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猪伪狂犬病血清抗体ge-elisa检测方法的建立

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中国兽药杂志 2007年第7期41卷 9-12页

作者：柴虹范忠军陈义平王志亮徐天刚中国动物卫生与流行病学中心

以纯化的猪伪狂犬病病毒ge蛋白为抗原建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接ge-elisa方法。最佳反应条件为,抗原包被浓度为1.7μg/mL,待检测血清1∶40稀释。与伪狂犬病阳性血清反应为阳性,与猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝... 详细信息

以纯化的猪伪狂犬病病毒ge蛋白为抗原建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接ge-elisa方法。最佳反应条件为,抗原包被浓度为1.7μg/mL,待检测血清1∶40稀释。与伪狂犬病阳性血清反应为阳性,与猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、猪乙型脑炎、猪布氏杆菌病5种疾病阳性血清和猪伪狂犬病ge缺失疫苗接种的猪免疫血清及SPF猪阴性血清均无交叉反应。批间、批内试验变异系数分别不超过5%和9%。用该方法与Ingezim elisa试剂盒和HerdChek elisa试剂盒同时对172份血清进行了平行检测,总符合率分别达93.6%和83.7%。试验结果表明:猪伪狂犬病血清抗体间接ge-elisa检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪伪狂犬病野毒感染猪的血清抗体检测。

关键词：猪伪狂犬病抗体 ge-elisa 试剂盒

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规模化猪场伪狂犬病净化方案应用效果的研究

中国兽医杂志 2018年第12期54卷 10-15页

作者：郭倩妤汤德元曾智勇黄涛王彬胡玲玲龙冬梅叶丽石远菊杨伟廖少山刘巧玲贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025

猪伪狂犬病被世界动物卫生组织(OIE)列为B类动物疫病,在我国一些大型规模化猪场普遍存在,直接或间接影响我国养猪业的健康发展,该病已被列入《国家中长期动物疫病防治规划》(2012-2015年)重点优先防制和净化的疫病。本研究是在应用猪伪... 详细信息

猪伪狂犬病被世界动物卫生组织(OIE)列为B类动物疫病,在我国一些大型规模化猪场普遍存在,直接或间接影响我国养猪业的健康发展,该病已被列入《国家中长期动物疫病防治规划》(2012-2015年)重点优先防制和净化的疫病。本研究是在应用猪伪狂犬病ge/gB-elisa监测方法(GB/T 18641-2002)进行规模化猪场猪伪狂犬病抗体监测区分PRV野毒与疫苗毒感染的基础上,配合猪场从PRV病原学检测区分PRV野毒与疫苗毒的多重PCR(mPCR)方法和生物安全措施的建立,对贵州某规模化猪场伪狂犬病进行净化方案应用效果进行研究。先后开展了对安顺某规模化猪场血液进行了4次PRV-gB/ge elisa抗体监测及PRV抗原检测,共监测样品为1 837份,检测结果表明,安顺某规模化猪场在开展伪狂犬病净化工作之后猪PRV-gB抗体水平均达到90%,PRV-ge抗体阳性率及PRV抗原阳性率均降为0,表明所开展的净化方案对规模化猪场猪伪狂犬病的净化工作有明显的效果,该研究可为规模化猪场伪狂犬病的净化提供参考。

关键词：猪伪狂犬病 gB/ ge-elisa 检测 mPCR 技术野毒感染净化效果

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猪伪狂犬病的诊断与净化方案的建立

黑龙江畜牧兽医 2018年第1期 147-150页

作者：文双云李国江沙万里刘东旭闫满卢松岩王喜伟吉林农业科技学院吉林农业大学动物科学技术学院预防兽医学吉林省重点实验室吉林省动物疫病控制中心柳河县动物疫病预防控制中心

为了确诊吉林省某规模化猪场是否感染猪伪狂犬病(PR),试验采用临床症状观察、剖检、ge-elisa、病毒核酸提取、PCR鉴定、DNA纯化与测序等方法进行了研究,并按照相关法律法规要求建立PR净化方案。结果表明:该猪场发生了PR;为了净化PR,应... 详细信息

为了确诊吉林省某规模化猪场是否感染猪伪狂犬病(PR),试验采用临床症状观察、剖检、ge-elisa、病毒核酸提取、PCR鉴定、DNA纯化与测序等方法进行了研究,并按照相关法律法规要求建立PR净化方案。结果表明:该猪场发生了PR;为了净化PR,应用建立的PR净化方案,2个月后再进行ge-elisa检测,结果所有种猪均为PR阴性。说明净化方案效果显著。

关键词：猪伪狂犬病(PR) PR诊断 ge-elisa PCR 测序净化方案

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河南省猪伪狂犬病毒野毒感染的防控效果评估

畜牧与兽医 2017年第9期49卷 79-82页

作者：郭振华张桂悦王楠楠白杨宋臣乔松林河南省农业科学院动物免疫学重点实验室河南郑州450002 南阳正大有限公司河南南阳473000

为了解当前河南省猪伪狂犬病毒(PRV)野毒感染状况及总结评估有效的应对措施,利用g E-elisa鉴别诊断试剂盒,对采集的900余份血清样品,进行了PRV野毒感染的血清学调查。同时针对一些代表性的猪场,进行长期的跟踪观察,评估PRV野毒感染的控... 详细信息

为了解当前河南省猪伪狂犬病毒(PRV)野毒感染状况及总结评估有效的应对措施,利用g E-elisa鉴别诊断试剂盒,对采集的900余份血清样品,进行了PRV野毒感染的血清学调查。同时针对一些代表性的猪场,进行长期的跟踪观察,评估PRV野毒感染的控制效果。结果显示,野毒感染血清阳性率为46.7%(427/915),猪场阳性率为76.7%(23/30),提示PRV在我省感染流行较为广泛。猪场跟踪显示,利用现有的疫苗,通过制定合适的免疫程序,在野毒感染的猪场依然可以生产出野毒阴性的上市商品猪,为现阶段猪伪狂犬的控制和净化提供了参考。

关键词：猪伪狂犬病毒 ge-elisa 免疫程序

2014—2016年河南省猪伪狂犬野毒感染和免疫情况血清学调查

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河南农业科学 2016年第12期45卷 153-156,160页

作者：解伟涛梁跃乔松林郝慧芳郭成留河南省农业科学院动物免疫学重点实验室河南郑州450002

调查河南省猪群伪狂犬野毒感染流行情况,为制订合理的防控与净化策略提供参考依据。于2014年1月—2016年5月,采集河南省不同地域780个猪场16 200份血清样本,使用g Eelisa鉴别诊断方法进行血清学调查,对10个阳性稳定猪场和10个阳性发病... 详细信息

调查河南省猪群伪狂犬野毒感染流行情况,为制订合理的防控与净化策略提供参考依据。于2014年1月—2016年5月,采集河南省不同地域780个猪场16 200份血清样本,使用g Eelisa鉴别诊断方法进行血清学调查,对10个阳性稳定猪场和10个阳性发病猪场进行血清学分析,对2个后备母猪培育场(1个为阴性场,另1个为阳性场)进行生产成绩分析,同时对猪场伪狂犬g E基因缺失疫苗使用情况进行调查,并跟踪了40个猪场的疫苗免疫情况。结果显示,河南省猪场伪狂犬g E抗体阳性率90.0%,血清样本阳性率46.2%,成年种猪阳性率53.1%,后备种猪阳性率27.6%。猪群在阳性发病场的阳性率高于在阳性稳定场的阳性率,育肥猪感染带毒严重影响其生产成绩,猪场伪狂犬疫苗免疫强度呈现增加趋势。综上可知,目前河南省猪群伪狂犬野毒感染情况比较严重。

关键词：猪伪狂犬野毒 ge-elisa 免疫

延平区两猪场伪狂犬血清检测及垂直感染风险评估

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延平区两猪场伪狂犬血清检测及垂直感染风险评估

作者：李艳晖福建农林大学

学位级别：硕士

目的：利用ge-elisa和gB-elisa试剂盒评估分析福建省南平市延平区两个规模化猪场的猪伪狂犬野毒感染率,并建立PCR诊断方法对两猪场猪伪狂犬野毒的垂直传播风险进行分析。方法：对2014年11月～12月份南平市延平区两个规模化猪场进行猪伪... 详细信息

目的：利用ge-elisa和gB-elisa试剂盒评估分析福建省南平市延平区两个规模化猪场的猪伪狂犬野毒感染率,并建立PCR诊断方法对两猪场猪伪狂犬野毒的垂直传播风险进行分析。方法：对2014年11月～12月份南平市延平区两个规模化猪场进行猪伪狂犬ge抗体及gB抗体检测,并对结果进行统计分析,评估两个规模化猪场的野毒感染阳性率。将统计结果与2013年南平市延平区流行病疫情调查结果进行对比分析,以评估2014年这两个猪场猪伪狂犬病毒(PRV)的流行进展。基于ge基因建立检测猪伪狂犬(PR)野毒的PCR诊断方法,并分析建立的PCR方法的特异性、灵敏性、重复性以及与国家标准的相符性。使用本试验建立的PCR方法检测两规模化猪场和延平区12个猪场的ge抗体阳性猪群的脐带血以及公猪精液,统计对比两猪场脐带血和精液的PCR阳性检出率与12个猪场的平均阳性率,评估两规模化猪场的垂直传播风险压力。结果与分析：A猪场共抽样353份血清,B猪场共抽样267份血清,ge抗体检测结果表明,A、B两场所检测的猪群中除公猪外,其他所有猪群均检出ge抗体,总阳性率分别为：51.08%、58.80%,说明了两场均是PR野毒的阳性场。两场公猪的ge抗体阳性率为0.00%,属于阴性猪群,说明了公猪群未被PR野毒感染。A、B猪场的母猪ge抗体阳性率分别为：53.87%、46.15%;30～40日龄保育猪的ge抗体阳性率分别为：26.09%、51.16%,加上可疑数的比例后分别为：31.89%、51.16%;60日龄保育猪的ge抗体阳性率分别为：45.45%、65.96%;而90～120日龄猪群ge抗体阳性率高达90%以上,由此推断在转舍(保育舍转至肥育舍)时该阶段猪群被PR野毒感染。gB抗体检测结果表明：两场的gB总抗体阳性率分别为96.87%、96.84%;两个猪场公猪的gB抗体阳性率都为100.00%;母猪的gB抗体阳性率分别为93.4%、100.00%,抗体水平高且离散度低,有可能是疫苗免疫和PR野毒感染的综合作用;30-40日龄保育猪的gB抗体阳性率分别为94.20%、97.67%,且整齐度高,因此可推断除了受母源抗体的影响,两猪场的首免效果好,而抗体水平A猪场高于B猪场;两猪场60日龄至120日龄仔猪血清的gB抗体S/N值持续降低,即抗体水平升高,而此阶段母源抗体已几乎消退,ge抗体也不降反升,因此推断60日龄尤其是120日龄转舍时猪群受野毒感染。2014年A场ge抗体阳性率平均值为51.08%,B场ge抗体阳性率平均值为58.80%,与2013年延平区20个猪场的猪伪狂犬病野毒感染调查结果56.26%相比,无下降,而从临床上调查A、B两场无爆发病情,说明两猪场猪群呈隐性感染,虽然2014年A、B两场PR的得到了有效的控制,但隐形感染和种猪排毒现象较为严重,需制定有效的免疫程序,加强疫苗免疫,提高猪场的养殖条件。在本研究中,我们基于ge基因片段,建立的猪伪狂犬病PCR诊断方法具有良好的特异性,灵敏性和重复性。对野毒、疫苗毒以及阴性病料的检测结果,与国标一致。利用这一方法,我们抽检了延平区12个猪场和A、B两场的脐带血和公猪精液。检测结果如下：延平区12个猪场共抽检132份脐带血,PCR阳性率为31.82%,A场阳性率为57.14%,B场阳性率为60.71%;12个场共抽检公猪精液86份,阳性率为15.12%,A、B两场公猪精液PCR野毒阳性率均为0.00%,由此推断A、B两猪场由母猪传播给仔猪的垂直感染压力大,高于延平区12个猪场的平均水平,而由公猪精液传播的暂未造成危险。由两猪场的ge以及gB抗体检测结果分析表明,两个猪场猪群除公猪外都呈隐性感染,临床无症状,可见猪群得到有效控制,生产较为稳定,但由保育猪舍转至肥育猪舍时,ge抗体明显升高,此阶段仔猪母源抗体已消退,加上环境突变等因素,猪群由于应激而容易被野毒感染,加上母猪排毒,使得病毒在场内循环,因此对仔猪首免及肥育猪监测是稳定ge抗体阳性的关键。结论：虽然通过疫苗接种有效减少猪伪狂犬病的发生的散播,但大部分猪场并没有彻底消灭猪伪狂犬病,部分免疫猪仍有排毒的可能,严重威胁易感猪。因此两猪场需要对母猪进行严格的免疫防控,尽可能淘汰阳性猪以免给猪场造成生产繁殖压力,保障新生仔猪的品质。用elisa检测方法对猪场的不同猪群的PRV-gB抗体和PRV-ge抗体进行血清学检测,并对其结果进行评估,以作为判断该猪场是否感染野毒、接种疫苗是否达到最佳效果的依据,并结合PCR诊断方法分析评估被检猪群的垂直传播风险,对指导规模化猪场全面实施伪狂犬病净化是有实际意义的。

关键词：猪伪狂犬病 ge-elisa gB-elisa PCR诊断垂直传播风险

山西地区猪场2016年度猪伪狂犬病流行病学调查

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山西地区猪场2016年度猪伪狂犬病流行病学调查

作者：韩岗山西农业大学

学位级别：硕士

伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由α-疱疹病毒亚科、疱疹病毒科的伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的多种家畜共患的急性接触性传染病。猪是主要贮存宿主和传染源,临床上以妊娠母猪早期流产、死胎及呼吸系统症状为主要特征,危害养... 详细信息

伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由α-疱疹病毒亚科、疱疹病毒科的伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的多种家畜共患的急性接触性传染病。猪是主要贮存宿主和传染源,临床上以妊娠母猪早期流产、死胎及呼吸系统症状为主要特征,危害养猪生产,会引起严重的经济损失。伪狂犬病一直是制约我省养猪业发展的重要疾病之一,为全面了解山西地区猪伪狂犬病的流行情况和影响因素,为我省防控PR提供流行病学数据,本研究从血清学、病原学以及影响流行的因素等方面对该病在我省的流行情况进行了调查分析,结果表明:1.对2016年1月至12月山西地区122个不同规模猪场的哺乳仔猪、断奶仔猪、育肥猪三个阶段典型的病例进行临床检查、病理剖检,发现哺乳仔临床死亡率高(50-100%)。断奶保育仔猪与哺乳仔猪相似,但症状较轻,死亡率(20-50%)相对较低;育肥猪单一猪伪狂犬病感染通常死亡率小于3%,但是,一但继发细菌感染,则死亡率较高。母猪在妇妊娠中后期流产现象多发,死亡率较低。山西猪伪狂犬病猪场发病率18.85%。2.通过对3412份猪血清进行ge-elisa检测,结果总阳性率为38.67%,山西省各地区猪伪狂犬病毒野毒阳性率检出率较高,且不同地区之间猪伪狂犬病野毒阳性率存在显著性差异(P<0.05)。猪伪狂犬病野毒阳性率与季节有密切关系,且不同季节猪伪狂犬病野毒阳性率存在显著差异(P<0.05)。母猪伪狂犬病野毒阳性率最高为45.27%,其次为哺乳仔猪41.16%、育肥猪36.90%、保育仔猪30.61%。母猪检出率显著高于(P<0.05)哺乳仔猪、育肥猪、保育仔猪,且不同生长阶段猪群检出率存在显著差异(P<0.05)。保育仔猪伪狂犬病野毒阳性率检出率最低。猪伪狂犬病野毒阳性率的高低与猪场规模有较大关系。大型猪场猪伪狂犬病野毒阳性率与散户猪场伪狂犬病野毒阳性率差异显著(P<0.05)且与中型猪场、小型猪场伪狂犬病野毒阳性率差异极显著(P<0.01)。大型猪场伪狂犬病野毒阳性率最高,依次为散户猪场、中型猪场、小型猪场,小型猪场检出率最低为25.54%。3.通过对393份猪场样品进行PCR病原检测,结果总检出率为23.76%。晋南地区检出率显著高于(P<0.05)晋东南、晋中、晋北地区。晋北地区猪伪狂犬病检出率最低。猪伪狂犬病检出率呈现出从南到北依次减小的趋势。猪伪狂犬病夏季检出率最高,显著高于(P<0.05)秋季、冬季、春季,猪伪狂犬病春季检出率最低。育肥猪伪狂犬病阳性率检出率显著高于(P<0.05)其他猪群,哺乳仔猪伪狂犬病阳性率显著高于(P<0.05)保育仔猪,母猪群体伪狂犬病阳性率最低。不同规模猪场猪伪狂犬病检出率存在差异,散户猪场猪伪狂犬病检出率显著高于(P<0.05)其他猪场,大型猪场检出率依旧较高,小型猪场检出率最低。

关键词：猪伪狂犬病流行病学 ge-elisa PCR

规模猪场伪狂犬病流行病调查及监测结果综合分析

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中国畜禽种业 2020年第9期16卷 8-9页

作者：吴双燕韦玉庆韦玉姣余信罗生覃光毅肖大杰李芳梁丽娟广西鹿寨县动物疫病预防控制中心 545600 广西鹿寨县水产技术推广站 545600 广西鹿寨县平山镇水产畜牧兽医站 545612 广西鹿寨县中渡镇水产畜牧兽医站 545609 广西鹿寨县导江乡水产畜牧兽医站 545622

为了摸清鹿寨县规模猪场伪狂犬病的发生流行情况,有效控制猪场的猪伪狂犬病,对鹿寨县规模猪场猪伪狂犬病感染状况进行流行病学调查,通过使用猪伪狂犬病病毒ge-elisa抗体检测试剂盒,检测血清样品,计算出鹿寨县猪伪狂犬病血清学场流行率... 详细信息

为了摸清鹿寨县规模猪场伪狂犬病的发生流行情况,有效控制猪场的猪伪狂犬病,对鹿寨县规模猪场猪伪狂犬病感染状况进行流行病学调查,通过使用猪伪狂犬病病毒ge-elisa抗体检测试剂盒,检测血清样品,计算出鹿寨县猪伪狂犬病血清学场流行率以及个体流行率。结果显示:鹿寨县南北地区之间猪伪狂犬病毒野毒阳性率差异显著,北部地区猪伪狂犬病毒野毒阳性率显著高于南部地区;小型猪场伪狂犬病野毒阳性率最高为14.84%,中型猪场、大型猪场伪狂犬病野毒阳性率依次降低;不同生长阶段的猪群均可感染PRV,母猪PRV野毒阳性检出率最高为24.57%,仔猪PRV野毒阳性检出率为6.15%,育肥猪的PRV野毒阳性检出率为0.35%。本课题研究表明:鹿寨县北部地区规模猪场猪伪狂犬病野毒感染形势严峻,应加强猪场生物安全管理、科学饲养管理、合理地制定种猪高效免疫计划,强化定期监测防控意识,果断淘汰病猪,净化猪群,做好综合防治工作。

关键词：猪伪狂犬病流行病学调查 ge-elisa

2012—2013年我国部分地区猪伪狂犬病流行病学调查

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中国动物检疫 2015年第4期32卷 1-5页

作者：邹敏杨旭兵郑辉王红李陆梅孙健王福军吴发兴范根成青岛易邦生物工程有限公司山东青岛266114 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032

[目的]了解我国主要生猪养殖地区猪群中猪伪狂犬病毒感染情况。[方法]分别采用PCR和geelisa检测方法,对2012-2013年采集/送检的1127份发病猪群组织样品、14801份猪血清样品进行了病原学、血清学检测。[结果]检出PRV野毒感染病原学样品98... 详细信息

[目的]了解我国主要生猪养殖地区猪群中猪伪狂犬病毒感染情况。[方法]分别采用PCR和geelisa检测方法,对2012-2013年采集/送检的1127份发病猪群组织样品、14801份猪血清样品进行了病原学、血清学检测。[结果]检出PRV野毒感染病原学样品98份,总体检出率8.69%,猪场的PCR检出率为22.49%;共检测14801份血清样品,野毒感染抗体阳性样品2388份,总体阳性率为16.13%,场的阳性率为44.02%。对检测数据进行分类统计,发现华东、华中等生猪主产区猪群中均存在不同程度的PRV野毒感染,感染率呈逐年上升趋势;分析不同日龄猪群的野毒感染抗体检测数据,发现种猪的感染率较高,其次是哺乳仔猪、育肥猪。[结论]猪伪狂犬病在我国主要生猪养殖地区仍不同程度存在,提示应进一步提升猪伪狂犬病的免疫预防水平,定期进行病原学、血清学检测,做好综合防治工作。

关键词：猪伪狂犬病毒 ge基因 PCR ge-elisa 流行病学调查