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作者：陈婷华中农业大学

学位级别：硕士

黄芩苷(Baicalin)是从中药黄芩中提取的一种黄酮类化合物,具有明显的促进胚泡着床和保胎作用,已经广泛应用于临床。目前对于黄芩苷保胎作用机理的认识主要有以下几方面：第一,黄芩苷可以直接或间接调节哺乳动物体内Thl与Th2型免疫细胞... 详细信息

黄芩苷(Baicalin)是从中药黄芩中提取的一种黄酮类化合物,具有明显的促进胚泡着床和保胎作用,已经广泛应用于临床。目前对于黄芩苷保胎作用机理的认识主要有以下几方面：第一,黄芩苷可以直接或间接调节哺乳动物体内Thl与Th2型免疫细胞的细胞因子含量,使机体免疫平衡向有利于胚泡附着的方向倾斜;第二,对体内雌、孕激素含量及其受体起到一定的影响作用,改善子宫内膜的生理环境,为胚泡的植入创造有利条件;第三,对多种因素引起的子宫平滑肌收缩有一定的抑制作用,减少了因为早期胚泡着床不稳定而造成的流产。但是,黄芩苷是否通过与胚泡着床有密切联系的wnt通路发挥作用,目前还未见报道。妊娠是一个调动机体多方面生理机能的复杂生物学过程,为了更加深入的探究黄芩苷发挥保胎作用的分子机理,我们开展了本次实验。实验选取了性成熟、体成熟的昆明系雌、雄小白鼠,将成功交配的雌鼠记为妊娠第1天并随机分为四组：空白对照组、黄芩苷组、米非司酮组及黄芩苷+米非司酮组。于妊娠d2-8天,黄芩苷组小鼠给予黄芩苷,米非司酮组给予米非司酮,黄芩苷+米非司酮组给予黄芩苷和米非司酮,空白对照组则给予黄芩苷和米非司的溶剂。在妊娠d8进行妊娠率与着床胚泡数的统计。于妊娠d3-8天,采集血液样本,采用放射免疫法检测小鼠血清中雌二醇和孕酮的含量;采集子宫组织,抽提总RNA,采用qRT-PCR法检测β-catenin、LRP6、Dkk1和wnt4基因相对表达水平;提取子宫组织总蛋白,采用Western-blotting法检测β-catenin、LRP6、Dkk1和wnt4蛋白表达水平。结果表明黄芩苷引起围着床期的小鼠血清中雌二醇含量下降(P4-8显著降低(Pwnt4mRNA水平在d3-8显著升高(P4-7显著升高(P4-8显著升高(Pwnt信号通路相关物质(β-catenin、LRP6、Dkk1和wnt4) mRNA及蛋白表达水平的影响,发现黄芩苷可能是通过影响血清雌、孕激素水平对经典wnt信号通路中的β-catenin、LRP6、Dkk1和wnt4表达的调节作用影响了wnt/β-catenin通路的传导从而促进了小鼠胚泡的附着过程。

关键词：黄芩苷米非司酮胚泡着床 wnt通路 β-catenin LRP6 Dkk1 wnt4

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辛伐他汀对大鼠肾缺血再灌注损伤中wnt/JNK影响的研究

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中国中西医结合肾病杂志 2012年第3期13卷 201-205,I0001,I0002页

作者：武云娜方敬爱张晓东孙艳艳刘文媛山西医科大学第一医院肾内科太原030001

目的:探讨辛伐他汀(simvastatin SIM)对大鼠肾缺血再灌注损伤中wnt/JNK的影响。方法:雄性wistar大鼠36只随机分为:假手术组、手术组、SIM干预组,每组12只,再将每组按取材时间不同分为6 h、48 h两个时相组。手术方法:假手术组开腹分离双... 详细信息

目的:探讨辛伐他汀(simvastatin SIM)对大鼠肾缺血再灌注损伤中wnt/JNK的影响。方法:雄性wistar大鼠36只随机分为:假手术组、手术组、SIM干预组,每组12只,再将每组按取材时间不同分为6 h、48 h两个时相组。手术方法:假手术组开腹分离双侧肾动脉,但不夹闭,后关闭腹腔;手术组游离双侧肾动脉,动脉夹夹闭45 min后恢复灌注建立肾IRI模型;SIM干预组术前1周给大鼠灌胃SIM 20 ***-1.d-1,其余处理同手术组。肾IRI后6 h、48 h,检测血清Scr值,肾组织行病理学观察及免疫组织化学法测定wnt4、JNK1及其信号通路下游炎症因子TNFα的表达,并采用real time PCR法测定肾组织wnt4 mRNA、JNK1 mRNA的表达。结果:肾组织病理学观察:假手术组肾组织形态结构基本正常;手术组肾小管上皮细胞有不同程度的肿胀、坏死和脱落、排列紊乱,管腔扩张,肾间质水肿、炎细胞浸润明显,以IRI后6 h为著;SIM干预组肾组织损伤程度较手术组明显减轻。Scr值测定:手术组Scr值较假手术组明显升高(Pwnt4、JNK1、TNFα表达较弱;手术组IRI后肾小管上皮细胞胞浆内wnt4、JNK1、TNFα表达均比假手术组增强(Pwnt4、JNK1、TNFα表达水平较手术组减弱(Pwnt4 mRNA、JNK1 mRNA表达较弱;手术组肾小管上皮细胞wnt4 mRNA、JNK1 mRNA表达均较假手术组增强(Pwnt4 mRNA、JNK1 mRNA表达比手术组均有所下降(Pwnt4、TNFα均成正相关(rs=0.94,rs=0.95);wnt4 mRNA、JNK1 mRNA成正相关(rs=0.75);且均与Scr成正相关(rs分别为rs=0.93,rs=0.96,rs=0.94,rs=0.70,rs=0.35)。结论:辛伐他汀预处理可能通过抑制wnt/JNK信号通路的表达,从而减轻肾IRI程度。

关键词：缺血再灌注辛伐他汀 wnt4 JNK1 TNFα

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益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾间质wnt与NF-κB影响的研究

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中国中西医结合肾病杂志 2012年第6期13卷 487-490,I0004页

作者：韩凤梅方敬爱张晓东孙艳艳刘文媛山西医科大学第一医院太原030001

目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾间质wnt4、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(PGSK-3β)及核因子-κB(NF-κB)表达水平的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠32只,体重(200±20g),随机选取8只作为正常组,其余予腹腔注射链脲佐菌素,制... 详细信息

目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾间质wnt4、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(PGSK-3β)及核因子-κB(NF-κB)表达水平的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠32只,体重(200±20g),随机选取8只作为正常组,其余予腹腔注射链脲佐菌素,制备糖尿病肾病动物模型,造模成功后随机分成4组:模型组(n=8),益肾胶囊组(n=8)和氯沙坦组(n=8)。连续给药12周。12周末,检测各组大鼠24h尿蛋白定量,血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),取肾组织行HE染色、免疫组化。光镜下观察肾间质病理变化情况,用免疫组化法检测wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平,行实时荧光定量(FQ-PCR)法测定肾组织中wnt4、NF-κBmRNA的表达。结果:12周末,与正常组比较,模型组大鼠24h尿蛋白定量、血Scr、BUN明显增加,肾间质wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平明显升高,肾组织wnt4、NF-κBmRNA表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P4h尿蛋白定量、血Scr、BUN明显减少,肾间质wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平明显降低,肾组织wnt4、NF-κBmRNA表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益肾胶囊可能通过调节DN肾间质wnt4、PGSK-3β、NF-κB的表达,影响了NF-κB和wnt通道的信号转导,延缓了DN的进展。

关键词：糖尿病肾病益肾胶囊 wnt4 PGSK-3β NF-κB

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辛伐他汀减轻UUO大鼠肾纤维化及可能机制的研究

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临床肾脏病杂志 2018年第11期18卷 705-709页

作者：石春花马飞湖北医药学院附属人民医院肾内科十堰442000 湖北医药学院附属人民医院耳鼻喉科十堰442000

目的本研究旨在探讨辛伐他汀改善输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织纤维化以及可能的机制。方法 30只SD大鼠,随机分为假手术对照组(Sham组)、模型组(UUO组)和辛伐他汀治疗组(Sim组),治疗组术前3 d予20 mg·kg^(-1)·d^(-1)辛伐他汀生理盐水混悬... 详细信息

目的本研究旨在探讨辛伐他汀改善输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织纤维化以及可能的机制。方法 30只SD大鼠,随机分为假手术对照组(Sham组)、模型组(UUO组)和辛伐他汀治疗组(Sim组),治疗组术前3 d予20 mg·kg^(-1)·d^(-1)辛伐他汀生理盐水混悬液3 mL灌胃治疗,对照组及模型组予等体积生理盐水灌胃。成模后7 d处死各组大鼠。行HE、Masson、PAS染色方法光镜下观察大鼠肾脏病理改变;免疫组化观察wnt4和β-catenin蛋白在肾组织的表达; Western blotting检测各组大鼠肾皮质β-catenin、wnt4、GSK-3β、p-GSK-3β、CollagenⅠ、α-SMA和E-cadherin蛋白在各组大鼠肾组织的相对表达量。结果与Sham组相比,UUO组大鼠肾组织纤维化病变明显,肾组织β-catenin、wnt4、α-SMA、p-GSK-3β、CollagenⅠ蛋白的表达明显增多(P wnt4、β-catenin和p-GSK-3β蛋白表达减少(P wnt4/β-catenin信号通路的激活和传导有关。

关键词：肾纤维化单侧输尿管结扎 wnt4 辛伐他汀 β-catenin

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