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Dual effect of wisp-1 in diverse pathological processes

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Chinese Journal of Cancer Research 2016年第6期28卷 553-560页

作者： Mengmeng Feng Shuqin Jia Laboratory of Surgery the Affiliated Hospital Inner Mongolia Medical University Key Laboratory of Carcinogenesis and Translational Research (Ministry of Education/Beijing) Molecular Oncology Laboratory Peking University Cancer Hospital & Institute Key Laboratory of Carcinogenesis and Translational Research (Ministry of Education/Beijing) Center for Molecular Diagnosis Peking University Cancer Hospital & Institute

Wnt-1 inducible signaling pathway-1（wisp-1）, also known as CCN-4, belongs to the connective tissue growth factor（CTGF） family. wisp-1 is primarily expressed in embryonic stem cells and is involved in adult organ development. wisp-1 participates in many cellular processes, including proliferation, differentiation, apoptosis and adhesion. In addition, wisp-1 plays an important role in diverse pathophysiological processes, such as embryonic development, inflammation, injury repairs and cancers. Recent studies showed that wisp-1 was highly correlated with tumor progression and malignant transformation, whereas it played an oncogenic role in colorectal cancer,cholangiocarcinoma, hepatocellular carcinoma and breast cancer. However, interestingly, wisp-1 exerts a tumorsuppressing role in lung and prostate cancers. wisp-1 promotes cell proliferation, adhesion, motility, invasion,metastasis and epithelial-to-mesenchymal transition via particular signaling pathways. In this review, we discussed the structure, expression profile, functions, clinical significance and potential mechanisms of wisp-1 in cancer and non-neoplastic diseases.

关键词： wisp-1 cancer clinical significance metastasis oncogene tumor suppressor

Reprogramming of cancer-associated fibroblasts by apoptotic cancer cells inhibits lung metastasis via Notch1-wisp-1 signaling

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Cellular & Molecular Immunology 2022年第12期19卷 1373-1391页

作者： Hee Ja Kim Kyungwon Yang Kiyoon Kim Ye‐Ji Lee Sieun Lee Sung Yong Ahn Young‐Ho Ahn Jihee Lee Kang Department of Physiology College of MedicineEwha Womans UniversitySeoul07804Korea Inflammation-Cancer Microenvironment Research Center College of MedicineEwha Womans UniversitySeoul07804Korea Department of Molecular Medicine College of MedicineEwha Womans UniversitySeoul07804Korea

The interplay between apoptotic cancer cells and the tumor microenvironment modulates cancer progression and ***-associated fibroblasts(CAFs)play a crucial role in promoting these events through paracrine ***,we demonstrate that conditioned medium(CM)from lung CAFs exposed to apoptotic cancer cells suppresses TGF-β1-induced migration and invasion of cancer cells and *** exposure of CAFs to apoptotic 344SQ cells(ApoSQ)inhibited CAF migration and invasion and the expression of CAF activation *** secretion of Wnt‐induced signaling protein 1(wisp-1)by CAFs exposed to ApoSQ was required for these antimigratory and anti-invasive *** inhibition of Notch1 activation or siRNA-mediated Notch1 silencing prevented wisp-1 production by CAFs and reversed the antimigratory and anti-invasive *** expression of the Notch ligand delta-like protein 1 on the surface of ultraviolet-irradiated apoptotic lung cancer cells triggered Notch1-wisp-1 *** receptor brain-specific angiogenesis inhibitor 1(BAI1)-Rac1 signaling,which facilitated efferocytosis by CAFs,participated in crosstalk with Notch1 signaling for optimal production of *** addition,a single injection of ApoSQ enhanced wisp-1 production,suppressed the expression of CAF activation markers in isolated Thy1^(+)CAFs,and inhibited lung metastasis in syngeneic immunocompetent mice via Notch1 *** with CM from CAFs exposed to ApoSQ suppressed tumor growth and lung metastasis,whereas treatment with wisp-1-immunodepleted CM from CAFs exposed to ApoSQ reversed the antitumorigenic and antimetastatic ***,treatment with CM from CAFs exposed to apoptotic lung cancer cells could be therapeutically applied to suppress CAF activation,thereby preventing cancer progression and metastasis.

关键词： CAFs Apoptotic lung cancer cells Notch1 wisp-1 Efferocytosis Migration Invasion Metastasis

Effect of siRNA on wisp-1 gene expression,proliferation,migration and adhesion of mouse hepatocellular carcinoma cells

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Asian Pacific Journal of Tropical Medicine 2015年第10期8卷 803-809页

作者： Jian Ge Xiao-Hua Zhang Fang Wang Yu Wang Qing-Yan Li Wei Tao Guo-Hua Ren Department of Gastroenterology Affiliated Shandong Provincial Hospital of Shandong University School of Nursing Binzhou Vocational College Department of Gastroenterology Zhangqiu People's Hospital Department of Gastroenterology General Hospital of Ningxia Medical University Department of Medical Oncology Shandong Cancer Hospital and Institute

Objective:To study the inhibition effect of siRNA on the expression of wisp-1 gene in Hca-F of mouse hepatocellular carcinoma cells strain and also its effect on the proliferation,migration and adhesion of hepatocellular carcinoma ***:Three expression vectors of siRNA were ***2000 was employed to transfect Hca-F cells and Western blot was used to detect the inhibition effect of siRNA on the expression of wisp-1 ***,CCK8 was adopted to detect the effect of wisp-1 siRNA on the proliferation of Hca-F cells;Annexin V-FTTC/PI double staining flow cytometry was used to detect the effect of wisp-1 siRNA on the apoptosis of Hca-F cells;Transwell was used to detect the effect of wisp-1 siRNA on the migration of Hca-F *** in vitro cell adhesion kit was used to detect of wisp-1 siRNA on the change in the components of extracellular matrix to which Hca-F cells *** blot was used to detect the activation of protein kinase B(AKT)/glycogen synthase kinase-3(3pathway and the expression of downstream target protein p53 and matrix metal!***:The siRNA showed interference effect on the expression of wisp-1 *** with the control group,after being transfected to cells,wisp-1 siRNA could significantly inhibit the proliferation,migration and adhesion of Hca-F cells and also promote the cell apoptosis,which was related to the down-regulated phosphorylation of AKT and glycogen synthase kinase-3β and the expression of p53 and matrix metalIoproteinases-2(Pwisp-1 expression can reduce the proliferation,migration and adhesion of mouse hepatocellular carcinoma cells,which is related to the AKT/ glycogen synthase kinase-3 β ***-1 gene may be the potential target to cure the hepatocellular carcinoma.

关键词： Hepatocellular carcinoma cells wisp-1 RNA interfer

肺癌组织中CTGF和wisp-1基因表达的研究

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卫生研究 2008年第5期37卷 555-557页

作者：李宁王旗陈萍萍谢东崔玲玲李文杰郑州大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室郑州450001 中国科学院营养研究所

目的研究肺癌中CTGF和wisp-1基因表达与临床病理因素的关系。方法采用RT-PCR和免疫组化染色法对60名肺癌患者的癌组织和癌旁正常肺组织中CTGF和wisp-1表达水平进行测定。结果65%(39/60)的肺癌组织CTGF基因表达水平低于癌旁正常肺组织(t=... 详细信息

目的研究肺癌中CTGF和wisp-1基因表达与临床病理因素的关系。方法采用RT-PCR和免疫组化染色法对60名肺癌患者的癌组织和癌旁正常肺组织中CTGF和wisp-1表达水平进行测定。结果65%(39/60)的肺癌组织CTGF基因表达水平低于癌旁正常肺组织(t=-1.59,P=0.016);83%(50/60)的肺癌组织wisp-1基因表达水平高于癌旁正常肺组织(t=4.15,P=0.000),此结果得到免疫组化的证实。Pearson相关分析:wisp-1和CTGF基因的表达呈显著负相关(r=-0.299;P=0.020)。多元线性回归分析:肿瘤位置和性别对癌组织CTGF基因表达有重要影响;病理类型、年龄和家族史对wisp-1基因表达有影响。结论CTGF和wisp-1基因中单个基因或两个基因相互作用对肺癌的进展均起重要作用及其与临床病理因素的关系。

关键词： CTGF wisp-1 肺癌基因表达

wisp-1与VEGF-A在老年食管鳞癌组织中表达的临床意义

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肿瘤防治研究 2024年第10期51卷 858-863页

作者：李晨露黄俊星南京医科大学附属泰州人民医院肿瘤科泰州225300

目的探索WNT1诱导信号通路蛋白-1(wisp-1)及血管内皮生长因子-A(VEGF-A)在老年食管鳞状细胞癌(ESCC)患者中作为新的分子标志物的临床价值。方法将老年ESCC分为65~70岁组与>70岁组,分别应用免疫组织化学染色法与RT-PCR检测wisp-1、VEGF-... 详细信息

目的探索WNT1诱导信号通路蛋白-1(wisp-1)及血管内皮生长因子-A(VEGF-A)在老年食管鳞状细胞癌(ESCC)患者中作为新的分子标志物的临床价值。方法将老年ESCC分为65~70岁组与>70岁组,分别应用免疫组织化学染色法与RT-PCR检测wisp-1、VEGF-A蛋白与m RNA的表达。Log rank检验分析临床病理特征与食管鳞癌预后的关系。结果ESCC组织中wisp-1阳性表达率明显高于癌旁组织(53.33%vs.35.42%,P=0.045)、>70岁及有淋巴结转移的患者显著高于65~70岁(P=0.047)及无淋巴结转移的患者(P=0.032)。ESCC组织中VEGF-A蛋白的阳性表达率显著高于癌旁组织(50.00%vs.20.83%,P=0.001),浸润程度T3~T4期、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期显著高于T1~T2、无淋巴结转移、Ⅰ~Ⅱ期患者(P=0.030、0.006、0.010)。wisp-1mRNA和VEGF-A mRNA表达水平明显高于癌旁组织(Pwisp-1及VEGF-A表达水平与老年ESCC的预后相关(Pwisp-1及VEGF-A与老年ESCC患者恶性行为相关,且年龄越大,wisp-1表达越高,有作为老年ESCC新的分子标志物的潜能。

关键词：老年食管鳞癌 wisp-1 VEGF-A

膝关节骨性关节炎中wisp-1调控机制的研究

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中国骨质疏松杂志 2015年第5期21卷 537-540,549页

作者：姜旭吴成爱王莹赵丹慧北京积水潭医院矫形骨科 100035 北京市创伤骨科研究所 100035

目的使用膝关节骨性关节炎(OA)临床组织标本与人软骨细胞株(NHAC),以分子生物学手法探讨wisp-1在骨关节软骨基质合成和分泌中的调控机理,明确其在骨性关节炎中的作用。方法 NHAC细胞以1.4×106/m L密度播种于6孔板(直径3.5 cm)后培养48... 详细信息

目的使用膝关节骨性关节炎(OA)临床组织标本与人软骨细胞株(NHAC),以分子生物学手法探讨wisp-1在骨关节软骨基质合成和分泌中的调控机理,明确其在骨性关节炎中的作用。方法 NHAC细胞以1.4×106/m L密度播种于6孔板(直径3.5 cm)后培养48 h,于含有0.2%牛血清白蛋白(BSA)的DF中继续培养12 h,使细胞处于静止状态。向含0.02%BSA的DF培养基中加入10、50和100 ng/m L的Wnt刺激细胞6 h。对照siRNA与β-catenin siRNA,使用Entranser TM-R(Engreen)转染试剂转染至NHAC。转染24 h后使用PBS清洗细胞两次。向含0.02%BSA的DF培养基中加入50 ng/m L的Wnt刺激细胞。向NHAC负荷不同剂量wisp-1,24 h后观察MMPs和ADAMTS4。利用总RNA提取试剂盒提取组织标本和细胞RNA,反转录产物c DNA作为PCR扩增模板进行定量PCR;使用蛋白提取试剂盒提取蛋白。结果在膝关节组织标本中发现,在骨性关节炎关节软骨中wisp-1、Wnt和b-catenin基因表达及蛋白水平明显增高。在NHAC细胞,Wnt诱导下wisp-1转录水平显著提高,与Wnt呈现剂量依赖关系。经敲除内源性β-catenin表达后,Wnt诱导wisp-1作用明显降低。wisp-1以量依存性的诱导细胞外基质蛋白分解酶MMP3、MMP9、MMP13和ADAMTS4基因表达在软骨细胞中Wnt诱导wisp-1信号途径通过β-catenin的可能性很大。结论 wisp-1与骨性关节炎的发生具有一定的相关性;在软骨细胞中Wnt诱导wisp-1的信号途径通过b-catenin。

关键词：膝关节骨性关节炎软骨细胞 wisp-1 信号传导细胞外基质

wisp-1、MMP-2在结直肠腺瘤和腺癌中的表达及其意义

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WISP-1、MMP-2在结直肠腺瘤和腺癌中的表达及其意义

作者：王连兰州大学

学位级别：硕士

目的检测人结直肠腺癌、结直肠腺瘤和正常肠黏膜中wisp-1、MMP-2的蛋白及基因表达水平,探讨两者在结直肠肿瘤发生、发展过程中可能发挥的作用及与结直肠肿瘤临床病理特征的关系。方法采用免疫组化PV-9000法检测112例结直肠腺癌组织、5... 详细信息

目的检测人结直肠腺癌、结直肠腺瘤和正常肠黏膜中wisp-1、MMP-2的蛋白及基因表达水平,探讨两者在结直肠肿瘤发生、发展过程中可能发挥的作用及与结直肠肿瘤临床病理特征的关系。方法采用免疫组化PV-9000法检测112例结直肠腺癌组织、56例结直肠腺瘤及30例癌旁正常组织中wisp-1和MMP-2蛋白的表达情况;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测12例结直肠腺瘤组织、40例结直肠腺癌组织及其对应的正常肠黏膜中wisp-1mRNA和MMP-2mRNA的相对含量。结果(1)wisp-1和MMP-2在结直肠腺癌组织中阳性表达率明显高于结直肠腺瘤组织和正常结直肠黏膜,统计分析差异有显著性(P均wisp-1和MMP-2在结直肠腺癌中的表达与肿瘤大小、TNM分期、组织学分化程度、浆膜浸润及淋巴结转移均呈有显著相关性(Pwisp-1与MMP-2的表达呈正相关(r=0.732,Pwisp-1与MMP-2在结直肠腺瘤组织中的表达水平显著高于正常组织,统计分析差异有显著性(P均wisp-1和MMP-2的表达与腺瘤的组织学类型、异型增生程度等临床病理指标有显著相关性(P均wisp-1mRNA(?)(?)MMP-2mRNA表达与蛋白表达水平一致,从正常肠黏膜→腺瘤→腺癌,其表达水平呈逐渐增高趋势。结论(1)wisp-1和MMP-2基因的异常表达与结直肠腺瘤癌变密切相关,是结直肠腺癌发生的早期事件,有望对结直肠腺癌的早期诊断提供帮助。 (2)wisp-1和MMP-2的表达与结直肠腺癌的大小、分化程度、浆膜浸润、淋巴结转移及TNM分期有关,可以作为潜在预测结直肠腺癌浸润和转移的指标,联合检测两者的表达,对于评估患者的病情有一定的临床参考价值。

关键词：结直肠肿瘤 Wnt信号通路 wisp-1 MMP-2 RT-PCR 免疫组织化学

wisp-1在肾脏纤维化中的作用及其机制研究

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WISP-1在肾脏纤维化中的作用及其机制研究

作者：杨雪西南医科大学

学位级别：硕士

目的:肾脏纤维化是以细胞外基质（Extracellularmatrix,ECM）的过度积聚和沉积为主要病理特征的一种肾脏病理损害,是各种慢性肾脏病（Chronic kidney disease,CKD）进展至终末期肾脏病（End-stage kidney disease,ESKD）的共同通路。其... 详细信息

目的:肾脏纤维化是以细胞外基质（Extracellularmatrix,ECM）的过度积聚和沉积为主要病理特征的一种肾脏病理损害,是各种慢性肾脏病（Chronic kidney disease,CKD）进展至终末期肾脏病（End-stage kidney disease,ESKD）的共同通路。其发病机制复杂,无有效的防治措施。我们前期研究发现,WNT1诱导信号通路蛋白1（WNT1-inducible signaling pathway protein 1,wisp-1）在有肾纤维化的CKD患者的肾组织、血清以及体内、外肾脏纤维化模型中表达水平均一致性的升高,且CKD患者血清wisp-1的表达随着肾组织纤维化程度的加重而明显增强,提示wisp-1可能是促进肾纤维化的因子,参与肾纤维化的发生发展。本研究旨在进一步明确wisp-1在体内外肾脏纤维化模型中的功能作用,并探讨其可能的分子机制,为肾脏纤维化的治疗提供新的思路。方法:1、利用质粒及siRNA转染技术上调或干扰wisp-1在大鼠肾小管上皮细胞株NRK52E中的表达,进一步采用定量实时聚合酶链式反应（Quantitative real-time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR）和蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测在转化生长因子（Transforming growth factor,TGF）-β1刺激24小时后,wisp-1和肾脏纤维化指标包括胶原蛋白Ⅰ（Collagen Ⅰ,Col Ⅰ）和纤维连接蛋白（Fibronectin,FN）的表达。2、利用单侧输尿管梗阻（Unilateral ureteral obstruction,UUO）小鼠模型构建肾脏纤维化的体内模型,将市售抗wisp-1的单克隆和/或多克隆抗体通过腹腔注射入动物体内,以抑制小鼠肾脏中wisp-1的表达。实验分组:正常组、模型组、UUO+IgG组、UUO+不同wisp-1抗体组（包括UUO+Ab1、UUO+Ab2、UUO+Ab3）;利用常规病理染色（HE、PAS、Masson三色染色）观察肾脏病理、肾纤维化变化;通过免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）染色、qRT-PCR 及 Western blot 检测 wisp-1及纤维化指标Col I、FN和α-平滑肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）的表达。3、使用lipofectamine 3000将GFP-LC3质粒转染入NRK52E细胞,激光共聚焦荧光显微镜观察细胞中代表自噬体形成的GFP-LC3斑点的表达;利用Western blot检测各组小鼠肾组织中自噬相关标记物包括抗微管相关蛋白 1 轻链 3（anti-microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3）,Beclin 1 和 SQSTM1/p62 的变化。结果:1、转染过表达wisp-1质粒的NRK52E中,wisp-1表达较空质粒组明显升高（P=7.00x10-3）;而瞬时转染wisp-1的NRK52E,wisp-1表达较正常组明显减少（P=7.25x10-4）。2、TGF-β1诱导24小时后,NRK52E中Col I、FN及TGF-β1明显上升;而过表达wisp-1,TGF-β1诱导NRK52E产生的ColⅠ、FN较空质粒组进一步升高（P=3.26x10-4（Col Ⅰ）、9.50×10-5（FN））;干扰wisp-1在NRK52E细胞中的表达较正常组进一步减少了TGF-β1诱导的纤维化标志物Col Ⅰ和FN的产生（P2.23×10-4（Col Ⅰ）、1.70×10-5（FN））。3、UUO小鼠腹腔注射抗wisp-1抗体7天后,UUO+wisp-1 不同抗体组的 wisp-1 在 mRNA(P=1.20×10-2（UUO+Ab1组）、3.00×10-5（UUO+Ab2 组）、9.30×10-4（（UUO+Ab3 组））、蛋白（P=2.42×10-3（UUO+Ab1-组）、3.46×10-2（UUO+Ab2 组）、1.50x10-2（UUO+Ab3组））较UUO组明显降低;4、从病理表现上,相比UUO组和UUO+IgG组,UUO+wisp-1不同抗体组小鼠肾间质纤维化、细胞外基质沉积明显减轻;5、UUO+wisp-1不同抗体组小鼠肾组织的ColⅠ、FN和α-SMA的mRNA和蛋白质水平较UUO组和UUO+IgG组表达显著降低（mRNA:UUO+Ab1 组:P=3.78x10-4（Col Ⅰ）、1.35×10-2（FN）、1.98×10-2（α-SMA）;UUO+Ab2 组:P=1.20×10-5（Col Ⅰ）、1.26×10-4（FN）、1.06

关键词： wisp-1 肾脏纤维化 TGF-β1 单侧输尿管梗阻自噬

肾癌组织wisp-1表达及其临床意义的探讨

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中华肿瘤防治杂志 2009年第16期16卷 1238-1241页

作者：牛志宏丁森泰高德轩丁克家吕家驹山东大学附属省立医院泌尿外科山东济南250021

目的:探讨肾癌组织中WNT诱导的分泌型蛋白-1(wisp-1)基因的表达及意义。方法:应用实时RT-PCR和免疫组化法检测31例肾癌组织和18例癌旁正常肾组织中wisp-1mRNA和蛋白的表达。结果:wisp-1mRNA在肾癌组织中的表达中位值(3.37)显著低于癌旁... 详细信息

目的:探讨肾癌组织中WNT诱导的分泌型蛋白-1(wisp-1)基因的表达及意义。方法:应用实时RT-PCR和免疫组化法检测31例肾癌组织和18例癌旁正常肾组织中wisp-1mRNA和蛋白的表达。结果:wisp-1mRNA在肾癌组织中的表达中位值(3.37)显著低于癌旁正常组织(9.32),Pwisp-1表达水平与肿瘤分期、大小无显著相关。肾癌组织和正常肾组织中wisp-1免疫组化阳性率分别为71.0%和100%,Pwisp-1可能与肾癌的发生和分化相关。

关键词：肾肿瘤/病理学 wisp-1 mRNA 免疫组织化学