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辽宁新品系绒山羊zfx、ZFY基因片段的进化研究与性别鉴定

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畜牧兽医学报 2006年第6期37卷 530-536页

作者：金梅傅忠扬栾媛媛高文波王薇辽宁师范大学生命科学学院大连116029

根据摩弗伦羊(Mouflon)和人(Human)的zfx、ZFY基因序列以及相关文献设计引物,以雌雄辽宁新品系绒山羊的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增并克隆其zfx、ZFY基因第11号外显子的部分片段,进行序列测序。结果用NCBI的BLAST,生物软件***、Mega... 详细信息

根据摩弗伦羊(Mouflon)和人(Human)的zfx、ZFY基因序列以及相关文献设计引物,以雌雄辽宁新品系绒山羊的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增并克隆其zfx、ZFY基因第11号外显子的部分片段,进行序列测序。结果用NCBI的BLAST,生物软件***、Mega、***、DNAClub等进行分析。对辽宁新品系绒山羊(New-breeding cashmere goat)、藏系绵羊(Tibetan sheep)、摩弗伦羊(Mouflon)、马(Horse)、山狗(Coyote)、猪(Pig)、鲸(Whale)、人(Human)和牛(Cow)的zfx、ZFY基因的外显子同源性进行序列对比分析。用N-J方法构建分子系统树。分析结果表明:zfx、ZFY基因两者核苷酸同源性达92%,推导的氨基酸同源性为95%。经分析可知,辽宁新品系绒山羊与摩弗伦羊亲缘关系最近,与其他物种的亲缘关系较远。利用限制性内切酶AvaII对辽宁新品系绒山羊zfx、ZFY基因的PCR产物进行酶切,确定AvaII为zfx基因上的特异酶切位点,以此对辽宁新品系绒山羊性别进行鉴定。

关键词：辽宁新品系绒山羊 zfx ZFY 序列比对进化分析性别鉴定

Sox and zfx genes in giant panda

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Science China(Life Sciences) 1998年第6期41卷 623-627页

作者：周荣家程汉华余其兴张亚平 Wuhan University China

By using PCR cloning techniques, the DNA sequences of the HMG box regions of six Sox genes ( pSox ) and the zinc finger domains of two zfx genes ( pzfx ) in the giant panda were identified. The giant panda Sox genes fell into two subfamilies, SOX S1 and SOX S2. The pSox and pzfx genes of the giant panda were highly homologous to the corresponding genes in mammals and revealed close substitution rates to those in the primates.

关键词： giant panda SRY box zfx genes.

奶牛zfx,ZFY基因片段的克隆、测序及PCR对奶牛性别鉴定灵敏度研究

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生物工程学报 1995年第1期11卷 81-84页

作者：徐亚欧龚荣慈唐榕毛裕民西南民族学院畜牧兽医系成都610041 复旦大学遗传所上海200433

奶牛胚胎的性别鉴定是多年来奶牛业研究和探索的问题。尤其在体外授精,胚胎分割冷冻,保存及胚胎移植一系列生物科学高技术发展和应用的今天,这一问题的解决显得更加重要和迫切。用分子杂交的方法也可对胚胎进行早期性别鉴定,但这一方法... 详细信息

奶牛胚胎的性别鉴定是多年来奶牛业研究和探索的问题。尤其在体外授精,胚胎分割冷冻,保存及胚胎移植一系列生物科学高技术发展和应用的今天,这一问题的解决显得更加重要和迫切。用分子杂交的方法也可对胚胎进行早期性别鉴定,但这一方法必须要有大量的样品DNA,而且所需时间长。

关键词：奶牛 zfx ZFY 基因性别鉴定聚合酶链反应

PCR扩增ZFY、zfx序列鉴定奶牛性别的灵敏度研究

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中国兽医学报 1997年第3期17卷 234-237页

作者：龚荣慈徐亚欧唐榕毛裕民西南民族学院牧医系复旦大学遗传研究所

从克隆、测序所得奶牛ＺＦＹ、ＺＦＸ序列中设计１对高特异性引物（或探针），即分别特异于牛ＺＦＹ、ＺＦＸ的ＺＦ３、ＺＦ４，与克隆时使用的引物ＺＦ２搭配成ＺＦ２、ＺＦ３和ＺＦ２、ＺＦ４。利用这２对引物和ＺＦ１、ＺＦ２对奶牛... 详细信息

从克隆、测序所得奶牛ＺＦＹ、ＺＦＸ序列中设计１对高特异性引物（或探针），即分别特异于牛ＺＦＹ、ＺＦＸ的ＺＦ３、ＺＦ４，与克隆时使用的引物ＺＦ２搭配成ＺＦ２、ＺＦ３和ＺＦ２、ＺＦ４。利用这２对引物和ＺＦ１、ＺＦ２对奶牛基因组ＤＮＡ进行ＮｅｓｔＰＣＲ来判断性别，结果达到用超微量（８ｐｇ）ＤＮＡ，即可检出ＺＦＹ、ＺＦＸ序列而判定雌雄的灵敏度；用非同位素标记试剂盒（ＤＩＧ－Ｓｙｓｔｅｍ）标记ＺＦ３、ＺＦ４作为探针，对ＺＦ１、ＺＦ２扩增产物点杂交来判断性别。

关键词：牛性别鉴定 PCR ZFY zfx

zfx在肝内胆管癌中表达水平的临床意义及与其生物学功能的关系

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ZFX在肝内胆管癌中表达水平的临床意义及与其生物学功能的关系

作者：林群安徽医科大学

学位级别：硕士

目的研究X染色体耦联锌指蛋白(zinc-finger protein x-linked,zfx)在肝内胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,并探讨其对肝内胆管癌(Intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)预后的影响。体外细胞实验si RNA沉默人肝内胆管癌HCCC... 详细信息

目的研究X染色体耦联锌指蛋白(zinc-finger protein x-linked,zfx)在肝内胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,并探讨其对肝内胆管癌(Intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)预后的影响。体外细胞实验si RNA沉默人肝内胆管癌HCCC-9810细胞中zfx基因的表达,观察对HCCC-9810细胞凋亡、迁移的影响,以期为肝内胆管癌的提供新的分子治疗。方法第一部分回顾性收集安徽医科大学第一附属医院院肝胆胰外科2012年2月至2017年2月行手术治疗且临床病历资料完整肝内胆管癌患者的组织蜡块,共选取60例肝内胆管癌肿瘤组织、50例邻近的癌旁正常胆管组织以及15例肝内胆管结石的胆管组织标本。以癌组织为实验组,癌旁组及结石组为对照组,通过免疫组织化学法(PV-9001二步法)检测各组zfx的表达情况。探讨zfx在癌组织中的表达(高表达组和低表达组)与临床病理特点之间的关系。应用Kaplan-Meier法绘制两组术后总体生存曲线,并用Cox回归分析模型确定ICC患者预后的独立影响因素。第二部分体外培养人肝内胆管癌HCCC-9810细胞,分别用含zfx目的基因的si RNA(zfx-si RNA)和无义序列的si RNA(NC-si RNA)转染细胞,将实验分zfx-si RNA组、NC-si RNA组和空白对照Cell组三组,各组细胞培养72 h后,用Western blot检测细胞中zfx基因蛋白水平的变化,最后用流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验检查细胞迁移能力。结果***蛋白在肝内胆管癌组织、癌旁组织及肝内胆管结石组织中高表达率分别是73.3%、38%、26.7%,且肿瘤组织中的高表达率明显高于癌旁组织(χ2=13.914,Pzfx在血清CEA升高、肿瘤分化程度低、有淋巴结转移、TNM分期高的患者高表达率较高,且与血清CEA、肿瘤分化程度的表达差异具有统计学意义(Pzfx高表达患者总体生存率明显低于zfx低表达患者(P=0.006)。多因素Cox回归模型分析结果表明zfx表达是肝内胆管癌患者不良预后的独立影响因素(HR=2.635,95%CI=1.044.651,P=0.040)。4.体外实验zfx-si RNA转染HCCC-9810细胞株72h后,Western blot检测结果表明与NC-si RNA组(对照组)和Cell(空白对照)相比,zfx-si RNA有效降低了HCCC-9810细胞系的zfx蛋白水平的表达。5.细胞凋亡实验表明,zfx-si RNA组细胞的凋亡率高于Cell组(t=22.623,Pzfx-si RNA组细胞迁移数量明显低于Cell组和NC-si RNA组(Pzfx的表达与肝内胆管癌恶性临床病理特征相关,高表达的zfx是肝内胆管癌不良预后的独立因子。2.沉默zfx基因的表达促进肝内胆管癌HCCC-9810细胞的凋亡和抑制细胞迁移。

关键词： zfx 肝内胆管癌预后

zfx在鼻咽癌组织中的表达与临床预后间的关系

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ZFX在鼻咽癌组织中的表达与临床预后间的关系

作者：李寅苏州大学

学位级别：硕士

背景与目的：鼻咽癌是我国南方和东南亚较常见的头颈部恶性肿瘤。环境因素、基因易感性和EB病毒感染被认为是鼻咽癌发病的重要因素。大多数鼻咽癌患者早期临床症状不典型,早期诊断率低,导致临床预后较差。目前鼻咽癌的治疗手段是以放疗... 详细信息

背景与目的：鼻咽癌是我国南方和东南亚较常见的头颈部恶性肿瘤。环境因素、基因易感性和EB病毒感染被认为是鼻咽癌发病的重要因素。大多数鼻咽癌患者早期临床症状不典型,早期诊断率低,导致临床预后较差。目前鼻咽癌的治疗手段是以放疗为主的综合治疗,以减少肿瘤的局部复发,提高生存率。目前TNM分期作为主要的鼻咽癌疾病的主要评判指标指导临床治疗。然而,对于病理分期相同,治疗方法相同的鼻咽癌患者,个体预后生存率相差较大,在鼻咽癌的诊治中寻找特异性更高的诊断与预后评判指标显得尤为重要。X染色体耦联锌指蛋白是一类锌指蛋白类的转录因子,zfx(英文)基因位于X染色体上,因其与ZFY的高度同源而被发现,其含有13个C2H2的锌指结构。zfx基因被证实与哺乳动物的性别决定有关,同时在胚胎干细胞的自我更新中有着重要作用。近些年,相关研究发现zfx参与多种恶性肿瘤的发生发展,沉默zfx基因能够显著抑制肿瘤细胞的增殖和迁移。研究zfx有望成为新的肿瘤靶向治疗的方向。有学者通过免疫组化染色和临床资料的随访证实zfx参与结肠癌及其他头颈肿瘤的发病,并且能够作为有效的临床预后参考指标。目前,并无相关zfx在鼻咽癌作用的研究。我们通过检测鼻咽癌组织中zfx的表达情况,结合患者临床相关病理参数和临床预后分析,探讨zfx在鼻咽癌中的诊断价值与临床意义。同时,上皮间质转换被证实参与鼻咽癌发病机制,而E钙黏蛋白的减少被视为EMT的标志,我们同时检测了鼻咽癌患者中E钙黏蛋白的表达,并分析其与zfx表达间的关系。方法：1.收集125例鼻咽癌病理标本,均来自上海市第六人民医院耳鼻咽喉喉科2003年至2013年诊治的鼻咽癌住院病例。2.通过Real-time PCR、Western-blot检测30对鼻咽癌组织及正常组织中zfx和E钙黏蛋白的表达情况,免疫组织化学法(SP法)检测125例实验组及40例对照组中zfx和E钙黏蛋白的表达情况,据评分结果将其分为高表达和低表达两组。3.结合患者的临床及预后资料,用SPSS 19.0软件对所有数据进行分析。应用Spearman相关性分析zfx和E钙黏蛋白之间表达的关联性;应用Kaplan-Meier曲线对zfx的表达与鼻咽癌患者的总生存率、无瘤生存率、无复发生存率、无转移生存率的关系进行分析,log-rank检验分析生存曲线的差异;以Cox模型进行多因素生存分析。探讨zfx与患者临床病理特征之间的关系。Pzfx mRNA在鼻咽癌组织中的表达显著高于正常组织(0.18±0.09 vs 0.13±0.03,Pzfx在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常组织(zfx:2.76±0.24 vs 1.34±0.10,Pzfx高表达,而E钙黏蛋白22.4%高表达(28/125), (Pzfx和E钙黏蛋白两者表达两两之间呈高度负相关(r＝-0.262,P＝0.003);***的表达水平与患者的淋巴结转移情况(P=0.002)、TNM分期显著有关(Pzfx高表达的患者较低表达的鼻咽癌患者有着显著更低的总体生存率、无进展生存率、无复发生存率和无远处转移生存率(P=0.03,P=0.01,P=0.04和P=0.03)。单因素分析指出zfx的表达情况、年龄、淋巴转移情况、TNM分期均与鼻咽癌患者的整体生存率显著相关(P＝0.035,P=0.003,P=0.034和P=0.027),多因素分析指出只有zfx的表达情况、年龄和TNM分期能够作为鼻咽癌患者整体生存率的独立预测因素。(P=0.046,P=0.021和P=0.029).结论：1.在鼻咽癌组织中,zfx表达增高,E钙黏蛋白表达减低,两者参与了鼻咽癌的发生发展;***的表达水平能够作为判断鼻咽癌淋巴结转移情况的预测指标;同时zfx的表达能够独立作为评价鼻咽癌患者临床预后的参考指标;***在鼻咽癌组织中过表达可能通过激活下游信号通路并下调E钙黏蛋白的表达,影响肿瘤细胞的侵袭转移能力。

关键词：鼻咽癌 zfx E钙黏蛋白 EMT 临床预后

犬zfx/Zfy基因干扰载体构建及性控效果的观察

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犬Zfx/Zfy基因干扰载体构建及性控效果的观察

作者：纪俊明石河子大学

学位级别：硕士

动物性别控制技术的相关研究早在多年前就已经开始。目前国际上家畜性别控制技术方法主要有三种:(1)X精子与Y精子的分离方法。(2)胚胎的性别鉴定方法。(3)控制家畜受精环境方法。尽管家畜性别控制的方法很多,但由于影响因素较多很难找... 详细信息

动物性别控制技术的相关研究早在多年前就已经开始。目前国际上家畜性别控制技术方法主要有三种:(1)X精子与Y精子的分离方法。(2)胚胎的性别鉴定方法。(3)控制家畜受精环境方法。尽管家畜性别控制的方法很多,但由于影响因素较多很难找到合适的即经济又方便的性别控制方法,在生产上推广应用。如今,随着科学技术水平的发展,以及对细胞遗传学、分子生物学等理论的深入研究,从基因水平研究控制性别已经成为一种新的研究方向,同时也使性别控制在生产中应用推广成为了一种可能。性别控制技术中的性控精液已经广泛应用于奶牛、猪等家畜的生产,而RNA干扰技术在新型的养犬业中还无人研究。RNA干扰是一种转录后的基因沉默现象且已被证实和广泛应用。通过体外人工合成或体内产dsRNA在细胞内特异性地降解其同源的m RNA,使得相应的基因沉默,实现阻止目标基因表达的目的。zfx/Zfy基因均属于ZFY(zinc finger-Y)基因家族,zfx编码的蛋白作为转录因子,在精子形成过程中具有一些功能并与精子的发生有关。本研究拟在前期研究的基础上,构建出犬的zfx、Zfy基因干扰的载体同时进行犬生精细胞、支持细胞体外培养,将干扰载体转入犬生精细胞,利用实时定量PCR检测zfx、Zfy基因的表达情况,体外验证RNA干扰载体的沉默效应,筛选出犬体外有效的zfx、Zfy基因的RNA干扰载体,再利用犬体外Zfy基因沉默效应有效的RNA干扰载体对犬进行zfx、Zfy基因体内干扰试验,最后统计其后代性别比例,以此达到研究人为控制犬性别的目的。具体研究结果如下:1.犬zfx\Zfy基因mRNA序列(***05641207\***964866),按照RNAi设计原则,针对该基因的编码区各设计并合成3对shRNA干扰片段。以pLL3.7慢病毒骨架质粒作为载体,成功地构建了6个重组表达载体pLL3.7 xa-xc\pLL3.7ya-yc,经测序验证,成功构建了表达载体。2.将构建好的6个犬zfx\Zfy基因shRNA重组质粒表达载体进行体外RNAi试验。初步筛选出细胞水平上对zfx基因干扰效果较好的表达质粒载体pLL3.7-xa,其使zfx基因表达水平下降了98.7%,与对照组相比差异极显著(Pzfx基因shRNA重组表达载体进行犬体内RNAi试验。雄犬睾丸注射重组质粒表达载体pLL3.7-xa,间隔10d注射一次,连续注射3次。对公犬进行最后一次注射4d后与饲养的母犬交配。1)第一次动物体内干扰实验,采取同期发情与人工授精方案,结果如下:实验组受胎率为25%(2/8),共产子6只,雌性比例为83.33%(5/6);对照组受胎率为62.5%(5/8),共产子23只,雌性比例为56.52%(13/23)。实验组后代雌性性别比例与对照组差异极显著(P<0.01)。实验结果后代性别比例出现了反向偏移,雌性比例明显升高。为了确定结果的准确性,我们再一次进行了动物体内干扰实验。2)第二次动物体内干扰实验,由于第一次动物实验受胎率下降,因此在第二年对6只母犬采取自然交配的方法进行试验。结果如下:实验组受胎率为66.67%(4/6),共计产子16只,雌性率为75%(12/16)。实验结果后代性别仍然出现了反向偏移,雌性后代率差异极显著(P<0.01)。但是受胎率与对照组无显著差异。

关键词： RNAi zfx Zfy 工作犬生精细胞性别控制

锌指蛋白zfx在慢性髓细胞白血病干/祖细胞中的作用

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锌指蛋白ZFX在慢性髓细胞白血病干/祖细胞中的作用

作者：王禹苏州大学

学位级别：硕士

目的:研究zfx(Zinc finger protein,X-linked)在慢性髓细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)干/祖细胞中的功能并初探其作用机制。方法:(1)通过Q-RT-PCR和western blot检测健康供体和CML患者细胞中zfx的表达水平;(2)研究zfx沉默对CML患者CD34+细胞集落生成(CFC)能力的影响;(3)筛选体外对伊马替尼(Imatinib mesylate,IM)耐受的患者来源的CD34+细胞,研究沉默zfx对这些细胞IM反应性的影响;使用Annexin V/7-AAD法研究zfx沉默对K562细胞受IM诱发的细胞凋亡的影响;(4)microarray筛选CML患者CD34+细胞中受zfx表达影响的差异表达基因,并进行Q-RT-PCR验证,采用染色质免疫共沉淀(ChIP)和双荧光素酶报告基因检测(Luciferase assay)等方法研究zfx对WNT3表达的调控;(5)研究WNT3沉默对K562细胞生长、CFC和IM敏感性的影响;(6)利用慢病毒在敲低zfx表达的K562细胞中过表达WNT3,研究过表达WNT3能否“挽救”zfx沉默诱发的表型;(7)Q-RT-PCR 和 western blot 检测 CML 细胞中敲减 zfx 对WNT3/β-catenin信号通路相关分子的影响。结果:(1)zfx在CML患者CD34+细胞中较对照细胞显著高表达,zfx表达随CML的疾病进程而增高;(2)zfx沉默显著抑制CML患者CD34+细胞(包括IM耐受细胞)的集落生成能力,zfx沉默显著增强IM诱发K562细胞凋亡的能力;(3)WNT3是zfx的靶基因,WNT3在CML患者CD34+细胞中表达较对照细胞显著增高;(4)沉默WNT3表达显著抑制K562细胞生长和集落生成能力,并增强细胞的IM敏感性;(5)过表达WNT3部分“挽救”zfx沉默造成的生长抑制和IM增敏;(6)沉默zfx抑制Wnt/β-catenin信号通路的相关分子。结论:zfx在CML患者CD34+细胞中异常高表达,zfx沉默抑制CML细胞生长并使这些细胞对IM增敏。zfx结合于WNT3启动子并调控其转录,也影响Wnt/β-catenin信号通路相关分子的表达。

关键词： zfx WNT3 慢性髓细胞白血病伊马替尼转录调控

肿瘤相关基因CCNY、zfx调控肺癌增殖的作用和机理研究

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肿瘤相关基因CCNY、ZFX调控肺癌增殖的作用和机理研究

作者：江妹北京市结核病胸部肿瘤研究所

学位级别：硕士

背景与目的：Cyclin Y(又叫CCNY)是近年来新发现的一种细胞周期蛋白，它在细胞周期调控及转录等过程中发挥重要作用，可能与肿瘤的发生发展密切相关。Cyclin X(又叫CCNX)是最近发现的一种Cyclin Y的同源异构体，缺失了Cyclin Y N端的1-5... 详细信息

背景与目的：Cyclin Y(又叫CCNY)是近年来新发现的一种细胞周期蛋白，它在细胞周期调控及转录等过程中发挥重要作用，可能与肿瘤的发生发展密切相关。Cyclin X(又叫CCNX)是最近发现的一种Cyclin Y的同源异构体，缺失了Cyclin Y N端的1-54位氨基酸。现有的研究已证实Cyclin Y定位于细胞膜，而Cyclin X由于缺失N端的豆蔻酰化位点而失去膜定位，主要定位于细胞核。但是两者之间的关系及其对细胞功能的影响还尚未有文献报道。本研究通过在正常细胞及肿瘤细胞中高表达CCNY、CCNX及CCNY N端突变体CCNY(G2A)基因，探讨Cyclin Y和Cyclin X对正常细胞及肺癌细胞增殖的影响。方法：利用间接免疫荧光的方法研究A549、H1299及H446等5种肺癌细胞和HEK293正常细胞内两种异构体Cyclin Y与Cyclin X的表达;并构建真核表达质粒pEGFP-N1/CCNY、 pEGFP-N1/CCNX及pEGFP-N1/CCNY(G2A)，采用脂质体转染的方法获得Cyclin Y、Cyclin X及Cyclin Y (G2A)高表达的HEK293细胞株和肺癌细胞株;荧光显微照相、细胞间接免疫荧光及Western Blot方法鉴定各细胞株中Cyclin Y、Cyclin X及Cyclin Y (G2A)的定位及表达;细胞增殖实验比较三者对正常细胞系HEK293和肺癌细胞系H446、H1299细胞增殖的影响。结果：1.通过间接免疫荧光的方法未检测到Cyclin Y和Cyclin X在正常细胞HEK293中的表达，但二者在肺癌细胞系中高表达。结果还显示在不同的肺癌细胞中两种异构体的表达不同：在A549细胞中Cyclin Y和Cyclin X均有表达，而在H446细胞中主要表达Cyclin Y，另外在H1299、95D及95C细胞中主要表达Cyclin X。在以上所有的肺癌细胞中Cyclin Y和Cyclin X均与PFTK1共定位。2.本研究构建了真核表达质粒pEGFP-N1/CCNY、 pEGFP-N1/CCNX及pEGFP-N1/CCNY(G2A)并转染至正常细胞及肺癌细胞中，建立了Cyclin Y、Cyclin X及Cyclin Y (G2A)高表达的正常细胞株和肺癌细胞株。间接免疫荧光验证Cyclin Y定位于细胞膜，Cyclin X由于缺失Cyclin Y N端的豆蔻酰化位点主要定位于细胞浆和细胞核，而Cyclin Y N端的豆蔻酰化位点突变后也失去膜定位而主要分布于细胞浆和细胞核。3.细胞增殖实验显示失去膜定位的Cyclin Y(G2A)和Cyclin X可明显促进细胞的增殖，但是膜定位的全长Cyclin Y对细胞的增殖无明显的促进作用。结论：*** Y和Cyclin X在肺癌细胞中高表达，且在不同细胞中两种异构体的表达不同，但是在本研究所用的全部肺癌细胞中Cyclin Y和Cyclin X与PFTK1共定位。提示Cyclin Y和Cyclin X在肺癌发展过程中可能发挥不同的功能。2.失去膜定位的Cyclin Y(G2A)和Cyclin X可明显促进正常细胞及肿瘤细胞的增殖。表明胞浆定位的Cyclin X可能是Cyclin Y发挥功能的形式，而膜定位的CyclinY可能不直接参与细胞周期的调控。3.深入研究CyclinY、Cyclin X与PFTK1的关系不仅有助于揭示肿瘤的发生机制，并可为肿瘤的防治提供一个新的视点。目的：转录因子X染色体偶联锌指蛋白（Zinc finger protein, X-linked）是锌指蛋白超家族中的一员，其编码基因zfx位于哺乳动物X染色体上。现有的研究表明，zfx在胚胎发育、细胞自我更新等生命过程中发挥着重要的作用。但是zfx在肺癌发生发展中的功能尚不清楚。方法：运用Real-time PCR技术检测zfx基因mRNA在8种肺癌细胞系和一种胚胎肺上皮细胞系中的表达水平;应用RNAi技术构建zfx基因沉默细胞株，研究zfx基因沉默后对非小细胞肺癌细胞系95D的增殖能力及细胞周期分布的影响;另外，外科手术获取49例NSCLC组织及配对肺癌旁组织，运用Real-time PCR技术检测NSCLC组织及相应癌旁组织中zfx基因mRNA的表达。结果：zfx基因mRNA在肺癌细胞系及肺肿瘤组织中高表达;在95D细胞中，zfx基因沉默后不但抑制了肺癌细胞的增殖能力，而且使G0/G1期细胞明显增加;癌组织中zfx的表达量/癌旁组织中zfx的表达量（T/N）与肿瘤是否淋巴结转移具有统计学上的差异。结论：

关键词： Cyclin Y Cyclin X PFTK1 亚细胞定位肺癌 zfx 细胞增殖细胞周期阻滞非小细胞肺癌 shRNA