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烟曲霉bata基因在卡泊芬净抑菌“矛盾现象”中的调控功能研究

烟曲霉batA基因在卡泊芬净抑菌“矛盾现象”中的调控功能研究

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中国菌物学会2018年学术年会

作者：曾利平仲国维南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室南京医科大学公共卫生学院卫生检验学系现代毒理学教育部重点实验室

棘白菌素类抗真菌药物对念珠菌属是杀菌剂,对曲霉属是抑菌剂,在侵袭性真菌病治疗中发挥重要作用。近年来多项体内、体外研究证实,棘白菌素类抗真菌药物对念珠菌属和曲霉属均可产生"矛盾现象",即在低药物浓度时念珠菌或曲霉被杀死或抑制... 详细信息

棘白菌素类抗真菌药物对念珠菌属是杀菌剂,对曲霉属是抑菌剂,在侵袭性真菌病治疗中发挥重要作用。近年来多项体内、体外研究证实,棘白菌素类抗真菌药物对念珠菌属和曲霉属均可产生"矛盾现象",即在低药物浓度时念珠菌或曲霉被杀死或抑制,而在高药物浓度时出现菌落生长的现象。目前,此现象的产生机制尚未阐明。本项目从根癌农杆菌诱导的烟曲霉随机突变库2000株菌中筛选到2株卡泊芬净耐药菌,对其中1株分离鉴定并命名为基因bata,有研究显示其在人中的同源基因ABCC2负责从肝细胞转运胆汁酸/胆汁盐到胆小管,另外和肿瘤细胞耐药也有关系;在芽殖酵母中的同源基因Ybt1表达蛋白定位在空泡膜上与卵磷脂转运进入空泡内有关。目前在丝状真菌中该基因的同源基因还没有被研究和鉴定。通过构建荧光蛋白标记菌株我们确定了bata-GFP是定位在菌丝细胞内的空泡上发挥功能的。通过构建基因敲除菌株和基因高表达菌株我们发现相比野生株,?bata敲除株和OEbata对卡泊芬净最小抑菌浓度MIC值没有发生明显改变,但是出现抑菌"矛盾现象"的药物浓度分别出现提前和延迟（野生株:4μg/ml;?bata:8μg/ml;OEbata:2μg/ml）。另外我们又将其分别在含有细胞壁抑制剂Congo Red和Calcofluor White,以及含有Na Cl的高渗透培养基上检测菌株的敏感性。结果发现相比野生型菌株,?bata对Congo Red,Calcofluor White和Na Cl具有轻微的抗性;OEbata对三种所测试的试剂都表现出非常明显的敏感表型。由此推测bata基因在维持烟曲霉细胞壁几丁质和葡聚糖等多糖的结构组成上起重要作用。所以下一步我们将围绕bata如何通过空泡运输影响细胞壁结构组分差异进而影响卡泊芬净抑菌"矛盾现象"来解释bata参与调控该现象的机制。

关键词：烟曲霉 bata基因空泡转运矛盾现象

来源： cnki会议评论

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