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T Helper 1 and T Helper 2 Cytokines Differentially Modulate Expression of filaggrin and its Processing Proteases in Human Keratinocytes

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Chinese Medical Journal 2016年第3期129卷 295-303页

作者： Zheng-Hong Di Lei Ma Rui-Qun Qi Xiao-Dong Sun Wei Huo Li Zhang Ya-Ni Lyu Yu-Xiao Hong Hong-Duo Chen Xing-Hua Gao Department of Dermatology The First Hospital of China Medical University Shenyang Liaoning 110001 China Department of Dermatology Shengjing Hospital of China Medical University Shenyang Liaoning 110004 China

Background： Atopic dermatitis （AD） is characterized by defective skin barrier and imbalance in T helper 1/T helper 2 （Th 1/Th2） cytokine *** （FLG） is the key protein to maintaining skin barrier *** studies indicated that Th1/Th2 cytokines influence FLG expression in ***, the role ofThl/Th2 cytokines on FLG processing is not substantially *** aim was to investigate the impact ofThl/Th2 cytokines on FLG ***： HaCaT cells and normal human keratinocytes were cultured in low and high calcium media and stimulated by either interleukin （IL）-4, 13 or interferon-γ（IFN-γ）.FLG, its major processing proteases and key protease inhibitor lymphoepithelial Kazal-type-related inhibitor （LEKTI） were measured by both real-time quantitative polymerase chain reaction and Western *** expression was also evaluated in acute and chronic AD lesions by ***： IL-4/13 significantly reduced, while IFN-γsignificantly up-regulated FLG ***-4/13 significantly increased, whereas IFN-γsignificantly decreased the expression ofkallikreins 5 and 7, matriptase and channel-activating serine protease *** the contrary, IL-4/13 significantly decreased, while IFN-γincreased the expression of LEKTI and *** trends were observed in AD ***： Our results suggested that Th1/Th2 cytokines differentially regulated the expression of major FLG processing *** imbalance between Th1 and Th2 polarized immune response seems to extend to FLG homeostasis, through the network of FLG processing enzymes.

关键词： Atopic Dermatitis Cytokine filaggrin Lymphoepithelial Kazal-type-related Inhibitor Protease

filaggrin mutations are associated with ichthyosis vulgaris in the Southern Chinese population

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Health 2010年第12期2卷 1345-1348页

作者： Chang-Xing Li Quan Luo Xue-Mei Li Xi-Bao Zhang Chun-Lei Han Ze-Lin Ma Dong-Zi Lin Department of Dermatology Dongguan Institute of Dermatology Dongguan China

filaggrin (FLG) plays an important role in the epidermal barrier function, which identified in patients with ichthyosis vulgaris(IV).To study the genetics of FLG mutations in Southern Chinese patients with IV. We evaluated the influence of five mutations (3321 delA, 441delA, 1249 insG, E1795X and S3296X) in a cohort of 65 IV Chinese patients and in 100 control individuals using the Sequenom? MassARRAY? system. The null allele frequency of 3321delA was 52.31%(34/65). FLG mutation 441delA was only found in one IV patients. FLG mutations 1249insG, E1795X and S3296X were not found in these patients. These findings show that the mutation 3321delA represent the most frequent genetic cause in Southern Chinese IV patients. Our findings confirm and extend the knowledge of the influence of FLG mutations in IV.

关键词： Ichthyosis Vulgaris Southern Chinese Population filaggrin Mutation

Expression of Skin Barrier Protein filaggrin in Skin Diseases without Atopic Dermatitis

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Journal of Biosciences and Medicines 2018年第1期6卷 101-112页

作者： Yang Zhang Chen Tu Shuang Wang Shengxiang Xiao Department of Dermatology The Second Affiliated Hospital School of Medicine Xi’an Jiaotong University Xi’an China

The epidermis represents an essential barrier versus a broad range of exogenous stimuli. To form a functional epidermis, keratinocytes express filaggrin which plays a vital role in atopic dermatitis. However the relationship between filaggrin and other skin diseases remains unknown. In our study we chose 5 different common skin diseases and analyzed the expression of filaggrin in the skin using immunohistochemistry. Imiquimod (IMQ)-induced mouse model was used for detecting the filaggrin level and barrier function. The results indicated that the expression of filaggrin is reduced in psoriasis compared to the other skin diseases. Furthermore in vivo study showed that the skin barrier is defected with a decreased expression of filaggrin in IMQ-induced psoriasis mouse model, which is accompanied with an increased level of IL-17/IL-23. In conclusion, the defective skin barrier is involved in the development of psoriasis in human and mice with a reduced expression of filaggrin which may be regulated by the increased level of IL-17/IL-23 in the skin.

关键词： Skin Barrier Psoriasis filaggrin Atopic Dermatits

苯并芘对人角质形成细胞Caspase-14和filaggrin表达的影响

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实用医学杂志 2013年第6期29卷 940-942页

作者：张芳芳车雅敏刘原君王晶晶刘全忠天津医科大学总医院皮肤科 300052

目的:研究苯并芘(BaP)对永生化人角质形成细胞(HaCaT)中的Caspase-14和filaggrin mRNA表达的影响,探讨其与BaP所致的细胞损伤的关系。方法:体外培养HaCaT;噻唑蓝法(MTT)检测BaP对HaCaT增殖活性的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测... 详细信息

目的:研究苯并芘(BaP)对永生化人角质形成细胞(HaCaT)中的Caspase-14和filaggrin mRNA表达的影响,探讨其与BaP所致的细胞损伤的关系。方法:体外培养HaCaT;噻唑蓝法(MTT)检测BaP对HaCaT增殖活性的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同浓度的BaP对HaCaT中Caspase-14和filaggrin mRNA表达的影响。结果:不同浓度的BaP对HaCaT细胞体外增殖均有抑制作用,随其浓度增加对细胞的抑制更为明显,且存在量效关系;BaP对Caspase-14和filaggrin mRNA表达起到明显的上调作用,成浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:BaP可以引起皮肤屏障功能的损伤。

关键词：苯并芘 Caspase-14 filaggrin 永生化人角质形成细胞

马齿苋提取物对急性湿疹大鼠皮肤HRH1和filaggrin基因表达的影响

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马齿苋提取物对急性湿疹大鼠皮肤HRH1和Filaggrin基因表达的影响

作者：王华成都中医药大学

学位级别：硕士

目的：观察两种不同马齿苋提取物有效成分对急性湿疹大鼠背部皮肤组织HRH1和filaggrin基因表达的影响,探讨不同马齿苋提取物治疗急性湿疹的可能机制。方法：SD大鼠50只,♂早各半,随机分为5组,每组10只,即：正常组、模型组、阳性药物对... 详细信息

目的：观察两种不同马齿苋提取物有效成分对急性湿疹大鼠背部皮肤组织HRH1和filaggrin基因表达的影响,探讨不同马齿苋提取物治疗急性湿疹的可能机制。方法：SD大鼠50只,♂早各半,随机分为5组,每组10只,即：正常组、模型组、阳性药物对照组、马齿苋醇提取物组、马齿苋鲜榨液组。除正常组外,用电剃须刀剃去其余四组大鼠腹部毛发,面积约1 cm×2 cm,并在大鼠剃毛部位涂抹5%的2,4-二硝基氯苯(DNCB) 30μl于皮肤首次致敏;在致敏后第三天,再用电剃须刀剃去左、右对称背部约为2cm×2cm面积的剃毛区域,并在右背部剃毛区涂DNCB进行二次抗原攻击,浓度为0.2%,用量为50μ1,左背部对称的剃毛区不用药物,作为对照部位。以后按上述方法连续激发三次,每三天一次,用药后第九天观察大鼠右背部皮肤明显出现红斑,水肿,丘疹,糜烂或渗出,提示造模成功。于激发后第十天开始给药,每天两次,每次1ml,连续九天,最后在首次致敏后的第二十一天断颈处死大鼠,剪取造模区皮肤,分别予RT-PCR检测各实验组大鼠皮肤filaggrin基因表达和免疫组化检测HRH1平均光密度。结果：1、与正常组相比,模型组大鼠皮肤组织HRH1蛋白含量明显升高,具有非常显著的统计学意义(Pfilaggrin基因的2值极显著小(Pfilaggrin基因的2值极显著增大(Pfilaggrin基因的2值极显著增大(Pfilaggrin基因的表达,加速filaggrin水解成各种天然保湿因子,有效改善和修复大鼠皮肤屏障功能,增强了机体的免疫功能,从而起到了治疗急性湿疹的作用。

关键词：急性湿疹马齿苋鲜榨液马齿苋醇提取物 HRH1 filaggrin

特应性皮炎的屏障功能与filaggrin基因突变及客观评估的研究

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特应性皮炎的屏障功能与filaggrin基因突变及客观评估的研究

作者：吕娅妮中国医科大学

学位级别：硕士

前言特应性皮炎(atopic dermatitis,AD),是一种与遗传有关的,复杂的、慢性炎症性皮肤功能紊乱的皮肤病,其发病机制及临床表现复杂。中间丝相关蛋白是皮肤屏障功能的一个重要蛋白。最近研究表明位于编码中间丝相关蛋白(filaggrin,FLG)基... 详细信息

前言特应性皮炎(atopic dermatitis,AD),是一种与遗传有关的,复杂的、慢性炎症性皮肤功能紊乱的皮肤病,其发病机制及临床表现复杂。中间丝相关蛋白是皮肤屏障功能的一个重要蛋白。最近研究表明位于编码中间丝相关蛋白(filaggrin,FLG)基因上的突变是欧洲家族鱼鳞病(ichthyosis vulgaris,IV)的一个致病因素,也是特应性皮炎的一个重要的易感因素。FLG突变引起的表达的缺失或减少影响皮肤的屏障功能。AD的临床评估有多个评分系统,SOCRAD评分方法是目前对于AD的一个常用的临床评分方法,主要的评估标准是依靠我们主观上对皮损严重性和累积范围的判定。objective severity assessment of atopic dermatitis(OSAAD)评分是近年来发展起来的AD评估标准,主要组成为用客观的测量方法评估表皮的屏障功能,测量表皮水分含量,油脂含量和PH值,和用非侵袭性的生物工程学方法和计算机辅助计算评估疾病的严重程度。OSAAD评分方法避免了SCORAD评分方法的主观性的缺点。目的本实验通过对中国人群AD患者的FLG多态性的研究,讨论FLG突变与AD发生的相关性及与AD患者表皮屏障功能的相关性。并通过对正常人和AD患者的表皮水分、油脂含量及PH值的检测,探讨表皮水分、油脂含量及PH值与屏障功能的相关性。方法对59名AD患者(Williams诊断标准确诊为AD患者)和169名正常人,辽宁籍,年龄在6个月至21岁,进行提取外周血DNA,进行聚合酶链反应(PCR),扩增目的片段,限制性内切酶消化、电泳,结果检测,观察分析FLG突变E2422X,S2554X,S2889X,S3296X,和R4307X。并采用无创检测技术,用客观评估的方法,对其中的32名AD患者和30名正常对照组,进行表皮水分、油脂含量及PH值的测量。检测部位为前额、肘窝、手背、胸骨前、腰骶、胫前,分别检测患者皮损部位,患者的正常皮肤,及正常人的检测,患者皮损根据干燥,轻度红斑脱屑,和红斑、丘疹、水疱、渗出分为轻度和重度,分别以相同部位进行比较。结果研究组及正常对照组均未检测出FLG突变的阳性结果。对于水分、油脂、PH值的测量参数根据皮肤状态的不同而不同。AD患者无皮损的正常皮肤及正常人皮肤相应部位的水分、油脂、PH值存在显著差异(p<0.05),患者不同轻重程度的皮损相应部位的水分、油脂、PH值存在差异(p<0.05)。对患者皮损相应部位的水分、油脂、PH值做线性回归,显示患者皮损处皮肤前额、肘窝、胸骨前油脂与水分呈正相关(r=1.830 r=1.057 r=0.294 P<0.05),皮损处皮肤胸骨前、腰骶及胫前水分与PH值呈负相关(r=-17.792 r=-10.683 r=-14.143 P<0.05)。结论FLG突变检测结果为阴性可能与样本量少有关,或者种族或地域之间的差别有关。水分、油脂、PH值与皮肤的不同状态有关,AD患者皮损处皮肤及无皮损的正常皮肤的水分、油脂、PH值与正常人皮肤的水分、油脂、PH值均存在显著差异,其各测量值可以反映出AD患者皮肤的屏障功能存在异常,并随着皮损的轻重程度的变化而变化。通过这些客观值的测量,可以掌握皮肤屏障功能或疾病的严重程度。

关键词：特应性皮炎 filaggrin 突变屏障功能水分油脂 PH值客观评估

BaP联合UVB对人角质形成细胞Caspase-14和filaggrin表达的影响

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BaP联合UVB对人角质形成细胞Caspase-14和Filaggrin表达的影响

作者：张芳芳天津医科大学

学位级别：硕士

目的研究不同浓度苯并芘(BaP)与不同剂量(UVB)(中波紫外线分别及联合作用下对永生化人角质形成细胞株(HaCaT)增殖活性及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-14(Caspase-14)和丝聚蛋白(filaggrin) mRNA表达的影响,探讨其同BaP及UVB所致的细... 详细信息

目的研究不同浓度苯并芘(BaP)与不同剂量(UVB)(中波紫外线分别及联合作用下对永生化人角质形成细胞株(HaCaT)增殖活性及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-14(Caspase-14)和丝聚蛋白(filaggrin) mRNA表达的影响,探讨其同BaP及UVB所致的细胞损伤的关系。方法第一部分：培养HaCaT细胞;绘制细胞生长曲线;分别用浓度为30、50、80、100μmol/L BaP及剂量为10、30、60、90mJ/cm2的UVB分别作用HaCaT细胞,采用四甲基偶氮唑蓝比色实验(MTT法)测定HaCaT细胞增殖活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同浓度BaP和不同剂量UVB分别作用24h后HaCaT细胞Caspase-14mRNA和filaggrin mRNA的表达水平。第二部分：选取一定浓度BaP和一定剂量UVB联合条件下HaCaT细胞,用MTT法测定作用前后HaCaT细胞增殖活性;RT-PCR方法检测80μmol/L BaP和60mJ/cm2UVB联合作用HaCaT细胞24h后Caspase-14mRNA和filaggrin mRNA的表达水平。结果 1.对照组细胞随培养时间的延长细胞增殖活性增加;经BaP和UVB作用后,细胞增殖活性较对照组相应时间点下降,差异有统计学意义(Pfilaggrin mRNA呈低水平表达或基本不表达,经浓度为30、50、80、100μmol/L的BaP及剂量为10、30、60、90mJ/cm2的UVB作用后,HaCaT细胞中Caspase-14mRNA和filaggrin mRNA相对含量高于相同时间点对照组(Pfilaggrin mRNA表达明显增强,与对照组相比,差异有统计学意义(Pfilaggrin mRNA表达增加,二者存在相互影响关系。 3、BaP联合UVB较分别作用HaCaT细胞后,Caspase-14mRNA和filaggrin mRNA表达量明显增加,且呈剂量依赖关系。

关键词：苯并芘中波紫外线 HaCaT细胞 Caspase-14 filaggrin

filaggrin和Caspase-14在皮肤屏障中的作用

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皮肤性病诊疗学杂志 2012年第2期19卷 114-117页

作者：张芳芳车雅敏傅志宜天津医科大学总医院皮肤性病科天津300052

filaggrin和Caspase-14主要分布于表皮。它们不仅在表皮细胞的分化及皮肤屏障中起着重要的作用,而且与许多皮肤疾病存在一定联系。本文阐述它们在皮肤屏障功能和某些皮肤疾病中的作用,为进一步预防皮肤损伤及治疗相关皮肤疾病提供新的... 详细信息

filaggrin和Caspase-14主要分布于表皮。它们不仅在表皮细胞的分化及皮肤屏障中起着重要的作用,而且与许多皮肤疾病存在一定联系。本文阐述它们在皮肤屏障功能和某些皮肤疾病中的作用,为进一步预防皮肤损伤及治疗相关皮肤疾病提供新的研究思路。

关键词： filaggrin Caspase-14 皮肤屏障

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特应性皮炎丝聚合蛋白基因突变的检测

中国热带医学 2011年第7期11卷 791-793页

作者：李常兴李雪梅张锡宝韩春雷马泽粦林东子东莞市慢性病防治院广东东莞523008 广州市皮肤病防治所广东广州510095

目的探讨丝聚合蛋白(filaggrin,FLG)基因的突变与特应性皮炎(Atopic dermatitis,AD)的相关性。方法提取50例汉族AD患者及100例健康对照者的基因组DNA,利用Sequenom MassArray质谱阵列技术分析FLG基因(3321delA,441delA,1249insG,E1795X和S3296X)五个突变位点。结果 14例(28%)AD患者发现FLG基因3321delA突变,对照组有4例(4%)发生该基因突变。6例(12%)AD患者发现FLG基因441delA突变,对照组有0例(0%)发生该基因突变。患者组及对照组均未见FLG基因1249insG,E1795X和S3296X突变。结论 FLG基因突变可能与AD易感性相关。

关键词：特应性皮炎汉族人 filaggrin 基因突变