检索结果-南通市图书馆

作者：张成才吉林大学

学位级别：硕士

在我国，人们的生活水平不断提高，结肠癌的发病率却在逐年上升，结肠癌的死亡率更是排在肿瘤死亡的第四位，对人们的健康产生巨大的威胁。近年来有关结肠肿瘤动物模型与分子病因学的研究正成为热点之一。ywhaz属于14-3-3基因家族，其... 详细信息

在我国，人们的生活水平不断提高，结肠癌的发病率却在逐年上升，结肠癌的死亡率更是排在肿瘤死亡的第四位，对人们的健康产生巨大的威胁。近年来有关结肠肿瘤动物模型与分子病因学的研究正成为热点之一。ywhaz属于14-3-3基因家族，其家族基因与肿瘤的形成有着密切的联系。有研究发现，ywhaz基因编码的14-3-3ζ蛋白在胃癌、肺癌、肝癌等多种癌组织中表达异常。在对抑癌基因p53的研究中，ywhaz过表达可引起p53表达量下降，进而导致肿瘤发生。本研究通过构建结肠癌HCT-8肿瘤裸鼠动物实验模型，利用RNA干扰及高表达ywhaz基因，探讨其对结肠癌的增殖影响，为ywhaz作为结肠癌治疗靶点提供理论依据。本研究构建了肿瘤裸鼠动物移植模型，通过RNA干扰及高表达ywhaz基因，分别在转录水平、翻译水平、细胞增殖及肿瘤增殖等四个层面探讨ywhaz基因RNA干扰及高表达对结肠癌HCT-8细胞及肿瘤的影响。结果显示，转染RNA干扰质粒组（pGPU6/GFP/Neo-ywhaz-792pGPU6/GFP/Neo-ywhaz-733pGPU6/GFP/Neo-ywhaz-612、pGPU6/GFP/Neo-ywhaz-505）ywhaz mRNA与阴性对照组（pGPU6/GFP/Neo-shNC）相比表达量下降（P＜0.05)，转染高表达质粒组（PEF1α-IRES-DSRED-Express2-ywhaz）ywhaz mRNA与空载对照组（PEF1α-IRES-DSRED-Express2）相比表达量升高（P＜0.05)，空载对照组与阴性对照组比较无明显变化。转染干扰质粒组ywhaz编码的14-3-3ζ蛋白表达量下降，转染高表达质粒组14-3-3ζ蛋白表达量升高，对照组与空白组无明显变化。转染干扰质粒组细胞较阴性对照组增殖减缓（P＜0.05)，转染高表达质粒组细胞较空载对照组增殖加快（P＜0.05)，对照组与空白组相比无明显变化。通过皮下移植，成功构建裸鼠移植性肿瘤模型，治疗结果显示，注射RNA干扰质粒组裸鼠肿瘤生长程度明显小于对照组（P＜0.05)，抑制率达57.28％，注射高表达质粒组裸鼠肿瘤生长程度明显高于对照组（P＜0.05)。

关键词：结肠癌HCT-8 RNA干扰高表达 ywhaz基因

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RNA干扰ywhaz基因对结肠癌HCT-8细胞增殖的影响

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吉林大学学报（医学版） 2015年第2期41卷 307-310,I0005页

作者：张成才宋艳艳周梦娇崔志倩张西臣邢沈阳吉林大学动物科学学院动物科学系吉林长春130062 吉林大学第二医院肾病内科吉林长春130041 吉林大学动物医学学院预防兽医学系吉林长春130062

目的:探讨中RNA干扰ywhaz基因对结肠癌HCT-8细胞增殖的影响,阐明其作用机制。方法:构建靶向基因ywhaz的siRNA载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-ywhaz-792、pGPU6/GFP/Neoywhaz-733、pGPU6/GFP/Neo-ywhaz-612和pGPU6/GFP/Neo-ywhaz-505作为RNA干扰质粒组,同时设立阴性对照质粒组(pGPU6/GFP/Neo-shNC质粒);采用荧光定量PCR检测ywhaz mRNA的表达水平和表达抑制率;采用MTT法检测HCT-8细胞的增殖率。结果:倒置荧光显微镜下观察,细胞转染率为60%。荧光定量PCR检测,RNA干扰组ywhaz mRNA表达水平低于阴性对照组(Pywhaz可抑制该基因的转录,并抑制HCT-8细胞的增殖。

关键词： ywhaz基因结肠肿瘤 HCT-8细胞 RNA干扰

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miR-451靶向调控肾小球系膜细胞ywhaz基因的表达

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中国生物制品学杂志 2013年第8期26卷 1107-1112页

作者：查何彭惠民马晶周吉王瑞敏尹频文利张政重庆医科大学分子医学及肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心重庆401331 重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的探讨miR-451对肾小球系膜细胞ywhaz基因表达的靶向调控。方法应用生物信息学技术对miR-451的靶基因进行预测,PCR法扩增靶基因3′UTR全长片段,插入荧光素酶报告载体pmiR-RB-REPORTTMvector中,构建荧光素酶报告质粒pmiR-ywhaz-3′UTR... 详细信息

目的探讨miR-451对肾小球系膜细胞ywhaz基因表达的靶向调控。方法应用生物信息学技术对miR-451的靶基因进行预测,PCR法扩增靶基因3′UTR全长片段,插入荧光素酶报告载体pmiR-RB-REPORTTMvector中,构建荧光素酶报告质粒pmiR-ywhaz-3′UTR。将miR-451 mimics和NC mimics分别转染高糖培养条件下的小鼠系膜细胞,将miR-451 inhibitor和NC inhibitor分别转染低糖培养条件下的小鼠系膜细胞,采用Real-time RT-PCR和Westernblot法检测miR-451和ywhaz的表达水平;将miR-451 mimics和NC mimics分别与pmiR-ywhaz-3′UTR共转染高糖培养条件下的小鼠系膜细胞,miR-451 inhibitor和NC inhibitor分别与pmiR-ywhaz-3′UTR共转染低糖培养条件下的小鼠系膜细胞,检测各组细胞荧光素酶活性。结果 ywhaz基因3′UTR区有11个碱基与miR-451种子序列匹配,其中7个碱基呈高度保守性;荧光素酶报告质粒经测序鉴定构建正确;miR-451在miR-451 mimics组呈高表达,在miR-451 inhibitor组表达降低;miR-451可抑制ywhaz的蛋白表达;荧光素酶活性检测发现,miR-451可通过与ywhaz3′UTR的结合,抑制ywhaz的表达。结论 miR-451可直接靶向糖尿病相关基因ywhaz,抑制其蛋白表达,为进一步研究miR-451调控早期糖尿病肾病发生发展的机制提供了依据。

关键词： miR-451 ywhaz基因靶基因早期糖尿病肾病

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ywhaz和ATPase6在小鼠植入前胚胎中阶段特异性表达的分析

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Developmental and Reproductive Biology 2002年第4期11卷 261-269页

作者：李文雍梁前进中国科学院遗传与发育生物学研究所，北京100080 北京师范大学生命科学学院，北京100875

ywhaz基因与卵裂球之间的通讯以及细胞通讯系统的建立有关，而ATPase6基因对1-细胞向2-细胞转变是非常关键的并在氧化磷酸化系统的建立中起重要作用。本文报道小鼠2-细胞期胚胎特异表达的基因的表达分析。对mRNA差异显示技术（DDRT-PCR... 详细信息

ywhaz基因与卵裂球之间的通讯以及细胞通讯系统的建立有关，而ATPase6基因对1-细胞向2-细胞转变是非常关键的并在氧化磷酸化系统的建立中起重要作用。本文报道小鼠2-细胞期胚胎特异表达的基因的表达分析。对mRNA差异显示技术（DDRT-PCR）进行改进，使之在小鼠植入前胚胎发育领域得以应用。通过对感兴趣的差异片段进行回收，亚克隆，序列分析和反向Northern杂交，结果表明：ywhaz和ATPase6是2-细胞期胚胎特异表达的基因。

关键词：胚胎植入前发育 mRNA差异显示阶段特异性基因表达 ywhaz基因

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