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Predictive role of xrcc5/xrcc6 genotypes in digestive system cancers

World Journal of Gastrointestinal Oncology 2011年第12期3卷 175-181页

作者： Mei-Due Yang Chia-Wen Tsai Wen-Shin Chang Yung-An Tsou Cheng-Nan Wu Da-Tian Bau Terry Fox Cancer Research Laboratory China Medical University Hospital Graduate Institute of Basic Medical Science China Medical University Department of Medical Laboratory Science and Biotechnology Central Taiwan University of Science and Technology Graduate Institute of Clinical Medical Science China Medical University

Cancers are a worldwide concern;oral,esophageal and gastrointestinal cancers represent important causes of cancer-related mortality and contribute to a signif icant burden of human *** DNA repair systems are the genome caretakers,playing a critical role in the initiation and progression of ***,the association between the genomic variations of DNA repair genes and cancer susceptibility is not well *** review focuses on the polymorphic genotypes of the non-homologous end-joining DNA repair system,highlighting the role of two genes of this pathway,xrcc5 and xrcc6,in the susceptibility to digestive system cancers and discussing their potential contributions to personalized medicine.

关键词： xrcc5 xrcc6 Polymorphism Oral cancer Esophageal cancer Gastrointestinal cancer Colorectal cancer

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xrcc5基因多态性与高发区食管癌、贲门癌遗传易感性的相关性

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癌症 2007年第3期26卷 280-284页

作者：董秀娟王娜郭炜周荣秒张晓娟李琰河北省肿瘤研究所分子生物学研究室河北石家庄050011

背景与目的:xrcc5为DNA双链断裂修复基因,其表达异常、活性紊乱与肿瘤的发生和发展密切相关。本研究旨在探讨xrcc5基因多态性与河北省食管癌高发区-磁、涉县人群食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cellcarcinoma,ESCC)和贲门腺癌(gast... 详细信息

背景与目的:xrcc5为DNA双链断裂修复基因,其表达异常、活性紊乱与肿瘤的发生和发展密切相关。本研究旨在探讨xrcc5基因多态性与河北省食管癌高发区-磁、涉县人群食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cellcarcinoma,ESCC)和贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)遗传易感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测329例ESCC患者、255名GCA患者和631例健康对照人群xrcc5C74468A、G74582A单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)的基因型分布。结果:xrcc5基因C74468A C和A的等位基因频率及C/C、A/C、A/A基因型频率在ESCC、GCA及对照组之间差异无显著性(P>0.05)。根据吸烟状况和上消化道肿瘤(UGIC)家族史分层分析发现,携带A等位基因(A/C+A/A基因型)可能降低上消化道肿瘤阳性家族史人群的ESCC、GCA发病风险(经性别、年龄和吸烟校正后的OR分别为0.58和0.61,95%CI分别为0.38～0.90和0.38～0.97)。xrcc5G74582A基因G、A等位基因频率及A/A、A/G、G/G基因型频率在ESCC、GCA及对照组之间亦差异无显著性(P>0.05)。分层分析发现,携带G等位基因(A/G+G/G基因型)可能降低上消化道肿瘤阳性家族史人群的GCA发病风险(经性别、年龄和吸烟校正后的OR为0.63,95%CI为0.40～0.98)。两多态性位点联合分析显示,ESCC、GCA患者与健康对照组的单体型分布差异也无显著性(P>0.05)。结论:xrcc5C74468A A等位基因(A/C+A/A基因型)可能降低磁县和涉县上消化道肿瘤阳性家族史人群的ESCC、GCA发病风险。而G74582A G等位基因(A/G+G/G基因型)可能仅降低该地区上消化道肿瘤阳性家族史人群的GCA发病风险。

关键词： xrcc5 单核苷酸多态性食管肿瘤贲门肿瘤遗传易感性

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Polymorphisms in xrcc5,xrcc6,xrcc7 genes are involved inDNA double-strand breaks(DSBs) repair associated with the risk ofacute myeloid leukemia(AML) in Chinese population

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Journal of Nanjing Medical University 2009年第2期23卷 93-99页

作者： Guoqiang Wang Shuyu Wang Qun Shen Shiwei Yin Chunping Li Aiping Li Jianyong Li Jianwei Zhou Qizhan Liu Department of Health Toxicology School of Public Health Nanjing Medical University Nanjing 210029 China Department of Hematology Jiangsu Province Hospital of Traditional Chinese Medicine Nanjing 210029 China Department of Hematology the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University Nanjing 210029 China

Objective：To investigate the association between the X-ray repair cross complementing（xrcc） group 5, xrcc6 and xrcc7 polymorphisms and risk of acute myeloid leukemia（AML）. Methods：This hospital-based case-control study included 120 AML patients and 210 cancer-free controls in a Chinese population. Three polymorphisms of xrcc5, xrcc6 and xrcc7 were genotyped using the polymerase chain reaction（PCR） or polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism（PCR-RFLP） method. Results： We found that there was a significant decrease in risk of AML associated with the xrcc6 -61 CG/GG genotype（adjusted odd ratio （OR） = 0.55; 95% confident interval（CI） = 0.34-0.89） compared with the -61CC genotype. For the novel tandem repeat polymorphism （VNTR） in the xrcc5 promoter, we found when the xrcc5 six genotypes were dichotomized（i.e., 2R/2R, 2R/1R versus 2R/0R, 1R/1R, 1R/0R and 0R/0R）, the latter group was associated with increased risk of AML（adjusted OR = 1.67; 95% CI = 1.00-2.79） compared to 2R/ 2R＋2R/1R genotype. However, the xrcc7 6721G〉T polymorphism had no effect on risk of AML. Conclusion：The xrcc6 -61C 〉 G and xrcc5 2R/1R/0R polymorphisms, but not xrcc7 6721G 〉 T polymorphism, could play an important role in the development of AML. Larger scale studies with more detailed data on environment exposure are needed to verify these findings.

关键词： xrcc5 xrcc6 xrcc7 single nucleotide polymorphism tandem repeat polymorphism acute myeloid leukemia

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xrcc5、xrcc6单核苷酸多态性与乳头状甲状腺癌BRAF基因突变相关性研究

XRCC5、XRCC6单核苷酸多态性与乳头状甲状腺癌BRAF基因突变相关性...

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作者：李莹莹滨州医学院

学位级别：硕士

背景:最近的研究结果表明,国内甲状腺癌的发病率呈不断攀升的态势。其发病率由1/10万上升至3-4/10万。甲状腺恶性肿瘤中最为常见的病理类型是乳头状甲状腺癌(PTC)(约占甲状腺恶性肿瘤比例的80%)。环境与遗传因素作为肿瘤致病因素的两方... 详细信息

背景:最近的研究结果表明,国内甲状腺癌的发病率呈不断攀升的态势。其发病率由1/10万上升至3-4/10万。甲状腺恶性肿瘤中最为常见的病理类型是乳头状甲状腺癌(PTC)(约占甲状腺恶性肿瘤比例的80%)。环境与遗传因素作为肿瘤致病因素的两方面互为增强。一方面电离辐射作为甲状腺癌较为明确的环境致病因素引起的DNA双链断裂增加了甲状腺癌的易感性;另一方面参与甲状腺癌发生与发展的遗传学分子机制主要是基因的点突变和染色体重排,其中癌基因BRAF V600E的点突变研究较为广泛。此外,修复DSB基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)作为甲状腺癌遗传易感因素新的研究课题备受关注。DSB修复基因的单核苷酸多态性(SNP)对PTC的诊断、治疗、肿瘤良恶性评估以及预后监测均具有积极的指导作用。分析参与DSB修复路径中修复基因的单核苷酸多态性与BRAF突变的关联对进一步探索和揭示乳头状甲状腺癌的发病机制具有重要意义,为此我们选取xrcc5、xrcc6作为修复基因多态性研究对象并探查其多态性与BRAF突变有无相关性。目的:寻找与BRAF突变显著相关的修复基因的SNPs,以期为PTC的诊疗提供新的分子靶点,同时为临床预测BRAF突变风险,为甲状腺乳头状癌的诊治及预后监测提供新的分子标志物。方法:采用以医院临床标本为基础的病例-病例研究,拟应用分子流行病学的方法,利用已有的标本提取DNA,借助PCR技术进行基因分型,设计并分析乳头状甲状腺癌患者中xrcc5、xrcc6基因多态性在BRAF突变型与野生型之间的分布情况。结果:1. xrcc5基因rs2160981位点的基因型在BRAF野生型和突变型两个分组间存在明显差异(X2: 9.267;P: 0.008),具有统计学意义;同时rs2160981位点的等位基因频率在两组间的差异也具有统计学意义(X2: 7.262;P: 0.009)。2. xrcc6基因rs132771位点基因型在BRAF野生型和突变型两组间的差异具有统计学意义(X2: 7.067;P: 0.008),该位点的等位基因频率在BRAF野生型和突变型两组间的差异具有统计学意义(X2: 6.563;P: 0.001)。结论:乳头状甲状腺癌(PTC)患者非同源修复通路中xrcc5、xrcc6基因的单核苷酸多态性(SNPs)与BRAF突变具有相关性。

关键词：甲状腺乳头状癌 BRAF xrcc5 xrcc 单核苷酸多态性

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利用免疫共沉淀技术验证LOX与xrcc5在人乳腺癌细胞内的相互作用

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广西医科大学学报 2016年第1期33卷 6-9页

作者：周文婷刘剑仑刘侠杨华伟韦薇广西医科大学附属肿瘤医院乳腺外科南宁530021

目的:探讨赖氨酰氧化酶(LOX)和xrcc5在人乳腺癌细胞内是否存在相互作用。方法:构建含有LOX全长及插入LOX基因序列C端的2个StrepⅡ和一个Flag标签的慢病毒表达载体GV303/EGFP(LOX-SF),经酶切鉴定正确后,将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞,... 详细信息

目的:探讨赖氨酰氧化酶(LOX)和xrcc5在人乳腺癌细胞内是否存在相互作用。方法:构建含有LOX全长及插入LOX基因序列C端的2个StrepⅡ和一个Flag标签的慢病毒表达载体GV303/EGFP(LOX-SF),经酶切鉴定正确后,将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞,使用荧光定量PCR和蛋白质印迹实验对细胞中重组蛋白LOX-SF进行检测。利用免疫共沉淀技术验证LOX与xrcc5之间的相互作用,并通过间接免疫荧关分析LOX与xrcc5在MDA-MB-231人乳腺癌细胞的定位情况。结果:重组LOX蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中稳定表达。LOX抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中检测到xrcc5,同时xrcc5抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中也检测到LOX。利用间接免疫荧光分析,LOX与xrcc5在细胞核内存在共定位。结论:LOX与xrcc5在人乳腺癌细胞内存在相互作用,并且在细胞核内共定位。

关键词： LOX xrcc5 免疫共沉淀相互作用

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γ射线照射后小鼠xrcc1、xrcc5基因mRNA表达分析

γ射线照射后小鼠XRCC1、XRCC5基因mRNA表达分析

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中国毒理学会放射毒理专业委员会第七次、中国毒理学会免疫毒理专业委员会第五次、中国环境诱变剂学会致突专业委员会第二次、中国环境诱变剂学会致畸专业委员会第二次、中国环境诱变剂学会致癌专业委员会第二次全国学术会议

作者：王芹岳井银李进穆传杰中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所

IRM-2小鼠是我所培育的近交系小鼠品系,该小鼠突出的生物学特性是具有较强的辐射抗性及较低的染色体畸变率。目前辐射抗性研究大多采用辐射敏感细胞系或突变株,只能通过导入基因间接的对辐射抗性进行研究。相比之下,具有辐射抗性的 IRM-... 详细信息

IRM-2小鼠是我所培育的近交系小鼠品系,该小鼠突出的生物学特性是具有较强的辐射抗性及较低的染色体畸变率。目前辐射抗性研究大多采用辐射敏感细胞系或突变株,只能通过导入基因间接的对辐射抗性进行研究。相比之下,具有辐射抗性的 IRM-2小鼠是极

关键词： γ射线照射 xrcc5

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LOX相互作用蛋白的验证及其在乳腺癌迁移与侵袭中的研究

LOX相互作用蛋白的验证及其在乳腺癌迁移与侵袭中的研究

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作者：周文婷广西医科大学

学位级别：硕士

目的1.赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase, LOX)的相互作用蛋白的验证,明确蛋白相互作用位点。2.探讨LOX和xrcc5蛋白相互作用对乳腺癌细胞迁移与侵袭能力的影响。方法1.在乳腺癌MDA-MB-231细胞转染重组蛋白LOX-SF的慢病毒,通过western blot和R... 详细信息

目的1.赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase, LOX)的相互作用蛋白的验证,明确蛋白相互作用位点。2.探讨LOX和xrcc5蛋白相互作用对乳腺癌细胞迁移与侵袭能力的影响。方法1.在乳腺癌MDA-MB-231细胞转染重组蛋白LOX-SF的慢病毒,通过western blot和RT-PCR对细胞中重组蛋白LOX-SF进行检测。2.采用双向免疫共沉淀,免疫荧光共定位的实验方法验证LOX与xrcc5和Histone H1.1的相互作用。3.我们采用慢病毒作为载体的过表达技术,分别构建稳定过表达LOX、过表达xrcc5的载体,单独转染和联合转染至低转移潜能并且LOX低表达的MCF-7细胞中,分为未转染组、LOX空载体组、LOX转染组、xrcc5空载体组,xrcc5转染组、LOX和xrcc5空载体共转染组及LOX和xrcc5过表达共转染组;流式分选联合转染LOX和xrcc5过表达载体及空载体共转染的细胞株,western blot和RT-PCR检测转染后各组细胞的LOX和xrcc5蛋白表达的变化,分别通过Transwell迁移和侵袭实验检测转染细胞的迁移与侵袭能力。结果1.在MOI=10的条件下,LOX慢病毒转染MDA-MB-231细胞,96 h后镜下观察绿色荧光间接评估慢病毒转染效率,发现慢病毒转染效率>90%。Western blot结果显示：实验组能检测到重组蛋白LOX-SF和LOX本体蛋白,而空白对照组和阴性对照组未能检测到重组蛋白LOX-SF的条带,仅都能检测到LOX本体蛋白。RT-PCR结果：实验组、空载对照组及空白对照组重组基因LOX mRNA的2““‘值分别为15.32±0.12、1.18±0.01、1.00±0.00,实验组LOX-SF mRNA表达水平明显高于空载对照组和空白对照组(P0.05)。2.免疫共沉淀(Co-IP)结果表明,Western blot能检测到LOX抗体沉淀的免疫复合物中含有xrcc5、Histone H1.1蛋白,且免疫印迹中出现的条带与MDA-MB-231细胞总蛋白的条带位置一致。3.反向免疫共沉淀结果表明：Western blot能分别检测到xrcc5抗体、Histone H1.1抗体沉淀的免疫复合物中含有LOX蛋白,且免疫印迹中出现的条带与MDA-MB-231细胞总蛋白中的LOX蛋白条带位置一致。4.实验采取内源性共定位分析(即未经任何处理的MDA-MB-231细胞、MCF-7细胞)进行。分别用不同种属的抗体进行免疫荧光定位分析,用激光共聚焦显微镜扫描(630×)可见,LOX与Histone H1.1共定位分析：LOX红光标记,主要定位在胞质,少部分在胞核,呈弥散分布;Histone H1.1绿光标记,主要定位在胞质,LOX与Histone H1.1在胞质存在明显共定位,呈现黄色。LOX与xrcc5共定位分析：LOX绿光标记,主要定位在胞质及细胞核,呈弥散分布;xrcc5红光标记,定位在细胞核内,也呈弥散分布;LOX和xrcc5在细胞核存在明显的共定位,呈现黄色。5.在MOI=10条件下,将LOX和xrcc5过表达慢病毒载体联合转染乳腺癌MCF-7细胞后,对LOX和xrcc5过表达共转染组及LOX和xrcc5空载体共转染组细胞进行流式荧光分选,通过流式荧光检测LOX和xrcc5空载体共转染组筛选出的细胞转染效率由15.37%提高到83.94%,LOX和xrcc5过表达共转染组的细胞流式荧光检测,转染效率由45.65%提高到70.82%。6.采用Western blot及Real-time PCR分别检测转染后各组LOX和xrcc5在基因和蛋白水平的变化。Western blot结果能检测到LOX蛋白在MCF-7有表达且为低表达;实验组能检测到重组蛋白LOX-SF和LOX本体蛋白,而空白对照组和阴性对照组未能检测到重组蛋白LOX-SF的条带,仅都能检测到LOX本体蛋白。与未转染组及空载体组比较,xrcc5过表达组的xrcc5蛋白表达明显升高。与空白对照组及阴性对照组比较,LOX和xrcc5过表达共转染的细胞LOX和xrcc5蛋白表达量均明显升高。Real-time PCR结果显示：LOX过表达组、LOX空载体组、LOX和xrcc5过表达共转染组、LOX和xrcc5空载体共转染组及未转染组的LOX mRNA的2-ΔΔct值分别为241.044±45.81、2.86+0.41、207.12±±23.40、2.06±0.06、1.00±0.00,LOX过表达组、LOX和xrcc5过表达共转染组的LOX mRNA表达水平明显高于空载体组和未转染组(P<0.01),空载体组和未转染组的LOX mRNA表达水平无明显

关键词：乳腺癌 LOX xrcc5 Histone H1.1 迁移侵袭

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