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沉默circankrd11靶向miR-218-5p对RSV诱导的支气管上皮细胞损伤的影响

免疫学杂志 2023年第12期39卷 1042-1049页

作者：赵梦李艳红湖北文理学院附属医院襄阳市中心医院儿科襄阳441021

目的探究沉默circankrd11对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导的支气管上皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法采用RSV诱导人支气管上皮细胞HBECs建立细胞损伤模型,相应转染后用含有感染复数为0.0001 RSV的培养基培养24 h;qRT-PCR法检测circAN... 详细信息

目的探究沉默circankrd11对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导的支气管上皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法采用RSV诱导人支气管上皮细胞HBECs建立细胞损伤模型,相应转染后用含有感染复数为0.0001 RSV的培养基培养24 h;qRT-PCR法检测circankrd11、miR-218-5p、TNFR1和BRD4的表达量;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;ELISA法检测IL-6、IL-1β的水平;双荧光素酶报告实验检测circankrd11与miR-218-5p的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2、TNFR1和BRD4蛋白表达量。结果RSV诱导的HBECs中circankrd11的表达量升高(Pcircankrd11或转染miR-218-5p mimic后,RSV诱导的HBECs细胞增殖的抑制率下降,炎症因子含量降低,凋亡细胞数减少(Pcircankrd11可充当miR-218-5p的分子海绵而靶向结合miR-218-5p;共转染si-circankrd11与miR-218-5p inhibitor可恢复转染si-circankrd11对RSV诱导的HBECs增殖、凋亡及炎症的作用。结论沉默circankrd11可通过上调miR-218-5p表达抑制TNFR1和BRD4表达,促进细胞增殖及抑制细胞凋亡和炎症反应从而减轻RSV诱导的支气管上皮细胞损伤。

关键词：人支气管上皮细胞呼吸道合胞病毒 circankrd11 miR-218-5p

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