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Journal of Acute Disease 2024年第2期13卷 74-80页

作者： Ahmad Reza Moradi Mehrdad Gholami Lotfollah Davoodi Negar Hajilou Hamid Reza Goli Sana Institute of Higher Education SariIran Department of Medical Microbiology and Virology Faculty of MedicineMazandaran University of Medical SciencesSariIran Antimicrobial Resistance Research Center Faculty of MedicineMazandaran University of Medical SciencesSariIran Molecular and Cell Biology Research Center Faculty of MedicineMazandaran University of Medical SciencesSariIran

Objective:To investigate the frequency of exou and exoY genes in patients with Pseudomonas aeruginosa ***:In this study,100 clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa were collected from patients hospitalized in educational-therapeutic hospitals and were identified using standard microbiological ***,the antibiotic resistance pattern of the isolates was determined by the disk agar diffusion *** bacterial DNAs were extracted by the alkaline lysis ***,the presence of exou and exoY genes was evaluated by the PCR ***:In this study,47%,72%,29%,39%,40%,and 44%of the isolates were non-susceptible to piperacillin,aztreonam,ceftazidime,imipenem,tobramycin,and ciprofloxacin,*** addition,95%and 93%of the clinical isolates carried the exou and exoY *** and fecal isolates had both virulence genes,while only one wound isolate had neither ***,all urinary isolates contained the exoY gene and only one isolate lacked the exou ***,88 isolates simultaneously had both exou and exoY ***:High prevalence of exou and exoY genes in this region indicates a significant role of typeⅢsecretion system in pathogenesis of Pseudomonas *** typeⅢsecretion system may be a suitable target to reduce the pathogenicity of this bacterium.

关键词： Pseudomonas aeruginosa exou exoY Virulence gene TypeⅢsecretion system PCR

铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统分泌蛋白exou与耐药性的关系研究

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中国临床药理学杂志 2022年第19期38卷 2324-2328页

作者：杨晓庆孙平薛寒徐子辉华中农业大学医院检验科湖北武汉430070 武汉大学中南医院检验科湖北武汉430071 武汉大学人民医院内分泌科湖北武汉430060

目的分析铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统分泌蛋白exou与耐药性的关系。方法收集21株铜绿假单胞菌,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测菌株exou以及exoS基因携带情况,用琼脂稀释法测定头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培... 详细信息

目的分析铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统分泌蛋白exou与耐药性的关系。方法收集21株铜绿假单胞菌,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测菌株exou以及exoS基因携带情况,用琼脂稀释法测定头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、左氧氟沙星和环丙沙星对21株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC),通过序列比对分析耐药基因突变情况,用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测铜绿假单胞菌中耐药相关基因(mexR,ampC和ampR)的表达量。结果在21株铜绿假单胞菌中,有8株携带了exou基因,13株携带了exoS基因,未发现同时携带exou和exoS的菌株。药敏试验结果显示:所有携带exou的菌株均对至少3种β内酰胺类药物具有耐药性。突变分析显示:在8株携带exou的铜绿假单胞菌中,有6株存在T83I突变,其中5株存在gyrA(T83I)和parC(S87L)组合突变,并同时具有mexR,ampC和ampR基因突变。RT-PCR结果显示:携带exou的菌株ampC与ampR基因的相对表达量较标准菌株PAO1明显增高,而携带exoS的菌株中其表达明显降低。mexR基因的相对表达量与二者相反。结论携带exou的铜绿假单胞菌具有更多与耐药基因相关的突变,进而导致其对氟喹诺酮类药物以及β内酰胺酶类药物耐药。

关键词：铜绿假单胞菌 exou 耐药性

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铜绿假单胞菌毒性蛋白exou的研究进展

中国人兽共患病学报 2015年第11期31卷 1069-1074页

作者：鞠晓红李正花马爱新李瑶吉林医药学院病原学教研室吉林132013 吉林化工医院检验科吉林132001

铜绿假单胞菌是一种重要的条件致病菌,有多种毒力因子,其中Ⅲ型分泌系统(T3SS)在其引起的急性感染中发挥至关重要的作用,是铜绿假单胞菌感染、致病的重要因素。T3SS主要通过靶向输送4种效应蛋白(ExoS、ExoT、exou和ExoY)对宿主细胞发挥... 详细信息

铜绿假单胞菌是一种重要的条件致病菌,有多种毒力因子,其中Ⅲ型分泌系统(T3SS)在其引起的急性感染中发挥至关重要的作用,是铜绿假单胞菌感染、致病的重要因素。T3SS主要通过靶向输送4种效应蛋白(ExoS、ExoT、exou和ExoY)对宿主细胞发挥毒性作用。其中exou是最具破坏性的蛋白,与感染的发生、预后及治疗密切相关。本文主要将近年来与毒性蛋白exou有关的研究进展做一简要综述,旨在为铜绿假单胞菌感染的控制及治疗提供参考。

关键词：铜绿假单胞菌 Ⅲ型分泌系统 exou 多重耐药毒力基因

铜绿假单胞菌毒力基因exoS、exou临床分布及耐药性研究

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中国医院药学杂志 2017年第1期37卷 48-51页

作者：鞠晓红李瑶王月华赵蓬波吉林医药学院病原教研室吉林吉林132013 吉林省人民医院检验科吉林长春132000

目的:了解临床分离铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)毒力基因exoS、exou的分布特征及耐药特点,为铜绿假单胞菌感染的治疗与控制提供参考。方法:收集2015年9月至2016年3月临床送检标本,分离鉴定铜绿假单胞菌,液... 详细信息

目的:了解临床分离铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)毒力基因exoS、exou的分布特征及耐药特点,为铜绿假单胞菌感染的治疗与控制提供参考。方法:收集2015年9月至2016年3月临床送检标本,分离鉴定铜绿假单胞菌,液体稀释法进行药敏试验,PCR技术检测分离菌株exoS、exou基因,并对结果进行统计分析。结果:exoS、exou基因检出率分别为85.71%(54/63)、65.08%(41/63)。4种基因型exoS+/exou+、exoS+/exou-、exoS-/exou+和exoS-/exou-的阳性率分别为53.97%、31.75%、11.11%和3.17%。呼吸道标本检出率最高的基因型是exoS+/exou+(60.87%),泌尿道以exoS+/exou-为主(57.14%)。多重耐药菌exoS、exou阳性率为80.95%、76.19%,非多重耐药菌阳性率为88.10%、59.52%,比较无显著性差异(p>0.05)。exoS+/exou+基因型菌株耐药率较高,对亚胺培南和左氧氟沙星耐药性明显高于其他菌株(pexou携带率较高,以exoS+/exou+基因型为主,基因型表达存在感染部位差异。多重耐药菌与非多重耐药菌基因表达无显著性差异,但同时携带两种毒力基因菌株耐药性强。

关键词：铜绿假单胞菌 exoS exou 耐药性 Ⅲ型分泌系统

铜绿假单胞菌exoS、exou基因的检测与分析

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中国卫生检验杂志 2013年第1期23卷 129-132页

作者：吴爱武黄子然广州医学院检验系广州510260

目的:了解临床分离的铜绿假单胞菌(Pae)Ⅲ型分泌系统毒力基因exoS、exou的携带情况及分布特点。方法:对来自广州医学院第一附属医院临床分离的64株Pae,采用PCR法检测exoS、exou毒力基因的携带情况。结果:64株Pae中,exoS基因阳性的占65.6... 详细信息

目的:了解临床分离的铜绿假单胞菌(Pae)Ⅲ型分泌系统毒力基因exoS、exou的携带情况及分布特点。方法:对来自广州医学院第一附属医院临床分离的64株Pae,采用PCR法检测exoS、exou毒力基因的携带情况。结果:64株Pae中,exoS基因阳性的占65.63%(42/64);exou基因阳性的占10.94%(7/64);在30株多重耐药的Pae中,exoS基因阳性的占73.33%(22/30),exou基因阳性的占10%(3/30)。在34株非多重耐药的Pae中,exoS基因阳性的占58.82%(20/34),exou基因阳性的占11.76%(4/34)。结论:临床分离的Pae中,携带的毒力基因以exoS基因型为主,exou基因型所占比例较低。多重耐药菌株与非多重耐药菌株exoS和exou基因的携带率差异无显著性。

关键词：铜绿假单胞菌毒力基因 exoS exou

阿奇霉素对铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统exoS和exou基因表达的影响

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国际检验医学杂志 2021年第13期42卷 1584-1588页

作者：常彦斌游灵玲张晓兵重庆医科大学附属第一医院检验科重庆400016

目的通过研究铜绿假单胞菌临床株Ⅲ型分泌系统基因exoS、exou的分布情况与耐药性的关系以及阿奇霉素对菌株exoS、exou mRNA表达的影响,为临床在相应菌株中应用阿奇霉素提供理论依据。方法运用PCR检测50株临床分离的铜绿假单胞菌exoS、e... 详细信息

目的通过研究铜绿假单胞菌临床株Ⅲ型分泌系统基因exoS、exou的分布情况与耐药性的关系以及阿奇霉素对菌株exoS、exou mRNA表达的影响,为临床在相应菌株中应用阿奇霉素提供理论依据。方法运用PCR检测50株临床分离的铜绿假单胞菌exoS、exou基因分布情况,K-B法研究这些细菌对常用抗菌药物的耐药率,用逆转录PCR(RT-PCR)分析不同浓度阿奇霉素对铜绿假单胞菌exoS、exou mRNA表达的作用。结果50株临床分离的铜绿假单胞菌中36株(72.00%)为exoS阳性,14株(28.00%)为exou阳性,无同时携带两种基因的菌株。exou阳性株对10种抗菌药物的耐药率高于exoS阳性株,环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率差异有统计学意义(Pexou阳性株后,exou mRNA相对表达水平较空白对照组明显减低。结论铜绿假单胞菌中毒力基因exou的检出率低,exou阳性株耐药性相对较强,低浓度阿奇霉素能促进铜绿假单胞菌毒力基因exoS mRNA的表达,而抑制exou mRNA的表达。

关键词：铜绿假单胞菌 Ⅲ型分泌系统 exoS exou 阿奇霉素

43株临床铜绿假单胞菌exoS、exou基因的携带及其耐药性

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中国感染控制杂志 2010年第2期9卷 93-96页

作者：董晨晓宋诗铎王悦门昆天津医科大学第二医院感染性疾病研究所天津300211 天津医科大学第二医院天津300211

目的研究43株临床分离的铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统毒素基因exoS、exou携带情况以及细菌的耐药性。方法采用聚合酶链反应(PCR)法检测毒素基因的分布,K-B纸片扩散法检测细菌的耐药性。结果 43株临床铜绿假单胞菌中,37株(86.05%)exoS基因阳... 详细信息

目的研究43株临床分离的铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统毒素基因exoS、exou携带情况以及细菌的耐药性。方法采用聚合酶链反应(PCR)法检测毒素基因的分布,K-B纸片扩散法检测细菌的耐药性。结果 43株临床铜绿假单胞菌中,37株(86.05%)exoS基因阳性,6株(13.95%)exou基因阳性,无同时携带2种基因菌株。携带exou的临床株对9种抗菌药物的耐药率均高于携带eroS菌株,其中对头孢他啶、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率差异有显著性(Pexou的铜绿假单胞菌临床株所占比例较低,但耐药率高。

关键词：铜绿假单胞菌 Ⅲ型分泌系统毒素基因 exoS exou 抗药性微生物

基于组学数据表达谱的下呼吸道铜绿假单胞菌毒力基因exoS和exou的共表达网络分析

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国际检验医学杂志 2019年第20期40卷 2529-2533页

作者：焦二莉陈博内蒙古包钢医院检验科内蒙古包头014010 内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院内蒙古包头014010

目的以铜绿假单胞菌的基因芯片为研究样本,并对其进行组学数据层面的挖掘,旨在从分子生物学的层面阐明下呼吸道铜绿假单胞菌毒力基因exoS和exou的共表达网络特征,并发现其关键的调控基因。方法于2016年3月至2018年5月采用定群抽样的方... 详细信息

目的以铜绿假单胞菌的基因芯片为研究样本,并对其进行组学数据层面的挖掘,旨在从分子生物学的层面阐明下呼吸道铜绿假单胞菌毒力基因exoS和exou的共表达网络特征,并发现其关键的调控基因。方法于2016年3月至2018年5月采用定群抽样的方法选取内蒙古包钢医院呼吸内科接诊并在该院接受后续治疗的312例下呼吸道铜绿假单胞菌感染者为受试对象,生物标本为患者的肺泡灌洗液及痰液。使用寡聚核苷酸探针对铜绿假单胞菌的基因进行检测,对芯片数据进行预处理。选择头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林、阿米卡星、环丙沙星、左旋氧氟沙星、多尼培南、替卡西林共8种呼吸内科针对革兰阴性菌常用的抗菌药物对生物标本进行耐药性测定,利用MCODE算法构建以exoS/exou为核心的耐药基因共表达网络模型。结果耐药组exoS/exou表达量均显著高于非耐药组,差异有统计学意义(Pexou表达呈正相关性(Pexou表达呈正相关性(Pexou、RAC1、ITGB1、ITGB5、CRK、CAMK2D、RHOA、FLNA、IGF1R、TGFBR2、FOS。其中RAC1基因调控能力评分最高(72.00),调控基因数最多(6个);其后依次为ITGB1、ITGB5及CRK基因。结论痰标本出现exoS和exou高表达提示铜绿假单胞菌有更高概率产生耐药性;RAC1、ITGB1、ITGB5及CRK基因可能是调控exoS和exou表达的关键基因。

关键词：组学数据表达谱下呼吸道铜绿假单胞菌 exoS exou 共表达网络

Co-expression network analysis of virulence genes exoS and exou of pseudomonas aeruginosa in lower respiratory tract based on histological data expression profiles

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Discussion of Clinical Cases 2019年第4期6卷 10-16页

作者： Erli Jiao Bo Chen Clinical Laboratory Baogang HospitalBaotouInner MongoliaChina The First Affiliated Hospital of Baotou Medical College Inner Mongolia University of Science and TechnologyBaotouInner MongoliaChina

Objective:To use the gene chip of pseudomonas aeruginosa as a research sample and to explore it at an omics level,aiming at elucidating the co-expression network characteristics of the virulence genes exoS and exou of pseudomonas aeruginosa in the lower respiratory tract from the perspective of molecular biology and identifying its key regulatory ***:From March 2016 to May 2018,312 patients infected with pseudomonas aeruginosa in the lower respiratory tract who were admitted to Department of Respiratory Medicine of Baogang Hospital and given follow-up treatments in the hospital were selected as subjects by use of cluster *** lavage fluid and sputum collected from those patients were used as biological *** genes of pseudomonas aeruginosa were detected with the help of oligonucleotide probes to make a pre-processing of chip data.A total of 8 common antibiotics(ceftazidime,gentamicin,piperacillin,amikacin,ciprofloxacin,levofloxacin,doripenem and ticarcillin)against Gram-negative bacteria were selected to determine the drug resistance of biological *** algorithm was used to construct a co-expression network model of the drug-resistance genes focused on exoS/***:The expression level of exoS/exou in the drug-resistance group was significantly higher than that in the non-resistance group(pexou(pexou(pexou,RAC1,ITGB1,ITGB5,CRK,CAMK2D,RHOA,FLNA,IGF

关键词： Omics data expression profile Lower respiratory tract Pseudomonas aeruginosa exoS exou Co-expression network

糖尿病大鼠创面感染的铜绿假单胞菌与自噬相互作用的实验研究

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糖尿病大鼠创面感染的铜绿假单胞菌与自噬相互作用的实验研究

作者：马亚楠天津医科大学

学位级别：硕士

目的:1、探讨PA的T3SS结构对糖尿病溃疡创面组织中自噬相关蛋白表达的影响,并进一步探讨其对糖尿病溃疡创面愈合的影响。2、探讨PA的T3SS分泌的毒力蛋白exou、ExoS分别对糖尿病溃疡创面组织中自噬相关蛋白表达的影响,并进一步探讨其对... 详细信息

目的:1、探讨PA的T3SS结构对糖尿病溃疡创面组织中自噬相关蛋白表达的影响,并进一步探讨其对糖尿病溃疡创面愈合的影响。2、探讨PA的T3SS分泌的毒力蛋白exou、ExoS分别对糖尿病溃疡创面组织中自噬相关蛋白表达的影响,并进一步探讨其对糖尿病溃疡创面愈合的影响。3、探讨雷帕霉素及庆大霉素对PA感染的糖尿病溃疡创面组织中自噬相关蛋白表达的影响及对糖尿病溃疡创面愈合的影响。方法:一、第一部分:36只SD大鼠随机分为六组:糖尿病非感染组（DM+未感染）,糖尿病感染PAK组（DM+PAK）,糖尿病感染PAK△pcrV-（DM+PAK△pcrV-）,非糖尿病非感染组（N+未感染）,非糖尿病感染PAK组（N+PAK）,非糖尿病感染PAK△pcrV-（N+PAK△pcrV-）,每组各6只。分别在造模第0天、3天、7天、14天、21天观察创面愈合情况并进行创面内菌落计数;分别在造模第0、7、14天取创面组织,HE染色观察各组大鼠创面组织内细胞形态、结构变化;免疫组化及Western blotting检测各组大鼠创面组织内自噬相关蛋白LC3、Beclin-1、p62的表达;免疫荧光双染色检测各组大鼠创面组织内巨噬细胞中LC3的表达;二、第二部分:24只SD大鼠随机分为四组:糖尿病感染PA103组（DM+PA103）,糖尿病感染PA01（DM+PA01）,非糖尿病感染PA103组（N+PA103）,非糖尿病感染PA01（N+PA01）,每组各6只。方法同第一部分;三、第三部分:36只SD大鼠随机分为六组:糖尿病感染PA103组（DM+PA103）,糖尿病感染PA103且雷帕霉素干预组（DM+PA103+雷帕霉素）,非糖尿病感染PA103组（N+PA103）,非糖尿病感染PA103且雷帕霉素干预组（N+PA103+雷帕霉素）,糖尿病感染PA103且庆大霉素干预组（DM+PA103+庆大霉素）,非糖尿病感染PA103且庆大霉素干预组（N+PA103+庆大霉素）,每组各6只。方法同第一部分。结果:一、第一部分:1、创面愈合情况:与非糖尿病组大鼠相比,糖尿病组大鼠第3天有黑痂形成,第7天有较多脓性分泌物,创面未见缩小,第21天创面仍未愈合,伤愈合时间明显延迟。在糖尿病组中,与DM+未感染及DM+PAK△pcrV-相比,第3天DM+PAK组黑痂形成、坏死较严重、周围较红肿,第7天有脓性分泌物渗出且最多,第21天仍有较多分泌物,第21伤口直径较大。2、创面内菌落计数:与非糖尿病感染组相比,糖尿病感染组菌落增长速度较快且减少速度较慢,其中与DM+PAK△pcrV-相比,DM+PAK组第7天以后菌落数开始减少,但减少不明显。3、HE结果:糖尿病感染组在第7、14天炎性粒细胞浸润逐渐增加,与DM+PAK△pcrV-相比,DM+PAK分别在第7、14天有更多炎性细胞浸润。非糖尿病组感染组在第7天炎性细胞浸润达到高峰,第14天炎性细胞下降,与N+PAK△pcrV-组相比,N+PAK分别在第7、14天有更多炎性细胞浸润。4、免疫组化结果:各组LC3、Beclin-1在第0、7、14天表达递增,p62蛋白第7、14天表达均逐渐下降（P均＜0.05）。N+非感染组LC3、Beclin-1表达在第7、14天表达明显高于DM+非感染组,p62表达在第7、14天低于DM+非感染组（P均＜0.05）。DM+PAK△pcrV-组LC3、Beclin-1表达在第14天高于DM+PAK,p62表达在第14天低于DM+PAK（P均＜0.05）;N+PAK△pcrV-组中LC3、Beclin-1表达在第7、14天高于N+PAK,p62表达在第7、14天低于N+PAK（P均＜0.05）;与N+PAK组相比,DM+PAK组在第14天LC3、Beclin-1表达较低,p62表达较高（P均＜0.05）;与N+PAK△pcrV-组相比,DM+PAK组LC3、Beclin-1表达在第7、14天较低,p62表达在第7、14天较高（P均＜0.05）。5、免疫印迹结果:同免疫组化结果相一致。6、免疫荧光结果:DM+PAK△pcrV-组巨噬细胞中LC3表达在第14天高于DM+PAK组;N+PAK△pcrV-组中巨噬细胞中LC3表达在第7、14天高于N+PAK。二、第二部分:1、创面愈合情况:与DM+PA01相比,DM+103组第3天有黑痂形成、坏死较严重、周围较红肿,伤口直径扩大,第14天伤口直径仍未缩小,坏死仍严重,第21天仍有较多分泌物,创面仍未愈合。2、创面内菌落计数:DM+PA103和DM+PA01在第0-7天持续增长,与DM+PA01相比,DM+PA103增加较快,第7天以后菌落数开始减少,减少较缓慢。3、HE结果:与DM+PA01组相比,DM+PA103分别在第7、14天有较多中性粒细胞、巨噬细

关键词：自噬糖尿病足感染铜绿假单胞菌 T3SS exou 创面愈合雷帕霉素