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Optimization,validation and application of an assay for the activity of HMG-coa reductase in vitro by LC–ms/ms

Journal of Pharmaceutical Analysis 2015年第6期5卷 383-388页

作者： Jing Wang Ji-Ye Sun Chun-Jie Sha Yu-Feng Shao Yan-Hong Liu You-Xin Li Zhen-Wen Duan Wan-Hui Liu School of Pharmacy Yantai University State Key Laboratory of Long-acting and Targeting Drug Delivery System Shandong Luye Pharmaceutical Co. Ltd. Peking University WBL Biotech Co. Ltd.

A stable HMG-coa reductase （HMGR） reaction in vitro was developed by a sensitive, selective and precise liquid chromatography-tandem mass spectrometry （LC-ms/ms） method. The optimized enzyme reaction condition contained 1.5 lag of HMGR, 20 nM of NADPH with 50 rain of reaction time. The method was validated by several intraand inter-day assays. The production transitions of m/z 147.0/59.1 and m/z 154.0/59.1 were used to detect and quantify mevalonolactone （MVAL） and MVAL-DT, respectively. The accuracy and precision of the method were evaluated over the concentration range of 0.005- 1.000 lag/mL for MVAL and 0.010-0.500 lag/mL for lovastatin acid in three validation batch runs. The lower limit of quantitation was found to be 0.005 lag/mL for MVAL and 0.010 lag/mL for lovastatin acid. Intra-day and inter-day precision ranged from 0.95% to 2.39% and 2.26% to 3.38% for MVAL, 1.46% to 3.89% and 0.57% to 5.10% for lovastatin acid, respectively. The results showed that the active ingredients in Xuezhikang capsules were 12.2 and 14.5 mg/g, respectively. This assay method could be successfully anDlied to the oualitv control study of Xuezhikanu caosule for the first time.

关键词： xuezhikanglc-ms/mshmg-coa reductasemevalonolactonequality control

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