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急性髓系白血病的中医证型分布与wt1基因及其他相关因素的研究

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急性髓系白血病的中医证型分布与WT1基因及其他相关因素的研究

作者：李紫璇天津中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过回顾性分析,对AML患者进行中医证型研究,探讨中医证型与患者性别、年龄、wt1基因表达量及AML预后分层的关系,以期为AML的中医预后提供一个新的参考方向。方法:按研究要求选取2017年9月至2019年9月于天津中医药大学第一附属医... 详细信息

目的:通过回顾性分析,对AML患者进行中医证型研究,探讨中医证型与患者性别、年龄、wt1基因表达量及AML预后分层的关系,以期为AML的中医预后提供一个新的参考方向。方法:按研究要求选取2017年9月至2019年9月于天津中医药大学第一附属医院血液科收治的符合纳入标准的AML患者,共计144例,所有患者均接受过化疗,依据《血液病诊断及疗效标准》及《复发难治性急性髓系白血病中国诊疗指南(2017年版)》判定其疗效,根据四诊信息,确定中医证型,将患者分为气血两虚证、气阴两虚证、热毒炽盛证、毒瘀互结证、正虚邪实证5种证型。采用回顾性研究的方法,除wt1基因的测定值外,收集患者骨髓细胞形态学检查、染色体检测报告、基因突变检查,综合上述结果,对所有患者进行预后的危险分层。整理以上数据,采用SPSS 26.0进行统计分析,分别探讨AML中医证型与患者性别、年龄、wt1基因表达量及疾病预后分层的关系、预后的危险分层与wt1基因表达量的关系、AML各亚型(M-M,不包括M)与wt1基因表达的关系。本研究中,所有病人wt1基因实时定量PCR检测由北京海斯特医学检验机构测定,利用Taqman探针荧光定量PCR方法检测样本中wt1基因的m RNA表达量,wt1的表达水平以wt1拷贝数与ABL拷贝数的比值乘以10表示,检出wt1拷贝即认为是阳性。结果:(1)144例患者均接受过化疗,包括化疗后缓解者59例,化疗后未缓解者39例,复发难治者46例;其中气血两虚证20例(缓解13例,未缓解5例,复发难治2例),气阴两虚证23例(缓解21例,未缓解2例);热毒炽盛证28例(未缓解7例,复发难治21例),毒瘀互结证患者8例(未缓解2例,复发难治6例);正虚邪实证65例(缓解25例,未缓解23例,复发难治17例),其中虚实相间证的患者数最多,而仅表现为虚证(气血两虚证或气阴两虚证)或实证(热毒炽盛证或毒瘀互结证)的患者数相对较少。(2)统计144例AML患者,男性患者64例,占44.4%,女性患者80例,占55.6%,男:女=4:5。对各组中医证型的性别进行统计,差异无统计学意义(P>0.05),故本研究认为中医证型分布与患者性别无相关性。(3)144例AML患者最小年龄为18岁,最大年龄为79岁,中位年龄用M±Q标示为56±11岁,将全部患者按年龄段分为三组:18岁-39岁(20例),40岁-59岁(66例),≥60岁(58例),统计各年龄组患者wt1基因表达量,发现AML患者中医证型分布与年龄相关(P18-39岁患者中,气阴两虚证患者所占比例最大,气血两虚证与正虚邪实证比例相当;在40-59岁患者中,正虚邪实证例数最多,占总数50%,其次为热毒炽盛证,为22.7%,气血两虚证及气阴两虚证所占比例相当,毒瘀互结证例数最少;在≥60岁患者中,正虚邪实证比例最高,为44.8%,热毒炽盛证次之,其余三证例数相当。(4)分析各年龄组患者wt1基因的表达情况,其差异有统计学意义(Pwt1基因表达水平存在相关性。将各年龄组两两比较,18-39岁组与40-59岁具有显著性差异(Pwt1基因中位表达量高于18-39岁患者;18-39岁与≥60岁患者相比较,≥60岁组患者中位表达水平较高,两组差异具有统计学意义(Pwt1基因表达水平关系中,经统计分析,wt1表达水平在AML亚型中分布不同(Pwt1表达水平高于M组与M组,而在其余各组的两两比较中,在本次研究中均显示无统计学意义(P>0.05)。(6)统计各危险分层组中wt1基因表达量,wt1基因表达水平与疾病危险分层有关(Pwt1基因表达量高于低危组(Pwt1表达水平亦高于低危组(P0.05),说明wt1基因在高危组及中危组中表达水平较高,而在低危组中表达水平相对较低。AML不同危险分层提示不同的预后,因此,wt1基因表达水平高者预后较差,而表达量低者预后相对较好。(7)在AML的疾病预后分层与中医证型的关系中,气血两虚证与气阴两虚证的低危患者所占比例最大,分别为85.0%、82.6%,中危组与高危组患者数极少;在热毒炽盛证与毒瘀互结证中高危组患者所占比例最高,分别为60.7%、62.5%;在正虚邪实证中,中危组患者例数最多,所占比例为40.0%。经Fisher确切概率法得检验有统计学意义(Pwt1基因的m RNA表达量,5组wt1基因表达水平有统计学差异(P<0.0

关键词：急性髓系白血病中医证型 wt1基因预后分层

RT-PCR检测wt1基因在白血病患者中的表达及临床意义

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RT-PCR检测WT1基因在白血病患者中的表达及临床意义

作者：聂波昆明医学院

学位级别：硕士

[目的] 研究wt1基因在白血病患者中的表达情况及其临床意义。 [方法] 运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法，检测wt1基因在50例白血病患者及8例正常人、3例血液系统非恶性肿瘤患者中的表达。分析wt1基因在白血病患者中的表达规... 详细信息

[目的] 研究wt1基因在白血病患者中的表达情况及其临床意义。 [方法] 运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法，检测wt1基因在50例白血病患者及8例正常人、3例血液系统非恶性肿瘤患者中的表达。分析wt1基因在白血病患者中的表达规律，及其与白血病转归、预后等的关系。 [结果] RT-PCR检测wt1基因的灵敏性为10。急性非淋巴细胞白血病(ANLL)22例中有17例(77.3％)，急性淋巴细胞性白血病(ALL)11例中有6例(54.5％)，及急性混合细胞性白血病(AMLL)1例wt1基因表达阳性，且FAB分型中各型急性白血病均可呈阳性表达。慢性粒细胞白血病(CML)15例，其中慢性期8例wt1基因表达均为阴性，急变期9例，5例wt1基因表达阳性(55.6％)。其表达与CML的病情演进有关。浆细胞白血病1例(PCL)wt1基因表达阴性。8名正常人及3例血液系统非恶性肿瘤疾病患者wt1基因表达均为阴性。可见wt1表达与白血病转归有关，可先于临床提示复发;且wt1基因表达阳性患者缓解率(CR+PR)低于表达阴性者(分别为31.3％和69.2％，P＜0.05)。 [结论1 wtI基因的表达可见于各种类型的白血病，而无论其有无特异性肿瘤标志。动态观察发现wtI基因的表达具有一定的规律性，可作为临床评估预后、检测微小残留病(MRD)的泛白血病基因标志及CML病程演进的指标。

关键词：白血病 wt1基因微小残留病

猪早期胚胎和泌尿生殖器官发育过程中wt1基因表达和组蛋白乙酰化变化的研究

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猪早期胚胎和泌尿生殖器官发育过程中WT1基因表达和组蛋白乙酰化...

作者：谭文涛吉林大学

学位级别：硕士

维尔姆氏瘤（Wilms tumour）或称为肾母细胞瘤，是一种儿童多见的肾脏恶性肿瘤。维尔姆氏瘤基因1（Wilms tumour gene1，wt1基因）是唯一一个与维尔姆氏瘤的发生相关的基因，而且被普遍认为是该肿瘤的抑制基因。wt1基因通过调控多个基... 详细信息

维尔姆氏瘤（Wilms tumour）或称为肾母细胞瘤，是一种儿童多见的肾脏恶性肿瘤。维尔姆氏瘤基因1（Wilms tumour gene1，wt1基因）是唯一一个与维尔姆氏瘤的发生相关的基因，而且被普遍认为是该肿瘤的抑制基因。wt1基因通过调控多个基因的表达进而影响细胞增殖与发育，对于肾脏、睾丸和卵巢的发育起到至关重要的作用，它能影响器官发生、功能维持以及多个发育相关基因表达的调控。研究发现，组蛋白乙酰化能够调控wt1基因的表达从而影响其功能的发挥。然而，在猪泌尿系统各器官发育过程中，wt1基因的表达水平以及组蛋白乙酰化对wt1基因表达调控的机制目前还不得而知，亟待进一步研究。本实验针对猪泌尿生殖器官中wt1基因的表达方式、功能以及wt1基因表达水平与总体组蛋白乙酰化程度之间的相互关系进行了研究。结果显示： 1、在猪早期胚胎阶段wt1基因在GV期和MII期中高表达，在孤雌囊胚中表达量极低，在其他孤雌胚胎时期中几乎不表达;在新生仔猪和成体猪各主要器官中，wt1基因高表达于脾、肾、卵巢和睾丸中。 2、丁酸钠（NaBu）处理猪肾成纤维细胞（PKF）后，PKF中wt1和组蛋白H4的表达量随着NaBu浓度的提高和处理时间的延长而上升，而且wt1和组蛋白H4在PKF中的表达位置一致。 3、随着发育的进行猪肾脏、卵巢和睾丸的组织结构发生了明显的变化;此外，在E35d、E60d、新生仔猪和成体猪泌尿生殖器官中，wt1和组蛋白H4共表达于特定的组织细胞中，而且wt1高表达的组织细胞中组蛋白H4也同样高表达。综上所述，wt1基因高表达于胚胎期猪、新生仔猪和成体猪的肾脏、卵巢和睾丸中，说明wt1基因在猪泌尿生殖器官的发育、形成以及成熟后器官正常功能的维持中发挥着重要作用。此外，总体乙酰化水平的提高能有效地提高PKF中wt1基因的表达;在各发育时期猪泌尿生殖器官中，高度的组蛋白乙酰化调控着wt1基因的高表达，进而保证了猪泌尿生殖器官的发育、形成以及正常功能的维持。本实验对猪早期胚胎和泌尿生殖器官发育过程中wt1基因表达和组蛋白乙酰化变化的关系做出了系统研究，为以后探索wt1基因的表达模式以及wt1基因和组蛋白乙酰化之间具体的调控机制提供了理论基础和实验依据。

关键词： wt1基因组蛋白乙酰化泌尿生殖器官早期胚胎猪

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓细胞PIG-A基因突变形式及EGR-1、wt1基因表达水平研究

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阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓细胞PIG-A基因突变形式及EGR-1...

作者：李丽燕天津医科大学

学位级别：硕士

目的：了解阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)患者PIG-A基因突变形式及EGR-1基因(early growth response gene)、wt1基因(Wilms’ tumor gene) mRNA表达水平,探讨中国PNH患者PIG-A基因突变特点及PNH克隆获得增殖优势的机制。方法：研究对象为20例,其中PNH患者16例,AA-PNH综合征患者4例,正常对照10例。采用流式细胞术(FCM)检测PNH患者及AA-PNH综合征患者外周血及骨髓CD55-及CD59-细胞的比例,并分选出CD59-的骨髓单个核细胞(BMMNCS)。应用DNA测序法检测PIG-A基因突变的形式;RT-PCR方法检测CD59+ BMMNC及CD59- BMMNC wt1基因及EGR-1基因mRNA的表达水平。结果： 1.对16例PNH患者中的9例和4例AA-PNH患者中的1例进行了BMMNCPIG-A基因突变形式的检测,共发现了5种突变形式,均为碱基置换,包括鸟嘌呤替代腺嘌呤,胸腺嘧啶替代鸟嘌呤,胸腺嘧啶替代腺嘌呤,鸟嘌呤替代胸腺嘧啶,胞嘧啶替代鸟嘌呤,其中1例为同义突变,余为错义突变。其中有3例PNH患者同时存在2个以上的点突变,未发现插入或者缺失突变形式。对上述结果进行了突变形式的阳性率分析,G替代A的阳性率为30.0%(3/10),T替代G的阳性率为20.0%(2/10),T替代A的阳性率为10.0%(1/10),G替代T的阳性率为10.0%(1/10),C替代G的阳性率为10.0%(1/10)。我们所研究的10例患者,BMMNC PIG-A基因有突变患者的CD59-细胞数量高于没有突变者,且突变形式为G替代A的CD59-细胞数量高于其他突变的形式。 2.PNH及AA-PNH患者CD59-细胞组、CD59+细胞组及正常对照组EGR-1mRNA的相对表达量分别为(1.00±0.11)、(0.86±0.14)和(0.85±0.06),CD59-细胞组明显高于CD59+细胞组和正常对照组(p均0.05);PNH及AA-PNH患者CD59-细胞组、CD59+细胞组及正常对照组wt1 mRNA的相对表达量分别为(1.06±0.16)、(0.90±0.14)和(0.85±0.06),CD59-细胞组明显高于CD59+细胞组和正常对照组(p均0.05)。EGR-1、wt1mRNA的相对表达量与CD59-细胞数量均呈正相关关系(相关系数分别为0.509、0.481,p均基因突变主要表现为单个碱基的置换,且随机分布于基因的编码区,没有突变热点及丛集现象,PNH克隆EGR-1基因和wt1基因过表达对其取得增殖优势可能起到促进作用。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿 PIG-A基因突变 wt1基因 EGR-1基因

儿童白血病CDX2基因的表达和临床意义及其与wt1基因的对照研究

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儿童白血病CDX2基因的表达和临床意义及其与WT1基因的对照研究

作者：李迎侠第四军医大学

学位级别：硕士

目的探讨尾型同源盒转录因子-2(caudal-related homeodomain transcription -2 CDX2)在儿童白血病中的表达及临床意义,及其与wt1基因的比较。方法本研究以wt1基因作为同期对照基因,应用RT-PCR技术检测儿童白血病患者骨髓(BM)及外周血... 详细信息

目的探讨尾型同源盒转录因子-2(caudal-related homeodomain transcription -2 CDX2)在儿童白血病中的表达及临床意义,及其与wt1基因的比较。方法本研究以wt1基因作为同期对照基因,应用RT-PCR技术检测儿童白血病患者骨髓(BM)及外周血(PB)单个核细胞(MNC)CDX2基因的表达情况。儿童白血病患者60例,AL未缓解组39例,其中初发35例(ALL 25例, AML 10例),复发4例;AL缓解组18例;CML 3例。并设立17例成人白血病(ALL 5例,AML 8例,CML 3例,CLL 1例)患者及25例健康体检者对照。监测11例AL患儿骨髓及外周血中CDX2基因与wt1基因在初治、治疗第13-19天及诱导缓解后表达水平的变化,并随访8月～14月观察其病情变化,对CDX2基因、wt1基因监测MRD的作用进行比较和分析,阐述CDX2基因用于检测儿童白血病MRD的可行性。结果 1初发儿童白血病与成人白血病CDX2基因表达情况初发儿童白血病患者38例,AL组CDX2基因表达总阳性率80.0%(28/35例);其中ALL组和AML组CDX2阳性率比较(88.0% vs 0%)差异无统计学意义(P=0.084,P>0.05),两组CDX2表达水平(0.6181±0.2342 vs 0.6230±0.2441)无明显统计学差异(t=0.055,P>0.05);3例CML患儿CDX2基因表达阳性1例。成人白血病患者17例,AL组CDX2基因表达总阳性率69.2%(9/13例),3例CML患者CDX2表达阳性1例,1例CLL患者CDX2表达阳性。儿童组与成人组AL的CDX2表达阳性率相比(80.0% vs 69.2%)差异无统计学意义(P =0.334,P>0.05),两组CDX2表达水平(0.5961±0.2317 vs 0.5981±0.2862)无明显统计学差异(t=0.025,P>0.05)。儿童组与成人组ALL患者CDX2阳性率相比(88.0% vs 40%)差异有统计学意义(P =0.041,P 基因表达阳性率相比(60.0% vs 87.5% )差异无统计学意义(P =0.225,P >0.05)。健康对照组25例,CDX2基因表达均为阴性,与儿童AL组相比有显著统计学差异( =37.5, P 1),且儿童AL、ALL和AML CDX2基因表达水平较健康对照组明显增高(0.5910±0.2225,0.6181±0.2342,0.6230±0.2441)。儿童AL初发组CDX2基因表达水平低于复发组(0.5910±0.2225 vs 0.7733±0.0465)(t=2.912,P基因与wt1基因表达的阳性率比较儿童AL未缓解组、缓解组CDX2表达总阳性率(82.1% vs 0%)比较有显著统计学差异( =33.67, P 1);未缓解组与对照组比较(82.1% vs 0%)有显著统计学差异( =41, P 1);其中未缓解ALL组、AML组CDX2阳性率(89.3% vs 63.6%)比较无统计学意义(P=0.083,P >0.05)。未缓解组wt1基因、CDX2基因阳性率(48.7% vs 82.1%)比较差异有统计学意义(P=0.049,Pwt1基因、CDX2基因阳性率(46.4% vs 89.3%)比较,差异有统计学意义(Pwt1基因、CDX2基因阳性率(54.5% vs 63.6%)比较差异无统计学意义。 3 CDX2、wt1基因与临床疗效的关系初发AL患儿中,CDX2基因表达阳性、阴性者CR率(96.4% vs 100%)比较无统计学差异(P =0.8,P >0.05);CDX2基因与wt1基因表达阴性组的CR率比较差异无统计学意义(P=1,P>0.05);二者表达阳性组的CR率比较,差异无统计学意义(P=0.9,P>0.05)。CDX2基因、wt1基因表达双阳性组与双阴性组、双阳性组与单阳性组、单阳性组与双阴性组比较均无统计学差异。除外1例CDX2基因、wt1基因表达均为阳性的ALL患儿化疗第19天、诱导化疗结束时均未达CR,判为高危,家长放弃治疗外,余患儿均获CR。 4儿童AL CDX2基因与wt1基因表达的相关性比较 CDX2基因表达阳性、阴性的儿童AL中,wt1基因表达阳性率分别为46.8%(15/32)和57.1%(4/7),统计分析CDX2基因与wt1基因在儿童AL中的表达无明显相关性(P =0.531,P >0.05)。 5急性白血病病程中CDX2基因与wt1基因表达的动态观察 11例AL患儿随访8～14个月,初诊时CDX2表达阳性的9例患儿,5例于治疗第13～19天时转为阴

关键词：尾型同源盒转录因子-2 RT-PCR 白血病微小残留病 wt1基因儿童

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wt1基因在白血病中的表达及其临床意义

昆明医学院学报 2003年第4期24卷 100-103页

作者：聂波杨绵本昆明医学院第一附属医院血液内科昆明650032

wt1基因最早作为Wilms瘤的抑癌基因被发现 .近年来发现它在造血组织中也有表达 ,并与白血病的发生、发展及预后有关 .由于wt1在白血病中的表达有一定规律性 ,故可能成为微小残留白血病的检测标志 .

关键词： wt1基因白血病基因表达抑癌基因预后

wt1基因在成人初发急性髓系白血病患者中的表达及其临床意义

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中国药物与临床 2018年第7期18卷 1191-1193页

作者：安泽峰葛晓燕王梅芳康建民陈阳秦晓璐杨林花山西医科大学第二临床医学院太原030001 山西医科大学第二医院血液科

急性髓系白血病（AML）是以造血干细胞恶性增殖分化,不成熟的髓系原始细胞在骨髓和外周血中累积为特征的恶性疾病。临床特征以贫血、出血、感染和髓外浸润为主。本文对2014年4月至2016年6月山西医科大学第二医院住院部初诊的非早幼粒细... 详细信息

急性髓系白血病（AML）是以造血干细胞恶性增殖分化,不成熟的髓系原始细胞在骨髓和外周血中累积为特征的恶性疾病。临床特征以贫血、出血、感染和髓外浸润为主。本文对2014年4月至2016年6月山西医科大学第二医院住院部初诊的非早幼粒细胞白血病（APL）的AML患者的临床资料及实验室特征进行回顾性分析,以期对非APL的AML患者微小残留病灶（MRD）做出更准确的判断。

关键词：急性髓系白血病白血病患者 wt1基因临床意义山西医科大学第二医院早幼粒细胞白血病初发成人

wt1基因联合FCM-MRD预测急性髓系白血病早期复发的临床研究

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现代临床医学 2020年第4期46卷 246-248页

作者：杨威陈尚萍张雄王艳丽龚燕玲古茂群董颖王思敏茂名市人民医院血液内科广东茂名525000

目的:探讨wt1基因联合FCM-MRD预测急性髓系白血病(AML)早期复发的临床价值。方法:选取2014年12月至2017年12月我院收治的100例AML患者,分别于治疗前,治疗后1、3、6、12个月采用RQ-PCR技术检测wt1基因表达水平,采用FCM分析患者微小残留病... 详细信息

目的:探讨wt1基因联合FCM-MRD预测急性髓系白血病(AML)早期复发的临床价值。方法:选取2014年12月至2017年12月我院收治的100例AML患者,分别于治疗前,治疗后1、3、6、12个月采用RQ-PCR技术检测wt1基因表达水平,采用FCM分析患者微小残留病灶(MRD)水平。随访1年后,根据预后情况分为缓解组54例和复发组46例,探讨两组间wt1基因表达水平和MRD水平变化。结果:治疗后1、3、6、12个月,复发组的FCM-MRD阳性率高于缓解组(P1)。治疗后3、6、12个月,复发组wt1基因的表达量高于缓解组(P1)。wt1基因与FCMMRD联合预测AML早期复发的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、有效性均高于单独wt1基因和单独FCMMRD(Pwt1基因表达水平和MRD水平,有助于预测疾病复发风险。

关键词： wt1基因 FCM-MRD检测急性髓系白血病复发

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wt1基因与造血系统肿瘤研究现状

临床血液学杂志 2017年第3期30卷 395-398页

作者：张玉玲李海亮赣南医学院江西赣州341000 赣南医学院第一附属医院血液科

wt1基因位于人类染色体11p13,分子量约50kb,编码产物为转录调节因子,与Wilms瘤的形成密切相关,它的突变与AML的未成熟表型有关[1]。笔者就wt1在造血系统肿瘤中的表达、表达调控、靶基因及临床应用价值的研究进行综述。现报告如下。

关键词： wt1基因造血调控微小残留病白血病靶向治疗