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znf582 hypermethylation promotes metastasis of nasopharyngeal carcinoma by regulating the transcription of adhesion molecules Nectin-3 and NRXN3

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Cancer Communications 2020年第12期40卷 721-737页

作者： Yin Zhao Xiao-Hong Hong Kang Li Ying-Qing Li Ying-Qin Li Shi-Wei He Pan-Pan Zhang Jun-Yan Li Qian Li Ye-Lin Liang Yang Chen Jun Ma Na Liu Yu-Pei Chen Experimental Research Department Sun Yat-sen University Cancer CenterState Key Laboratory of Oncology in South ChinaCollaborative Innovation Center of Cancer MedicineGuangdong Key Laboratory of Nasopharyngeal Carcinoma Diagnosis and TherapyGuangzhouGuangdong 510060P.R.China Center for Translational Medicine The First Affiliated HospitalSun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdong 510080P.R.China

Background:Epigenetic regulation plays an important role in the development and progression of nasopharyngeal carcinoma(NPC).However,the epigenetic mechanisms underlying NPC metastasis remains poorly *** aimed to find functional genes which regulate the metastasis of NPC and identify therapeutic targets for NPC ***:Bisulfite pyrosequencing was used to analyze zinc finger protein 582(znf582)methylation in NPC tissues and cell *** reverse transcription-polymerase chain reaction(qRT-PCR)and Western blotting were used to determine the expression of *** vitro and in vivo experiments were performed to evaluate the biological function of znf582 in ***582-targeting genes were identified by chromatin immunoprecipitation sequencing(ChIP-seq)and were confirmed by ChIP-qPCR and luciferase ***:znf582 promoter was hypermethylated in NPC,and both the mRNA and protein levels of znf582 were down-regulated in NPC tissues and cell *** restoration of znf582 inhibited NPC migration,invasion,and metastasis,while the knockdown of znf582 promoted NPC migration,invasion,and metastasis in vitro and in ***582 directly regulated the transcription and expression of adhesion molecules Nectin-3 and *** Nectin-3 and NRXN3 were identified as functional targets of znf582,and the restoration or abrogation of these genes reversed the tumor suppressor effect of znf582 in NPC ***:znf582 acts as a tumor suppressor gene in NPC by regulating the transcription and expression of adhesion molecules Nectin-3 and NRXN3,which may provide novel therapeutic targets for NPC treatment.

关键词： Metastasis Nasopharyngeal carcinoma Nectin-3 NRXN3 znf582

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znf582/PAX1甲基化在HR-HPV感染女性中的分流价值

ZNF582/PAX1甲基化在HR-HPV感染女性中的分流价值

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作者：汤余洁郑州大学

学位级别：硕士

研究背景和目的高危型人乳头状瘤病毒(High-risk human papilloma virus,HR-HPV)的持续感染被认为是导致宫颈癌的主要原因。世界卫生组织推荐HPV检测作为宫颈癌的初级筛查方法。HPV检测的高敏感性可以发现大多数宫颈高级别鳞状上皮内病... 详细信息

研究背景和目的高危型人乳头状瘤病毒(High-risk human papilloma virus,HR-HPV)的持续感染被认为是导致宫颈癌的主要原因。世界卫生组织推荐HPV检测作为宫颈癌的初级筛查方法。HPV检测的高敏感性可以发现大多数宫颈高级别鳞状上皮内病变或更严重的病变(High-grade squamous intraepithelial lesions or worse,HSIL+),但同时,HPV检测的低特异性也会导致不必要的恐慌。因此,为HPV检测阳性的女性选择合适的分流方法至关重要。细胞学检测是目前临床上常见的HR-HPV阳性的分流方法,具有较高的特异性,但细胞学检测依靠人工阅片,其结果常受到细胞样本量和细胞学家能力的限制。此外,HPV16/18感染的女性存在宫颈上皮内瘤变 3 级(Cervical intraepithelial neoplasia grade 3,CIN3)和隐匿性宫颈癌的风险最高,因此即使细胞学结果为阴性,也应立即进行阴道镜检查和活检,目前尚没有合适的分流方法,最终导致了较高的阴道镜转诊需求。然而,阴道镜引导下活检的准确性也常常受到阴道镜医师技术水平以及宫颈转化区类型的限制。绝经后女性或是伴有宫颈Ⅲ型转化区(Type Ⅲ of cervical transformation zone,TZ Ⅲ)HR-HPV感染的女性,因宫颈萎缩或病变隐匿,常常面临漏诊的问题。面对目前宫颈癌筛查工作中的难题,基因甲基化检测的出现带来了新的希望。目前,已有许多研究证明了基因甲基化与宫颈癌之间的密切联系,并鉴定出多个有潜力的候选基因,例如锌指蛋白582(Zinc finger 582,znf582),配对盒子1(Paired box 1,PAX1),红细胞膜蛋白配体4.1样3(Erythrocyte-membrane protein band 4.1-like 3,EPB41L3),序列相似家族 19 成员A4 重组蛋白(Recombinant family with sequence similarity 19,member A4,FAM1 9A4),连接粘附分子 3(Junctional adhesion molecule 3,JAM3),可以作为HR-HPV感染女性分流宫颈上皮内瘤变3级及以上(Cervical intraepithelial neoplasia grade 3 or worse,CIN3+)的良好分流方法。本研究的目的是验证znf582和PAX1基因甲基化检测在HR-HPV感染人群中的分流价值,并进一步探索其在特殊人群,如高致癌性HPV16/18感染伴高阴道镜转诊需求,或者是年龄≥50岁(绝经后)或伴有TZⅢ容易漏诊的HR-HPV感染女性中的应用价值。材料和方法收集2018年到2020年至郑州大学第一附属医院就诊的424名HR-HPV感染女性的年龄、HPV类型、znf582和PAX1基因甲基化检测结果、细胞学检测结果和病理学结果的完整信息。本研究中的所有患者均采用罗氏HPV检测和液基细胞学检测(Liquid-based cytology,LBC)的常规宫颈癌筛查方法。其中znf582和PAX1基因甲基化检测是在湘雅医学实验室进行(根据湘雅医学实验室的规定,PAX1的△Cp≤9或znf582的△Cp≤11被定义为高甲基化)。所有细胞学和病理学结果均由两名细胞学专家和两名病理学家独立进行了诊断。结果1.各检测方法在HR-HPV感染女性中的分流价值znf582和PAX1甲基化检测、LBC检测和HPV16/18检测,检测CIN3+的敏感性、特异性、阳性预测值分别为70.7%/89.8%/77.3%、61.4%/90.1%/75.4%、72.1%/59.9%/47.0%和 77.9%/44.7%/41.0%。znf582和PAX1甲基化检测,检测CIN3+的特异性显著高于LBC检测(Pznf582甲基化检测和LBC检测,检测CIN3+的敏感性显著高于P4X1甲基化检测(Pznf582(7.99 和 0.672)、PAX1(7.07 和 0.544)和znf582&PAX1(5.71 和 0.664)甲基化检测。此外,znf582、PAX1和znf582&PAX1三种基因甲基化检测对检测CIN3+的特异性分别为90.4%、91.0%和85.9%,均显著高于LBC检测(64.1%)(Pznf582和znf582&PAX1甲基化检测,检测CIN3+患者的敏感性分别为76.8%和80.5%,显著高

关键词： znf582 PAX1 甲基化细胞学 HPV16/18 宫颈转化区分流

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PAX1、SOX1和znf582基因甲基化与口腔癌相关性研究

PAX1、SOX1和ZNF582基因甲基化与口腔癌相关性研究

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作者：曾长南华大学

学位级别：硕士

研究目的:探讨口腔癌组织中PAX1、SOX1和znf582基因甲基化与口腔癌发生的相关性。研究方法:收集2016年1月-2016年12月在湘潭市第一人民医院和湘潭市中心医院诊治的口腔疾病患者的组织标本,口腔癌30例,口腔粘膜良性病变10例。口腔癌患者... 详细信息

研究目的:探讨口腔癌组织中PAX1、SOX1和znf582基因甲基化与口腔癌发生的相关性。研究方法:收集2016年1月-2016年12月在湘潭市第一人民医院和湘潭市中心医院诊治的口腔疾病患者的组织标本,口腔癌30例,口腔粘膜良性病变10例。口腔癌患者均经病理形态学确诊为口腔鳞状细胞癌,随后行根治手术,样本分别选取癌区组织、癌旁组织和手术切缘。运用甲基化特异性实时定量聚合酶链反应(QMSP)方法检测样本组织中PAX1、SOX1和znf582基因甲基化表达情况,计算出甲基化水平指数(M-index)和甲基化阳性率。1.比较口腔良、恶性病变组织中PAX1、SOX1和znf582基因甲基化的差异;2.比较口腔癌患者PAX1、SOX1和znf582基因甲基化在癌区组织、癌旁组织和手术切缘之间的差异。持续追踪这40例患者的预后情况,分析口腔癌患者PAX1、SOX1和znf582基因甲基化与临床病理资料及预后的相关性。结果:1.口腔癌癌区组织中PAX1、SOX1和znf582基因甲基化水平指数和甲基化阳性率均显著高于口腔良性病变患者组织(Pznf582基因甲基化阳性率明显高于癌旁组织及切缘组织(Pznf582基因甲基化水平指数与患者的年龄、性别、部位、肿瘤大小、TNM、临床分期及病理分化程度等临床病理资料无明显统计学差异(P>0.05)。4.口腔癌组织中PAX1、SOX1和znf582基因甲基化阳性的患者术后无病生存期较甲基化阴性患者无病生存期缩短,但无明显统计学差异(P=0.115、0.684、0.493)。Cox比例风险回归多因素分析PAX1、SOX1和znf582基因甲基化与年龄、性别、组织分化程度、淋巴结转移情况、病理分期与患者预后无明显统计学差异(P>0.05)。结论:***1、SOX1和znf582基因甲基化与口腔癌的发生具有相关性;***1、SOX1和znf582基因甲基化水平癌区组织高于癌旁组织及切缘组织,PAX1、SOX1和znf582基因甲基化检测对诊断早期口腔癌有重要意义。

关键词： PAX1 SOX1 znf582 基因甲基化口腔癌

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PAX1与znf582基因甲基化对宫颈病变程度的评估及对细胞学ASC分流作用的研究

PAX1与ZNF582基因甲基化对宫颈病变程度的评估及对细胞学ASC分流...

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作者：史凡黎中国医科大学

学位级别：硕士

目的:宫颈癌是威胁全球女性健康最常见的恶性肿瘤之一,给社会和家庭带来严重的经济负担。高危型HPV的持续感染是宫颈病变及宫颈癌发生的重要因素,因此通过有效精准的宫颈癌筛查及时发现高风险人群并适时采取合适的干预治疗措施就能阻止... 详细信息

目的:宫颈癌是威胁全球女性健康最常见的恶性肿瘤之一,给社会和家庭带来严重的经济负担。高危型HPV的持续感染是宫颈病变及宫颈癌发生的重要因素,因此通过有效精准的宫颈癌筛查及时发现高风险人群并适时采取合适的干预治疗措施就能阻止宫颈癌的发生和进展。目前常用的宫颈癌筛查方法包括HPV和TCT单独或联合筛查,ASC包括ASCUS和ASC-H两类细胞学诊断,是TCT最常见的诊断,其处理亦是临床极具争议的问题,寻找有效的检测指标对ASCUS和ASC-H进行分流管理是宫颈癌领域的研究热点。本研究旨在评价PAX1与znf582基因甲基化对宫颈病变程度的评估作用及对细胞学ASC的分流价值研究方法:选取2017年6月-2019年1月就诊于中国医科大学附属盛京医院妇科门诊自愿接受宫颈癌筛查的1758名患者,对其行HPV分型及液基细胞学检测。收集细胞学检测异常者的废弃TCT标本行PAX1和znf582基因甲基化检测。筛查异常者进一步行阴道镜检查,必要时行组织病理学检查,并将病理学诊断结果作为金标准。采用SPSS22.0统计软件对实验数据进行分析。结果:1.随宫颈病变级别的升高HPV感染率和TCT阳性率总体呈上升的趋势,细胞学异常级别与宫颈病变级别之间存在等级相关性(Pznf582基因甲基化阳性率及平均甲基化水平指数中位数在各级别宫颈病变间的差异有统计学意义(均Pznf582基因平均甲基化水平指数与宫颈病变级别存在等级相关性(均Pznf582基因平均甲基化水平指数在慢性宫颈炎及CINI组与CINII+组间差异具有有统计学意义(均Pznf582基因甲基化及二者联合检测对CINII+的诊断效能,AUC分别为0.746、0.848和0.831,Cut-off值分别为4.36、1.00和1.02。***1与znf582基因甲基化阳性率及平均甲基化水平指数中位数在异常细胞学各级别间均存在显著差异(均Pznf582基因平均甲基化水平指数和二者联合检测的甲基化水平指数与异常细胞学级别存在等级相关性(均Pznf582基因平均甲基化水平指数在两组间差异存在显著差异(P=0.021),二者联合检测的甲基化水平指数在两组间分布不具有统计学差异(P=0.06)。8.在ASC-H中,PAX1基因平均甲基化水平指数在慢性宫颈炎及CINI组与CINII+组间的差异无统计学意义(P=0.09),znf582基因平均甲基化水平指数在两组间差异存在显著差异(P=0.002),二者联合检测的甲基化水平指数在两组间分布亦具有显著的统计学差异(P=0.008)。结论:***1与znf582基因甲基化对宫颈病变级别有一定的预测作用,有望成为有临床应用价值的宫颈癌筛查指标。***582基因甲基化对ASCUS和ASC-H人群的分流管理有一定的临床意义。***1与znf582基因甲基化联合检测对预测宫颈病变级别和诊断ASC-H人群中的宫颈高级别病变具有重要意义。

关键词：宫颈病变 ASCUS ASC-H DNA甲基化 PAX1 znf582

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宫颈腺癌znf582及SOX1基因甲基化研究及其与临床相关性分析

宫颈腺癌ZNF582及SOX1基因甲基化研究及其与临床相关性分析

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作者：赵雪蘅南华大学

学位级别：硕士

目的:通过检测znf582和SOX1在宫颈腺癌、宫颈腺体非典型增生、正常宫颈组织中甲基化表达情况,探讨其与宫颈腺癌发生、发展过程的相关性,同时收集患者相关临床资料,分析其与各临床指标的相关性,从而评估其作为宫颈腺癌临床诊疗、分期及... 详细信息

目的:通过检测znf582和SOX1在宫颈腺癌、宫颈腺体非典型增生、正常宫颈组织中甲基化表达情况,探讨其与宫颈腺癌发生、发展过程的相关性,同时收集患者相关临床资料,分析其与各临床指标的相关性,从而评估其作为宫颈腺癌临床诊疗、分期及预后判断的生物标记物的意义。方法:1.收集2013年4月-2015年4月湖南省肿瘤医院诊治的手术患者,宫颈腺癌140例,宫颈腺体非典型增生5例及正常宫颈组织30例。采用甲基化特异性PCR法检测组织中znf582和SOX1基因甲基化的检测,以探讨这两种基因甲基化与宫颈腺癌发生发展之间的关系;2.结合所研究的宫颈腺癌的临床分期,转移及手术等各项临床信息,分析宫颈腺癌znf582与SOX1基因甲基化与临床分期及预后各指标之间的相关性,探究与宫颈腺癌筛查与诊断的临床意义。结果:1.宫颈腺癌组中znf582与SOX1的甲基化表达水平明显高于宫颈腺体非典型增生及正常宫颈组(Pznf582与SOX1的甲基化表达水平明显高于正常宫颈组织(P582的甲基化高表达与宫颈腺癌病理分化程度高具有相关性(pznf582在宫颈高分化腺癌组织中甲基化表达水平均高于中分化及低分化组织(pznf582在宫颈中分化腺癌组织中甲基化表达水平高于低分化组织(p582的甲基化表达水平与是否行术前辅助放化疗相关(p=0.04),两者之间差异具有统计学意义。在未行术前辅助放化疗组中znf582甲基化表达水平明显高于已行术前辅助放化疗组。***582与sox1的甲基化表达水平与宫颈腺癌肿瘤大小、浸润深度、tnm分期及病理类型的关系无明显统计学差异,尚不能认为znf582与sox1的高甲基化表达与宫颈腺癌肿瘤大小、浸润深度、tnm分期及病理类型相关。结论:***582及sox1两基因甲基化高表达与宫颈腺癌发生发展具有相关性;***582的甲基化高表达与宫颈腺癌病理分化程度具有相关性;***1在无淋巴结转移的组织中甲基化表达明显高于有淋巴结转移组;***582在未行术前辅助放化疗的组织中甲基化表达明显高于已行术前辅助放化疗的组织

关键词：宫颈腺癌 znf582 SOX1 甲基化甲基化特异性PCR

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znf582高甲基化通过调控黏附分子Nectin-3和NRXN3转录促进鼻咽癌转移

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癌症 2021年第2期40卷 52-68页

作者：赵银洪晓鸿李康李颖庆黎映琴何世微张磐磐李君炎李倩梁叶琳陈扬马骏柳娜陈雨沛中山大学肿瘤防治中心实验研究部华南肿瘤学国家重点实验室肿瘤医学协同创新中心广东广州510060 中山大学第一附属医院转化医学中心广东广州510080

背景与目的表观遗传学调节在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的发生和发展中发挥着重要作用。然而,目前对调控NPC转移的表观遗传学机制尚知之甚少。本研究旨在发现可调节NPC转移的功能基因,并鉴定NPC的治疗靶点。方法采用亚硫酸... 详细信息

背景与目的表观遗传学调节在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的发生和发展中发挥着重要作用。然而,目前对调控NPC转移的表观遗传学机制尚知之甚少。本研究旨在发现可调节NPC转移的功能基因,并鉴定NPC的治疗靶点。方法采用亚硫酸氢盐处理的焦磷酸测序法分析NPC组织和细胞系中锌指蛋白582(zinc finger protein 582,znf582)的甲基化状态。用实时定量逆转录多聚酶链式反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blotting检测znf582的表达。通过体外和体内实验探讨NPC中znf582的生物学功能。用染色质免疫共沉淀测序(chromatin immunoprecipitation sequencing,ChIP-seq)法筛选znf582的靶基因,用ChIP-qPCR和荧光素酶分析进行验证。结果NPC中znf582启动子发生了高甲基化,NPC组织和细胞系中znf582的mRNA和蛋白表达水平下调。在体外和体内实验中,恢复znf582可抑制NPC的迁移、侵袭和转移,而敲减znf582可促进NPC的迁移、侵袭和转移。znf582直接调节黏附分子Nectin-3和NRXN3的转录和表达。Nectin-3和NRXN3是znf582的功能靶分子,恢复或阻断这些基因可逆转znf582在NPC转移中的抑癌活性。结论znf582通过调控黏附分子Nectin-3和NRXN3的转录和表达在NPC中发挥抑癌基因活性,为NPC的治疗提供了新靶点。

关键词：转移鼻咽癌 Nectin-3 NRXN3 znf582

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血浆中znf582甲基化在结直肠癌早期诊断中的可行性研究

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东南大学学报（医学版） 2023年第2期42卷 252-256页

作者：戴彦苗彭惠平王杰夏晨静高黎明徐宏伟昆山市中医医院脾胃肝胆科江苏昆山215300

目的:探讨血浆锌指蛋白582(zinc finger protein 582,znf582)基因甲基化检测用于结直肠癌早期诊断的可行性。方法:选择2021年1月至2022年6月在昆山市中医医院就诊的结直肠癌患者78例(直肠癌组)、结直肠息肉患者62例(结直肠息肉组)为研... 详细信息

目的:探讨血浆锌指蛋白582(zinc finger protein 582,znf582)基因甲基化检测用于结直肠癌早期诊断的可行性。方法:选择2021年1月至2022年6月在昆山市中医医院就诊的结直肠癌患者78例(直肠癌组)、结直肠息肉患者62例(结直肠息肉组)为研究对象,另选83例结肠镜检查正常者作为正常对照组。采用甲基化特异性荧光定量PCR检测血浆中znf582的甲基化状态,并进行统计学分析。结果:znf582在结直肠癌组患者血浆中的甲基化水平显著高于结直肠息肉组和正常对照组(Pznf582甲基化用于诊断结直肠癌的AUC为0.879(95%CI 0.818~0.925)。znf582甲基化对结直肠息肉和结直肠癌的检测灵敏度分别为37.1%、73.1%,对结直肠病变的诊断特异性为90.4%。znf582甲基化对不同性别、分期、分化程度以及肿瘤大小的结直肠癌检测灵敏度无显著差异。结论:血浆znf582可以作为一种潜在的操作简便的、非侵入性结直肠癌早期诊断替代方案。

关键词：结直肠癌甲基化血浆 znf582 诊断

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脱落细胞用于znf582、PAX1基因甲基化检测口腔癌/癌前病变的临床应用评估

脱落细胞用于ZNF582、PAX1基因甲基化检测口腔癌/癌前病变的临床...

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2019第一届全国口腔颌面-头颈肿瘤学术大会——聚合引领、协同发展

作者：毛雅晴孙睿章文博俞光岩彭歆北京大学口腔医院

研究目的:抑癌基因甲基化程度与肿瘤发生存在一定相关性。本研究拟通过检测口腔癌/癌前病变患者的口腔脱落细胞中PAX1、znf582基因甲基化程度,验证其用于口腔鳞状细胞癌/癌前病变早期诊断或筛查的可能性。研究方法:选择2017-2019年就诊... 详细信息

研究目的:抑癌基因甲基化程度与肿瘤发生存在一定相关性。本研究拟通过检测口腔癌/癌前病变患者的口腔脱落细胞中PAX1、znf582基因甲基化程度,验证其用于口腔鳞状细胞癌/癌前病变早期诊断或筛查的可能性。研究方法:选择2017-2019年就诊于北京大学口腔医院口腔颌面外科口腔鳞状细胞癌患者93例、癌前病变/黏膜病患者27例、正常对照组104例,应用甲基化特异性PCR检测其口腔脱落细胞的甲基化指数,以先入组原发癌、正常对照组各50例绘制接受者操作特征曲线,计算最佳判定值,进而计算各组PAX1及znf582的阳性率、敏感度与特异度。

关键词：口腔鳞状细胞癌癌前病变脱落细胞甲基化 PAX1 znf582

来源： cnki会议评论

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PAX1、znf582基因甲基化与口腔鳞状细胞癌的相关性研究

PAX1、ZNF582基因甲基化与口腔鳞状细胞癌的相关性研究

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2019第一届全国口腔颌面-头颈肿瘤学术大会——聚合引领、协同发展

作者：孙睿章文博俞光岩彭歆北京大学口腔医院

研究目的:研究表明基因甲基化与癌症的发生发展有密切关系。本研究拟探讨基因甲基化程度与口腔鳞状细胞癌的易感因素、肿瘤大小、淋巴结转移、生物学行为的相关性。研究方法:选择2017-2019年就诊于北京大学口腔医院口腔颌面外科口腔鳞... 详细信息

研究目的:研究表明基因甲基化与癌症的发生发展有密切关系。本研究拟探讨基因甲基化程度与口腔鳞状细胞癌的易感因素、肿瘤大小、淋巴结转移、生物学行为的相关性。研究方法:选择2017-2019年就诊于北京大学口腔医院口腔颌面外科口腔鳞状细胞癌患者108例,应用甲基化特异性PCR检测鳞癌组织中PAX1、znf582的甲基化指数,通过t检验对不同组别进行对比,通过Spearman相关性分析计算各因素相关性系数r。

关键词：口腔鳞状细胞癌甲基化分子标志物 PAX1 znf582

来源： cnki会议评论

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