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双酚A对大鼠胰岛素瘤细胞凋亡及胰岛素分泌水平的影响

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环境与职业医学 2020年第6期37卷 609-615页

作者：李丽萍王乐德小明李玲张亚娟朱丽敏宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学公共卫生与管理学院宁夏银川750004 银川市第一人民医院医技科宁夏银川750004

[背景]双酚A(BPA)是一种典型的具有拟雌激素作用的环境内分泌干扰物。越来越多的研究显示,BPA暴露与人类2型糖尿病(T2DM)发生呈正相关,但其作用机制尚不清楚。探讨BPA对糖代谢的影响具有非常重要的意义。[目的]探讨双酚A对大鼠胰岛素瘤... 详细信息

[背景]双酚A(BPA)是一种典型的具有拟雌激素作用的环境内分泌干扰物。越来越多的研究显示,BPA暴露与人类2型糖尿病(T2DM)发生呈正相关,但其作用机制尚不清楚。探讨BPA对糖代谢的影响具有非常重要的意义。[目的]探讨双酚A对大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)凋亡及胰岛素分泌水平的影响。[方法]常规培养INS-1细胞,待细胞贴壁后,用含不同浓度BPA(6、30、150μmol·L^-1)的RPMI 1640培养基进行染毒,以DMSO为溶剂(终浓度≤0.1%)。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测BPA对INS-1细胞存活率的影响;流式细胞术检测BPA对INS-1细胞凋亡率的影响;活性氧(ROS)试剂盒检测BPA染毒对INS-1细胞ROS水平的影响;葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测不同浓度BPA对INS-1细胞胰岛素分泌的影响;荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法分别检测BPA对INS-1细胞Bcl-2、Bax、半胱天冬酶(caspase)3基因及其蛋白表达水平的影响。[结果]与DMSO溶剂对照组比较,30μmol·L^-1 BPA组INS-1细胞存活率增高,150μmol·L^-1 BPA组细胞存活率降低(P30、150μmol·L^-1 BPA组INS-1细胞内ROS含量增加(均P30μmol·L^-1 BPA组INS-1细胞胰岛素分泌水平增高(均P30μmol·L^-1 BPA组胰岛素分泌水平增高(P30μmol·L^-1 BPA组增高(均Pcaspase3的mRNA和蛋白相对表达水平在150μmol·L^-1BPA组增高,在30μmol·L^-1BPA组降低(均Pcleaved-caspase3与caspase3蛋白相对表达水平比值在6、150μmol·L^-1 BPA组增高(均P30μmol·L^-1BPA对INS-1细胞具有一定的促进增殖作用,对INS-1细胞胰岛素分泌水平也具有促进作用;6、150μmol·L^-1BPA可降低INS-1细胞活力,诱导INS-1细胞凋亡,降低胰岛素分泌水平,其作用机制可能与氧化损伤有关。

关键词：双酚A INS-1细胞细胞凋亡 Bcl-2 Bax caspase3 cleaved-caspase3

丹参酮IIA对人肺癌细胞H2009凋亡的影响

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四川医学 2022年第3期43卷 222-226页

作者：李娜四川大学华西公共卫生学院/四川大学华西第四医院姑息医学科四川成都610041

目的研究丹参酮IIA(Tan IIA)是否增敏顺铂(cDDP)对肺癌细胞的杀伤作用,以及初步探讨其可能的机制。方法H2009细胞分为对照组,Tan IIA单药组,cDDP单药组以及Tan IIA+cDDP联合用药组。处理细胞48~72 h,生长期末在显微镜下观察细胞凋亡情况... 详细信息

目的研究丹参酮IIA(Tan IIA)是否增敏顺铂(cDDP)对肺癌细胞的杀伤作用,以及初步探讨其可能的机制。方法H2009细胞分为对照组,Tan IIA单药组,cDDP单药组以及Tan IIA+cDDP联合用药组。处理细胞48~72 h,生长期末在显微镜下观察细胞凋亡情况,CCK-8实验检测细胞抑制率,以流式细胞仪检测细胞凋亡情况,以蛋白质印迹法检测细胞的凋亡相关蛋白cleaved-caspase3的表达水平。结果分别以cDDP(3、6、9μM)联合Tan IIA(1μM)处理H2009细胞后,联合用药组抑制率(53.05%)较单药组明显增加(P3μM)联合cDDP(9μM)处理H2009后,联合用药组抑制率(57.47%),与两单药组相比,明显增加(P35.9%vs.8.6%、20.0%;7.9%vs.1.7%、2.7%),表明Tan IIA可显著增强cDDP诱导的细胞凋亡;进一步通过western blot研究发现,联合用药组中cleaved-caspase3蛋白表达明显增高,表明Tan IIA可能是通过上调cleaved-caspase3的表达而促进了肿瘤细胞的凋亡,以上研究结果差异均有统计学意义。结论TanⅡA可增敏cDDP对肺癌细胞H2009的杀伤作用,且呈剂量-时间依赖性,其可能机制是促进了cleaved-caspase3凋亡蛋白的表达。

关键词：丹参酮ⅡA 肺癌 H2009细胞凋亡 cleaved-caspase3

虾青素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型的神经保护作用

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中国组织工程研究 2015年第40期19卷 6480-6484页

作者：林良烽福建医科大学附属第二医院儿科福建省泉州市362000

背景:研究发现虾青素有良好的神经保护作用,但是对于其在新生儿缺氧缺血性损伤中的治疗作用,目前尚无相关报道。目的:构建缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型,观察虾青素对其产生的神经保护作用及作用的途径。方法:从98只7 d龄的SD乳鼠中随机... 详细信息

背景:研究发现虾青素有良好的神经保护作用,但是对于其在新生儿缺氧缺血性损伤中的治疗作用,目前尚无相关报道。目的:构建缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型,观察虾青素对其产生的神经保护作用及作用的途径。方法:从98只7 d龄的SD乳鼠中随机取30只作为假手术组,其余大鼠结扎左颈总动脉2 h后,置于体积分数92%的特种标准气体、8%的氧气缺氧舱2 h建立缺血缺氧性脑损伤模型。假手术组仅分离颈总动脉,不予缺血缺氧处理。将造模成功的大鼠随机分为脑缺血缺氧组和虾青素治疗组,各30只。虾青素治疗组大鼠在脑缺血缺氧模型建成后立即通过腹腔注射80 mg/kg虾青素。结果与结论:与假手术组相比,脑缺血缺氧组大鼠缺血损伤区顶叶皮质中p-Akt、p-GSK3β、cleaved-caspase3蛋白的表达水平显著增加,Bcl-2蛋白的表达水平显著减少(Pcleaved-caspase3蛋白的表达水平(P3β信号通路相关。

关键词：实验动物脑及脊髓损伤动物模型虾青素组织工程新生大鼠缺血缺氧性损伤 p-Akt p-GSK3β Bcl-2 cleaved-caspase3 凋亡

丙泊酚对新生鼠大脑皮层神经元存活及凋亡的影响

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重庆医科大学学报 2010年第8期35卷 1175-1178页

作者：杨坤金先庆陈廷福赵丽华重庆医科大学附属儿童医院普外科重庆400014

目的:探讨丙泊酚对新生鼠大脑皮层神经元存活及凋亡的影响。方法:取新生1d内的SD(Sprague-dawley)大鼠的皮层神经元,培养6d,应用免疫细胞化学法及电子显微镜鉴定神经元,用不同浓度的丙泊酚作用神经元不同时间,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测... 详细信息

目的:探讨丙泊酚对新生鼠大脑皮层神经元存活及凋亡的影响。方法:取新生1d内的SD(Sprague-dawley)大鼠的皮层神经元,培养6d,应用免疫细胞化学法及电子显微镜鉴定神经元,用不同浓度的丙泊酚作用神经元不同时间,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测细胞存活率,TUNEL染色法测细胞凋亡指数,Western-blot免疫印记检测cleaved-caspase3蛋白的表达。结果:丙泊酚作用12h后,细胞存活率在6个组中无明显变化,作用24h及48h后,较高浓度组细胞存活率降低趋势明显。且较高浓度作用于神经元24h后凋亡指数及cleaved-caspase3蛋白的表达均呈浓度依赖性增高(P<0.05)。结论:高浓度长时间丙泊酚作用于大脑皮层神经元可降低其存活力和促进细胞凋亡,这一结论对临床儿童麻醉用药有指导意义。

关键词：丙泊酚皮层神经元细胞存活率凋亡 TUNEL cleaved-caspase3

TRPV1激活calcineurin-NFAT2-p53信号通路诱导结直肠癌细胞凋亡

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TRPV1激活calcineurin-NFAT2-p53信号通路诱导结直肠癌细胞凋亡

作者：付俊文西南医科大学

学位级别：硕士

目的:探究TRPV1(瞬时受体电位香草酸亚型1)在结直肠癌组织与癌旁组织以及正常组织中的差异表达,TRPV1的表达是否影响结直肠癌细胞的增殖与凋亡,同时检测TRPV1是否通过激活p53促进结直肠癌细胞凋亡,与其对细胞内Ca和NFAT(活化T细胞核因子... 详细信息

目的:探究TRPV1(瞬时受体电位香草酸亚型1)在结直肠癌组织与癌旁组织以及正常组织中的差异表达,TRPV1的表达是否影响结直肠癌细胞的增殖与凋亡,同时检测TRPV1是否通过激活p53促进结直肠癌细胞凋亡,与其对细胞内Ca和NFAT(活化T细胞核因子)表达的影响,进而调节凋亡相关蛋白。从而探讨TRPV1通过Ca调节信号依赖通路calcineurin-NFAT2-p53诱导结直肠癌细胞增殖凋亡。方法:TCGA(肿瘤基因组图谱)数据库中发现结肠癌细胞样本275例、正常组织样本349例,探究结直肠癌组织和正常组织中TRPV1蛋白是否存在差异表达,收集四川省人民医胃肠外科2018年5月-2018年8月的结直肠癌(colorectal cancer,CRC)标本10例、距肿瘤边缘0.5cm的癌旁组织10例,距肿瘤边缘5cm以上的正常结直肠组织6例,免疫组织化学技术检测各标本中的TRPV1蛋白的表达情况。为进一步探索TRPV1在结直肠癌中的生物学行为,探究TRPV1是否通过p53抑制结直肠癌细胞增殖,促进结直肠癌细胞凋亡。在人结直肠癌HCT116细胞系上进行功能实验。使用不同试剂培养结直肠癌HCT116细胞,分为空白对照组、辣椒素(TRPV1激活剂)组、辣椒素+Pifithrin-α(p53抑制剂)组。用CCK-8检测测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。探究TRPV1活化对细胞内Ca和NFAT2(活化T细胞核转录因子2)蛋白浓度的影响;分为空白对照组和辣椒素组,使用Fluo-4 AM染色检测细胞内Ca浓度,蛋白质印迹检测p-NFAT2(磷酸化的NFAT2)和NFAT2蛋白的表达水平,免疫荧光检测NFAT2蛋白的表达水平。最后探究TRPV1通过calcineurin(钙调神经磷酸酶)增加细胞内NFAT2蛋白表达,进而影响凋亡相关蛋白,从而影响结直肠癌HCT116细胞的增殖和凋亡;分为空白对照组、辣椒素+FK506(calcineurin抑制剂)组,辣椒素组培养结直肠癌HCT116细胞,通过免疫荧光测定检查NFAT2蛋白的表达水平、流式细胞术检测细胞凋亡、蛋白质印迹检查凋亡相关蛋白的表达水平。结果:TCGA数据库中结肠癌细胞样本275例,正常组织样本349例,TRPV1蛋白在结肠癌组织中的表达明显低于正常组织。我院收集的结直肠癌肿瘤标本10例、癌旁组织10例、正常结直肠组织6例的临床样本中发现结直肠癌组织中TRPV1蛋白的表达明显低于癌旁组织及正常组织,TRPV1蛋白在癌旁组织的表达介于癌组织和正常组织之间,表达差异具有统计学意义。TRPV1通过激活p53抑制结直肠癌HCT116细胞增殖,促进细胞凋亡。空白对照组、辣椒素组、辣椒素+Pifithrin-α组分别培养结直肠癌HCT116细胞;CCK-8检测细胞活力:空白对照组>辣椒素组+Pifithrin-α组>辣椒素组;流式细胞术检测细胞凋亡:辣椒素组>辣椒素组+Pifithrin-α组>空白对照组;蛋白质印迹测:促凋亡因子:辣椒素组>辣椒素组+Pifithrin-α组>空白对照组,而抗凋亡因子的表达则相反。TRPV1增加结直肠癌HCT116细胞内Ca内流和NFAT蛋白表达水平。空白对照组和辣椒素组分别培养结直肠癌HCT116细胞,Fluo-4 AM染色检测细胞内Ca浓度:辣椒素组>空白对照组;蛋白质印迹检测NFAT2蛋白表达:辣椒素组>空白对照组;p-NFAT2蛋白表达:空白对照组>辣椒素组;免疫荧光检测NFAT2的表达:辣椒素组>空白对照组。TRPV1通过激活calcineurin(钙调神经磷酸酶)促进结直肠癌HCT116细胞凋亡。空白对照组、辣椒素组、辣椒素+FK506(calcineurin抑制剂)组培养结肠癌HCT116细胞,免疫荧光测定NFAT2蛋白表达:辣椒素组>辣椒素+FK506组>空白对照组;流式细胞学检测细胞凋亡:辣椒素组>辣椒素+FK506组>空白对照组;蛋白质印迹法检查凋亡相关蛋白p53、BAX、cleaved-caspase3表达:辣椒素组>辣椒素+FK506组>空白对照组,而抗凋亡蛋白bcl-2的表达则相反。结论:TRPV1在结直肠癌组织中表达低于癌旁组织和正常组织,癌旁组织TRPV1的表达介于癌组织和正常组织之间,差异表达具有统计学意义。TRPV1能够抑制结直肠癌细胞的增殖,促进结直肠癌细胞的凋亡。并通过Ca调节calcineurin-NFAT2-p53信号通路诱导结直肠癌细胞凋亡;TRPV1是一种有效的肿瘤抑制因子,可能成为结直肠癌的治疗提供新的靶点。

关键词： TRPV1 结直肠癌 Ca2+ CaN NFAT2 p53 Bax cleaved-caspase3 bcl-2

丙泊酚对发育中大脑皮层神经元细胞活性及凋亡的影响

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丙泊酚对发育中大脑皮层神经元细胞活性及凋亡的影响

作者：杨坤重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：以体外培养的大脑皮层神经元为研究对象,选用不同浓度丙泊酚和不同的作用时间对其进行药物干预,研究其对发育中大脑皮层神经元细胞活性及凋亡的影响。方法：取24h内SPF级新生SD大鼠的大脑皮层神经元,培养6d经神经元鉴定后进行以... 详细信息

目的：以体外培养的大脑皮层神经元为研究对象,选用不同浓度丙泊酚和不同的作用时间对其进行药物干预,研究其对发育中大脑皮层神经元细胞活性及凋亡的影响。方法：取24h内SPF级新生SD大鼠的大脑皮层神经元,培养6d经神经元鉴定后进行以下三个实验。实验一：96孔板中,设置6个组,每组设置3个平行副孔,C1组不加任何处理,为对照组,P1，2，3，4，5组加入丙泊酚,终浓度分别为2、5、10、20、50μg/ml,分别于给药后12、24、48h后用MTT法测每组的OD值。实验二：将在24孔板中培养6d的神经元C：组不做任何处理,Pⅰ、ⅱ、ⅲ组分别加入丙泊酚,终浓度为10、20、50μg/ml,孵育24h后用TUNEL染色法测神经元凋亡率。实验三：在培养体系中加入丙泊酚,每组5孔,C3组不做任何处理,为对照组,PⅠ、Ⅱ、Ⅲ组终浓度分别为10、20、50μg/ml,作用24h后,提取全蛋白,Westen-blot测cleaved-caspase3蛋白的表达。结果：(1)在倒置显微镜下观察,原代培养6d的大鼠大脑皮层神经元胞体饱满,密度适中,立体感强,突起较长,已互相连接成网络。(2)MTT检测结果显示,丙泊酚作用12h后,细胞活性无明显变化,作用24h后,MTT检测结果与对照组比,药物浓度为10、20μg/ml组与对照组比较有统计学意义(P3)TUNEL法检测细胞凋亡率显示与C2组比较,Pⅰ、ⅱ、ⅲ组神经元凋亡率均升高,与对照组比较均有统计学意义(Pcleaved-caspase3蛋白在大脑皮层神经元中的表达随浓度升高而逐渐增高,与C3组比较差异有统计学意义。(P<0.05)结论：丙泊酚可抑制神经元的存活、促进其凋亡,且抑制细胞存活和促进凋亡的程度与作用时间和浓度有关,这一结论为临床谨慎用药提供了理论依据。

关键词：丙泊酚皮层神经元细胞活性凋亡 TUNEL cleaved-caspase3

PI3K/Akt信号通路在七氟烷后处理减轻犬体外循环肺组织细胞凋亡中的作用

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PI3K/Akt信号通路在七氟烷后处理减轻犬体外循环肺组织细胞凋亡中...

作者：罗俊丽遵义医学院

学位级别：硕士

目的:探讨七氟烷后处理对体外循环(CPB)犬肺功能、肺组织细胞凋亡情况及p-akt、cleaved-caspase3表达的影响,评价PI3K/Akt信号通路在七氟烷后处理减轻CPB犬肺损伤中的作用。方法:实验用健康杂种犬24只,随机分为4组(n=6),假手术组(C组)... 详细信息

目的:探讨七氟烷后处理对体外循环(CPB)犬肺功能、肺组织细胞凋亡情况及p-akt、cleaved-caspase3表达的影响,评价PI3K/Akt信号通路在七氟烷后处理减轻CPB犬肺损伤中的作用。方法:实验用健康杂种犬24只,随机分为4组(n=6),假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、七氟烷后处理组(S组)及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂组(S+W组)。C组行机械通气,胸骨正中开胸,其余不做任何处理,I/R组建立CPB左肺缺血再灌注损伤模型,S组在开放左肺动静脉即刻行2%七氟烷后处理30min,S+W组在开放左肺动静脉前10分钟给予PI3K抑制剂wortmannin 0.16mg·kg-1泵注,开放左肺动静脉即刻行2%七氟烷后处理30min。于开胸前(T1)、开放左肺动静脉即刻(T2)及停机后2h(T3)取肺左下叶组织光镜下观察病理学变化,同时在各时点采集股动脉血,行动脉血气分析,计算呼吸指数(RI)和氧合指数(OI),采用蛋白质印迹法(western blotting)检测各时点肺组织p-Akt、cleaved-caspase3的表达,TUNEL法检测各时点肺组织细胞凋亡情况。结果:(1)各组犬呼吸参数的变化:T1时点各组犬RI和OI无明显差异(P>0.05);与T1时点比较,C组各时点RI及OI无统计学意义,I/R组、S组及S+W组T2、T3 RI明显增加,OI明显降低(P3时点I/R组、S组及S+W组与I/R组RI明显增加,OI则相反(P3时点I/R组、S组及S+W组RI明显增加,OI明显降低(P3时点比较,S组RI降低,OI增加(P0.05);与S组T3时点比较,S+W组RI增加,OI降低(P3时点),C组肺泡壁光滑完整,偶见炎性细胞,I/R与S+W组肺组织结构紊乱,肺泡壁断裂,肺泡腔塌陷并可见明显的红细胞以及大量炎性细胞浸润;S组部分肺泡壁断裂,少量炎性细胞及少量红细胞渗出。(3)四组犬肺组织p-Akt、cleaved-caspase3的表达:开胸前各组犬p-Akt和cleaved-caspase3表达量极少,无明显差异(P>0.05);与T1时点比较,C组各时点p-Akt,cleaved-caspase3表达无明显差异(P>0.05),其余三组T2、T3时点肺组织p-Akt,cleaved-caspase3的表达明显升高(P3时点R组、S组及S+W组肺组织p-Ak,cleaved-caspase3的表达增加(P3时点S组p-Akt表达增加(Pcleaved-caspase3表达降低(P0.05);与S组T3时点比较,应用PI3K阻断剂后S+W组p-Akt表达降低,cleaved-caspase3增加(P0.05),其余三组T2、T3时点肺组织凋亡细胞数目增多,凋亡指数上升(P3时点各组凋亡指数明显高于T2时点(P3时点凋亡指数较C组高;与I/R组比,T3时点S组与S+W组凋亡指数明显降低(P3时点比S+W组凋亡指数降低(P3K/Akt信号通路激活后上调p-Akt水平,抑制cleaved-caspase3的表达有关。

关键词：体外循环七氟烷后处理 p-Akt cleaved-caspase3 肺缺血再灌注损伤

小白菊内脂对人雄激素非依赖性前列腺癌DU-145细胞的体外作用及其机制的研究

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小白菊内脂对人雄激素非依赖性前列腺癌DU-145细胞的体外作用及其...

作者：董春辉河北医科大学

学位级别：硕士

目的:近年来，我国前列腺癌的发病率和病死率也在呈上升趋势。该病的早期可手术治疗。因为肿瘤的发展依赖于雄激素的存在，对于错失手术时机多数患者可行雄激素阻断治疗，但随着治疗时间的延长，肿瘤往往转变为激素抵抗型前列腺癌（horm... 详细信息

目的:近年来，我国前列腺癌的发病率和病死率也在呈上升趋势。该病的早期可手术治疗。因为肿瘤的发展依赖于雄激素的存在，对于错失手术时机多数患者可行雄激素阻断治疗，但随着治疗时间的延长，肿瘤往往转变为激素抵抗型前列腺癌（hormone-refractoryprostatecancer,HRPC）。因此继续开发一种能有效地控制肿瘤生长，改善患者症状的药物具有重要的意义。小白菊内酯（panhenolide，PTL）是从中草药艾菊中提取的，属于倍半萜稀内酯类化合物，在一些西方国家，早年间已被提纯并用于消炎镇痛之用。一般被用于治疗关节炎、头痛、偏头痛及感冒发热等，随着国内外学者对小白菊的深入研究，现已证实小白菊内酯在体内外对多种肿瘤细胞具有明显的抑制效果，如乳腺癌、胃癌及肝癌等多种肿瘤。近几年国外一些研究表明PTL可能对前列腺癌有一定作用，但研究较少，且浮于表面，具体作用大小及机制尚不清楚，因此本实验通过观察PTL对体外培养的人雄激素非依赖性前列腺癌DU-145细胞的增殖、凋亡的影响并探讨其作用机制，旨在为前列腺癌的辅助治疗及PTL的临床应用提供实验依据。方法： 1细胞培养体外细胞传代培养人前列腺癌DU-145细胞。待细胞对数生长期，大约生长至70%时，进行药物刺激。实验组细胞给予不同浓度的PTL处理，对照组细胞给予生理盐水处理。 2细胞增殖分析分别应用MTT法和及细胞计数法对细胞增殖分析。以测定检测各浓度、时间点细胞的吸光度OD值，推算抑制率，评估PTL是否影响DU-145细胞增殖。 3流式细胞学分析取敏感浓度，以浓度梯度分组处理各组细胞后，消化制备成单细胞悬液，然后经过经固定、洗涤及染色等过程后，用流式细胞学分析PTL对DU-145细胞周期分布和凋亡的影响。 4免疫细胞化学染色将细胞接种于玻片上，用PTL处理48h后，取出玻片将各组细胞固定。用TritonX-100处理玻片，封闭后一抗及二抗结合反应，然后通过DAB显色后光镜下计数阳性细胞数并计算其所占比例,检测KI67蛋白表达率。 5Western印迹分析取等量细胞总蛋白，加样与SDS聚丙烯酰胺凝胶经过电泳、电转膜，封闭、一抗及二抗结合、化学发光等过程，然后对cleaved-caspase3、Bcl-2和Bax蛋白进行检测。结果： 1PTL抑制DU-145细胞增殖MTT和细胞计数分析显示，PTL可以明显抑制DU-145细胞增殖，具有明显的时间和浓度依赖性，呈明显的正相关性（P＜0.05）。免疫细胞化学染色结果表明，PTL处理DU-145细胞后增殖标志物KI67蛋白表达降低，与浓度呈负相关性（P＜0.05）。 2PTL促进DU-145细胞凋亡流式细胞学结果表明，PTL促进DU-145细胞阻滞于G0/G1期（P＜0.01），并诱导DU-145细胞出现明显的凋亡峰（P＜0.05）。Western印迹结果表明PTL处理DU-145细胞后增殖凋亡标志物cleaved-caspase3表达增加，与浓度呈正相关性（P＜0.01）。Western印迹结果表明在PTL处理DU-145细胞后促凋亡蛋白Bax表达水平明显升高，与浓度呈正相关性（P＜0.05），而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平明显降低，与浓度呈负相关性（P＜0.01）。结论： 1小白菊内酯可明显抑制人前列腺癌DU-145细胞的增值，且呈明显的时间、剂量依赖性，可能与下调KI67蛋白表达有关。 2小白菊内酯对人前列腺癌DU-145细胞的细胞周期有一定影响。随着药物浓度的增小大，DU-145细胞G0/G1期细胞数明显增多，S和G2/M期细胞数减少，细胞周期阻滞于G0/G1期。 3小白菊内酯可以有效诱导人前列腺癌DU-145细胞凋亡，呈时间、剂量依赖性。凋亡可能与上调人前列腺癌DU-145细胞中cleaved-caspase3的表达有关。 4上调Bax和下调Bcl-2表达水平可能是小白菊内酯诱导DU-145细胞凋亡的机制之一。

关键词：小白菊内酯前列腺癌增殖凋亡 KI67 cleaved-caspase3 Bax Bcl-2

大鼠脊髓损伤模型中NKCC1调控脊髓损伤的机制及其干预因素研究

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临床医学研究与实践 2019年第27期4卷 1-3页

作者：惠浩郝定均闫亮黄大耿孙宏慧赵勤鹏葛朝元西安交通大学附属红会医院脊柱外科

目的构建大鼠脊髓损伤(SCI)模型,观察NKCC1亚基调控脊髓水肿的机制以及其选择性抑制剂布美他尼(BT)干预后对SCI的影响。方法将60只SD大鼠按随机分配原则分为假手术组(Sham组)、SCI组、SCI+BT组,各20只。构建大鼠SCI模型。于造模后分别... 详细信息

目的构建大鼠脊髓损伤(SCI)模型,观察NKCC1亚基调控脊髓水肿的机制以及其选择性抑制剂布美他尼(BT)干预后对SCI的影响。方法将60只SD大鼠按随机分配原则分为假手术组(Sham组)、SCI组、SCI+BT组,各20只。构建大鼠SCI模型。于造模后分别通过脊髓含水量测定、脊髓功能评分及Western blot方法分析大鼠脊髓水肿情况、脊髓功能及NKCC1、cleaved-caspase 3含量变化。结果 SCI损伤后,与Sham组相比,SCI组的脊髓组织含水量明显更高,Basso Beattie and Bresnahan(BBB)评分显著降低,NKCC1、cleaved-caspase 3含量均显著增加,表明造模成功。SCI损伤48 h后,BT+SCI组脊髓含水量显著低于SCI组(Pcleaved-caspase 3含量显著低于SCI组(P<0.05)。结论 BT可以显著改善SCI情况,这种改善可能与BT降低损伤后脊髓水肿、减少脊髓细胞的凋亡有关。

关键词：脊髓损伤 NKCC1 布美他尼 BBB评分 cleaved-caspase3