检索结果-南通市图书馆

作者：张建锋河北医科大学

学位级别：硕士

目的：本研究通过病例-对照研究的方法，试讨论xrcc6基因rs5751129和rs2267437两个位点的单核苷酸多态性（single nucleotideploymorphisms SNP）与结直肠癌（Colorectal Cancer CRC）发病风险的相关性，为CRC高危人群的筛检及诊治提供... 详细信息

目的：本研究通过病例-对照研究的方法，试讨论xrcc6基因rs5751129和rs2267437两个位点的单核苷酸多态性（single nucleotideploymorphisms SNP）与结直肠癌（Colorectal Cancer CRC）发病风险的相关性，为CRC高危人群的筛检及诊治提供有利的分子生物学依据。方法：选取2012年2月-2013年2月间就诊于河北医科大学第四医院的78例直肠癌患者，51例结肠癌患者和74例健康人群做病例-对照研究。对符合实验条件的对象采集静脉血5ml，并记录年龄、性别、吸烟、饮酒、家族史等信息。采用蛋白酶K消化－饱和氯化钠盐析法提取研究对象白细胞中的DNA，采用聚合酶链反应－连接酶检测反应（PolymeraseChain Reaction-ligase detection reaction，PCR－LDR）方法对xrcc6基因的rs2267437C/G和rs5751129C/T两个SNP位点等位基因及基因分型进行检测。应用SPSS13.0软件（SPSS Company, Chicago, Illinois, USA）对实验数据进行统计分析。采用χ2检验及t检验对性别、抽烟、饮酒、肿瘤家族史及年龄加以分析，以P=0.05为检验水准,P＜0.05有统计学意义。采用χ2对对照组基因型频率进行Hardy-Weinberg平衡分析。采用χ2检验对实验组与对照组之间的基因型和等位基因型分布加以分析比较。单体型频率和连锁不平衡分析采用EH软件和2LD软件（1.2version, RockefellerUniversity, New York）。应用非条件Logistic回归法计算表示相对风险度的比值比（odds ratio, OR）及95%可信区间（confidence interval, CI）。结果： 1对照组中-1310rs2267437C/G和T-991Crs5751129C/T两个位点的基因型频率分布都符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）。 2xrcc6基因rs5751129C/T多态性与CRC发病风险相关性分析 xrcc6基因rs5751129C/T位点上等位基因C和T在结肠癌组中出现频率为96.1%和3.9%，直肠癌组中出现频率为92.9%和7.1%，在对照组中为94.6%和5.4%，两组分别相比，认为结肠癌和对照组，直肠癌和对照组的差异均没有统计学意义（P分别为0.553和0.812）。在结肠癌组中T/T、C/T两种基因型出现的频率分别92.2%和7.8%，直肠癌组中T/T、C/T两种基因型出现的频率分别85.9%和14.1%，而在正常对照组中分别为89.2%和10.8%，两组分别与对照组相比较，差异均无统计学意义（P分别为0.841和0.852）。携带T/T基因型和C/T基因型与结肠癌和直肠癌的发生无相关性（OR=0.876，95%CI=0.239-3.214;OR=1.111，95%CI=0.368-3.353）。 3xrcc6基因rs2267437C/G多态性与CRC发病风险的相关性分析: xrcc6基因rs2267437C/G位点上等位基因C和G在结肠癌组中出现频率为78.4%和21.6%，在直肠癌组中出现频率为76.9%和23.1%，在正常对照组中为87.2%和12.8%，表明在直肠癌与对照组的对比中，差别有统计学意义（P＜0.02）;在结肠癌与对照组的对比中差异无统计学意义（P=0.67）。在结肠癌中C/C、C/G两种基因型出现的频率分别为56.9%和43.1%，在直肠癌中分别为53.8%和46.2%，而在正常对照组中则为74.3%和25.7%，结肠癌组和直肠癌组分别与对照组对比较，差异均有统计学意义（P=0.041，OR=2.196，95%CI=1.026-4.700;P=0.009，OR=2.481，95%CI=1.250-4.926）。 4采用EH软件和2LD软件对结肠癌组和对照组中xrcc6基因rs2267437C/G和rs5751129C/T两SNPs位点进行联合分析。显示（Table5）xrcc6基因rs2267437C/G与rs5751129C/T两位点间存在连锁的不平衡现象（D’=0.994）。人群中rs5751129T-rs2267437C单体型（OR=1.250,95％CI=1.052~2.075）， rs5751129T-rs2267437G单体型（OR=0.846,95％CI=0.506~0.914），表明此两种基因型与结肠癌发病风险存在关联性。其它两种单体型的OR值和95％CI分别为0.406（95％CI=0.009~18.820）、0.716（95％CI=0.209~2.449），表明此两种单体型可能与结肠癌的发病风险无关。对直肠癌组和对照组中xrcc6基因

关键词：结直肠癌（CRC） xrcc6基因单核苷酸多态性（SNP）等位基因

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利用CRISPR/Cas系统构建在xrcc6内源基因插入Flag标签序列的HeLa细胞系

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生物技术通讯 2016年第1期27卷 7-11页

作者：李瑞花付汉江沈远钟一然朱捷郑晓飞军事医学科学院放射与辐射医学研究所放射生物学北京市重点实验室北京100850 安徽医科大学研究生学院安徽合肥230032

目的:利用CRISPR/Cas系统在xrcc6基因5′端插入Flag标签序列,筛选xrcc6-Flag稳定表达的宫颈癌细胞(He La)株。方法:根据Gen Bank中xrcc6基因序列,设计xrcc6基因敲入的g RNA序列,构建入p Cas-Guide载体中,获得p Cas-xrcc6载体;设计xrcc6基因的同源臂序列,利用搭桥PCR方法将同源臂和Flag标签序列作为模板进行扩增,得到供体DNA片段,并将其克隆到p Back Zero-T表达载体上,获得p xrcc6-Donor载体;将上述2个载体共转染He La细胞,采用PCR、Western印迹等方法检测和筛选Flag标签序列插入xrcc6基因5′端的细胞株。结果:构建了p Cas-xrcc6和p xrcc6-Donor载体,筛选获得3株xrcc6-Flag稳定表达细胞株。结论:构建了xrcc6-Flag稳定细胞株,为研究xrcc6基因及其蛋白产物的生物学功能奠定了基础。

关键词： CRISPR/Cas系统 xrcc6基因 Flag标签

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NHEJ通路相关基因在电离辐射所致脑损伤中的表达情况研究

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中国辐射卫生 2019年第3期28卷 223-227页

作者：李梅刘梦雅王新钢黄立群孙鸽尹晶晶秦秀军中国辐射防护研究院放射医学与环境医学研究所

目的通过对大鼠头部进行不同剂量的照射,研究NHEJ通路相关基因在电离辐射所致脑损伤中的表达情况。方法利用医用电子加速器装置对SD大鼠分别进行10 Gy、20 Gy、30 Gy的照射,并于照后30天提取动物海马组织中的总RNA;30 Gy照射组在照后6 h... 详细信息

目的通过对大鼠头部进行不同剂量的照射,研究NHEJ通路相关基因在电离辐射所致脑损伤中的表达情况。方法利用医用电子加速器装置对SD大鼠分别进行10 Gy、20 Gy、30 Gy的照射,并于照后30天提取动物海马组织中的总RNA;30 Gy照射组在照后6 h、24 h、72 h、7天、30天五个不同时间点提取动物海马组织中的总RNA。使用实时荧光定量PCR技术对NHEJ通路中的xrcc4、xrcc5和xrcc6基因的表达情况进行研究。结果经照射大鼠海马组织中与DNA修复相关的基因xrcc4、xrcc5和xrcc6表达均有所上调;20 Gy组xrcc4、xrcc5和xrcc6基因的表达量较10 Gy和30 Gy组高;xrcc4基因在照后7天表达量达到最高,而xrcc5和xrcc6基因在照后6 h达到最高,xrcc4、xrcc5和xrcc6基因表达量均在照后30天达到最低。结论通过本项目研究发现NHEJ通路中与DNA损伤修复有关基因xrcc4、xrcc5、xrcc6在电离辐射所致脑损伤照射不同剂量点及照后不同时间点均上调表达,说明在10、20、30 Gy照射和电离辐射后6 h、24 h、72 h、7天、30天五个不同时间点机体均通过NHEJ通路进行DNA双链修复,且在照后6h和第7天修复能力最强。

关键词：电离辐射 xrcc4基因 xrcc5基因 xrcc6基因 DNA双链断裂修复实时荧光定量PCR

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