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小鼠wnt1基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体的构建

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实用儿科临床杂志 2012年第13期27卷 987-989,993页

作者：秦大妮周泽民沈惠平余章斌韩树萍江苏大学附属宜兴市人民医院儿科江苏宜兴214200 南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科南京210004

目的构建小鼠wnt1基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测其在P19细胞中的表达。方法采用PCR方法获得wnt1基因启动子最小功能单位和3'UTR区域在内的DNA片段。双酶切后插入到pGL3-Basic载体中构成重组表达载体,使萤火虫荧光素酶... 详细信息

目的构建小鼠wnt1基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测其在P19细胞中的表达。方法采用PCR方法获得wnt1基因启动子最小功能单位和3'UTR区域在内的DNA片段。双酶切后插入到pGL3-Basic载体中构成重组表达载体,使萤火虫荧光素酶报告基因的表达受wnt1启动子控制。将构建的重组表达载体或pGL3-Basic载体分别与内参质粒pRL-SV40(表达海肾荧光素酶)共转染P19细胞,24 h后用双荧光检测试剂盒测定萤火虫荧光素酶及海肾荧光素酶活性。结果重组表达载体经双酶切及测序鉴定证明构建正确,空白对照组(荧光强度比值:2.820 4±0.294 4)与对照组(荧光强度比值:3.050 8±0.303 7)及wnt-3'UTR突变组(荧光强度比值:51.475 8±0.983 7)比较,差异均有统计学意义(Pa1),该重组表达载体在P19细胞特异性高表达萤火虫荧光素酶。结论成功构建小鼠wnt1基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测到该载体在P19细胞的特异性表达。

关键词： wnt1 P19细胞 pGL3-Basic 基因表达载体构建萤火虫荧光素酶

胃炎I号对胃癌前病变大鼠wnt信号通路wnt1,wnt3a,CyclinD1表达的影响

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中药新药与临床药理 2014年第4期25卷 397-401页

作者：曾进浩潘华峰刘友章严艳赵自明任金玲胡霞李海文赖秋华广州中医药大学广东广州510006 广东省中医研究所广东广州510095

目的探讨健脾化瘀解毒复方胃炎I号对胃癌前病变(GPL)的疗效及其分子学机制。方法将SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,维酶素组(0.2 g·kg-1),胃炎I号组(7.5 g·kg-1)。采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)水溶液自由饮用、饥饱失常、... 详细信息

目的探讨健脾化瘀解毒复方胃炎I号对胃癌前病变(GPL)的疗效及其分子学机制。方法将SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,维酶素组(0.2 g·kg-1),胃炎I号组(7.5 g·kg-1)。采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)水溶液自由饮用、饥饱失常、耗气泻下法复制GPL大鼠模型。观察胃炎I号连续治疗10周后对GPL大鼠wnt信号通路wnt1、wnt3a、细胞周期蛋白D1(Cyclin-D1)表达的影响。结果模型组大鼠胃黏膜上皮的wnt1、wnt3a、Cyclin D1表达评分均较空白对照组显著增加(Pwnt信号通路wnt1,wnt3a,Cyclin D1的表达,抑制wnt/茁-catenin信号通路的异常激活,能在一定程度上阻断和逆转胃黏膜恶性转变。

关键词：胃炎I号胃癌前病变 wnt信号通路 wnt1 wnt3a 细胞周期蛋白D1

wnt1、β-catenin及LGR5在慢性浅表性胃炎中的表达

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Wnt1、β-catenin及LGR5在慢性浅表性胃炎中的表达

作者：周小嫔河北医科大学

学位级别：硕士

目的:wnt/β-catenin信号通路是经典的信号通路,其不仅可以调控和影响干细胞的自我更新和分化,还参与细胞增殖、分化、运动及凋亡等一系列过程,其异常激活或基因的异常表达与肿瘤发生发展紧密联系,wntl作为wnt大家族中的成员之一,在整... 详细信息

目的:wnt/β-catenin信号通路是经典的信号通路,其不仅可以调控和影响干细胞的自我更新和分化,还参与细胞增殖、分化、运动及凋亡等一系列过程,其异常激活或基因的异常表达与肿瘤发生发展紧密联系,wntl作为wnt大家族中的成员之一,在整个通路中它充当启动因子,研究证实wnt1与多种肿瘤的发生密切相关,β-catenin,一种Mr 92,000蛋白,对钙粘着蛋白为基础的上皮细胞粘附起作用,同时也是wnt信号的主要调节物,其异常表达与肿瘤患者不良预后相关。Lgr5(leucine-rich repeat-containing g-protein coupled receptor 5)又名GPR49,属于G蛋白耦联受体家族,是最新发现的一种wnt通路的靶基因,而且还是一种人类潜在的结肠癌干细胞标志物,已经有研究表明lgr5在不同肿瘤组织中都大量表达,如食管癌、肝癌、结肠癌、基底细胞癌及卵巢癌等等,慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)是多种诱因引起的慢性胃粘膜炎症,属于消化系统最普遍的疾病之一,治疗不及时或治疗不佳极易进一步发展为慢性萎缩性胃炎甚至发生癌变,本研究通过建立大鼠慢性浅表性胃炎的模型,观察wnt1、β-catenin及lgr5在大鼠慢性浅表性胃炎胃组织中表达情况,便于在早期发现其与胃癌发展的相关性,起到早期发现并预防胃炎向胃癌进一步发展。方法:1建立动物模型:随机选取30只成年雄性7周龄Wistar大鼠进行编号、称重,按随机数字表顺序分为3组,即空白组,对照组、模型组,每组10只,空白组:不做任何处理,正常饲养。对照组:0.9%生理盐水每日10ml/kg自由饮用6个月。模型组:0.02%氨水自由饮用(现配),饥饱失常(进食2天,禁食1天)。2造模成功后,将大鼠麻醉处死,采用HE染色,免疫组化、western blot和RT-PCR检测各组中wnt1、β-catenin以及lgr5的蛋白及基因的表达水平。结果:1 HE染色结果空白组和对照组显示为正常腺胃组织,未见异常改变,模型组胃窦粘膜固有膜、粘膜肌及粘膜下大量炎细胞浸润。2 Western blot结果:在蛋白水平Western blot进一步验证表明模型组中wnt1、lgr5蛋白表达较空白组显著增高(P0.05)。3免疫组化结果:wnt1、β-catenin及Lgr5免疫阳性产物染色结果:wnt1及Lgr5阳性产物主要定位于细胞的胞质和胞浆中,空白组和对照组组免疫阳性产物表达量较低,两者之间差异不显著,模型组表达量较正常组和盐水组显著增加(P0.05),模型组表达量较空白组和对照组显著减少(P0.05)。结论:1 wnt/β-catenin信号通路中代表分子的异常表达或通路异常激活与肿瘤发生发展密切相关,wnt1及lgr5在慢性浅表性胃炎组织中的表达量均高于对应的空白组及对照组,而β-catenin表达为模型组较正常组及对照组偏低,提示wnt通路在炎性刺激的作用下可能已经激活。2 Lgr5是wnt通路的一种靶基因,与肿瘤的发生发展密切相关,在我们研究中模型组中lgr5表达明显高于空白组和对照组,所以我们推测持续的炎症刺激Lgr5表达增加,Lgr5也可能为一种炎性促肿瘤重要因子。

关键词： LGR5 wnt1 β-catenin 慢性浅表性胃炎大鼠

丹防胶囊对免疫性肝纤维化大鼠肝组织wnt1、β-catenin、DKK1表达的影响

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天津医药 2019年第8期47卷 804-809,I0002页

作者：李璨陆爽吴君贵州医科大学感染病学教研室

目的探讨丹防胶囊对大鼠免疫性肝纤维化组织中wnt1、β-catenin及DKK1表达的影响及其可能机制。方法60只清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、阳性药物组、低丹组、中丹组、高丹组,每组10只。除正常组外其余各组腹腔注射猪血清制... 详细信息

目的探讨丹防胶囊对大鼠免疫性肝纤维化组织中wnt1、β-catenin及DKK1表达的影响及其可能机制。方法60只清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、阳性药物组、低丹组、中丹组、高丹组,每组10只。除正常组外其余各组腹腔注射猪血清制备大鼠免疫性肝纤维化模型,正常组腹腔注射等量生理盐水,2次/周。造模同时,低丹组、中丹组及高丹组分别给予丹防胶囊0.54、2.16、4.32g/kg灌胃,阳性药物组给予0.54g/kg复方鳖甲软肝片灌胃,正常组及模型组给予生理盐水灌胃,1次/d,共12周。12周末麻醉处死大鼠,行肝组织病理学检查,碱水解法检测肝组织羟脯氨酸(HYP)含量,免疫组织化学染色、Western blot、qPCR检测大鼠肝组织wnt1、β-catenin、DKK1的表达。结果与正常组比较,模型组肝纤维化明显,HYP含量和wnt1、β-catenin表达水平升高,DKK1表达水平降低(均Pwnt1、β-catenin和DKK1表达差异无统计学意义(P>0.05),中丹组、高丹组肝纤维化程度明显减轻,HYP含量和wnt1、β-catenin表达水平降低,DKK1表达水平升高(均Pwnt1、β-catenin表达水平升高,DKK1表达水平降低(均P0.05);低、中、高丹组中肝纤维化程度依次减轻,HYP含量及wnt1、β-catenin表达水平依次降低,DKK1表达水平依次升高,组间多重比较差异均有统计学意义(均P1表达,下调wnt1、β-catenin表达,从而抑制wnt/β-catenin通路激活有关。

关键词：丹防胶囊肝纤维化 wnt1 β-连环蛋白 Dickkopf-1

wnt1信号通路在肾透明细胞癌中的表达及作用机制

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Wnt1信号通路在肾透明细胞癌中的表达及作用机制

作者：陈弘复旦大学

学位级别：硕士

第一部分wnt1蛋白在肾透明细胞癌中的表达及作用机制探讨目的初步探讨wnt1在肾透明细胞癌(Renal clear cell carcinoma,RCCC)RCCC中的表达及作用机制。方法免疫组化方法检测RCCC中wnt1蛋白和β-catenin、VEGF、Cyclin T1的表达,分析wnt... 详细信息

第一部分wnt1蛋白在肾透明细胞癌中的表达及作用机制探讨目的初步探讨wnt1在肾透明细胞癌(Renal clear cell carcinoma,RCCC)RCCC中的表达及作用机制。方法免疫组化方法检测RCCC中wnt1蛋白和β-catenin、VEGF、Cyclin T1的表达,分析wnt1与这些蛋白之间、以及wnt1与肿瘤临床特征之间的的相关性。结果40例RCCC肿瘤组织中wnt1染色均为阳性,其中20例(50%)染色强阳性。wnt1在低分化(Fuhrman 3～4级)或进展(TNMⅢ～Ⅳ期)的肿瘤组织中表达较强,差异显著(P分别为0.009、0.02);wnt1表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关。β—catenin在40例RCCC中,15例(37.5%)出现膜表达缺失;36例(90%)肿瘤细胞胞浆呈阳性表达,其中18例(45%)呈强阳性表达;3例(7.5%)有明显的胞核染色。TNMⅢ—Ⅳ期的肿瘤组织中,β—catenin胞膜缺失的比例较TNMⅠ—Ⅱ期高(53.3%比16.0%,P=0.014),临床出现下腔静脉癌栓、下腔静脉癌栓伴肾门淋巴结受累和远处转移的3例病例均伴有β—catenin的膜缺失。wnt1表达与β—catenin的胞浆积聚和胞膜缺失均相关(P分别为0.012、0.024)。wnt1、β—catenin的胞浆表达均与VEGF表达呈正相关性(P分别为0.012、0.015)。RCCC中Cyclin T1表达增强(P＜0.001)。CyclinT1表达与RCCC分级呈正相关性(P=0.028),而与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分期无关(P＞0.05)。RCCC中,wnt1、β—catenin的胞浆表达均与CyclinT1表达呈正相关性(P分别为0.001、0.015)。结论wnt1蛋白在RCCC中普遍表达,主要存于细胞质中,可能参与肿瘤的发生与发展。wnt1蛋白可能通过干扰β—catenin的胞膜定位,影响RCCC肿瘤细胞之间的连接。另外过度表达的wnt1蛋白可能上调β—catenin胞质表达,激活下游信号。VEGF、Cyclin T1可能接受wnt1/β—catenin信号的正向调控,共同参与RCCC的形成。第二部分肾透明细胞癌中wnt1在蛋白水平对β—catenin的调节目的探讨wnt1在蛋白水平对β—catenin蛋白表达的调节。方法Western blot定量检测8例RCCC和2例正常肾组织中wnt1和β—catenin蛋白的表达,分析其相关性。结果2例正常肾组织中,wnt1蛋白的平均含量为1.05;8例RCCC肿瘤组织中,wnt1蛋白的平均含量为1.92,明显高于正常肾组织(P＜0.05)。Fuhrman分级为2级的6例RCCC中,分期较高的2例肿瘤组织wnt1表达均高于分期较低的4例肿瘤组织;TNM同为Ⅰ期的6例RCCC中,分级较高的2例肿瘤组织wnt1表达均高于分级较低的4例肿瘤组织。2例正常肾组织中,β—catenin平均含量为1.07;8例RCCC组织中,β—catenin平均含量为2.43,明显高于正常肾组织(P＜0.01)。Spearman秩相关检验显示,RCCC中,wnt1和β-catenin的蛋白表达总量之间无明显相关性(P＞0.05)。结论wnt1蛋白在RCCC中表达增强。β—catenin的蛋白总量在RCCC中升高,与分布异常一起成为β—catenin胞浆积聚的两大因素。wnt1可能主要通过影响β—catenin的定位来提高胞浆中的β—catenin蛋白水平。第三部分肾透明细胞癌中wnt1和β—catenin在mRNA水平的调节目的在mRNA转录的水平探讨wnt1激活的原因和作用机制。方法RT—PCR检测5例RCCC和对应的肾脏组织中wnt1和β—catenin的mRNA表达水平,分析这两者之间以及这两者与RCCC分级、分期的相关性。结果5例RCCC肿瘤组织中,wnt1的mRNA相对含量均高于配对的正常肾组织(P＜0.05);分级、分期较低的一例肿瘤wnt1的mRNA表达最低,分期分期较高的一例肿瘤wnt1的mRNA表达最高。5例RCCC的β—catenin mRNA水平与正常肾组织相比差异不显著(P＞0.05)。RCCC中,wnt1和β—catenin的mRNA水平无明显相关性(P＞0.05)。结论RCCC中wnt1在mRNA水平即存在激活,而β—catenin mRNA水平的激活不明显。wnt1可能在mRNA的下游对β—catenin进行调节。

关键词：肾透明细胞癌 wnt1 β连环蛋白血管内皮生长因子周期蛋白T1 信号通路

wnt1基因突变对wnt信号通路及Saos2细胞矿化的影响

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WNT1基因突变对WNT信号通路及Saos2细胞矿化的影响

作者：代运章济南大学

学位级别：硕士

成骨不全(osteogenesis imperfecta,OI)是一种间充质组织发育不全,胶原形成障碍而造成的罕见性先天遗传病,遗传方式为常染色体显性或隐形遗传。临床症状表现为骨质脆弱、蓝巩膜、牙本质发育不全、听力障碍等。目前共发现20个基因突变与O... 详细信息

成骨不全(osteogenesis imperfecta,OI)是一种间充质组织发育不全,胶原形成障碍而造成的罕见性先天遗传病,遗传方式为常染色体显性或隐形遗传。临床症状表现为骨质脆弱、蓝巩膜、牙本质发育不全、听力障碍等。目前共发现20个基因突变与OI发病相关,90%以上患者病源于编码Ⅰ型前胶原α链的COL1A1和COL1A2基因发生突变,导致胶原合成量下降或结构改变,表现为显性遗传。其余10%左右的患者致病基因种类繁多,与Ⅰ型胶原蛋白代谢密切相关,涉及到胶原翻译后修饰过程、胶原折叠装配及分泌过程异常、成骨细胞分化、钙离子通道、wnt信号通路等骨发育的诸多方面。其中报道的wnt1基因突变导致的成骨不全患者较少,共计25人。wnt1基因突变在成骨不全中的致病分子机制尚不明确,有待进一步深入研究。目的:进一步验证实验室前期成骨不全患者血液样本进行高通量测序发现的wnt1基因候选突变位点,以发现成骨不全患者中wnt1基因的新的突变位点。过表达wnt1突变体,进行TOPflash实验、wnt1蛋白显性负效应实验和Saos2细胞矿化实验。同时,构建circRNA荧光素酶报告载体,进行双荧光素酶报告实验,检测circRNA对靶向wnt1的miRNA的海绵功能。方法:1.提取患者全血基因组DNA,对前期实验室高通量测序发现的wnt1基因候选突变位点进行Sanger测序验证。2.构建wnt1突变体的过表达载体,瞬时转染HEK293T细胞和Saos2细胞,分别进行TOP-Flash实验、wnt1蛋白显性负效应实验和Saos2细胞矿化实验。3.构建circRNA荧光素酶报告载体,瞬时转染HEK293细胞,检测circRNA对靶向wnt1的miRNA的海绵功能。结果:1.在检测的OI患者中,9个wnt1基因的突变位点是未报道过的,分别为c.301C>T、c.382T>G、c.397G>A、c.620G>A、c.677C>T、c.681C>A、c.774C>A、c.937C>T、c.1010G>C。并同时成功构建其过表达载体wnt1 、wnt1、wnt1、wnt1、wnt1、wnt1、wnt1、wnt1、wnt1。2.在TOPflash实验中,野生型wnt1蛋白作为阳性对照,除S226L突变体外,其余突变型蛋白均与野生型蛋白有显著性差异。3.在显性负效应实验中,野生型wnt1蛋白作为阳性对照,,除Y258*突变型wnt1蛋白外,其余突变型蛋白均与野生型蛋白相比,没有显著性差异,P>0.05。4.在Saos2细胞矿化实验中,根据茜素红染色结果得知突变型wnt1组较野生型wnt1组矿化能力均明显减弱。5.hsairc01308能够与miR-148a和miR-152结合;hsairc01319组中miR-152与对照组相比P=0.59,可能与circRNA1319相互作用;hsairc01372与miR-148a、miR-148b和miR-152相互作用;hsairc01649与miR-133a结合。结论:新检测的wnt1突变位点丰富了中国OI患者突变表达谱,为研究wnt1导致成骨不全的致病机制提供了新的实验资料。TOPflash实验也间接反映出突变型wnt1蛋白使经典wnt信号通路中β-catenin介导的转录活性降低,矿化实验中突变型wnt1组较野生型wnt1组矿化能力均明显减弱。体外突变体wnt1似乎有轻微的显性负效应。pmiRGlo-circRNA1308、circRNA1372和circRNA1649能够结合miRNA,具有miRNA海绵功能。

关键词：成骨不全 wnt1 突变 β-catenin circRNA

wnt1、wnt5a及Survivin蛋白在胰腺导管腺癌中的表达及其临床意义

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Wnt1、Wnt5a及Survivin蛋白在胰腺导管腺癌中的表达及其临床意义

作者：黄祯南昌大学

学位级别：硕士

目的:检测wnt1、wnt5a及Survivin在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织与相应癌旁胰腺组织中的表达,分析wnt1、wnt5a及Survivin与胰腺癌临床病理参数的关系及两两之间表达的相关性,并探讨三者在胰腺癌中的临床意... 详细信息

目的:检测wnt1、wnt5a及Survivin在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织与相应癌旁胰腺组织中的表达,分析wnt1、wnt5a及Survivin与胰腺癌临床病理参数的关系及两两之间表达的相关性,并探讨三者在胰腺癌中的临床意义。方法:收集2008年1月至2013年12月间南昌大学第一附属医院病理科存档石蜡包埋胰腺导管腺癌标本43例,并取相应癌旁胰腺组织标本43例作为对照组,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-perosidase,SP)法检测wnt1、wnt5a及Survivin在PDAC与相应癌旁胰腺组织中的表达,运用SPSS 19.0软件对实验数据进行统计分析。结果:1、wnt1主要表达在细胞质内,在PDAC与相应癌旁胰腺组织中的阳性表达率分别为72.09%(32/43)、34.88%(15/43),PDAC组中wnt1的阳性表达率明显高于癌旁胰腺组织(Pwnt1的表达与PDAC临床病理参数中的组织学分级、神经浸润、淋巴结转移及TNM分期有关(P0.05)。2、wnt5a主要表达在细胞质内,在PDAC与相应癌旁胰腺组织中的阳性表达率分别为69.77%(30/43)、27.91%(12/43),PDAC组中wnt5a的阳性表达率明显高于癌旁胰腺组织(Pwnt5a的表达与PDAC临床病理参数中的神经浸润、淋巴结转移及TNM分期有关(P0.05)。3、Survivin主要表达于细胞质中,在PDAC与相应癌旁胰腺组织中的阳性表达率分别为81.39%(35/43)、11.63%(5/43),PDAC组中Survivin的阳性表达率明显高于癌旁胰腺组织(P0.05)。4、Spearman相关分析结果显示,在PDAC中wnt1与Survivin的表达呈正相关(r=0.542,Pwnt1与wnt5a及wnt5a与Survivin表达之间均无相关性(r=0.194,P>0.05;r=0.186,P>0.05)。结论:wnt1、wnt5a及Survivin的异常表达与胰腺癌的进展密切相关;Survivin可能为wnt1介导的wnt信号通路下游靶基因;联合检测wnt1、wnt5a与Survivin有助于胰腺癌预后的评估判断,并可为胰腺癌的辅助治疗提供理论基础。

关键词：胰腺导管腺癌 wnt1 wnt5a Survivin 免疫组织化学

wnt1、wnt2及sfrp4mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

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wnt1、wnt2及sfrp4mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

作者：曾鸿波中南大学

学位级别：硕士

目的：初步探讨wnt信号在胎盘组织中的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法：用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对40例子痫前期患者（其中轻度患者15例,重度患者25例）及20例正常晚孕者（对照组）胎盘组... 详细信息

目的：初步探讨wnt信号在胎盘组织中的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法：用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对40例子痫前期患者（其中轻度患者15例,重度患者25例）及20例正常晚孕者（对照组）胎盘组织中wnt1mRNA、wnt2mRNA及sfrp4mRNA的表达水平进行检测。结果： 1.子痫前期组胎盘组织中wnt1mRNA表达水平（0.82±0.20）低于对照组（1.40±0.27）,差异有统计学意义（P＜0.05）。重度子痫前期组和轻度子痫前期组表达水平分别为0.79±0.17、0.86±0.22,均低于对照组（P＜0.05）。重度子痫前期组低于轻度子痫前期组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。 2.子痫前期组胎盘组织中wnt2mRNA表达水平（0.39±0.20）低于对照组（1.21±0.25）,差异有统计学意义（P＜0.05）。重度子痫前期组和轻度子痫前期组表达水平分别为0.27±0.09和0.60±0.14,均低于对照组（P＜0.05）。重度子痫前期组低于轻度子痫前期组,差异有统计学意义（P＜0.05）。 3.子痫前期组胎盘组织中sfrp4mRNA表达水平（0.80±0.19）与对照组（0.72±0.14）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。对照组、轻度子痫前期组（0.78±0.15）、重度子痫前期组（0.81±0.22）sfrp4mRNA的表达水平呈上升趋势,但三组两两比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。 4.子痫前期组wnt1mRNA水平与wnt2mRNA水平呈正相关（r=0.417,P＜0.05）,与sfrp4mRNA水平呈负相关（r=-0.425,P＜0.05）, wnt2mRNA水平与sfrp4mRNA水平无相关性（r=-0.029,P＞0.05）。结论： 1. wnt1mRNA, wnt2mRNA及sfrp4mRNA在子痫前期患者和正常晚孕胎盘组织中均有表达。 2.子痫前期患者胎盘中wnt1mRNA及wnt2mRNA水平的降低可能与子痫前期的发病有关,其中wnt2mRNA还可能与病情严重程度有关;sfrp4mRNA与子痫前期的关系尚需进一步研究。 3.wnt1、wnt2通路在传导中有某些交汇,可能对子痫前期的发展起共同作用;sfrp4可能具有抑制wnt1信号的作用,而对wnt2信号无明显抑制。

关键词：子痫前期 wnt1 wnt2 分泌型卷曲相关蛋白4 逆转录聚合酶链反应

芪红通瘀饮对肾间质纤维化大鼠肾组织wnt/β-catenin信号通路的影响

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中华中医药杂志 2020年第4期35卷 1755-1759页

作者：李荣荣马华田树杰马天成郝子娟山西医科大学太原030000 山西医科大学第二医院中医科太原030001

目的:探讨芪红通瘀饮对肾间质纤维化大鼠肾组织中wnt/β-catenin信号通路的影响及作用机制。方法:先将60只雄性SD大鼠随机均分为假手术组,模型组,中药(芪红通瘀饮)低、中、高剂量组,西药组。除假手术组外,各组大鼠均建立左侧输尿管结扎... 详细信息

目的:探讨芪红通瘀饮对肾间质纤维化大鼠肾组织中wnt/β-catenin信号通路的影响及作用机制。方法:先将60只雄性SD大鼠随机均分为假手术组,模型组,中药(芪红通瘀饮)低、中、高剂量组,西药组。除假手术组外,各组大鼠均建立左侧输尿管结扎模型。术后21d采血、取肾。检测各组大鼠血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)的含量;HE、Masson染色观察肾组织的病理变化;免疫组化检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤连蛋白(FN)表达;Western Blot和RT-PCR技术分别检测肾组织中wnt1、β-catenin蛋白和mRNA表达水平。结果:与假手术组比较,模型组血清Scr、BUN显著升高(Pwnt1、β-catenin蛋白及其mRNA表达升高(Pwnt/β-catenin信号转导通路降低wnt1、β-catenin蛋白及其mRNA表达,从而减轻肾间质纤维化。

关键词：芪红通瘀饮肾间质纤维化 wnt1 β-catenin