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hsa_circ_0000670通过miR-515-5p/SIX1分子轴促进胃癌进展

中华肿瘤杂志 2023年第3期45卷 238-252页

作者：顾宏阮汝娟卢小冬褚雪峰南通大学附属如皋医院普外科江苏省如皋市226500 南通大学附属如皋医院心胸外科江苏省如皋市226500

目的探讨hsa_circ_0000670通过调控miR-515-5p/SIX1分子轴促进胃癌进展的分子机制。方法收集2014—2015年南通大学附属如皋医院收治的35例胃癌患者的胃癌及癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应法和Western blot法分别检测胃癌组... 详细信息

目的探讨hsa_circ_0000670通过调控miR-515-5p/SIX1分子轴促进胃癌进展的分子机制。方法收集2014—2015年南通大学附属如皋医院收治的35例胃癌患者的胃癌及癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应法和Western blot法分别检测胃癌组织、癌旁正常组织、人胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞AGS、HGC-27中circ_0000670、miR-515-5p、SIX1的表达水平;采用Pearson相关分析分析circ_0000670与miR-515-5p、miR-515-5p与SIX1、circ_0000670与SIX1的相关性。采用Kaplan-Meier法和Log rank检验分析circ_0000670低表达组(17例)和circ_0000670高表达组(18例)患者的生存情况。采用平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率,采用划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,双荧光素酶报告实验检测circ_0000670与miR-515-5p、miR-515-5p与SIX1的靶向关系。分别将sh-NC、sh-circ_0000670转染至HGC-27细胞,将细胞注射入裸鼠体内,检测移植瘤体积及重量,并检测移植瘤组织中circ_0000670、miR-515-5p及SIX1蛋白的表达水平,Western blot法检测E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。结果胃癌组织及细胞系中circ_0000670、SIX1的表达水平高于癌旁正常组织及胃上皮细胞GES-1,miR-515-5p的表达水平低于癌旁正常组织及胃上皮细胞GES-1(均Pcirc_0000670低表达组患者5年生存率(82.4%)高于circ_0000670高表达组(28.7%,P=0.034)。circ_0000670与miR-515-5p、miR-515-5p与SIX1呈负相关(r分别为-0.846、-0.615,均Pcirc_0000670与SIX1呈正相关(r=0.814,Pcirc_0000670或转染miR-515-5p mimic可减弱胃癌细胞AGS、HGC-27增殖、迁移及侵袭能力(均Pcirc_0000670可靶向调控miR-515-5p,miR-515-5p可靶向调控SIX1。共转染si-circ_0000670与miR-515-5p inhibitor可逆转转染si-circ_0000670对细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期及凋亡的作用(均Pcirc_0000670组小鼠移植瘤体积及重量[分别为(299.20±47.58)mm^(3)和(289.80±48.73)g]低于sh-NC组[分别为(596.20±125.46)mm^(3)和(538.00±114.39)g,均Pcirc_0000670组小鼠移植瘤组织中circ_0000670和SIX1表达水平降低,miR-515-5p的表达水平升高(均Pcirc_0000670的表达可通过调控miR-515-5p/SIX1分子轴从而减弱胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,诱导细胞周期阻滞于G_(0)/G_(1)期及促进细胞凋亡。

关键词：胃肿瘤 circ_0000670 miR-515-5p SIX1

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