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转bg2基因黑杨植株的获得

山东农业大学学报（自然科学版） 2004年第3期35卷 375-378,382页

作者：韩琳娜周春江崔德才王斌山东农业大学生命科学学院山东泰安271018 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101

利用根癌农杆菌介导法将 β - 1,3-葡聚糖酶基因 (bg2 )转入黑杨G1。本研究建立了黑杨G1的继代及高频再生系统 ,对传统农杆菌侵染方法进行了改良 ,通过抗生素筛选获得大量抗性植株。对抗性植株进行了PCR和PCR -Southern杂交鉴定。

关键词：黑杨抗性植株根癌农杆菌介导法杨树继代侵染杂交 bg 基因抗生素

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bg反叛性研究 ——以凯鲁亚克和金斯伯格为例

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BG反叛性研究 ——以凯鲁亚克和金斯伯格为例

作者：赵静广西师范大学

学位级别：硕士

bg即The Beat Generation,在中国我们称之为“垮掉的一代”。作为一个文学派别它以对另类生活方式的描写引起人们的关注并成名于二十世纪五十年代,其作品中所富含的反叛性对后世有着深远的影响,如嬉皮士等。在不停的反叛中不懈的追求是... 详细信息

bg即The Beat Generation,在中国我们称之为“垮掉的一代”。作为一个文学派别它以对另类生活方式的描写引起人们的关注并成名于二十世纪五十年代,其作品中所富含的反叛性对后世有着深远的影响,如嬉皮士等。在不停的反叛中不懈的追求是贯穿bg及其创作的主线,但在中国,因为译名、观念差异、作品翻译等等诸多方面的原因,许多人对其反叛性并没有充分的认识,大多数人只是注意到bg另类反叛生活的表面而没有看到其实质。本文试图以bg代表人物金斯伯格和凯鲁亚克为例,对其另类生活方式的反叛性进行全面的说明和分析,希望通过种种探讨可以更正人们以前对于bg“垮掉”的错误认识,对其有一个更加全面、深入的了解。本文由引言,正文三章和结语三个部分组成。第一章主要交代孕育bg的历史背景,主要分为两个层次。第一层主要说明bg所处的时代背景,第二层主要介绍bg所处时代影响较大的三大社会思潮。对bg所处历史背景的了解将有利于我们更好的理解bg的另类生活方式和其反叛性。第二章主要以bg代表人物凯鲁亚克和金斯伯格为例对bg的反叛性展开论述,主要分为三个层次:第一层将会简要介绍“酷儿”这个概念,因为在笔者看来bg本质上就是一群反叛的“酷儿”。第二个层次将以金斯伯格和凯鲁亚克为例,分七个部分,分别从七个方面对bg的反叛性展开详细的论述。第三层将进一步深入的探讨bg的反叛性,指出由于无可避免的受到传统观念的影响和消费社会的种种利用,bg的反叛所呈现出的局限性。对于其反叛性的局限性我们将分为两个部分,分别从不同角度进行集中论述,以期人们能对其反叛性有一个更全面的认识和了解。第三章将主要论述bg反叛性的影响。主要涉及其对六十年代反文化潮流,对美国后世文学和对中国当代文学三方面的影响。对bg反叛性影响的探讨不但能使我们对bg反叛性的巨大影响力有一个清醒的认识和准确的定位,它还会使我们对反叛的认识进一步深入。bg们在不停的反叛中寻求着超脱与超越,由于其反叛方式非常另类,不同以往,所以常遭非议。去掉其头顶“垮掉”的帽子,我们对其反叛性不仅有了更好的理解,同时也发现了其反叛的局限性,这样对bg就有了更为全面的认识。在今日,bg反叛性的影响力已经毋庸置疑的表现在诸多方面,在当下中国年轻人一代“反叛”情绪日益高涨的语境下,对这群“酷儿”反叛性影响的探讨更显得意义非凡。

关键词：反叛性酷儿 bg

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粘性丝孢酵母bg基因部分克隆与原核表达

粘性丝孢酵母BG基因部分克隆与原核表达

作者：代军飞西北民族大学

学位级别：硕士

粘性丝孢酵母作为一种油脂微生物,能够将碳水化合物与普通的油脂转化为微生物油脂储存在体内,但不能直接利用木质纤维素类的碳源合成微生物油脂。β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase, bg)作为糖苷水解酶家族成员,属于纤维素水解酶系,主要参... 详细信息

粘性丝孢酵母作为一种油脂微生物,能够将碳水化合物与普通的油脂转化为微生物油脂储存在体内,但不能直接利用木质纤维素类的碳源合成微生物油脂。β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase, bg)作为糖苷水解酶家族成员,属于纤维素水解酶系,主要参与水解位于末端的糖基原子团同芳基或烷基间的p-D-糖苷键生成葡萄糖,如p-葡萄糖苷和p-半乳糖苷,对于木糖及果糖苷也具有一定作用。水解纤维素产生的糖类能够被粘性丝孢酵母利用合成微生物油脂。本试验旨在通过研究bg为粘性丝孢酵母高效利用木质纤维素生产微生物油脂奠定一定的基础。本试验选取粘性丝孢酵母bg基因作为研究对象,在NCBI上寻找己报道的不同菌属bg基因序列设计引物,PCR扩增得到bg基因部分CDs区并使用生物信息学软件进行分析,通过荧光定量PCR技术检测其在不同培养时间、温度、碳氮比以及pH表达量的变化,克隆得到的部分CDS区导入表达载体并在大肠杆菌(*** Top 10)中表达。研究结果如下：(1)经过液氮研磨、反复冻融、超声波破碎、钢珠震荡以及酶同钢珠共同作用预处理方式,利用Trizol法提取粘性丝孢酵母总RNA。结果显示液氮研磨和酶同钢珠共同作用提取RNA相对完整无降解质量较好,反复冻融方式次之,超声波破碎出现明显的降解,而钢珠震荡方式电泳未检测出条带,说明液氮研磨是破碎粘性丝孢酵母细胞壁提取总RNA有效的预处理方式。(2)通过TA克隆得到bg基因的部分CDs区序列。序列长570bp,编码189个氨基酸,生物信息学分析显示该多肽属于亲水性蛋白,二级结构中α-螺旋占25.9%,延伸链占22.89%,无规则卷曲占51.20%,无p-折叠等其他结构。(3)通过荧光定量PCR技术结合SPSS软件分析bg基因mRNA在不同培养时间、温度、碳氮比以及pH表达量的变化,结果显示培养温度、pH、C/N对粘性丝孢酵母bg基因表达量无显著性影响;培养时间对其具有显著性影响,呈先上升后下降的趋势,在第3d时表达量最高且极显著高于其他培养时期。(4)将pET28a质粒表达载体与bg基因部分CDs区连接构建原核表达载体,通过大肠杆菌表达其编码的部分蛋白。经菌液PCR与琼脂糖凝胶电泳验证,表达载体在大肠杆菌中存在。SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,带有HisTaq的目的蛋白分子量大小与预期相符合。Western blot验证结果显示His标签有放射性反应,证明与HisTaq融合表达的目的蛋白在大肠杆菌内也表达,也进一步证明SDS-PAGE凝胶电泳结果的准确性,通过以上试验证明得到的蛋白为bg基因编码的部分蛋白,为后续试验奠定一定的基础。

关键词：粘性丝孢酵母 bg 克隆表达

活肺通片成分分析及君药五指毛桃中bg的抗炎活性研究

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活肺通片成分分析及君药五指毛桃中BG的抗炎活性研究

作者：杨怡广东药科大学

学位级别：硕士

目的:研究复方制剂活肺通片的化学成分及君药五指毛桃中佛手柑内酯的抗炎活性。利用色质谱联用技术,对复方制剂活肺通片及其君药五指毛桃进行化学物质组的系统研究;建立斑马鱼炎症模型,对君药五指毛桃中的佛手柑内酯进行抗炎和消炎活性... 详细信息

目的:研究复方制剂活肺通片的化学成分及君药五指毛桃中佛手柑内酯的抗炎活性。利用色质谱联用技术,对复方制剂活肺通片及其君药五指毛桃进行化学物质组的系统研究;建立斑马鱼炎症模型,对君药五指毛桃中的佛手柑内酯进行抗炎和消炎活性研究。方法:按活肺通片的提取工艺对五指毛桃中的化学成分进行提取,结合高效液相色谱-串联质谱(LCMS-IT-TOF)和气相色谱-质谱(GC-MS)技术对君药五指毛桃提取物中的复杂化学成分进行快速定性分析;采用固相萃取法从君药五指毛桃中分离纯化佛手柑内酯(Bergapten,bg)单体,采用LCMS-IT-TOF和核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)方法对佛手柑内酯单体进行鉴定;建立斑马鱼炎症模型,以斑马鱼幼鱼的形态学变化为依据,考察bg对斑马鱼幼鱼48h内的毒性;以巨噬细胞和中性粒细胞的数量和ROS、NO含量为指标,对bg进行抗炎和消炎活性研究;采用6倍量乙醇对五指毛桃中的化学成分进行回流提取,10倍量水对灵芝、平贝母、蛤蚧、甘草煎煮,合并浓缩液,运用LCMS-IT-TOF技术对活肺通片制剂中的复杂化学成分进行定性分析。结果:1.采用色质谱联用技术,从五指毛桃中共鉴定出27种化合物。其中通过LCMS-IT-TOF法鉴定出20种化合物,GC-MS法鉴定出9种化合物,化合物中黄酮类和香豆素类成分种类较多,香豆素和萜类成分含量相对较高,补骨脂素和佛手柑内酯在LCMS-IT-TOF和GC-MS分析中均分离得到。***对斑马鱼幼鱼的毒性评价结果表明,浓度为5,10和20μg/mLbg溶液在幼鱼的发育阶段没有诱导任何毒性作用,然而,较高的剂量对幼鱼有毒性并引起形态学缺陷,如心包水肿和脊髓弯曲。因此,选择5-20μg/mLbg溶液范围的浓度用于后续的实验。3.与对照组相比,浓度为5,10和20μg/mL bg溶液能以浓度依赖性的方式显著减少损伤部位的中性粒细胞和巨噬细胞的数量。4.在12 hpi时,与对照组相比,浓度为5,10和20μg/mL bg溶液能以浓度依赖性的方式显著减少损伤部位的中性粒细胞和巨噬细胞的数量。***以剂量依赖的方式减少切尾诱导的ROS产生。***以剂量依赖的方式抑制切尾诱导的NO产生。7.采用LCMS-IT-TOF技术,在正、负离子模式下,从复方制剂活肺通片中鉴定出33种化合物,其中黄酮类化合物最多,其次是香豆素类化合结论:1.建立LCMS-IT-TOF和GC-MS分析方法,采用色质谱联用技术,从五指毛桃中鉴定出27种化合物,包括香豆素类、黄酮类、有机酸类、多酚类、萜类、蒽醌类、生物碱类和甾醇类等多种成分,黄酮类和香豆素类化合物居多。实现了对君药五指毛桃的化学成分分析,为研究复方制剂活肺通片的药效物质基础及质量控制提供了实验数据。***通过抑制嗜中性粒细胞和巨噬细胞向损伤部位的募集,并通过促进伤口处的嗜中性粒细胞和巨噬细胞的清除,同时抑制尾部的ROS和NO的产生,在切割诱导炎症斑马鱼模型中表现出抗炎和消炎活性,为研究bg在体内抗炎机制奠定了实验基础。3.建立LCMS-IT-TOF分析方法,采用LCMS-IT-TOF法分析活肺通片的化学成分,共鉴定出33种化合物,包括黄酮类、香豆素类、萜类、生物碱、有机酸、多糖、酰胺等多种成分。其中7种化合物来自君药五指毛桃,2种化合物来源于臣药灵芝,7种化合物来源于佐药平贝母,3种化合物来源于使药甘草。实现了对复方制剂活肺通片复杂化学物质基础的定性分析,为研究复方制剂活肺通片的药效物质基础及质量控制提供了实验数据。

关键词：活肺通片五指毛桃 bg 液质联用成分分析

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bg波在6mm类晶体表面沟槽上的散射

声学学报 1982年第1期 35-50页

作者：汪承灏中国科学院声学研究所

利用表面微扰技术,把6mm类晶体表面沟槽上bg波的散射问题化成一个广义Lamb问题。这时在晶体表面不仅存在一个等效的力源分布,而且存在一个等效的电源分布。我们对金属化表面和自由表面,给出了反射的表面波和散射的体波的解析解,并讨论... 详细信息

利用表面微扰技术,把6mm类晶体表面沟槽上bg波的散射问题化成一个广义Lamb问题。这时在晶体表面不仅存在一个等效的力源分布,而且存在一个等效的电源分布。我们对金属化表面和自由表面,给出了反射的表面波和散射的体波的解析解,并讨论了它的特性。由所得结果表明,对于强机电耦合和高介电性材料,如PZT压电陶瓷,对金属化表面反射系数很大,而对自由表面则反射系数很小。

关键词：反射系数自由表面表面波波浪表面沟槽 bg 金属化 PZT 体波地震波波动方程双曲型方程微扰场晶体表面散射场弯曲表面 exp

不仅仅是美的享受——2001年度bg野生生物摄影大赛获奖作品选

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人与自然 2002年第1期 22-43页

一年一度的“bg野生生物摄影大赛是世界野生动物摄影界最高水平的竞赛，由英国《BBC野生动物杂志》和英国自然历史博物馆主办、bg集团赞助．2001年度赛事共有来自世界60多个国家的19000幅作品参赛。大赛设两个最高奖项即“2001年度bg野... 详细信息

一年一度的“bg野生生物摄影大赛是世界野生动物摄影界最高水平的竞赛，由英国《BBC野生动物杂志》和英国自然历史博物馆主办、bg集团赞助．2001年度赛事共有来自世界60多个国家的19000幅作品参赛。大赛设两个最高奖项即“2001年度bg野生生物摄影师奖”和“2001年度bg野生生物年轻摄影师奖”，这两个奖项分别被德国的托比亚斯伯纳德和比利时的罗尼·温德·埃斯特捧走。此外还设了十七个类别的各种奖项．我国奚志农的《滇金丝猴》获“态拉尔德·杜瑞濒危野生生物类”一等奖．为了让广大读者及时了解这次大赛的盛况．为了让更多的人欣赏到这些精美图片的魅力，也为了能够更强烈地唤起人们保护野和行动，本刊特约获奖归来的奚志农先生撰写了有关这次大赛的专文，同时选登了十八幅获奖作品．与大家共赏。诚如大赛评委克里斯·贝克汉姆先生所言——“这些图片给予你的不仅仅是精湛的质量，还有艺术的享受、拍摄技能的卓越和朴素简单的美。这些图片也许看起来又很残酷．因为它们所强调的是保护的意识和我们的天堂里正在消失的部分．它们唤起的是一种非同寻常的感觉——不是恐惧和惊讶，而是一种失落与羞愧．”

关键词：获奖作品奖项先生高水平赛事 BBC 竞赛年度享受 bg

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bg型滾筒式枝丫剝皮机

林业科技通讯 1975年第1期 26-27页

在批林批孔运动普及、深入、持久发展的大好形势下,黑龙江省林科院林业机械研究所研究试制成功bg型滚筒式枝丫剥皮机,初步试验,效果良好。该机由机架、电动机、传动装置(联轴节、减速器、链轮、链条)、剥皮装置(刀轴、滚筒、剥皮刀)四... 详细信息

在批林批孔运动普及、深入、持久发展的大好形势下,黑龙江省林科院林业机械研究所研究试制成功bg型滚筒式枝丫剥皮机,初步试验,效果良好。该机由机架、电动机、传动装置(联轴节、减速器、链轮、链条)、剥皮装置(刀轴、滚筒、剥皮刀)四部分组成。bg型剥皮机技术特性: 电机功率(瓩)

关键词：剥皮刀刀轴减速器调速器 bg 胶合板机械剥皮机

不仅仅是美的享受——2001年度bg野生生物摄影大赛获奖作品选

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人与自然 2002年第1期 23-43+22页

一年一度的"bg野生生物摄影大赛"是世界野生动物摄影界最高水平的竞赛,由英国《BBC野生动物杂志》和英国自然历史博物馆主办、bg集团赞助。2001年度赛事共有来自世界60多个国家的19000幅作品参赛。大赛设两个最高奖项即"2001年度bg野生... 详细信息

一年一度的"bg野生生物摄影大赛"是世界野生动物摄影界最高水平的竞赛,由英国《BBC野生动物杂志》和英国自然历史博物馆主办、bg集团赞助。2001年度赛事共有来自世界60多个国家的19000幅作品参赛。大赛设两个最高奖项即"2001年度bg野生生物摄影师奖"和"2001年度bg野生生物年轻摄影师奖",这两个奖项分别被德国的托比亚斯·伯纳德和比利时的罗尼·温德·埃斯特捧走。此外还设了十七个类别的各种奖项。我国奚志农的《滇金丝猴》获"杰拉尔德·杜瑞濒危野生生物类"一等奖。为了让广大读者及时了解这次大赛的盛况,为了让更多的人欣赏到这些精美图片的魅力,也为了能够更强烈地唤起人们保护野生生物和我们美丽家园的意识和行动,本刊特约获奖归来的奚志农先生撰写了有关这次大赛的专文,同时选登了十八幅获奖作品,与大家共赏。诚如大赛评委克里斯·贝克汉姆先生所言——"这些图片给予你的不仅仅是精湛的质量,还有艺术的享受、拍摄技能的卓越和朴素简单的美。这些图片也许看起来又很残酷,因为它们所强调的是保护的意识和我们的天堂里正在消失的部分。它们唤起的是一种非同寻常的感觉——不是恐惧和惊讶,而是一种失落与羞愧。"

关键词：获奖作品生物摄影摄影师美的享受滇金丝猴野生生物 bg 野生动物英国自然历史博物馆托比亚斯埃斯特微距镜头摄影界贝克汉姆

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校园bg特攻队(超级鱼铒计划)

初中生之友 2002年第34期 22-29页