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e抗原阴性重症乙型肝炎患者HBV前C区热点变异研究

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第一军医大学学报 2001年第11期21卷 852-854页

作者：林裕龙候金林王战会孙剑阎丽骆抗先第一军医大学南方医院传染科广东广州510515

目的　研究ＨＢＶ信号肽区热点变异与重症乙型肝炎发生及转归的关系。方法　采用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析方法检测６８例ＨＢｅＡｇ阴性的重症乙型肝炎病人（其中急性重肝６例、亚急性重肝３８... 详细信息

目的　研究ＨＢＶ信号肽区热点变异与重症乙型肝炎发生及转归的关系。方法　采用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析方法检测６８例ＨＢｅＡｇ阴性的重症乙型肝炎病人（其中急性重肝６例、亚急性重肝３８例、慢性重肝２４例）及４４例慢性乙型肝炎患者的Ｔ１８６２、Ａ１８９６变异情况。结果　急性重肝的Ａ１８９６、Ｔ１８６２变异分别为６６．７％（４／６）、０（０／６）；亚急性重肝４２．１％（１６／３８）、１５．８％（６／３８）；慢性重肝２５．０％（６／２４）、１６．７％（４／２４）；慢性肝炎４５．５％（２０／４４）、２．３％（１／４４）。重症乙型肝炎组与慢性肝炎组比较Ｔ１８６２变异率有显著差异（Ｐ＜０．０１），Ａ１８９６变异率无显著差异（Ｐ>０．０５）。结论　提示Ｔ１８６２变异与乙型肝炎的重症化密切相关。而Ａ１８９６变异与乙型肝炎重症化进程是否有关还不能确定。

关键词：聚合酶链反应限制性片段长度多态性前C区热点变异乙型肝炎病毒 HBV e抗原

拉米夫定治疗后乙型肝炎e抗原血清转换患者的长期随访

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中华肝脏病杂志 2005年第4期13卷 297-299页

作者：吴静黎李韶光温帆渊杨小云周华坚惠州市中心人民医院消化内科肝病区广东516001

目的观察拉米夫定治疗发生乙型肝炎e抗原(HBeAg)／抗-HBe血清转换的慢性乙型肝炎患者的转归。方法对发生HBeAg／抗-HBe血清转换时间≥6个月、拉米夫定治疗疗程≥18个月的68例患者进行24个月以上的随访观察。结果拉米夫定治疗后HBeAg／抗... 详细信息

目的观察拉米夫定治疗发生乙型肝炎e抗原(HBeAg)／抗-HBe血清转换的慢性乙型肝炎患者的转归。方法对发生HBeAg／抗-HBe血清转换时间≥6个月、拉米夫定治疗疗程≥18个月的68例患者进行24个月以上的随访观察。结果拉米夫定治疗后HBeAg／抗HBe血清转换率为25.19％,YMDD变异率为20.59％,HBeAg／抗-HBe血清转换后随访期内复发率为27.94％,停药后复发者再服拉米夫定有效。复发与年龄、治疗前丙氨酸氨基转移酶水平有关,与治疗前HBVDNA水平、疗程及有无YMDD变异无关。结论拉米夫定治疗慢性乙型肝炎即使HBeAg／抗-HBe血清转换≥6个月仍有较高的复发率,对长期接受拉米夫定治疗的患者应加强随访观察。

关键词：拉米夫定治疗乙型肝炎 e抗原血清转换

乙型肝炎病毒YMDD及e抗原相关多重变异及其临床意义

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中华内科杂志 2004年第2期43卷 121-124页

作者：许东田德英王卫华陈红云邢铭友郭威宋佩辉华中科技大学同济医学院附属同济医院传染科武汉430030

目的　研究拉米夫定治疗慢性乙型肝炎期间HBVYMDD基序、影响HBeAg分泌的多重变异情况与临床的关系。方法　采用基因芯片技术对拉米夫定治疗 9～ 30个月的慢性乙型肝炎患者进行YMDD基序、G1896A、A1814C、A176 2T和G176 4A(BCP双突变 )... 详细信息

目的　研究拉米夫定治疗慢性乙型肝炎期间HBVYMDD基序、影响HBeAg分泌的多重变异情况与临床的关系。方法　采用基因芯片技术对拉米夫定治疗 9～ 30个月的慢性乙型肝炎患者进行YMDD基序、G1896A、A1814C、A176 2T和G176 4A(BCP双突变 )单碱基变异检测。结果　 10 2例慢性乙型肝炎患者拉米夫定平均治疗 18个月时 ,2 2例发生YMDD变异 ,其中 8例发生多重变异 ,包括G1896A 3例、A1814C 2例、G1896A +A1814C、BCP双突变、BCP双突变 +G1896A多重变异各 1例 ,单纯YMDD变异和前 5例联合变异均为HBeAg阳性 ,而后 3例多重变异则为HBeAg阴性 ,其中 1例多重变异继续治疗 3个月后转变为单纯YMDD野生株阳性 ,同时伴有HBeAg的复阳。结论　拉米夫定治疗过程中存在YMDD及HBeAg相关多重变异的优势病毒株可能是HBVDNA复阳、同时伴有HBeAg阴转的原因之一 ,拉米夫定治疗过程中 ,HBeAg阴性时应监测其可能的相关变异。

关键词：乙型肝炎病毒 YMDD e抗原基因变异拉米夫定药物治疗

乙型肝炎e抗原阴性慢性乙型肝炎和肝硬化患者病毒基因型及丙氨酸氨基转移酶水平分析

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中华肝脏病杂志 2005年第7期13卷 491-493页

作者：李俊茜庄辉杜珩王小红段学章北京大学医学部病原生物学系 100083

目的观察乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性慢性乙型肝炎(CHB)及肝硬化患者的乙型肝炎病毒(HBV)基因型及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。方法采用酶联免疫吸附法检测62例CHB和41例肝硬化患者HBV标志物和血清ALT水平,用聚合酶链反应法检测其HBV基因... 详细信息

目的观察乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性慢性乙型肝炎(CHB)及肝硬化患者的乙型肝炎病毒(HBV)基因型及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。方法采用酶联免疫吸附法检测62例CHB和41例肝硬化患者HBV标志物和血清ALT水平,用聚合酶链反应法检测其HBV基因型。结果CHB患者中,21 例(33.9%)为HBeAg阴性,41例(66.1%)为HBeAg阳性;肝硬化患者中,28例(68.3%)为HBeAg阴性,13例(31.7%)为HBeAg阳性。CHB患者中,53例(85.5%)为C基因型,9例(14.5%)为B基因型; 肝硬化患者中39例(95.1%)为C基因型,2例(4.9%)为B基因型。HBeAg阴性CHB患者ALT>40 U/L 者的比例低于HBeAg阳性组(分别为47.6%和85.4%),差异有统计学意义(PeAg阴性肝硬化患者ALT>40 U/L者的比例低于HBeAg阳性组(分别为64.3%和92.3%)但差异无统计学意义。结论CHB 和肝硬化患者中,HBeAg阴性者的比例较高,此类患者的ALT水平较低,以C基因型占优势。

关键词： e抗原阴性慢性乙型肝炎肝硬化病毒基因型丙氨酸氨基转移酶 CHB HBeAg

乙型肝炎病毒核心抗原与e抗原在转化的哺乳动物细胞中的高效稳定表达

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病毒学报 1989年第3期5卷 201-210页

作者：景新朱既明中国预防医学科学院病毒学研究所

将乙型肝炎病毒(HBV)ayw亚型Bam HI 1.5kb片段插入到载体pSV 2-dhfr Bgl Ⅱ位点,构建重组质粒。其正向插入的重组质粒pSV 2-DHBc-54转化L细胞之后,在细胞内测得乙型肝炎核心抗原(HBcAg)与e抗原(HBeAg),在含10％小牛血清的细胞培养液上... 详细信息

将乙型肝炎病毒(HBV)ayw亚型Bam HI 1.5kb片段插入到载体pSV 2-dhfr Bgl Ⅱ位点,构建重组质粒。其正向插入的重组质粒pSV 2-DHBc-54转化L细胞之后,在细胞内测得乙型肝炎核心抗原(HBcAg)与e抗原(HBeAg),在含10％小牛血清的细胞培养液上清中仅测到HBeAg。此转化细胞用氨甲喋呤处理后,转化细胞表达HBcAg与HBeAg的量增加10倍以上。转化细胞系C-54-24传20代仍能稳定分泌HBeAg。转化细胞分泌的HBeAg,在含10％小牛血清的培养液中可在4℃稳定保存一年7个月以上。

关键词：乙肝病毒核心抗原 e抗原共转化

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乙型肝炎病毒e抗原在大肠杆菌中的高效表达

病毒学报 1991年第4期7卷 323-330页

作者：曾蔚蓝刘崇柏中国预防医学科学院病毒学研究所

乙型肝炎病毒C基因3’端切去至少119个碱基,加上终止信号,插入到质粒pBV220中,它具有噬菌体P_RP_L串联启动子和CItS857温度敏感基因,表达条件从30℃上升到 42℃。HBeAg获得高效表达,eLISA效价大于40 000,只含少量HBeAg。用抗-HBe和抗-HB... 详细信息

乙型肝炎病毒C基因3’端切去至少119个碱基,加上终止信号,插入到质粒pBV220中,它具有噬菌体P_RP_L串联启动子和CItS857温度敏感基因,表达条件从30℃上升到 42℃。HBeAg获得高效表达,eLISA效价大于40 000,只含少量HBeAg。用抗-HBe和抗-HBc对表达的HBeAg做阻断抑制试验显示,表达的HBeAg与血清HBeAg特异性完全相同,分子量在15 000道尔顿左右,表达产物呈稳定状态。

关键词：乙肝病毒 e抗原基因表达

应用转化细胞分泌的乙型肝炎病毒e抗原检测人血清中的乙型肝炎病毒e抗体

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病毒学报 1989年第2期5卷 159-167页

作者：景新朱既明中国预防医学科学院病毒学研究所

应用乙型肝炎病毒核心抗原基因转化的小鼠L细胞分泌的乙型肝炎病毒e抗原,采用eLISA法与Abbott公司抗-HBe eIA诊断盒平行比较,检测了31份抗-HBe阳性和19份抗-HBe阴性的人血清,结果完全相符。经多次重复试验,本法的OD490nm值的误差不超过... 详细信息

应用乙型肝炎病毒核心抗原基因转化的小鼠L细胞分泌的乙型肝炎病毒e抗原,采用eLISA法与Abbott公司抗-HBe eIA诊断盒平行比较,检测了31份抗-HBe阳性和19份抗-HBe阴性的人血清,结果完全相符。经多次重复试验,本法的OD490nm值的误差不超过8％。OD490nm值与血清稀释度之间呈直线关系。细胞培养液不经纯化即可应用,一般做1:4稀释。细胞分泌的抗原无感染性,价格低廉,不会因结合人血清蛋白而产生非特异性反应。因此比一般诊断盒中所用的人血清HBeAg有很大的优越性。

关键词：乙肝病毒 e抗原 e抗体

重型乙型肝炎e抗原阴性患者前C变异株及其体外翻译

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中华肝脏病杂志 2001年第1期9卷 42-44页

作者：郭亚兵侯金林骆抗先冯筱榕第一军医大学南方医院感染内科广州510515

目的　探讨ＨＢｅＡｇ阴性的慢性重型乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区变异及前Ｃ区Ｔ１８６２突变体对ｅ抗原合成和分泌影响。方法选取９例重型乙型病毒性肝炎患者，用ＰＣＲ方法扩增血清中ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ基因区，并克隆后测序和序列分析；... 详细信息

目的　探讨ＨＢｅＡｇ阴性的慢性重型乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区变异及前Ｃ区Ｔ１８６２突变体对ｅ抗原合成和分泌影响。方法选取９例重型乙型病毒性肝炎患者，用ＰＣＲ方法扩增血清中ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ基因区，并克隆后测序和序列分析；构建ＨＢＶ前Ｃ区Ｔ１８６２位点突变体表达质粒ｐＧＥＭＴ，经体外翻译比较野毒株和变异株的表达产物。结果ＨＢＶ前Ｃ区有３个位点变异使氨基酸序列改变，Ａ１８９６、Ａ１８９９和Ｔ１８６２；Ａ１８９９并不单独出现。前Ｃ区Ｔ１８６２突变并不阻止ＨＢＶｅ前体蛋白体外合成。同时，有２例并未检测到前Ｃ区的变异。结论　部分重型肝炎ＨＢｅＡｇ阴性原因除了Ｔ１８９６变异外，还存在Ｔ１８６２变异。前Ｃ１８６２突变对ＨＢＶｅ抗原前体蛋白合成并无影响，可能ｅ抗原前体在分泌过程中受阻。

关键词：乙型肝炎 e抗原前C区变异体外翻译

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胎盘对e抗原的选择性通过

中华传染病杂志 2004年第3期22卷 197-199页

作者：张瑾侯金林国泽延王战会杨虹程爱林解放军第二六○医院传染科石家庄050041 广州第一军医大学南方医院感染内科实验室北京佑安医院妇产科