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Enzymatic characterization of a Type Ⅱ isocitrate dehydrogenase from pathogenic Leptospira interrogans serovar Lai strain 56601

Enzymatic characterization of a Type Ⅱ isocitrate dehydroge...

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第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会

作者： Xiaoyu Zhao Peng Wang Yadong Ge Guoping Zhu Institute of Molecular Biology and Biotechnology Anhui Normal University

Leptospira interrogans,a Gram-negative pathogen,could cause infections in a wide variety of mammalian hosts,but due to their fastidious cultivation requirements and the lack of genetic systems,the pathogenic factor is still not *** dehydrogenase(IDH) is a key enzyme in the tricarboxylation(TCA) cycle,which could have an important impact on the growth and pathogenesis of the *** the present study,we first report the cloning,heterologous expression,and detailed characterization of the EDH gene from *** serovar Lai strain 56601(LiIDH).The molecular weight of LilDH was determined to be 87 kDa by filtration chromatography,suggesting LilDH is a typical *** optimum activity of LilDH was found at 60 ℃,and its optimum pH was 7.0(Mn) and 8.0(Mg).Heat-inactivation studies showed that heat treatment for 20 min at 50 ℃ caused a 50%loss of enzyme *** was completely divalent cation dependent as other typical dimeric IDHs and Mg was its best *** recombinant LilDH specificities(k/K values for NADPand NAD) in the presence of Mg and Mn were 6,269-fold and 1,000-fold greater for NADPthan NAD,*** current work is expected to shed light on the functions of metabolic enzymes in *** and provide useful information for LilDH to be considered as a possible candidate for serological diagnostics and detection of *** infection.

关键词： Leptospira interrogans isocitrate dehydrogenase kinetics coenzyme specificity diagnosic candidate

来源： cnki会议评论

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