检索结果-南通市图书馆

作者：何晋重庆医科大学

学位级别：硕士

背景:乳腺癌由于其高发病率及死亡率,目前仍是研究的重点。在乳腺癌中仍需要可靠的诊断和预后指标。包含锌指和BTB/POZ结构域的蛋白家族(zbtbs)是重要的转录因子,它们在肿瘤的发生发展或者抑制肿瘤方面发挥着巨大的作用。zbtb16在人乳... 详细信息

背景:乳腺癌由于其高发病率及死亡率,目前仍是研究的重点。在乳腺癌中仍需要可靠的诊断和预后指标。包含锌指和BTB/POZ结构域的蛋白家族(zbtbs)是重要的转录因子,它们在肿瘤的发生发展或者抑制肿瘤方面发挥着巨大的作用。zbtb16在人乳腺癌中的作用和机制还有待探索。方法:应用RT-PCR,qPCR,MSP检测zbtb16在乳腺癌细胞系和组织中的表达和甲基化。用细胞增殖实验,克隆形成实验,流式细胞周期、凋亡实验,划痕实验,细胞迁移和侵袭实验来检测zbtb16在乳腺癌细胞的生物学功能。通过裸鼠体内成瘤和免疫组化来分析zbtb16对体内肿瘤发生的影响。使用Western blot,qPCR,荧光素酶报告系统和co-IP进一步研究zbtb16在乳腺癌中的机制。结果:zbtb16在乳腺癌细胞系中表达失活与其启动子CpG岛甲基化相关。恢复zbtb16的表达后,zbtb16通过抑制体内和体外的乳腺癌细胞的增殖,诱导G2/M期阻滞,促进凋亡,抑制迁移和侵袭,逆转EMT来抑制乳腺癌的增殖和转移。同时过表达的zbtb16分别与zbtb28,BCL6/zbtb27形成异二聚体,并通过上调zbtb28和拮抗BCL6发挥肿瘤抑制作用。结论:zbtb16在乳腺癌中的表达缺失是由于其启动子高甲基化造成。恢复zbtb16的表达后可抑制肿瘤发生并改善预后。同时zbtb16通过上调zbtb28和拮抗BCL6而发挥抑癌作用。而且我们的发现还支持zbtb16有可能作为乳腺癌预后的一个检测指标。

关键词： zbtb16 methylation BCL6 zbtb28 breast cancer

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zbtb16基因过表达对牛肌内前体脂肪细胞增殖与分化的影响研究

ZBTB16基因过表达对牛肌内前体脂肪细胞增殖与分化的影响研究

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作者：张萌萌南京农业大学

学位级别：硕士

在肉用动物生产中,脂肪组织的沉积和分布与肉牛生产效率及经济效益关系密切。其中肌内脂肪含量是影响牛肉品质的关键因素,对牛肉多汁性、嫩度和风味等肉品质具有重要影响,提高肌内脂肪含量是改善牛肉品质的重要途径。zbtb16基因在动物... 详细信息

在肉用动物生产中,脂肪组织的沉积和分布与肉牛生产效率及经济效益关系密切。其中肌内脂肪含量是影响牛肉品质的关键因素,对牛肉多汁性、嫩度和风味等肉品质具有重要影响,提高肌内脂肪含量是改善牛肉品质的重要途径。zbtb16基因在动物个体发育、胚胎发生、染色体重构和细胞周期调控等方面发挥着重要的作用。本研究旨在探讨zbtb16基因对牛肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响,为通过分子育种手段调控脂质沉积奠定理论基础。试验共分为以下四个部分:第一部分:本研究旨在建立西门塔尔杂交牛肌内前体脂肪细胞的体外培养体系。采集成年西门塔尔杂交牛背最长肌处肌肉组织,分离肌内脂肪组织,采用Ⅰ型胶原酶分离获得前体脂肪细胞,进行前体脂肪细胞的原代和传代培养,并对其进行生长曲线的测定、细胞形态观察、油红O染色鉴定及脂肪含量的测定,且采用实时荧光定量RT-qPCR检测脂肪细胞分化关键基因PPARγ、C/EBPα、FABP4、ATGL、ADIOQ、HSL及LPL的mRNA在牛肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达。结果显示,分离的原代前体脂肪细胞约6h开始贴壁,细胞贴壁良好,细胞形态多为小梭形或形状不一的三角形,传代后杂质减少,细胞成分单一,第5～11天细胞进入指数生长期,细胞生长曲线近似“细胞形;诱导培养第8天细胞充脂率高,油红O染色呈红色,细胞内脂肪含量显著高于未诱导组(Pzbtb16基因过表达对牛肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响。对牛肌内前体脂肪细胞进行腺病毒载体Ad-zbtb16(zbtb16过表达载体)和Ad-GFP(腺病毒空载体)转染,细胞培养24h后,进行荧光拍照并观察细胞形态。结果显示,利用病毒载体(感染复数280)转染细胞后,细胞形态正常,呈纺锤状成纤维细胞样,贴壁牢固,荧光观察转染率在90%以上。RT-qPCR检测病毒转染后第1天的Ad-zbtb16过表达效率,结果显示,Ad-zbtb16组zbtb16的mRNA极显著高于空白对照组和Ad-GFP组(Pzbtb16蛋白表达量,结果显示,Ad-zbtb16组zbtb16蛋白水平极显著高于空白对照组和Ad-GFP组(Pzbtb16基因在牛肌内前体脂肪细胞中成功过表达。使用CCK-8测定细胞增殖活性,结果显示,与空白对照组和Ad-GFP组相比,Ad-zbtb16组并无显著差异(P>0.05),表明zbtb16对牛肌内前体脂肪细胞的增殖并无显著影响。利用RT-qPCR和Western Blot方法检测细胞分化第-2、0、2、4、6、8天和成熟脂肪细胞中zbtb16基因表达量。结果显示,随着牛肌内前体脂肪细胞的分化,细胞内zbtb16基因mRNA和蛋白表达量均呈显著递增。在前体脂肪细胞诱导分化的第0天对细胞进行腺病毒转染,并于分化第8天进行油红O染色和细胞内GPDH活性的测定。结果显示,Ad-zbtb16组细胞内脂质含量极显著高于空白对照组和Ad-GFP组(Pzbtb16组细胞GPDH活性显著强于空白对照组和Ad-GFP组(Pzbtb16组PPARγ、CEBP/α、FABP4的mRNA表达量均极显著高于空白对照组和Ad-GFP组(Pzbtb16过表达对细胞增殖并无显著影响,但是能够显著促进牛肌内前体脂肪细胞的分化。第三部分:本研究旨在探究zbtb16对牛肌内前体脂肪细胞棕色化及分化相关信号通路的影响。对牛肌内前体脂肪细胞进行腺病毒载体Ad-zbtb16和Ad-GFP转染后,在诱导分化的第8天,RT-qPCR检测细胞中线粒体ND1基因的表达量,免疫荧光染色观察细胞中线粒体的变化。结果显示,Ad-zbtb16组线粒体ND1基因表达量显著高于空白对照组和Ad-GFP组(P<0.05),与免疫荧光染色结果一致。在诱导分化的第8天,RT-

关键词： zbtb16 牛肌内前体脂肪细胞分化棕色化 P44/42MAPK信号通路

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应用肿瘤数据库信息分析zbtb16在肝癌中的表达及其功能初步研究

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现代免疫学 2020年第1期40卷 16-21页

作者：于玲于敏思路迪(北京)医药科技有限公司研发部北京100176 内蒙古医科大学附属医院心内科呼和浩特010050

Zinc finger and BTB domain containing 16(zbtb16),亦称早幼粒细胞白血病锌指蛋白(promyelocytic leukemia zinc finger,PLZF),作为一种转录抑制因子在调控细胞周期、增殖、分化和凋亡等多种功能中发挥重要作用,但其在肝癌组织中的表... 详细信息

Zinc finger and BTB domain containing 16(zbtb16),亦称早幼粒细胞白血病锌指蛋白(promyelocytic leukemia zinc finger,PLZF),作为一种转录抑制因子在调控细胞周期、增殖、分化和凋亡等多种功能中发挥重要作用,但其在肝癌组织中的表达情况及调控作用仍研究得较少。本研究利用GEPIA在线对TCGA肿瘤组织数据库和GTEx正常组织数据库中369例人肝癌组织和160例人正常肝组织中zbtb16的表达进行生物信息学分析。结果发现,zbtb16在人肝癌组织中表达显著下调;实时荧光定量PCR和Western blotting发现肝癌临床样本和肝癌细胞系中zbtb16 mRNA和蛋白质水平均明显下调;GEPIA在线分析示zbtb16表达水平与肝癌患者的生存率呈正相关。利用Ad-zbtb16腺病毒在肝癌细胞系HepG2中过表达zbtb16能显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力。进一步机制研究表明,过表达zbtb16能显著抑制JAK2和STAT3的磷酸化水平。以上结果表明,提高zbtb16的表达或可作为肝癌治疗的靶点。

关键词：肝癌 zbtb16 增殖迁移侵袭

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zbtb16在乳腺癌中的表达及其生物学作用的研究

ZBTB16在乳腺癌中的表达及其生物学作用的研究

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作者：乔璐吉林大学

学位级别：硕士

目的:本研究利用公共数据库探索了乳腺癌(breast cancer,BC)患者中锌指和含BTB域16(zinc finger and BTB domain containing 16,zbtb16)的表达、预后、临床病理参数及共表达基因,以说明其预后和潜在的治疗价值。此外,通过细胞功能实验... 详细信息

目的:本研究利用公共数据库探索了乳腺癌(breast cancer,BC)患者中锌指和含BTB域16(zinc finger and BTB domain containing 16,zbtb16)的表达、预后、临床病理参数及共表达基因,以说明其预后和潜在的治疗价值。此外,通过细胞功能实验明确了zbtb16在乳腺癌进展中的生物学作用,为乳腺癌的临床诊治提供新的依据,为探索乳腺癌发生发展中的机制奠定了基础。方法:1.通过查阅文献,选取zbtb16作为目的蛋白。本研究基于公共数据库,对zbtb16进行了生物信息学分析,以调查zbtb16是否可以作为乳腺癌的预后指标。通过Oncomine数据库研究了乳腺癌中zbtb16的mRNA表达模式。使用bc-Genexminer v4.4数据库分析该基因表达水平与临床病理及分子特征的关系。使用Kaplan Meier plotter数据库确定zbtb16对乳腺癌患者的预后价值。利用cBioPortal分析鉴定与zbtb16共表达的基因。并使用Cytoscape软件中的ClueGO插件进行分析以预测其在乳腺癌中的潜在功能。2.免疫印迹实验验证zbtb16的差异表达。3.构建zbtb16过表达稳转细胞株及沉默细胞株,通过CCK8、Transwell、Annexin V-PE细胞凋亡实验分别探究了zbtb16对乳腺癌生物学增值、侵袭、迁移及凋亡能力的影响。结果:1.在本研究中,我们对zbtb16进行了全面的生物信息学分析。相比正常乳腺组织,zbtb16在乳腺癌中mRNA水平显著降低。zbtb16的表达的降低与临床病理特征密切相关,包括:>51岁、淋巴结转移、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)阴性、Her2阳性、基底细胞样乳腺癌、三阴性乳腺癌、突变型P53以及更高的Scarff-Bloom-Richardson(SBR)分级。zbtb16 mRNA下调表达与乳腺癌患者较差的总体生存率(OS)、无复发生存率(RFS)、无远处转移生存率(DMFS)及无转移复发生存率(MRFS)相关。其次,乳腺癌中zbtb16 mRNA的表达水平与溶质载体26 A3(SLC26A3)表达呈正相关。其在乳腺癌中的主要功能可能与细胞周期的调整以及有丝分裂姐妹染色单体的分离有关,推测其可能通过上述相关信号通路发挥其抑癌作用。2.免疫印迹实验显示,zbtb16在乳腺癌中的蛋白表达显著降低。3.我们成功构建了zbtb16过表达稳转和沉默细胞株,RT-PCR和免疫印迹实验分析验证zbtb16过表达和沉默效果。细胞功能实验结果表明,过表达zbtb16后,乳腺癌细胞迁移、侵袭、增殖能力明显减弱,而凋亡能力明显增强;沉默zbtb16后,乳腺癌细胞迁移、侵袭、增殖能力明显增强,而凋亡能力明显减弱。结论:1.乳腺癌中下调表达的zbtb16与不良预后及恶性进展相关。该基因可能成为能共表达SLC26A3基因的乳腺癌有价值的肿瘤生物标志物及潜在治疗靶点。1.蛋白zbtb16的表达能抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移,但促进凋亡。

关键词：乳腺癌 zbtb16 生物信息学预后生物学功能

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Transcription factor YY1 is essential for iNKT cell development

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Cellular & Molecular Immunology 2019年第6期16卷 547-556页

作者： Xijun Ou Jianxin Huo Yuhan Huang Yan-Feng Li Shengli Xu Kong-Peng Lam Immunology Group Bioprocessing Technology InstituteAgency for ScienceTechnology and ResearchSingapore 138668Singapore Department of Biology Southern University of Science and TechnologyShenzhen 518055China Department of Physiology National University of SingaporeSingapore 117599Singapore Department of Microbiology and Immunology National University of SingaporeSingapore 117599Singapore Department of Pediatrics Yong Loo Lin School of MedicineNational University of SingaporeSingapore 117599Singapore School of Biological Sciences Nanyang Technological UniversitySingaporeSingapore

Invariant natural killer T(iNKT)cells develop from CD4+CD8+double-positive(DP)thymocytes and express an invariant Vα14–Jα18 T-cell receptor(TCR)α-*** of these cells requires the prolonged survival of DP thymocytes to allow for Vα14–Jα18 gene rearrangements and strong TCR signaling to induce the expression of the iNKT lineage-specific transcription factor ***,we report that the transcription factor Yin Yang 1(YY1)is essential for iNKT cell *** lacking YY1 displayed a block in iNKT cell development at the earliest progenitor ***1-deficient thymocytes underwent normal Vα14–Jα18 gene rearrangements,but exhibited impaired cell *** of the apoptotic protein BIM failed to rescue the defect in iNKT cell *** immunoprecipitation and deep-sequencing experiments demonstrated that YY1 directly binds and activates the promoter of the Plzf ***,YY1 plays essential roles in iNKT cell development by coordinately regulating cell survival and PLZF expression.

关键词： NKT cell PLZF YY1 zbtb16

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