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临床与实验病理学杂志 2016年第12期32卷 1322-1328,1333页

作者：申发燕张声王行富郑珂陈虹陈余鹏曾赛凡福建医科大学附属第一医院病理科福州350005 厦门大学附属第一医院病理科厦门361003

目的探讨ZO-1不同功能结构域表达变化与胃癌侵袭转移的关系。方法制作模拟胃癌侵袭转移的组织芯片,并行免疫组化染色检测ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)在胃癌不同进展位点的表达。结果胃腺癌组织中ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(... 详细信息

目的探讨ZO-1不同功能结构域表达变化与胃癌侵袭转移的关系。方法制作模拟胃癌侵袭转移的组织芯片,并行免疫组化染色检测ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)在胃癌不同进展位点的表达。结果胃腺癌组织中ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)出现胞膜异位至胞质的迷离表达或不表达,并随着胃癌的侵袭,迷离表达程度加剧,当胃癌转移至淋巴结时迷离表达程度反而降低。并发现胃腺癌的迷离表达程度与组织学类型相关。结论 ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)胞膜异位至胞质的迷离表达或不表达,提示ZO-1的PDZ3、GUK、SH3结构域、α基序和zu5结构域可能参与胃癌的侵袭转移及组织学结构的维持,这些结构域异常表达可能是ZO-1参与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)或间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition,MET)发生的机制之一。

关键词：胃肿瘤 ZO-1 基序 zu5结构域组织芯片

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ZO-1不同功能片段在胃癌中表达意义的研究

ZO-1不同功能片段在胃癌中表达意义的研究

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作者：申发燕福建医科大学

学位级别：硕士

[背景和目的]胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,中国是胃癌高发区域,研究发现ZO-1是上皮细胞癌发生发展的机制之一。本科室前期的RT-PCR研究结果表明ZO-1α+ mRNA在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达量未发现明显差异,而免疫组化研... 详细信息

[背景和目的]胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,中国是胃癌高发区域,研究发现ZO-1是上皮细胞癌发生发展的机制之一。本科室前期的RT-PCR研究结果表明ZO-1α+ mRNA在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达量未发现明显差异,而免疫组化研究结果却发现ZO-1蛋白表达的定位变化参与了胃癌的进展,即ZO-1蛋白出现了胞膜异位至胞浆的迷离表达。ZO-1包含有三个PDZ结构域、一个SH3、GUK、ABR、zu5结构域和一个α基序,为了进一步探讨ZO-1不同功能片段在胃癌进展过程中的作用,我们选择了ZO-1(α-pan)(主要检测PDZ3、SH3结构域、GUK结构域和α基序)、ZO-1(α+)(主要检测α基序)、ZO-1(α-)(主要检测α基序剪切后连接位点两端的10个氨基酸残基)和ZO-1(H-300)(主要检测zu5结构域),ZO-1四种不同的功能片段进行免疫组化技术染色,从而进一步探讨ZO-1的不同功能片段的表达模式与胃癌生物学行为的相关性。 [方法]收集从2008年11月至2009年6月间福建医科大学附属第一医院手术的199例胃癌病例存档蜡块,制作6×5、6×4的组织芯片。组织芯片选取5个具有代表性的位点,即正常胃粘膜、粘膜层胃癌组织、肿瘤中心区胃癌组织、侵袭前沿区胃癌组织和淋巴结转移灶胃癌组织。应用免疫组织化学方法检测ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)、ZO-1(α-)和ZO-1(zu5)在不同位点胃癌组织中的表达模式。 [结果] 1.粘膜层胃癌组织ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)较正常胃粘膜,出现了明显的胞膜异位至胞浆的迷离表达或不表达(Pzu5)的迷离表达程度最重。 2.进展期胃癌中ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)的迷离表达程度,从粘膜层胃癌到侵袭前沿区逐渐加剧,而淋巴结转移区较侵袭前沿区降低。 3.进展期胃癌粘膜层胃癌组织ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)迷离表达水平,较早期胃癌更为加剧(Pzu5)的迷离表达水平差异最为明显。 4.在粘膜层胃癌区、肿瘤中心区、侵袭前沿区和淋巴结转移区,胃癌组织的ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)的迷离表达程度均与组织学分型相关(Pzu5)还与患者的年龄相关;在粘膜层胃癌组织中ZO-1的三个不同功能片段的表达还与年龄和浸润深度相关。 5. 199例胃癌病例的粘膜层胃癌组织ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)表达水平进行比较发现, ZO-1(α+)与ZO-1(zu5)的表达水平和ZO-1(α-pan)与ZO-1(zu5)的表达水平具有明显差异(Pzu5)表达水平进行比较发现,ZO-1(α-pan)与ZO-1(zu5)表达水平具有明显差异(Pzu5)表达水平进行比较发现, ZO-1(α+)与ZO-1(zu5)的表达水平和ZO-1(α-pan)与ZO-1(zu5)的表达水平具有明显差异(Pzu5)的表达水平不具有明显的相关性,而在粘膜层胃癌区、肿瘤中心区、侵袭前沿区和淋巴结转移区,ZO-1三个不同功能片段的相关性明显增强,粘膜层胃癌区ZO-1三个不同功能片段的相关性最强。 9. ZO-1(α-)抗体来源于荷兰猪,预实验使用多种试剂盒检测,包括即用型SP检测试剂盒(美国LabVision公司产品)、即用型快速免疫组化MaxVisionTM检测试剂盒(KIT-5010,美国LabVision公司产品)、第二代通用型二步法检测系统(pv-9000,美国GBI公司产品),通用型SP系列工作液试剂盒(SP-9000,美国Zymed公司产品),大鼠两步法(非生物素)检测试剂盒(pv-6004,美国GBI公司产品),全自动多功能组织病理检测系统(Benchmark XT)试剂盒(美国VENTANA公司)等,未找到匹配的试剂盒,故无法检测。 [结论] 1.粘膜层胃癌组织ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)较正常胃粘膜出现了胞膜异位至胞浆的迷离表达或不表达,提示ZO-1的PDZ3、GUK、SH3结构域、α基序和zu5结构域参与了胃癌的发生过程;2.进展期胃癌病例从粘膜层胃癌区至肿瘤中心区至侵袭前沿区,癌组织ZO-1(α-pan)、ZO-1(α+)和ZO-1(zu5)的迷离表达程度逐渐加

关键词：胃癌 ZO-1 TJP1 基序 zu5结构域组织芯片免疫组化

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