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adropin对小鼠肠道炎症的影响及其与克罗恩病临床特征的相关性研究

adropin对小鼠肠道炎症的影响及其与克罗恩病临床特征的相关性研究

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作者：谢宏钗福建医科大学

学位级别：硕士

背景:肠道免疫失衡是炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的重要发病机理,近年发现免疫平衡与能量代谢活动相关。炎症性肠病特别是克罗恩病(Crohn’s disease,CD)患者存在明显能量代谢紊乱。adropin作为能量调节因子,广泛分布... 详细信息

背景:肠道免疫失衡是炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的重要发病机理,近年发现免疫平衡与能量代谢活动相关。炎症性肠病特别是克罗恩病(Crohn’s disease,CD)患者存在明显能量代谢紊乱。adropin作为能量调节因子,广泛分布于各个组织,具有调节糖脂能量代谢平衡、抗炎作用,但adropin在炎症性肠病的作用机制尚不清楚。目的:初步探索adropin对小鼠结肠炎症的影响,及其与克罗恩病临床特征的相关性。方法:(1)24只雄性8周龄SPF级adropin杂合子小鼠(KET)随机分为4组:KET空白对照组(KET-Cont组)、KET结肠炎组(KET-coli)、adropin治疗的KET结肠炎组(KET-coli-Adr)、安慰剂治疗的KET结肠炎组(KET-coli-Plac)。12只同窝出生的雄性等龄野生型(WT)小鼠随机分为2组:WT空白对照组(WT-Cont)和WT结肠炎组(WT-coli)。饮用2%DSS溶液7天诱发小鼠结肠炎,结肠炎基础上adropin药物450mmol/g/d/只腹腔注射5天治疗。观察小鼠一般情况;HE染色评价结肠病理组织学;免疫组化检测结肠组织adropin、PGC-1α和Sirt1等阳性细胞表达;ELISA法检测血清adropin、TL-1β和TNF-α水平;蛋白免疫印迹法检测结肠组织adropin-Sirt1/PGC-1a信号通路的相关蛋白(adropin、Sirt1、PGC-1α、NF-κB)表达水平。(2)纳入60例克罗恩病患者和36例健康体检者,ELISA法检测血清adropin水平,分析血清adropin水平与克罗恩病临床参数的相关性。收集8名回结肠切除的克罗恩病患者肠管病灶和6名右半结肠切除术的结肠癌患者癌旁正常肠管的结肠组织和肠系膜脂肪组织,利用免疫荧光检测其adropin、PGC-1α和Sirt1的表达情况。结果:(1)正常小鼠,adropin在结肠肌层和粘膜层均有表达;(1)与KET-Cont组血清adropin(80.98±1.10pg/ml)比较,KET-coli组血清adropin(107.20±3.32pg/ml)水平增高(Padropin(92.68±2.61pg/ml)比较,WT-coli组的adropin(120.80±5.07pg/ml)水平也增高(Padropin水平较WT-coli组稍减少。(2)与WT-coli组比较,KET-coli组的DAI、血清IL-1β、结肠病理炎症评分均增高、结肠长度缩短(Padropin、Sirt1、PGC-1α、NF-κB表达均高于KET-Cont、WT-Cont组(Padropin:(1)克罗恩病组和健康对照组血清adropin水平差异无统计学意义,但活动期克罗恩病组血清adropin(3629.81±931.49pg/ml)明显低于缓解期组(4322.47±1194.69pg/ml),差异有统计学意义(Padropin水平与克罗恩病患者ESR、CDAI呈负相关(Padropin、Sirt1、PGC-1α表达增多(P=0.034,P=0.023,P=0.000)。(3)与结肠癌组比较,克罗恩病组肠系膜脂肪组织adropin、PGC-1α表达也增多(P=0.000,P=0.000)结论:adropin可激活Sirt1/PGC-1α通路、抑制肠道NF-κB、IL-1β、TNF-α等炎症因子释放,改善肠道炎症。adropin基因缺失可加重结肠炎小鼠的肠道炎症。

关键词： adropin基因敲除结肠炎症 adropin表达炎症性肠病克罗恩病

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