对照IR36之间也表现显著或极显著的差异。其中 3个R5 0 7的抗性纯系 (R5 0 7G 3 1、R5 0 7G 7 4、R5 0 7G 3 2 )与IR36间无显著差异 ,根据其受害级别 ,R5 0 7G 3 1被认为已达到抗的水平 ,其余 1 6份抗性纯系均属于中抗水平。对R5 0 7转基因后代而言 ,同一转化子内不同纯系间的抗性水平无显著差异 ,而R81 8的转基因后代中 ,同一转化子内不同纯系间的抗性出现了显著或极显著的差异。R5 0 7的各个转化子间以及R81

关键词：水稻 gna基因褐飞虱转基因抗性鉴定雪花莲凝集素抗虫基因

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农杆菌介导gna基因转化菜薹

园艺学报 2003年第4期30卷 473-475页

作者：张扬勇李汉霞叶志彪卢永恩陆芽春华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室

以菜薹带柄子叶为外植体 ,采用农杆菌介导法将特异启动子PRSs-1与雪花莲凝集素 (gna)基因构建的嵌合基因转化菜薹 ,获得 2 6株Km抗性植株 ,经过PCR检测和PCR

关键词：农杆菌介导 gna基因基因转化菜薹带柄子叶外植体雪花莲凝集素基因构建嵌合基因

人工合成gna基因在小麦中的表达及其抗蚜虫效果研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2006年第4期14卷 559-564页

作者：高泽发陈绪清杨凤萍梁荣奇张立全张晓东北京市农林科学院农业生物技术研究中心北京市农林科学院农业生物技术研究中心北京100097 首都师范大学生命科学学院北京100037

利用经密码子优化的、人工合成雪花莲凝集素(Galanthusnivalisagglutinin),gna基因及RbcS启动子构建了高效特异表达载体pBAC202,通过基因枪轰击小麦幼胚和幼穗,将外源gna基因导入到3个高产小麦(TriticumaestivumL.)品种中,获得42个转基... 详细信息

利用经密码子优化的、人工合成雪花莲凝集素(Galanthusnivalisagglutinin),gna基因及RbcS启动子构建了高效特异表达载体pBAC202,通过基因枪轰击小麦幼胚和幼穗,将外源gna基因导入到3个高产小麦(TriticumaestivumL.)品种中,获得42个转基因后代株系。对转基因后代植株进行了DNA点杂交、PCR及PCR-Southern验证,确认外源gna基因已成功地整合到小麦基因组中。进一步的凝集素活性检测表明,小麦叶片中表达的凝集素可使红细胞凝集,并具有正常的生物学活性。转基因植株在人工饲养条件下进行抗蚜虫(Rhopalosiphumpadi)试验,蚜口密度抑制率从19%～73%不等,部分株系抑虫效果较好。利用转基因的方式可将外源抗虫基因gna导入到小麦中,并可有效地增强小麦的抗蚜能力,为选育具抗虫特性的优质小麦提供新的途径。

关键词：雪花莲凝集素 gna基因转基因小麦蚜虫抗性

农杆菌介导的gna基因对禾本科草坪草的遗传转化研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

农杆菌介导的GNA基因对禾本科草坪草的遗传转化研究

作者：姜茜苏州大学

学位级别：硕士

狗牙根[Cynodon dactylon(L.)Pars.]、结缕草(Zoysia japonica Steud.)和高羊茅(Festuca arundinacea)是国内外广泛应用的重要禾本科草坪草。由于草坪种植方式和养护方法的局限性,使草坪草容易受到害虫的侵袭,而且虫害蔓延速度较快。因... 详细信息

狗牙根[Cynodon dactylon(L.)Pars.]、结缕草(Zoysia japonica Steud.)和高羊茅(Festuca arundinacea)是国内外广泛应用的重要禾本科草坪草。由于草坪种植方式和养护方法的局限性,使草坪草容易受到害虫的侵袭,而且虫害蔓延速度较快。因此,利用植物基因工程技术改良其抗虫性,对防治害虫的危害,减少杀虫剂的使用,保护环境,节约草坪维护费用具有重要的意义。农杆菌介导法是植物基因工程中的常用方法,具有操作简便、转化率高、费用低廉的特点。本论文对狗牙根、结缕草和高羊茅的组织培养与植株再生技术进行了研究,对于农杆菌介导的抗虫基因——雪花莲凝集素(Galanthus nivalis agglutinin,gna)基因对这3种禾本科草坪草的遗传转化技术进行了探索。经PCR方法检测,已获得转基因的阳性植株。其主要研究结果如下: 1.以狗牙根、结缕草、高羊茅种子为外植体进行愈伤组织诱导,狗牙根和结缕草最佳愈伤组织诱导培养基为N6培养基,分别添加2mg/L和4mg/L 2,4-D时愈伤组织诱导率最高,为74.67%和86.67%;MS培养基较适合高羊茅的组织培养,当2,4-D浓度为11mg/L时,愈伤组织诱导率最高,为73.33%。 2.狗牙根愈伤组织在1/2 MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.5mg/L培养基上可分化,分化率为28.13%,分化芽在1/2 MS培养基上即可生根;结缕草愈伤组织分化培养基为1/2 N6+0.1 mg/L 2,4-D,分化率为46.88%,生根培养基为MS+NAA0.5mg/L+KT 0.5mg/L;高羊茅愈伤组织分化培养基为MS+1 mg/L 2,4-D+6-BA2mg/L,分化率为77.78%,生根培养基为原分化培养基。 3.添加一定浓度的壳聚糖(Chitosan)对狗牙根和结缕草愈伤组织诱导和分化均有一定程度的促进作用。当添加一定浓度的壳聚糖时,狗牙根和结缕草的愈伤组织诱导率均能够显著提高,狗牙根愈伤组织诱导率最高提高至86.67%,结缕草愈伤组织诱导率最高提高至98.33%;狗牙根和结缕草愈伤组织分化率分别提高至35.00%和78.13%。 4.狗牙根遗传转化体系中,用于侵染愈伤组织的农杆菌菌液最佳OD值约为0.4,侵染时间为30min;结缕草遗传转化的最佳条件和狗牙根相同;侵染高羊茅愈伤组织的农杆菌菌液最佳OD值约为0.5,侵染时间为20min。共培养3d后,转入附加抗生素的再生培养基上进行选择培养,愈伤组织分化出抗性芽。抗性芽在附加有抗生素的生根培养基上继续筛选,长出抗性根,形成完整的转化植株。狗牙根、结缕草和高羊茅的转化率分别为25.64%、38.46%和52.63%。随机抽取转化植株进行PCR检测,阳性率均在70%以上。

关键词：农杆菌禾本科草坪草 gna基因遗传转化

转cry3A和gna基因提高马铃薯抗虫性的研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

转cry3A和GNA基因提高马铃薯抗虫性的研究

作者：米晓晓甘肃农业大学

学位级别：硕士

马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata Say,CPB)是一种毁灭性的害虫,是中国的检疫害虫,现在已经入侵新疆维吾尔自治区并向东蔓延。蚜虫是种群数量非常庞大的一种刺吸式害虫,每年对全球的农作物造成重大的产量损失。大量使用农药引起生... 详细信息

马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata Say,CPB)是一种毁灭性的害虫,是中国的检疫害虫,现在已经入侵新疆维吾尔自治区并向东蔓延。蚜虫是种群数量非常庞大的一种刺吸式害虫,每年对全球的农作物造成重大的产量损失。大量使用农药引起生态破坏,残留农药对人类健康构成严重的威胁。cry3A基因是一种BT基因,gna基因是雪花莲凝集素基因。为了阻止这两种害虫的危害和马铃薯甲虫在中国的进一步蔓延,本研究分别获得了由Ca MV 35S启动子和ST-LS1启动子驱动的表达cry3A和gna基因的转基因马铃薯,并对获得的四种转基因马铃薯植株的抗虫性进行了鉴定。取得的主要研究结果如下:1.实时荧光定量(qRT-PCR)分析表明,cry3A和gna基因在含有CaMV 35S启动子的转基因马铃薯的根茎叶中均有表达,并且叶片中的表达量高于茎和根中的表达量。同时发现,这两个基因在ST-LS1启动子驱动的转基因马铃薯的叶片中的表达效果比茎中的表达效果好,在根部不表达。2.转基因系35S1-Cry上马铃薯甲虫幼虫在接种后3-4 d的死亡率很高,分别达到28%和36%。转基因系ST3-Cry上马铃薯甲虫幼虫在接种后第5 d的死亡率高达48%。转基因系35S1-Cry、35S2-Cry和ST3-Cry上马铃薯甲虫的生物量积累低,分别是未转基因对照的0.42%、0.43%和0.42%。转基因系35S8-Cry和ST2-Cry上马铃薯甲虫的取食量分别低达7.47mg/larvae/day和12.46mg/larvae/day。转基因植株上存活的幼虫生长缓慢或停止生长,个头小,严重的导致幼虫死亡。3.转基因马铃薯抗蚜虫鉴定结果表明,接种于转基因株系的蚜虫在接种后5d内的死亡率在20%到80%之间,转基因株系ST6-gna对蚜虫的的致死率最高达到为80%。在接种后第15 d,转基因植株上蚜虫的种群数量达到最大值,不同植株上蚜虫数量分布在17.03±1.43头(ST2-gna)到38.5±3.5头(ST6-gna)之间,占非转基因株系上蚜虫种群数量的24.92%-56.34%。结果表明gna基因能在马铃薯中表达而且对蚜虫有很高的致死率。

关键词：马铃薯甲虫蚜虫 cry3A基因 gna基因转基因马铃薯抗虫性