检索结果-南通市图书馆

军事医学科学院院刊 2004年第4期28卷 326-328,332页

作者：常会波刘云吴建新徐琪寿首都儿科研究所生化实验室北京100020 军事医学科学院放射医学研究所北京100850

目的 :克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因arob ,并测定其生物学活性。方法 :根据大肠杆菌中arob基因的序列设计了一对引物 ,利用PCR技术扩增得到arob基因 ,将其克隆入pGEM Teasy载体中 ,以双脱氧法进行测序 ,然后再克隆入高效原核... 详细信息

目的 :克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因arob ,并测定其生物学活性。方法 :根据大肠杆菌中arob基因的序列设计了一对引物 ,利用PCR技术扩增得到arob基因 ,将其克隆入pGEM Teasy载体中 ,以双脱氧法进行测序 ,然后再克隆入高效原核表达载体pBV2 2 0 ,对该重组子的SD序列进行调节后利用温度诱导表达 ,并测酶的生物活性。结果 :构建了arob基因的克隆和表达重组子 ,经SD序列调节后 ,arob基因获得高效表达 ,SDS PAGE图谱显示新增 38.8× 10 3 蛋白带 ,酶活性测定结果表明脱氢奎尼酸合成酶的相对酶活性为 5 .4。结论 :实现了脱氢奎尼酸合成酶基因在大肠杆菌中的高效表达 ,为构建产脱氢奎尼酸工程菌种奠定了基础。

关键词：脱氢奎尼酸合成酶 arob基因大肠杆菌基因表达

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