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临床神经外科杂志 2023年第5期20卷 524-530页

作者：赵水强孟大伟陈国强李亮亮王志文胡甜甜刘东升牛建星北京航空总医院神经外科北京100012

目的探讨下调hsa_circ_0006988(circ_0006988)对胶质瘤细胞凋亡和迁移的作用。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胶质瘤组织中circ_0006988、miR-3619-5p表达变化。胶质瘤细胞BT325分为Control、si-NC(转染siRNA control)、si-circ(转染circ_0006988 siRNA)、miR-NC(转染mimics control)、miR-3619-5p(转染miR-3619-5p mimics)、si-circ+anti-miR-NC(共转染circ_0006988 siRNA、inhibitor control)、si-circ+anti-miR-3619-5p组(共转染circ_0006988 siRNA、miR-3619-5p inhibitor),qRT-PCR检测miR-3619-5p表达,CCK-8实验检测增殖,流式细胞术检测凋亡,Transwell小室检测迁移,Western Blot检测Bax、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达。靶基因预测软件预测circ_0006988和miR-3619-5p结合位点,二者关系通过荧光素酶系统确定。结果与瘤旁组织比较,胶质瘤组织中circ_0006988表达水平升高,miR-3619-5p表达水平下降,并且胶质瘤组织中circ_0006988和miR-3619-5p表达水平负相关(r=-0.2897,Pcirc组胶质瘤细胞中miR-3619-5p水平增加,细胞增殖活性、迁移数目以及Bcl-2、MMP-2蛋白表达减少,凋亡率和Bax蛋白表达增多(Pcirc+anti-miR-NC组比较,si-circ+anti-miR-3619-5p组胶质瘤细胞中miR-3619-5p水平降低,细胞增殖活性、迁移数目以及Bcl-2、MMP-2蛋白表达增多,凋亡率和Bax蛋白表达减少(Pcirc_0006988靶向负调控miR-3619-5p表达。结论下调circ_0006988靶向促进miR-3619-5p表达诱导胶质瘤细胞凋亡,并抑制细胞迁移。

关键词： circ_0006988 胶质瘤迁移凋亡 miR-3619-5p

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hsa_circ_0006988诱导胶质瘤细胞铁死亡的机制研究

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中国医药导报 2023年第16期20卷 11-15页

作者：赵水强孟大伟陈国强李亮亮王志文胡甜甜牛建星北京航空总医院神经外科北京100012

目的研究hsa_circ_0006988(circ_0006988)诱导胶质瘤细胞铁死亡的机制。方法检测脑正常胶质细胞HEB,胶质瘤细胞A172、SHG44、CHG-5中circ_0006988表达水平,随后将胶质瘤细胞CHG-5分成Control组(空白对照)、si-NC组(转染siRNA control)、si-circ组(转染circ_0006988 siRNA)、si-Nrf2组(转染Nrf2 siRNA)、si-circ+Vector组(共转染circ_0006988 siRNA、阴性对照载体)、si-circ+Nrf2组(共转染circ_0006988 siRNA、Nrf2过表达载体);qRT-PCR方法检测各组细胞中circ_0006988表达差异;比色法检测Fe^(2+)含量,Western blot检测Nrf2、GPX4、Ferritin、TF、TFR蛋白表达,DCFHDA法检测ROS,硫代巴比妥酸法检测MDA。结果胶质瘤细胞A172、SHG44、CHG-5中circ_0006988表达水平高于脑正常胶质细胞HEB(Pcirc_0006988表达水平低于胶质瘤细胞CHG-5(Pcirc组胶质瘤细胞中,Fe^(2+)含量、ROS、MDA含量高于Control组、si-NC组,Ferritin、TF、TFR蛋白表达高于Control组、si-NC组(Pcirc组胶质瘤细胞Nrf2、GPX4蛋白表达低于si-NC组,Fe^(2+)含量,Ferritin、TF、TFR蛋白表达,ROS、MDA含量高于si-NC组(Pcirc+Nrf2组胶质瘤细胞Nrf2、GPX4蛋白表达高于si-circ+Vector组,Fe^(2+)含量,Ferritin、TF、TFR蛋白表达,ROS、MDA含量低于si-circ+Vector组(Pcirc_0006988通过抑制Nrf2/GPX4信号诱导胶质瘤细胞铁死亡。

关键词： circ_0006988 胶质瘤铁死亡 Nrf2/GPX4信号

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