检索结果-南通市图书馆

Differential screening and characterization analysis of the egg envelope glycoprotein zp3 cDNAs between gynogenetic and gonochoristic crucian carp

引用

Cell Research 2001年第1期11卷 17-27页

作者： FAN LIAN CHUN, SHU TING YANG, JIAN FANG GUI (State Key laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology, Institute of Hydrobiology, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430072, China) State Key laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology Institute of Hydrobiology Chinese Academy of Sciences Wuhan.

Gynogenetic silver crucian carp, Carassius auratus gibelio, is an intriguing model system. In the present work, a systemic study has been initiated by introducing suppression subtractive hybridization technique into this model system to identify the differentially expressed genes in oocytes between gynogenetic silver crucian carp and its closely related gonochoristic color crucian carp. Five differential cDNA fragments were identified from the preliminary screening, and two of them are zp3 homologues. Moreover, the full length zp3 cDNAs were cloned from their oocyte cDNA libraries. The length of zp3 cDNAs were 1378 bp for gyno-carp and 1367 bp for gono-carp, and they can be translated into proteins with 435 amino acids. Obvious differences are not only in the composition of amino acids, but also in the number of potential O-linked oligosaccharide sites. In addition, gyno-carp zp3 amino acid sequence has an unexpected higher identity value with common carp (83.5%) than that with the closely related gono-carp (74.7%). The unique homology may be originated from the ancient hybridization. Northern blot analysis confirmed that expression of the zp3 gene occurred exclusively in the oocytes. Because O-linked oligosaccharides on zp3 have been demonstrated to play very important roles in fertilization, it is suggested that the extra O-linked glycosylation sites may be related to the unique sperm-egg recognition mechanism in gynogenesis.

关键词： Gynogenesis suppression subtractive hybridization glycoprotein zp3 oocyte maturation.

来源：

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

Specific Expression of zp3 During Mouse Oogenesis by in situ Hybridization

引用

Chinese Science Bulletin 1994年第22期39卷 1926-1930页

作者：段崇文陈大元 State Key Laboratory of Reproductive Biology Institute of Zoology. Academia Sinica Beijing 100080 PRC

The zona pellucida of murine ovum is composed of three sulfatel glycoproteins designated as zp1, zp2 and *** oogenesis these three glycoproteins are coordinately synthesized and secreted to form zona *** them zp3 has ... 详细信息

关键词： zp3 gene expression oogenesis in situ hybridization.

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Structure and Function Analysis of Canine zp3 Protein

引用

Animal Husbandry and Feed Science 2017年第2期9卷 74-79页

作者： Zhao Qintao Zhang Jianhua Ye Junhua Nanchang Police Canine Base of the Ministry of Public Security Nanehang 330100China

To further study the biological function and mechanism of zp3 in domestic canine （ CaMs lupu familiaris） , the coding sequence （CDS） of zp3 gene was searched from NCBI database using bioinformatics method, and further transformed into protein sequence via MAGE software. The primary, secondary and terti- ary structure of protein was predicted with ExPASy, BLAST and DNA Star bioinformatics online software and program; the evolution and selected sites of zp3 pro- tein extracted from 11 species were analyzed using PAML software; the conservation of zp3 protein gene was analyzed with Predictprotein and Weblogo program; the tertiary structure of protein was edited by Python and PyMOL. The results showed that canine zp3 gene encoded 426 amino acids, and the encoding product was a hydrophilic transmembrane protein with signal peptide; the 1 -23ra amino acids were signal peptide areas, and transmembrane domain distributed in the （x-helix area of the 386th -408th amino acids; four loci were affected by phosphorylation, and these phosphorylation sites might be associated with signal transduction ; there were nine protein binding sites on zp domain; a high variation region was found in 325 -385 section of zp3, and most of phosphorylation and selected amino acid sites were distributed in this area. This indicated that the area had experienced rapid evolution, suggesting that zp domain and the high variation area might be in- volved in interaction of sperm and egg.

关键词： Canine zp3 Bioinformatics Structure prediction Biological function

来源：

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

卵透明带zp3的研究及其应用

引用

动物学杂志 2004年第1期39卷 122-126页

作者：徐丽彭景楩中国科学院动物研究所生殖生物学国家重点实验室北京100080

卵透明带蛋白围绕在卵母细胞外 ,在受精过程中起着重要作用。zp3蛋白是卵透明带蛋白家族中的重要成员 ,在功能上 ,zp3作为初级精子受体 ,起始精卵结合和顶体反应。由于zp3在受精中的重要作用 ,它成为免疫避孕的有效靶点。zp3蛋白疫苗和... 详细信息

卵透明带蛋白围绕在卵母细胞外 ,在受精过程中起着重要作用。zp3蛋白是卵透明带蛋白家族中的重要成员 ,在功能上 ,zp3作为初级精子受体 ,起始精卵结合和顶体反应。由于zp3在受精中的重要作用 ,它成为免疫避孕的有效靶点。zp3蛋白疫苗和DNA疫苗可以诱导机体产生较强的免疫反应 ,导致生育降低 ,同时带来一定程度的副作用。

关键词：卵透明带免疫避孕 DNA疫苗 zp3 受精过程

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

补肾中药对免疫性不孕症相关基因zp3 mRNA表达的影响

引用

中国妇幼保健 2009年第29期24卷 4151-4153页

作者：郭焱李丽李春莉长春中医药大学基础医学院吉林长春130117 吉林省人民医院

目的:观察补肾中药对免疫性不孕症相关基因zp3 mRNA表达的影响。方法:采用主动免疫法制作免疫性不孕小鼠模型,提取卵巢细胞总RNA,采用RT-PCR技术,检测药物对卵巢细胞zp3 mRNA的影响。结果:补肾中药可明显下调免疫性不孕小鼠卵巢细胞zp3 ... 详细信息

目的:观察补肾中药对免疫性不孕症相关基因zp3 mRNA表达的影响。方法:采用主动免疫法制作免疫性不孕小鼠模型,提取卵巢细胞总RNA,采用RT-PCR技术,检测药物对卵巢细胞zp3 mRNA的影响。结果:补肾中药可明显下调免疫性不孕小鼠卵巢细胞zp3 mRNA的水平(Pzp3 mRNA表达,从而发挥治疗作用。

关键词：补肾中药免疫性不孕症 zp3 mRNA

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

萍乡红鲫zp3蛋白组织差异性表达及其在卵母细胞中免疫荧光定位

萍乡红鲫ZP3蛋白组织差异性表达及其在卵母细胞中免疫荧光定位

引用

作者：史建伍南昌大学

学位级别：硕士

萍乡红鲫(Pingxiang red-transparent crucian carp, Carassius auratus var. Pingxiangnensis)主要分布于江西省萍乡地区,是三倍体野生鲫鱼的一种突变种。因其通体呈肉红色、透明而得名肉红鲫,是一种集食用和观赏价值于一体的鲫鱼品种,... 详细信息

萍乡红鲫(Pingxiang red-transparent crucian carp, Carassius auratus var. Pingxiangnensis)主要分布于江西省萍乡地区,是三倍体野生鲫鱼的一种突变种。因其通体呈肉红色、透明而得名肉红鲫,是一种集食用和观赏价值于一体的鲫鱼品种,在2008年被国家水产原良种委员会审定为新的养殖品种-萍乡红鲫。萍乡红鲫可以行雌核发育和两性生殖两种生殖方式。本论文主要包括以下三部分：一、利用RACE-PCR技术克隆得到萍乡红鲫zp3基因cDNA全长序列,该序列全长1385bp,有一个1308bp的完整开放阅读框,编码435个氨基酸,经过氨基酸序列比对,121-376位氨基酸残基属于zp家族domain超家族结构域。二、利用荧光定量PCR的方法检测了zp3基因在萍乡红鲫卵巢、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、脑等组织中的差异性表达,相对定量分析结果显示zp3基因在肝脏中表达量最低,在卵巢组织中的表达量显著多于其他五个组织,约是肝脏中的26656倍,除卵巢组织外,zp3基因在所检测的其他五个组织中都有微量的表达。三、将纯化好的zp3蛋白作为抗原免疫白兔,制备得到了多克隆兔抗鱼zp3蛋白血清。用Elisa间接法检测了抗血清的效价。将得到的抗血清用于卵母细胞冰冻切片免疫荧光定位实验。Elisa实验结果显示：抗血清效价约为25600且抗血清的特异性良好。免疫荧光实验结果显示：在早期发育的卵母细胞中,就有少量的zp3蛋白存在,随着卵母细胞的发育,zp3蛋白的合成累积量逐渐增加。在V时相的卵母细胞中,zp3蛋白在卵母细胞细胞膜上和细胞质中的存在量达到了最大。zp3蛋白在精卵识别的过程中起到了关键作用。本研究为进一步了解萍乡红鲫zp3蛋白在受精时的具体功能,提供了一点分子生物学方面的数据。

关键词：萍乡红鲫 zp3 荧光定量PCR RACE-PCR 免疫荧光

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

萍乡红鲫卵膜糖蛋白zp3基因的克隆与表达

萍乡红鲫卵膜糖蛋白ZP3基因的克隆与表达

引用

作者：吴会芳南昌大学

学位级别：硕士

萍乡红鲫(Pingxiang red-transparent crucian carp,Carassius auratus ***)是在江西省萍乡地区分布的天然三倍体鲫突变体经人工选育后获得的遗传性状基本稳定的后代,具有两性生殖和雌核发育两种生殖方式。卵透明带(zona pellucida,zp)... 详细信息

萍乡红鲫(Pingxiang red-transparent crucian carp,Carassius auratus ***)是在江西省萍乡地区分布的天然三倍体鲫突变体经人工选育后获得的遗传性状基本稳定的后代,具有两性生殖和雌核发育两种生殖方式。卵透明带(zona pellucida,zp),是围绕在卵外周的细胞外糖蛋白基质,zp3是zp家族的成员之一。实验表明,zp3是初级精子受体,在哺乳动物中已被证实具有结合精子并引发顶体反应的功能,其O-连糖基化侧链在精子结合中起关键作用。本论文主要内容分为两部分:一、采用SMART cDNA合成和RACE-PCR技术扩增萍乡红鲫zp3基因的cDNA序列,克隆得到的cDNA序列长度为1278bp。该序列具有完整的3′端,包含终止密码子TAA,加尾信号AATAAA以及30bp的poly(A)尾巴。其中16-1230bp为zp3的部分开放阅读框,编码404个氨基酸残基。比较萍乡红鲫、银鲫、普通鲤鱼、彩鲫和普通鲫鱼zp3氨基酸序列同源性,结果表面萍乡红鲫和银鲫之间的同源性最高,提示在进化中,二者的亲缘关系可能很近;二、将萍乡红鲫zp3 cDNA核心片段克隆到表达载体pET-32a中,转化入大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,表达出zp3融合蛋白,用Ni-NTA树脂亲和层析纯化表达产物,并通过SDS聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)进行检测和鉴定,最后采用Bradford法对纯化的蛋白进行定量。结果得到较为纯化的zp3融合蛋白,其分子大小约为31KDa,浓度为3.588mg/ml。为下一步zp3抗体的制备以及进一步研究萍乡红鲫zp3在卵子发生过程中的表达特征奠定基础。同时也为从精卵识别与早期结合的角度深入研究萍乡红鲫受精过程,探索鱼类受精过程中的精卵识别机制提供有价值的基础资料,并为其繁殖、养殖指导生产提供理论依据。

关键词：萍乡红鲫 zp3 基因克隆表达

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

绵羊透明带蛋白3（zp3）基因的变异及其与海拔、产羔数的相关性研究

绵羊透明带蛋白3（ZP3）基因的变异及其与海拔、产羔数的相关性研...

引用

作者：黄华榕华中农业大学

学位级别：硕士

本研究主要是研究zp3基因的变异与海拔及产羔数的关系,探讨zp3基因在物种间的进化以及在绵羊群体间的选择类型,寻找zp3基因与高繁殖力相关的SNP位点,为绵羊的选育工作提供理论参考。选择9个不同海拔高度的绵羊群体(高原型藏羊、欧拉型... 详细信息

本研究主要是研究zp3基因的变异与海拔及产羔数的关系,探讨zp3基因在物种间的进化以及在绵羊群体间的选择类型,寻找zp3基因与高繁殖力相关的SNP位点,为绵羊的选育工作提供理论参考。选择9个不同海拔高度的绵羊群体(高原型藏羊、欧拉型藏羊、山谷型藏羊、乌珠穆沁羊、苏尼特羊、滩羊、广灵大尾羊、小尾寒羊和湖羊)作为试验材料,采用混合样测序技术检测绵羊群体内zp3基因的SNP位点,用直接测序法对其进行分型,对这些位点的基因频率、基因型频率与海拔进行关联分析;对15个物种的zp3基因进行系统发生关系、基因相似性及物种间进化分析;对9个绵羊群体内检测到的zp3基因的SNP位点进行群体受选择状况分析;收集整理158只湖羊的产羔数据,分析SNP位点基因型、连锁区单倍型及双倍型与产羔数的关系。研究结果表明:***3基因在15个物种间的正选择检验表明zp3受到强烈的正选择。模型M2a朴素贝叶斯方法(NEB)检测发现zp3基因不存在正选择位点,经验贝叶斯方法(BEB)检测发现zp3基因存在3个正选择位点(364V、371S、372T)。模型M8朴素贝叶斯方法(NEB)检测发现zp3基因存在83个正选择位点,其中有7个后验概率显著的正选择位点(344Q、364V、371S、372T、374A、399T、401L,P>0.95);经验贝叶斯方法(BEB)检测发现zp3基因存在8个正选择位点(344Q、364V、371S、372T、374A、399T、401L、402P)。这些氨基酸正选择位点大部分位于精卵特异性识别区域内。2.利用混合样测序法在绵羊zp3基因上共检测到20个SNP位点,其中10个位于内含子区域,10个位于外显子区域。g.78T>C、g.195G>A、g.2293C>T、g.7576C>T是同义突变,g.259A>C和g.7610G>A是非同义突变。3.检测9个绵羊群体zp3基因序列的差异,利用Lositan对绵羊群体zp3的SNP位点进行种内进化状况的分析,结果表明平均分化系数为0.038,说明只有3.8%的的变异是由群体间产生的,97.2%的变异是由各群体内产生的。只有g.2046G>A和g.7576C>T受到了强烈的正选择作用,其余位点处于中性选择。4.9个群体zp3基因SNP位点的等位基因频率与海拔进行关联结果表明:g.7202A>G的等位基因A与海拔显著正相关,等位基因G与海拔显著负相关;g.9438G>C的等位基因G与海拔显著正相关,等位基因C与海拔显著负相关。基因型频率与海拔进行关联分析,结果表明:g.7179G>T的GG基因型与海拔显著正相关,GT基因型与海拔极显著负相关;g.7202A>G的AA基因型与海拔显著正相关,AG基因型与海拔极显著负相关;g.9438G>C的GG基因型与海拔显著正相关,GC基因型与海拔显著负相关。5.对湖羊群体SNP基因型、3个连锁区块的单倍型及双倍型分别与湖羊第1和第2胎产羔数进行关联分析,结果表明:位点g.328G>A与第1胎产羔数显著相关(P342A>G与产羔数显著相关(P0.05)。SNP单倍型、双倍型与第一、二胎的关联结果均不显著(P>0.05)。

关键词： zp3 绵羊物种间进化种内进化海拔产羔数

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

大鼠精子zp3结合蛋白sp56缺失肽的原核表达、纯化及其抗体的制备

大鼠精子ZP3结合蛋白sp56缺失肽的原核表达、纯化及其抗体的制备

引用

作者：张晓素上海师范大学

学位级别：硕士

哺乳动物卵透明带糖蛋白zp3（zona pellucida 3）是介导精卵初级结合,诱发精子发生顶体反应的关键分子。目前已在精子中发现多种zp3 结合蛋白,其中小鼠精子蛋白sp56 被认为是小鼠zp3 的受体候选者之一。至今,小鼠sp56 的同源物只有从豚... 详细信息

哺乳动物卵透明带糖蛋白zp3（zona pellucida 3）是介导精卵初级结合,诱发精子发生顶体反应的关键分子。目前已在精子中发现多种zp3 结合蛋白,其中小鼠精子蛋白sp56 被认为是小鼠zp3 的受体候选者之一。至今,小鼠sp56 的同源物只有从豚鼠睾丸中克隆到的AM67。根据本实验室已有的研究基础,在大鼠精子中有两个转录本——sp56l 和sp56s。sp56l 编码的蛋白与小鼠sp56 与豚鼠AM67 高度同源,都含有7 个Shshi结构域,而sp56s 编码的蛋白前体则完全缺失了第三个Shshi 结构域。本研究根据sp56l 上第三个Shshi 结构域设计两条引物,以本实验室已构建的大鼠sp56l 的cDNA 载体为模板PCR 扩增出sp56-lost 片段,通过pGEX-4T-3 上的多克隆酶切位点,把两个sp56-lost 片段串联起来定向克隆到pGEX-4T-3 载体上。用IPTG 诱导原核表达,筛选后,用谷胱甘肽-琼脂糖树脂亲和纯化,得不到可溶目的蛋白。为了能在变性条件下亲和纯化出目的蛋白,换用PET-32a 载体,同样用IPTG 诱导原核表达,筛选后用Ni-NTAHis-Bind 树脂在变性条件下亲和纯化出了目的蛋白。变形条件下亲和纯化所得的目的蛋白进行SDS-PAGE 电泳后,切下目的蛋白条带,剪碎后冻干,磨成粉末和完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂混合后免疫兔子四次,免疫三次后从兔耳缘静脉取血做ELISA,得抗血清效价,再从兔颈动脉放血收集抗血清。本工作成功制备了大鼠sp56s 缺失肽（sp56-lost）的抗体,为进一步研究大鼠sp56两种变异体的功能和分布奠定了基础,同时本次实验得到的sp56s 缺失肽抗体能为以后精卵结合过程的研究提供一个很好的时空定位标记。

关键词： zp3 大鼠sp56s缺失肽抗体原核表达亲和纯化 ELISA

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

犬zp3的结构与功能分析

引用

黑龙江畜牧兽医 2016年第8期 23-26,31,286-288页

作者：赵勤涛张建华公安部南昌警犬基地南昌330100

为了进一步研究家犬（Canis lupus familiaris）zp3的生物学功能及作用机制，研究采用生物信息学的方法，从NCBI数据库中搜集犬zp3基因的编码区序列（CDS），通过MAGE软件将其转化为蛋白质序列，利用ExPASy、BLAST和DNAStar等生物信息... 详细信息

为了进一步研究家犬（Canis lupus familiaris）zp3的生物学功能及作用机制，研究采用生物信息学的方法，从NCBI数据库中搜集犬zp3基因的编码区序列（CDS），通过MAGE软件将其转化为蛋白质序列，利用ExPASy、BLAST和DNAStar等生物信息学在线软件及程序对蛋白质的一级、二级和三级结构进行预测，运用PAML软件对11个物种zp3基因进化、受到选择的位点进行分析，用Predict-protein和Weblogo分析了zp3的保守性，采用Python和PyMOL对蛋白质的三级结构进行编辑。结果表明：犬zp3基因编码426个氨基酸，编码产物是一个有信号肽的亲水跨膜蛋白，第1～23位氨基酸是信号肽区域，跨膜结构域在第386～408位氨基酸的仪螺旋区；有4个位点检测到受到磷酸化的作用，这些磷酸化位点可能与信号转导有关；在zp结构域上有9个蛋白质结合位点；在zp3的325～385区段存在1个高变异区，并且大部分的磷酸化和受选择的氨基酸位点都分布在这一区域。说明该区域经历了快速的进化，暗示zp“结构域和该高变异区可能参与了精一卵的相互作用。

关键词：犬 zp3 生物信息学结构预测生物学功能

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：