检索结果-南通市图书馆

山东医药 2020年第26期60卷 24-28页

作者：蒋学军杨勇庹磊吉祖进雷新益湖北省十堰市国药东风总医院湖北十堰442001

目的观察微小RNA-148a(miR-148a)对结直肠癌(CRC)细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其作用机制与wnt1信号通路的关系。方法取人正常结直肠黏膜细胞FHC及人CRC细胞HCT116、SW620,采用qRT-PCR法检测wnt1 mRNA、miR-148a表达。取HCT116细胞... 详细信息

目的观察微小RNA-148a(miR-148a)对结直肠癌(CRC)细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其作用机制与wnt1信号通路的关系。方法取人正常结直肠黏膜细胞FHC及人CRC细胞HCT116、SW620,采用qRT-PCR法检测wnt1 mRNA、miR-148a表达。取HCT116细胞,分为Control组、miR-148a mimic组、miR-148a NC组。转染后48 h,用Transwell法检测HCT116细胞侵袭、迁移情况;通过荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞miR-148a、wnt1 mRNA表达;Western blotting法检测各组细胞wnt1蛋白及通路蛋白相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、侵袭和迁移相关蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达;采用双荧光素酶报告实验验证miR-148a与wnt1的靶向关系。结果与FHC细胞相比,HCT116、SW620细胞中wnt1 mRNA表达升高,miR-148a表达降低(P均0.05)。与Control组和miR-148a NC组相比,miR-148a mimic组wnt1 mRNA表达水平、细胞侵袭、迁移能力及wnt1、β-catenin、MMP-2、N-cadherin蛋白均表达降低,miR-148a表达水平升高(P均0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,与miR-148a NC+wnt1-3′UTR-WT组比较,miR-148a mimic+wnt1-3′UTR-WT组荧光素酶活性降低(Pwnt1/β-catenin通路激活,降低N-cadherin、MMP-2蛋白表达,从而抑制CRC细胞的侵袭、迁移能力。

关键词：微小RNA-148a 结直肠癌 wnt1通路细胞迁移细胞侵袭 N-钙黏蛋白基质金属蛋白酶2

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