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amh基因对鱼类性别决定影响的研究进展

黑龙江畜牧兽医 2022年第2期 26-31页

作者：闫悦朱昊俊陶易凡徐跑强俊南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214128 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业农村部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214128

鱼类是脊椎动物中种类最多的物种,其有性生殖具有多种策略,并且具有明显的雌雄二态性。鱼类具有复杂的性别决定机制,性别决定主要受遗传因素和环境因素的影响,其中遗传因素主要指染色体上的性别决定基因,环境因素主要包括水温、溶氧、... 详细信息

鱼类是脊椎动物中种类最多的物种,其有性生殖具有多种策略,并且具有明显的雌雄二态性。鱼类具有复杂的性别决定机制,性别决定主要受遗传因素和环境因素的影响,其中遗传因素主要指染色体上的性别决定基因,环境因素主要包括水温、溶氧、光照、pH值、养殖密度及激素等。本文介绍了鱼类生长的雌雄二态性及鱼类性别决定基因,并综述了amh基因的研究进展及amh基因与其他性别决定基因的级联效应,旨在为水产养殖鱼类的单向性别控制、疾病预防及高效育种提供理论依据。

关键词：鱼类二态性性别决定性别决定基因 amh基因基因级联效应

红耳龟amh基因在温度依赖型性别决定中的功能

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大黄鱼gsdf和amh基因的克隆及表达分析

水生生物学报 2023年第11期47卷 1858-1868页

作者：陈佳文孙伟金琳惠航博雷建东胡佳暄王宗吉葛楚天浙江万里学院动物性别与发育重点研究所宁波 315100 浙江万里学院生物与环境学院宁波 315100

为研究amh基因在TSD(Temperature-dependent sex determination,温度依赖型性别决定)中的功能,文章以红耳龟Trachemys scripta为TSD动物模型,分析了amh在胚胎性腺中的精细表达特征和细胞定位;通过基因功能缺失和获得研究手段,验证了amh... 详细信息

为研究amh基因在TSD(Temperature-dependent sex determination,温度依赖型性别决定)中的功能,文章以红耳龟Trachemys scripta为TSD动物模型,分析了amh在胚胎性腺中的精细表达特征和细胞定位;通过基因功能缺失和获得研究手段,验证了amh在TSD中的具体功能.表达分析结果显示,amh基因在性腺分化启动前的第15期便已呈现产雄温度(Male-producing temperature,MPT)性腺高表达;amh蛋白主要定位在MPT性腺sertoli前体细胞上,而在各个发育时期的FPT(Female-producing temperature,产雌温度)性腺中仅检测到极其微弱的amh mRNA和蛋白表达信号.RNA干扰实验显示,敲低amh后的MPT性腺出现了雄性向雌性完全性逆转,雄性分化因子Sox9明显下调,雌性分化因子Foxl2和Cyp19a1显著上调;相反地,异位表达amh后的FPT性腺则转向睾丸方向分化,Foxl2和Cyp19a1表达被抑制,Sox9表达上升.上述研究表明,amh是启动红耳龟早期睾丸分化必需且充分的关键因子,处于TSD雄性分化分子通路上游.

关键词： amh基因温度依赖型性别决定性腺分化性逆转红耳龟

来源：博看期刊评论

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南方水产科学 2017年第6期13卷 1-13页

作者：林爱强谢仰杰徐双斌叶坤龚诗琦王志勇集美大学水产学院农业部东海海水健康养殖重点实验室福建厦门361021

该研究克隆了大黄鱼(Larimichthys crocea)gsdf(gonadal soma derived factor)和amh(anti-Müllerian hormone)基因的开放阅读框序列并对它们的表达进行分析。大黄鱼gsdf基因c DNA序列开放阅读框长为618 bp,可编码205个氨基酸,含有信号肽和TGF-β结构域。系统进化分析显示,大黄鱼Gsdf与其他鱼类Gsdf聚为一枝,而与TGF-β超家族其他成员分开。amh基因c DNA序列开放阅读框为1 563 bp,可编码520个氨基酸,含有信号肽、amh-N区域和TGF-β保守结构域。系统进化分析显示,大黄鱼amh与舌齿鲈(Dicentrarchus labrax)amh进化关系最近。荧光定量PCR表达分析显示,gsdf和amh基因主要在大黄鱼性腺表达,在精巢中的表达量显著高于卵巢(P基因都在性腺分化前开始表达,在雄鱼精巢中表达量呈现先升高后下降的趋势,在卵巢的表达量很低。此外,相比于正常雌鱼,gsdf和amh基因在伪雄鱼(遗传性雌鱼)性腺中的表达量显著上调。这些结果表明,gsdf和amh基因在大黄鱼性腺分化过程中起到重要的作用。

关键词：大黄鱼 gsdf基因 amh基因基因表达性腺分化荧光定量PCR

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绵羊amh基因的克隆、序列分析与原核表达

江苏农业学报 2013年第6期29卷 1386-1392页

作者：蒋香菊吴阳升林嘉鹏汪立芹张利古丽米热.阿不都热依木杨楠刘莉黄俊成石河子大学动物科技学院新疆石河子832000 农业部草食家禽遗传育种与繁殖重点实验室新疆乌鲁木齐830000 新疆农业大学新疆乌鲁木齐830000

旨在克隆绵羊抗苗勒管激素基因(oamh)的全长编码区序列,并对其序列进行分析。以绵羊的卵泡颗粒细胞全RNA逆转录得到的cDNA为模板,参照牛的amh cDNA序列设计兼并引物,对oamh基因的全长编码区进行T载体克隆并测序,并对其进行生物信息学分... 详细信息

旨在克隆绵羊抗苗勒管激素基因(oamh)的全长编码区序列,并对其序列进行分析。以绵羊的卵泡颗粒细胞全RNA逆转录得到的cDNA为模板,参照牛的amh cDNA序列设计兼并引物,对oamh基因的全长编码区进行T载体克隆并测序,并对其进行生物信息学分析。根据预测的编码区氨基末端260氨基酸对应的序列设计表达引物,构建原核表达载体pET15b-oamh260,转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。序列分析结果表明,获得的绵羊amh基因序列全长1 797 bp(GenBank登录号:KC986978),完整开放阅读框为1 728 bp,共编码575个氨基酸,氨基末端24个氨基酸为信号肽序列,羧基末端区域TGFβ家族保守区,全序列与牛amh的同源性为95.80%。SDS-PAGE结果显示,IPTG诱导表达的融合蛋白大小为30 000,与预期蛋白质大小一致。Western blot检测结果显示,该蛋白质为His融合蛋白。以上结果表明该试验成功克隆了绵羊amh基因的完整编码区序列,构建了原核表达载体,在大肠杆菌中成功表达出目的融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

关键词：绵羊 amh基因序列分析原核表达

黑羽番鸭amh基因多态性与产蛋及体重性状的关联分析

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中国畜牧杂志 2021年第6期57卷 106-111页

作者：葛丽岩胡志刚张慧林陈强刘小林西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 陕西省潼关安大番鸭育种场陕西潼关714300

为研究黑羽番鸭amh基因的单核苷酸多态性与产蛋及体重性状之间的关系,本实验随机采取186只笼养黑羽番鸭,采用限制性内切酶(PCR-RLFP)方法进行amh基因SNP筛选,并与产蛋和体重性状进行相关性分析。结果显示:筛选出g.1731G>A、g.2044T>C、g... 详细信息

为研究黑羽番鸭amh基因的单核苷酸多态性与产蛋及体重性状之间的关系,本实验随机采取186只笼养黑羽番鸭,采用限制性内切酶(PCR-RLFP)方法进行amh基因SNP筛选,并与产蛋和体重性状进行相关性分析。结果显示:筛选出g.1731G>A、g.2044T>C、g.3531C>T 3个位点,其中g.1731G>A的AG为优势基因型,相关性分析结果表明,g.1731G>A突变位点中AG基因型的产蛋数显著高于AA型,g.1731G>A与体重无显著相关;g.2044T>C的CC为优势基因型,CC基因型的产蛋数显著高于TT型和TC型,CC基因型的体重显著高于TT型;g.3531C>T与产蛋数和体重不相关(P>0.05)。综上可知,amh基因存在于产蛋及体重性状相关的单核苷酸多态性位点,本研究为培育优良黑羽番鸭品种提供可参考的遗传标记。

关键词：黑羽番鸭 amh基因 SNP 产蛋体重

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黑羽番鸭amh基因功能验证及多态性研究

黑羽番鸭AMH基因功能验证及多态性研究

作者：葛丽岩西北农林科技大学

学位级别：硕士

抗苗勒氏管激素（Anti-Mullerian hormone,amh）是由雄性睾丸支持细胞和雌性卵巢颗粒细胞分泌的一种仅在性腺中表达的糖蛋白,是TGFβ超家族（Transforming growth factor beta superfamily,TGFβ超家族）配体成员。在雌性动物中,amh由... 详细信息

抗苗勒氏管激素（Anti-Mullerian hormone,amh）是由雄性睾丸支持细胞和雌性卵巢颗粒细胞分泌的一种仅在性腺中表达的糖蛋白,是TGFβ超家族（Transforming growth factor beta superfamily,TGFβ超家族）配体成员。在雌性动物中,amh由卵巢颗粒细胞分泌,作用原始卵泡,防止卵巢储备过早耗尽。amh基因在哺乳动物中研究较多,在家禽方向研究甚少。本研究通过构建黑羽番鸭amh基因的真核表达载体,并将其转染到番鸭卵巢颗粒细胞中进行功能验证,对amh基因的单核苷酸多态性与产蛋量和体重数据进行关联分析,结果如下:1.首先为了探究amh在番鸭卵巢中的表达规律,本研究通过q RT-PCR（Quantitative Real-time PCR,q RT-PCR）的方法检测高低产番鸭卵巢中和不同等级卵泡中amh及其受体amhR2（Anti-Mullerian hormone receptor type 2,amhR2）的表达情况。研究发现amh/amhR2在低产番鸭卵巢中表达显著高于高产番鸭。随着卵泡的发育,amh表达量逐渐降低,amh在大白卵泡中表达量最高,在等级卵泡中时amh表达量降到最低水平。初步得出结论amh在卵泡发育过程中起抑制作用。2.本试验成功克隆了黑羽番鸭amh基因的CDS区序列,长度为1833 bp,编码610个氨基酸,是分泌蛋白,有三种二级结构,存在信号肽。构建了真核过表达载体,为深入研究amh对番鸭颗粒细胞的作用奠定了基础。3.为了验证amh在番鸭卵巢颗粒细胞中的功能,本试验用amh过表达载体转染番鸭颗粒细胞。通过荧光定量方法检测amh及其相关基因的表达情况,结果表明,amh处理组与对照组相比,amh的受体amhR2、ALK2、ALK3、ALK6表达量显著增高,FSHR的表达量无显著差异,由此证明amh可通过amhR2、ALK2、ALK3、ALK6受体在颗粒细胞中发挥作用。凋亡相关基因Caspase-3,c-Myc和Bcl-2的表达无显著差异,增殖相关基因CDK2和PCNA的表达量在amh处理组低于空白对照组,结果表明amh抑制颗粒细胞增殖。4.为研究黑羽番鸭amh基因的单核苷酸多态性与产蛋及体重性状之间的关系,本试验随机采取186只笼养黑羽番鸭,采用限制性内切酶（PCR-RLFP）的方法进行amh基因SNPs筛选,并与产蛋和体重性状进行相关性分析。最终筛选了三个位点g.1731G＞A、g.2044T＞C、g.3531C＞T,其中g.1731G＞A的AG为优势基因型,相关性分析结果表明,g.1731G＞A突变位点中AG基因型产蛋数显著高于AA型（P＜0.05）,g.1731G＞A与体重不显著相关（P＞0.05）;g.2044T＞C的CC为优势基因型,CC基因型的产蛋数显著高于TT型和TC型（P＜0.05）,CC基因型的体重显著高于TT型（P＜0.05）;g.3531C＞T与产蛋数和体重不相关（P＞0.05）。综上可知,本研究amh基因的单核苷酸多态性对产蛋有影响,g.1731G＞A和g.2044T＞C可以为培育优良番鸭品种提供可参考的遗传标记。综上所述,本试验研究了amh在高低产番鸭中的表达规律和不同等级卵泡中的表达规律;克隆黑羽番鸭amh基因,成功构建amh过表达载体。在细胞水平上对amh进行功能验证,对amh基因的多态性与生产性能进行关联分析。本研究揭示了amh在番鸭颗粒细胞中的作用,为进一步研究提供理论基础,为培育优质番鸭品种,提供可参考的遗传标记。

关键词： amh基因黑羽番鸭卵巢颗粒细胞 SNP 关联分析

amh基因第二外显子多态性与京海黄鸡繁殖性能的关联性分析

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AMH基因第二外显子多态性与京海黄鸡繁殖性能的关联性分析

江苏省遗传学会2019年学术研讨会

作者：吴玉麟沈曼曼张闪闪段严军张涛张跟喜王金玉扬州大学动物科学与技术学院

amh（抗苗勒管激素）是转化生长因子-β超家族成员（TGF-β）之一,在卵泡发育和性别分化中起着重要的作用。为了探讨amh基因第二外显子的多态性对京海黄鸡繁殖性能的遗传效应,本研究采用聚合酶链式反应（PCR）及DNA测序方法,检测amh基因... 详细信息

amh（抗苗勒管激素）是转化生长因子-β超家族成员（TGF-β）之一,在卵泡发育和性别分化中起着重要的作用。为了探讨amh基因第二外显子的多态性对京海黄鸡繁殖性能的遗传效应,本研究采用聚合酶链式反应（PCR）及DNA测序方法,检测amh基因在246只京海黄鸡母鸡中的多态性,并统计基因型及基因频率,分析单倍型和二倍型及其对京海黄鸡的繁殖性状的影响。结果发现在amh基因第二外显子共检测出4个SNP突变位点:g1868A＞C（AA、aa、Aa）、g1883G＞A（BB、bb、Bb）、g1987G＞A（CC、cc、Cc）、g1996A＞G（DD、dd、Dd）。其中,g1996A＞G位点突变与繁殖性状显著相关（p＜0.05）,DD基因型个体的开产日龄显著高于dd基因型个体（p＜0.05）,说明dd基因型个体开产日龄更早,且dd基因型个体在300日龄产蛋数方面明显高于DD和Dd两种基因型个体,说明dd为优势基因型。在单倍型分析中,H3型个体的300日龄产蛋数明显高于H9型个体,在300日龄体重方面H9型个体明显高于H5型个体;在二倍型分析中,H1H4和H7H7型个体的300日龄产蛋数均显著高于H1H2型个体（p＜0.05）,在300日龄体重方面,H1H2型个体明显高于H7H7型个体,在开产蛋重方面,H1H7型个体显著高于H1H4型个体。300日龄产蛋数是衡量鸡繁殖力的重要指标,因而在生产中可选留H1H4和H7H7基因型个体,本研究中g A1996G位点的杂种优势也可以在育种实践中得到应用,为京海黄鸡的分子育种提供新的理论素材。

关键词： amh基因繁殖性能京海黄鸡多态性单倍型

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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牙鲆amhr2基因的分子特征及组织表达

水产科学 2024年第4期43卷 509-519页

作者：张发扬李坤汪惟超张丹丹付晓娜刘翠张俊玲上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306 上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心上海201306

为探讨牙鲆amh受体amhR2的分子特征及其在性腺发育中的作用,采用分子克隆和生物信息学方法克隆鉴定了牙鲆amhr2基因,通过半定量PCR和实时荧光定量PCR以及化学原位杂交技术测定了amhr2基因在牙鲆不同组织中的表达谱。试验结果显示:通过... 详细信息

为探讨牙鲆amh受体amhR2的分子特征及其在性腺发育中的作用,采用分子克隆和生物信息学方法克隆鉴定了牙鲆amhr2基因,通过半定量PCR和实时荧光定量PCR以及化学原位杂交技术测定了amhr2基因在牙鲆不同组织中的表达谱。试验结果显示:通过克隆验证拼接得到的牙鲆amhr2 cDNA序列其开放阅读框长为1536 bp,编码511个氨基酸;牙鲆amhR2蛋白的近N-端含有长度为19个氨基酸(1~19位氨基酸)的信号肽结构,氨基酸序列对比发现其与狭鳞庸鲽的相似度最高,为89.96%;进化树分析得出,amhR2牙鲆在进化上与狭鳞庸鲽、大菱鲆的亲缘关系最近,进化地位相一致,说明牙鲆amhr2基因与其他物种具有一定的保守性;定量结果显示,amhr2基因主要在牙鲆卵巢与精巢中表达,且在卵巢中的表达水平显著高于精巢;原位杂交结果表明,amhr2基因主要在牙鲆支持细胞、精巢初级精母细胞以及次级精母细胞中表达,并在卵巢间质细胞、Ⅱ~Ⅴ期卵母细胞以及卵泡膜中表达。牙鲆amhR2氨基酸序列与狭鳞庸鲽亲缘关系最近,amhr2基因主要在性腺组织中表达,且在牙鲆精巢和卵巢的生殖细胞和体细胞中均有表达,可能在牙鲆的性腺发育中有重要的调控作用。

关键词：牙鲆 amhr2基因 amh基因性腺发育

山羊amh和amhR2基因多态性及其与产羔数关联分析

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