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cyp19a1对兔卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响

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畜牧兽医学报 2023年第10期54卷 4209-4219页

作者：杨安琪李嘉诚宋颖陈欣靳荣帅赵博昊吴信生陈阳扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

旨在探究P450芳香化酶基因(cytochrome P450,family 19,subfamily A,polypeptide 1,cyp19a1)对兔卵巢颗粒细胞(granulosa cells,GCs)增殖和凋亡的影响。本研究选择健康状况良好的8月龄新西兰白兔母兔,采集卵巢组织,分离并鉴定GCs;利用... 详细信息

旨在探究P450芳香化酶基因(cytochrome P450,family 19,subfamily A,polypeptide 1,cyp19a1)对兔卵巢颗粒细胞(granulosa cells,GCs)增殖和凋亡的影响。本研究选择健康状况良好的8月龄新西兰白兔母兔,采集卵巢组织,分离并鉴定GCs;利用一步克隆法获得兔cyp19a1基因全长序列,进行生物信息学分析;利用qRT-PCR、CCK8、FITC/PI等技术与方法,分析cyp19a1基因过表达和干扰对类固醇激素合成相关基因及GCs增殖和凋亡的影响。利用FSHR免疫荧光染色,鉴定分离的原代细胞是GCs,FSHR表达呈阳性。克隆cyp19a1基因,发现其cDNA全长为1512 bp,编码503个氨基酸。经生物信息学预测发现,cyp19a1蛋白是一种稳定的亲水性蛋白,含有一个P450家族结构域,与其它物种同源性较高。在GCs中,cyp19a1基因表达量的改变显著或极显著影响了类固醇激素合成相关基因IGF1R、cyp1B1、cyp1A1、BMP6、cyp17A1的表达(Pcyp19a1后,极显著上调/下调GCs增殖,极显著抑制/促进GCs凋亡水平(Pcyp19a1可以促进GCs增殖,抑制GCs凋亡,调控类固醇激素合成相关基因的表达,进而参与母兔卵泡发育进程。

关键词： cyp19a1 兔卵巢GCs 增殖凋亡

cyp19a1、GSTM1、GSTT1和GSTP1基因多态性与子宫内膜异位症患者发病的相关研究

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中华医学杂志 2019年第7期99卷 515-519页

作者：托娅杨菁陈秀娟刘芳内蒙古医科大学附属医院生殖医学中心呼和浩特010050 武汉大学人民医院生殖医学中心武汉430060

目的探讨cyp19a1 rs2899470、GSTM1、GSTT1、GSTP1 rs1695的基因多态性和子宫内膜异位症(EM)的关系。方法通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和多重等位基因特异聚合酶链式反应方法,检测从2015年10月至2017年10月内蒙古医科大学... 详细信息

目的探讨cyp19a1 rs2899470、GSTM1、GSTT1、GSTP1 rs1695的基因多态性和子宫内膜异位症(EM)的关系。方法通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和多重等位基因特异聚合酶链式反应方法,检测从2015年10月至2017年10月内蒙古医科大学附属医院收治262例EM患者和275名健康者的cyp19a1 rs2899470、GSTM1、GSTT1、GSTP1 rs1695的基因分型。结果携带cyp19a1 rs2899470 TT基因型的个体比携带GG基因型患EM的风险更高(P1),调整后的OR为2.33(95%CI 1.27~4.33);此外cyp19a1 rs2899470 TT基因型的个体将加重EM的病情(P1),OR为2.27(95%CI 1.05~4.90);而GSTM1、GSTT1和GSTP1 rs1695的多态性与EM发病风险没有关系。结论 cyp19a1 rs2899470多态性与EM发病风险及病情风险均相关。

关键词： cyp19a1 CSTM1 GSTT1 GSTP1 子宫内膜异位症

cyp17A1、cyp19a1基因变异与黔北麻羊产羔性状调控机制研究

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CYP17A1、CYP19A1基因变异与黔北麻羊产羔性状调控机制研究

作者：张艳贵州大学

学位级别：硕士

细胞色素P450c17(Cytochrome P450c17,cyp17A1)及细胞色素P450芳香化酶(cytochrome P450arom,cyp19a1)对卵泡发育、排卵、生殖激素的分泌及合成均具有重要作用,并影响着动物的繁殖性能。挖掘黔北麻羊产羔性状相关基因,筛选多羔分子标记... 详细信息

细胞色素P450c17(Cytochrome P450c17,cyp17A1)及细胞色素P450芳香化酶(cytochrome P450arom,cyp19a1)对卵泡发育、排卵、生殖激素的分泌及合成均具有重要作用,并影响着动物的繁殖性能。挖掘黔北麻羊产羔性状相关基因,筛选多羔分子标记有助于推进黔北麻羊多胎品系选育。本研究以cyp17A1、cyp19a1为目的基因,以经产多羔黔北麻羊母羊(3胎以上)为研究对象,采用PCR直接测序技术探究cyp17A1、cyp19a1基因多态位点与产羔性状间的关联作用,运用RT-q PCR技术检测cyp17A1、cyp19a1基因在黔北麻羊性腺轴组织m RNA水平;运用IHC检测cyp17A1、cyp19a1蛋白在卵巢组织中的定位表达;通过细胞免疫荧光鉴定所培养的卵泡颗粒细胞,随后,将构建的cyp17A1、cyp19a1基因的真核表达载体和RNA干扰载体并转染至卵巢颗粒细胞,以探究各重组质粒对颗粒细胞增殖、雌二醇及孕酮分泌和相关功能指标基因表达影响,揭示cyp17A1、cyp19a1基因在黔北麻羊的遗传效应,解析cyp17A1、cyp19a1基因调控山羊产羔性状的分子机制。研究结果如下:1.检测出cyp17A1有7个SNPs,g.59G>C、g.128G>A、g.129A>G、g.164T>C、g.2045G>A、g.4387G>A、g.4456C>T均存在两种基因型;除g.59G>C位点未偏离Hardy-Weinberg平衡(Pcyp19a1检测出7个SNPs,g.48818C>A属于中度多态,并偏离Hardy-Weinberg平衡(Pcyp19a1基因g.48818C>A位点AA型与产羔数显著相关(Pcyp17A1、cyp19a1基因在单、多羔黔北麻羊性腺轴中均有表达,且均在多羔卵巢组织中表达高于其他组织(Pcyp17A1、cyp19a1蛋白在黔北麻羊各级卵泡和颗粒细胞中均有表达。推测cyp17A1、cyp19a1基因主要在卵巢中发挥相应的功能,间接的影响其繁殖性能。3.pEGFP-N3-cyp17A1/cyp19a1真核表达质粒和sh-cyp17A1/cyp19a1沉默表达质粒转染卵泡颗粒细胞后,其可极显著上调和下调颗粒细胞中cyp17A1、cyp19a1在转录水平的表达(Pcyp17A1、cyp19a1的过表达能促进颗粒细胞的增殖,并促进Cyclin E、PCNA、BMRP-IB、INBHA及FSHR的表达,而沉默表达后能抑制细胞增殖并抑制细胞中Cyclin E、PCNA、BMRP-IB、INBHA及FSHR的表达。此外,过表达cyp19a1、cyp17A1能促进类固醇激素E及P的分泌(P>0.05),其中过表达cyp17A1能显著抑制类固醇合成激素相关酶STAR(Pcyp11A1、3βSHD的表达(P0.05),并显著促进类固醇合成激素相关酶STAR、cyp11A1(Pcyp19a1能极显著抑制类固醇合成激素相关酶STAR、cyp11A1、3βSHD的表达(Pcyp19a1后能极显著促进STAR、cyp11A1及3βSHD(Pcyp17A1、cyp19a1可能通过改变CyclinE、PCNA、STAR、cyp11A1、3βSHD等基因的表达调控细胞的增殖与激素的分泌、通过影响BMRP-IB、INBHA及FSHR的表达间接影响卵泡发育,进而影响山羊的繁殖性能。

关键词：黔北麻羊 cyp17A1 cyp19a1 SNP 卵泡颗粒细胞产羔数繁殖性能

cyp19a1基因rs7176005单核苷酸多态性与乳腺癌发病风险及临床病理特征的关系

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中华预防医学杂志 2018年第8期52卷 827-832页

作者：杜正贵王刘艳周毅万航宇梁法清吕青四川大学华西医院乳腺外科成都610041 成都市郫县中医医院外一科四川省人民医院乳腺外科

目的了解cyp19a1基因rs7176005单核苷酸多态性与乳腺癌发生及临床病理特征的关系。方法研究对象来自四川大学华西医院2012年9月至2016年11月乳腺科患者或者体检人员，分为乳腺癌病例组、乳腺良性疾病组和对照组，其中乳腺癌病例组共... 详细信息

目的了解cyp19a1基因rs7176005单核苷酸多态性与乳腺癌发生及临床病理特征的关系。方法研究对象来自四川大学华西医院2012年9月至2016年11月乳腺科患者或者体检人员，分为乳腺癌病例组、乳腺良性疾病组和对照组，其中乳腺癌病例组共138例，即术后常规石蜡切片确诊为原发性乳腺癌患者；乳腺良性疾病组共293例，即同时期门诊彩超提示为乳腺实性包块，经穿刺诊断为纤维腺瘤或者腺病的患者，按年龄±5岁与乳腺癌病例组匹配；对照组共259名，即同期门诊体检的健康女性，未发现乳腺相关疾病，按年龄±5岁与乳腺癌病例组匹配。采用直接测序法分析研究对象cyp19a1基因rs7176005单核苷酸的多态性，采用Hardy-Weinberg检验分析3组基因型的遗传平衡性，采用χ2检验分别比较3组间rs7176005位点基因型的分布差异以及携带不同基因型乳腺癌病例组对象间临床病理特征的差异。结果乳腺癌病例组、乳腺良性疾病组和对照组研究对象年龄分别为（44.69±8.09）、（42.33±11.44）和（41.92±9.61）岁。Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验结果显示，乳腺癌病例组、乳腺良性疾病组和对照组对象等位基因C和T的构成比差异均无统计学意义（χ2值分别为0.83、0.34、0.04，P值分别为0.363、0.561、0.852），即3组对象均符合遗传平衡，具有衡定性及群体代表性。138例乳腺癌病例中，cyp19a1基因rs7176005位点不同基因型的患者肿瘤大小分布差异有统计学意义（χ2=10.66，P=0.031），其中，携带TT和CT基因型的患者肿瘤大小以≤2 cm为主，比例分别为12/16和58%（40例），而携带TT基因型者以〉2且≤5 cm为主，比例为51%（27例）；不同基因型患者间临床分期的分布差异有统计学意义（χ2=11.19，P=0.025），携带CC和CT基因型者以Ⅱ期为主，比例分别为45.3%（24例）和52.2%（36例），携带TT基因型者以Ⅰ期为主，比例为9/16。结论 cyp19a1基因rs7176005单核苷酸多态性与乳腺癌发病无相关性，但含C等位基因的乳腺癌患者肿瘤增殖较快，发病时肿瘤也较大。

关键词：多态性单核苷酸乳腺肿瘤病理学 cyp19a1

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对大鼠睾丸发育及StAR、cyp19a1、cyp11a1基因表达的影响

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卫生研究 2010年第3期39卷 263-267页

作者：逯晓波于涛马明月靳翠红刘秋芳巫生文潘亮中国医科大学公共卫生学院卫生毒理教研室.沈阳110001 沈阳医学院公共卫生学院卫生毒理教研室

目的通过邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)28天短期重复暴露,探讨DEHP对雄性大鼠生殖系统发育的影响及其作用机制。方法40只7～9周龄雄性Wistar大鼠分为对照组(灌胃玉米油)和低、中、高剂量染毒组(每天灌胃DEHP10、100和1000mg/kg),每... 详细信息

目的通过邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)28天短期重复暴露,探讨DEHP对雄性大鼠生殖系统发育的影响及其作用机制。方法40只7～9周龄雄性Wistar大鼠分为对照组(灌胃玉米油)和低、中、高剂量染毒组(每天灌胃DEHP10、100和1000mg/kg),每组10只,动态观察动物一般状况、体重变化。28天后断头处死大鼠,测定睾丸组织脏器系数;对睾丸和附睾进行病理学观察。提取睾丸组织的总RNA,逆转录合成cDNA,通过PCR扩增产物比较DEHP不同剂量染毒对StAR、cyp19a1和cyp11a1基因表达的影响。结果随着DEHP剂量增加,大鼠体重增长受限(F=3.54,Pcyp19a1及cyp11a1基因表达降低,而StAR基因表达在各组间差异无显著性。结论DEHP对青春期雄性大鼠的生殖系统发育具有明显的毒性作用,导致睾丸重量降低,发育不全。DEHP及其代谢产物可能通过影响cyp19a1和cyp11a1等芳香化酶的基因表达,干扰内分泌平衡而使青春前期雄性大鼠产生生殖系统的发育障碍。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯睾丸发育 StAR cyp19a1 cyp11a1 基因表达

中等强度有氧运动对衰老大鼠肾上腺cyp19a1和VDR表达的影响

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九江学院学报（自然科学版） 2023年第1期38卷 125-128页

作者：李天吕振磊马鞍山学院安徽马鞍山243100 海南科技职业大学健康科学学院海南海口570100

目的探究有氧运动对衰老大鼠肾上腺cyp19a1和VDR的表达情况。方法以SD雄性大鼠为研究对象,随机分为D-半乳糖衰老组(D)、运动抑制衰老组(A)、D-半乳糖衰老运动组(DE)、对照组(C)和运动组(E),建立D-半乳糖衰老模型和有氧运动模型,运用West... 详细信息

目的探究有氧运动对衰老大鼠肾上腺cyp19a1和VDR的表达情况。方法以SD雄性大鼠为研究对象,随机分为D-半乳糖衰老组(D)、运动抑制衰老组(A)、D-半乳糖衰老运动组(DE)、对照组(C)和运动组(E),建立D-半乳糖衰老模型和有氧运动模型,运用Western Blot方法检测各组大鼠肾上腺cyp19a1,VDR的表达水平;运用SPSS13.0软件进行数据分析。结果①cyp19AI表达水平:运动抑制衰老组大于D-半乳糖衰老组(p1),D-半乳糖衰老运动组大于D-半乳糖衰老组(p1)。②VDR表达水平:D-半乳糖衰老运动组大于D-半乳糖衰老组(p1),运动抑制衰老组大于D-半乳糖衰老组(p1),结论中等负荷的有氧运动能够显著性的提高衰老大鼠肾上腺cyp19a1和VDR的表达含量。

关键词：衰老大鼠有氧运动肾上腺 cyp19a1 VDR

cyp19a1、STS基因在黔北麻羊不同组织中的表达

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基因组学与应用生物学 2020年第11期39卷 5045-5051页

作者：周志楠敖叶骆金红洪磊吴雨陈祥贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵阳550025 贵州大学动物科学学院贵阳550025

为探究cyp19a1、STS基因在黔北麻羊下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢5个性腺组织中的表达水平。本试验以黔北麻羊为研究对象,提取下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢5个性腺组织的RNA并逆转录合成cDNA第一链,采用实时荧光定量PCR(q-PCR... 详细信息

为探究cyp19a1、STS基因在黔北麻羊下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢5个性腺组织中的表达水平。本试验以黔北麻羊为研究对象,提取下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢5个性腺组织的RNA并逆转录合成cDNA第一链,采用实时荧光定量PCR(q-PCR)技术检测cyp19a1、STS基因的m RNA在黔北麻羊5个性腺组织中的表达水平。结果表明cyp19a1、STS基因的mRNA在黔北麻羊5个性腺组织中均有不同程度的表达,且2个基因在卵巢中的表达量相对最高,在下丘脑中的表达量相对最低,两者之间差异极显著(p1)。cyp19a1基因的mRNA在黔北麻羊5个性腺组织中的表达量由高到低依次为:卵巢>子宫>输卵管>垂体>下丘脑;STS基因的m RNA在黔北麻羊5个性腺组织中的表达量由高到低依次为:卵巢>垂体>子宫>输卵管>下丘脑。本研究结果为今后进一步探讨cyp19a1、STS基因对山羊的遗传机理提供了研究依据。

关键词：黔北麻羊 cyp19a1 STS 差异表达量

cyp19a1基因在鱼类性别分化和发育中的研究进展

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河南师范大学学报（自然科学版） 2019年第5期47卷 96-101,111页

作者：马晓刘倩王璐明吴利敏刘慧芬李学军河南师范大学水产学院

鱼类是人类获得优质动物蛋白的重要途径,蛋白的高效产出是水产研究领域的热点.许多鱼类存在性别异形的特点,因此,培育生长快、个体大的单性群体是增加产量的方式.单性群体的培育工作已在部分鱼类中完成,但鱼类的性别化机制复杂,受遗传... 详细信息

鱼类是人类获得优质动物蛋白的重要途径,蛋白的高效产出是水产研究领域的热点.许多鱼类存在性别异形的特点,因此,培育生长快、个体大的单性群体是增加产量的方式.单性群体的培育工作已在部分鱼类中完成,但鱼类的性别化机制复杂,受遗传、环境等因素影响.鱼类芳香化酶(cyp19a)可将雄激素转化为雌激素,是鱼类卵巢分化和发育的关键因素.cyp19a1基因在发挥功能时,不仅受到相关转录调控因子的影响,也与外界环境因素(如温度、pH值、盐度、湿度、光照等)有关.随着分子生物学技术的发展,水产动物性别分化机制日益深入,cyp19a1在性腺发育过程中的调控机制也愈发明确.通过综述水产动物中的cyp19a1基因的研究进展,为鱼类性别分化与性别发育机制的探索提供参考.

关键词：鱼类性别分化 cyp19a1 环境转录因子

泥鳅cyp19a1基因克隆及其在倍性间的表达差异

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华中农业大学学报 2021年第4期40卷 166-176页

作者：曹文怡易少奎杨楠苏君晓罗双双高泽霞周小云华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室武汉430070 湖州师范学院生命科学学院湖州313000

克隆并分析泥鳅cyp19a1a的全长cDNA和5′侧翼序列,用qRT-PCR技术比较cyp19a1a在二倍体、四倍体泥鳅组织间和倍性间的表达差异。结果发现,泥鳅cyp19a1a的cDNA全长1905 bp,包括29 bp的5′TR、301 bp的3′UTR和1575 bp的ORF序列,其氨基酸... 详细信息

克隆并分析泥鳅cyp19a1a的全长cDNA和5′侧翼序列,用qRT-PCR技术比较cyp19a1a在二倍体、四倍体泥鳅组织间和倍性间的表达差异。结果发现,泥鳅cyp19a1a的cDNA全长1905 bp,包括29 bp的5′TR、301 bp的3′UTR和1575 bp的ORF序列,其氨基酸序列中存在I-螺旋区、芳香化酶特异保守区以及血红素结合区等重要功能域。用hiTAIL-PCR克隆获得2040 bp的5′侧翼序列,在该序列上预测到典型元件TATA-box,以及C/EBPβ、SRY、ER、CREB、GR等转录因子结合位点。12月龄四倍体泥鳅的体长、体质量均显著高于二倍体,但性腺发育明显滞后于二倍体。cyp19a1a和cyp19a1b分别在二倍体、四倍体泥鳅的性腺和脑中的表达量最高。倍性间比较结果显示,cyp19a1a在四倍体各组织中的表达均高于二倍体(除精巢外);cyp19a1b在四倍体雌鳅脑中的表达量显著高于二倍体,但在四倍体雄鳅脑中的表达量显著低于二倍体。综合分析上述结果,四倍体中相对较高的cyp19a1a表达可能与其性腺所处发育时期有关,较晚的性成熟有利于泥鳅将更多能量用于个体生长。由于cyp19a1及其催化产生的雌激素还可以通过GH-IGF通路调节鱼类的生长,推测cyp19a1在泥鳅倍性间的差异表达可能与二倍体、四倍体间的生长生殖差异密切相关。

关键词：泥鳅 cyp19a1 四倍体性腺发育基因表达生殖调控