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儿童急性髓细胞白血病wt1基因表达及其临床意义

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中国当代儿科杂志 2016年第12期18卷 1211-1216页

作者：唐雪郭霞杨雪肖慧孙静静袁粒星高举四川大学华西第二医院儿科/儿童血液肿瘤科/出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室四川成都610041

目的研究急性髓细胞白血病（AML）患儿wt1基因表达情况及其与临床预后的关系。方法采用实时荧光定量PCR方法检测45例非M3儿童AML的wt1表达水平,并回顾性分析其与AML预后的关系。结果骨髓幼稚细胞比例〉60%的AML患儿wt1表达水平高于幼稚... 详细信息

目的研究急性髓细胞白血病（AML）患儿wt1基因表达情况及其与临床预后的关系。方法采用实时荧光定量PCR方法检测45例非M3儿童AML的wt1表达水平,并回顾性分析其与AML预后的关系。结果骨髓幼稚细胞比例〉60%的AML患儿wt1表达水平高于幼稚细胞≤60%的患儿（P〈0.05）。M2病例组初诊时wt1表达量低于非M2病例组（P〈0.05）。完全缓解组患儿的wt1表达量显著低于初诊组和复发组（P〈0.01）。诱导化疗结束时wt1高表达组的2年无病生存率（DFS）低于wt1低表达组（P〈0.05）。诱导化疗结束时wt1下降程度≥1个数量级病例组的2年总生存率（OS）和DFS高于wt1下降程度〈1个数量级病例组（P〈0.05）。AML患儿骨髓复发2~3个月前wt1表达呈上升趋势。结论 wt1表达水平与儿童AML预后密切相关,动态监测wt1表达在指导儿童AML个体化治疗、预后评估和复发预测方面具有重要临床应用价值。

关键词：急性髓细胞白血病 wt1基因预后实时荧光定量PCR 儿童

wt1基因对骨肉瘤细胞增殖凋亡和侵袭作用的实验研究

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中华解剖与临床杂志 2019年第4期24卷 341-346页

作者：张翼李甲振张岩卢新昌张彬郑州大学第一附属医院骨科郑州450052

目的探讨wt1基因在骨肉瘤中的表达及其对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法体外培养人成骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞MG-63细胞,Western blot法观察wt1蛋白的表达情况。体外培养MG-63细胞,分为siRNA-1组、siRNA-2组、阴性对照组(NC)组、... 详细信息

目的探讨wt1基因在骨肉瘤中的表达及其对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法体外培养人成骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞MG-63细胞,Western blot法观察wt1蛋白的表达情况。体外培养MG-63细胞,分为siRNA-1组、siRNA-2组、阴性对照组(NC)组、空白对照组,分别转染wt1 siRNA-1、wtI siRNA-2及NC链,空白对照只加入转染试剂。转染后采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测siRNA-1组、siRNA-2组、NC组、空白对照组MG-63细胞wt1基因mRNA的表达情况,选择抑制效果好的siRNA-2组用于后续实验。将转染后的MG-63细胞分为siRNA-2组、NC组,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡率,比色法检测Caspase-3活性,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,Western blot法检测wt1、Bcl-2、MMP-2蛋白的表达水平。结果Western blot法检测结果显示,骨肉瘤MG-63细胞中wt1蛋白的相对表达量1.29±0.14,明显高于成骨细胞hFOB1.19的0.23±0.07,差异有统计学意义(t=6.603,Pwt1 mRNA相对表达量均低于NC组和空白对照组,其中siRNA-2的抑制效果更显著,差异有统计学意义(F=12.470,Pwt1、Bcl-2、MMP-2蛋白相对表达量均明显低于NC组,差异均有统计学意义(t=6.063、3.979、4.232,P值均wt1在骨肉瘤细胞中高表达,靶向下调其表达水平可以抑制骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力,诱导细胞凋亡,这可能与Bcl-2和MMP-2表达下调有关。

关键词：骨肉瘤 wt1基因增殖侵袭凋亡

wt1基因检测时机对Wilm s肿瘤合并慢性肾脏疾病预后影响的回顾性队列研究

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中国循证儿科杂志 2019年第4期14卷 266-270页

作者：方晓燕沈剑沈茜毕允力汤小山刘佳璐张致庆翟亦晖陈径李国民吴冰冰钱琰琰徐虹饶佳国家儿童医学中心-复旦大学附属儿科医院肾脏科上海市肾脏发育与儿童肾脏病研究中心上海市出生缺陷重点实验室

目的分析在Wilms肿瘤合并慢性肾脏疾病(CKD)的患儿中wt1基因检测对诊断和长期预后的影响。方法检索上海市肾脏发育与儿童肾脏病研究中心儿童肾脏病基因检测数据库,2001年1月1日至2018年12月31日明确wt1基因突变、年龄<18岁患儿,或Wilms... 详细信息

目的分析在Wilms肿瘤合并慢性肾脏疾病(CKD)的患儿中wt1基因检测对诊断和长期预后的影响。方法检索上海市肾脏发育与儿童肾脏病研究中心儿童肾脏病基因检测数据库,2001年1月1日至2018年12月31日明确wt1基因突变、年龄wt1基因突变分为早诊断组和晚诊断组,以ESRD为终点比较两组的预后。结果22例患儿明确wt1基因的常染色体显性遗传突变,分别位于第8~9外显子/内含子。依据临床分型,10例为Denys-Drash综合征,3例为Fraiser综合征,9例表型为孤立型肾病综合征,5例合并假两性畸形。随访终点进入ESRD有15例,7例进入CKD 2~4期。应用生存曲线分析证实,早诊断组较晚诊断组进入ESRD病程显著延迟(P=0.011)。结论在儿童Wilms肿瘤、肾病综合征/蛋白尿、慢性肾功能损害的患儿中,在肾功能进展恶化之前及早明确wt1基因突变,不仅有助于临床诊断分型,还能显著延缓进入ESRD病程。

关键词：肾病综合征 wt1基因 Denys-Drash综合征 Fraiser综合征慢性肾脏疾病终末期肾衰竭

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肾脏疾病与wt1基因

中华儿科杂志 2009年第3期47卷 233-237页

作者：王晶晶叶礼燕余自华南京军区福州总医院儿科 350025

肾脏疾病是导致终末肾（end—stagerenaldisease，ESRD）的最常见原因之一。近年来的研究进展提示，在表现为蛋白尿甚至肾病综合征的肾脏疾病中，许多类型与wt1基因（Wilms’tumor 1 gene，wt1）突变有关，如孤立性激素耐药型。肾病综... 详细信息

肾脏疾病是导致终末肾（end—stagerenaldisease，ESRD）的最常见原因之一。近年来的研究进展提示，在表现为蛋白尿甚至肾病综合征的肾脏疾病中，许多类型与wt1基因（Wilms’tumor 1 gene，wt1）突变有关，如孤立性激素耐药型。肾病综合征（isolated steroid—resistant nephrotic syndrome，ISRNS）、孤立性弥漫性系膜硬化（isolated diffuse mesangial sclerosis，IDMS）、Denys—Drash综合征（Denys—Drash syndrome，DDS）和Frasier综合征（Frasier syndrome，FS）等。

关键词： wt1基因肾脏疾病 Drash综合征肾病综合征激素耐药型 gene 系膜硬化蛋白尿

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白血病患者wt1基因表达的研究

中华血液学杂志 2002年第7期23卷 367-369页

作者：黄仲夏肖白陈世伦李淑兰刘颖梅刘敬忠首都医科大学附属北京朝阳医院 100020 北京协和医院北京口腔医院

目的　探讨wt1基因与白血病发病的关系和临床意义。方法　采用逆转录巢式聚合酶链反应 (RT 巢式PCR)方法检测了K5 6 2和HL 6 0两个白血病细胞系、4 9例急性白血病 (AL)患者、33例慢性髓系白血病 (CML)患者和 2 5例正常对照的wt1基因表... 详细信息

目的　探讨wt1基因与白血病发病的关系和临床意义。方法　采用逆转录巢式聚合酶链反应 (RT 巢式PCR)方法检测了K5 6 2和HL 6 0两个白血病细胞系、4 9例急性白血病 (AL)患者、33例慢性髓系白血病 (CML)患者和 2 5例正常对照的wt1基因表达。结果　K5 6 2和HL 6 0两个白血病细胞系、2 9例初治或复发AL患者中有 2 1例、2 0例完全缓解 (CR)期AL中有 1例、18例CML急变期中有15例、5例CML加速期中有 1例、10例CML慢性期患者中有 1例表达wt1基因。wt1基因表达见于所有AL亚型 ,其相对水平与急性白血病的CR率有相关性。≥ 1.0的患者CR率低及生存期短。在CML中wt1基因表达表现出明显的阶段性 ,与慢性粒细胞白血病临床阶段及病情进展有关。结论　wt1基因表达与白血病发生有关 ,wt1基因高表达的患者CR率低、无病生存期短 ,可作为判断急性白血病预后和监测微量残留病的一项指标 ,也可作为CML急变的一项诊断指标。

关键词： wt1基因白血病逆转录-聚合酶链反应基因表达

汉族散发性激素耐药型肾病综合征15例NPHS2和wt1基因遗传学变异

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中华儿科杂志 2009年第3期47卷 221-223页

作者：王晶晶付荣叶礼燕陈新民余自华任榕娜黄隽王承峰陈光明黄俊景南京军区福州总医院儿科 350025

近年来的研究证实NPHS2基因（NPHS2）突变可引起散发性激素耐药型肾病综合征（steroid—resistant nephrotic syndrome，SRNS）；wt1基因（wt1）突变可引起孤立性SRNS等肾脏疾病。我们对15例汉族散发性SRNS患儿进行了NPHS2和wt1基因检测。

关键词：激素耐药型肾病综合征 NPHS2基因 wt1基因散发性基因遗传学汉族变异 SRNS

白血病细胞wt1基因启动子区DNA甲基化研究

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中华血液学杂志 2003年第10期24卷 527-529页

作者：王全顺于力赵瑜韩为东高春纪楼方定解放军总医院血液科北京100853

目的　研究白血病细胞wt1启动子区DNA甲基化与其表达的关系。方法　采用RT PCR技术、硫化PCR结合限制性内切酶技术检测白血病细胞系及正常人外周血单个核细胞wt1基因的表达及其启动子区DNA甲基化水平。结果　正常人外周血单个核细胞及U... 详细信息

目的　研究白血病细胞wt1启动子区DNA甲基化与其表达的关系。方法　采用RT PCR技术、硫化PCR结合限制性内切酶技术检测白血病细胞系及正常人外周血单个核细胞wt1基因的表达及其启动子区DNA甲基化水平。结果　正常人外周血单个核细胞及U937细胞不表达wt1基因 ,而HL 6 0、K5 6 2和KG1细胞高表达wt1基因 ,HL 6 0细胞wt1基因无甲基化。结论　wt1基因启动子区DNA甲基化不能抑制其表达 ,尚存在其他调节wt1基因表达的因素。

关键词：白血病 wt1基因 DNA甲基化研究 RT-PCR技术

急性T淋巴细胞白血病异基因造血干细胞移植后wt1基因表达及其与预后关系

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中华血液学杂志 2015年第8期36卷 642-646页

作者：张博赵晓甦秦亚溱王昱闫晨华许兰平张晓辉刘开彦黄晓军北京大学人民医院、北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室100044

目的探讨监测wt1基因在急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患者异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后预后的意义。方法回顾性分析2009年1月至2012年3月在我单位行allo-HSCT，且移植后连续监测wt1基因表达水平的68例T-ALL患者。留取初治，移... 详细信息

目的探讨监测wt1基因在急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患者异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后预后的意义。方法回顾性分析2009年1月至2012年3月在我单位行allo-HSCT，且移植后连续监测wt1基因表达水平的68例T-ALL患者。留取初治，移植前，＋30、＋60、＋90、＋180、＋270、＋360d骨髓标本，用实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）方法监测wt1基因表达水平，同时经流式细胞术（FCM）监测微小残留病（MRD）。结果①移植后wt1基因低水平表达与较低复发风险相关；②＋60、＋90d wt1基因升高与较高累计复发率相关（P〈0．001、P=0．003），与较低的无病生存率（P=0．004、P=0．006）和总生存率相关（P=0．004、P=0．007）；③移植后微小残留病（MRD）阳性是T-ALL移植后复发的独立危险因素；④联合wt1基因和FCM可用于移植后复发的监测。结论＋60、＋90d wt1基因升高与T-ALL预后显著相关，应尽早予以干预，减少复发甚至死亡风险。T-ALL移植后wt1基因表达低于0．6％，复发风险较低；wt1基因表达超过0．6％需密切随访，并结合FCM监测，达到MRD阳性标准需临床干预，降低复发率。

关键词： wt1基因白血病,T淋巴细胞,急性造血干细胞移植复发

53例骨髓增生异常综合征患者wt1基因表达与临床相关性研究

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浙江大学学报（医学版） 2006年第2期35卷 132-135页

作者：黄健金洁徐伟来浙江大学医学院附属第一医院血液科浙江杭州310003

目的:探讨W T 1基因与骨髓增生异常综合征(MDS)发病和病情进展的关系及临床意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测53例MDS患者和10例正常人骨髓中W T 1mRNA表达,并进行半定量分析。结果:MDS患者W T 1mRNA表达阳性率和表... 详细信息

目的:探讨W T 1基因与骨髓增生异常综合征(MDS)发病和病情进展的关系及临床意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测53例MDS患者和10例正常人骨髓中W T 1mRNA表达,并进行半定量分析。结果:MDS患者W T 1mRNA表达阳性率和表达水平均高于正常对照组。W T 1mRNA表达阳性率在MDS-RA和MDS-RA S组,明显低于MDS-RAEB和MDS-RAEB-t组,其表达水平从MDS-RA和MDS-RA S组向MDS-RAEB组和MDS-RAEB-t组逐渐升高。结论:W T 1基因表达与MDS病情发展有关。W T 1基因与疾病进展关系密切,是临床上对MDS病情的高危评估、预测病情变化和动态监测治疗效果及判断预后的重要指标。

关键词：骨髓增生异常综合征/病理学 wt1基因基因表达逆转录聚合酶链反应