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中国现代应用药学 2023年第2期40卷 172-178页

作者：屠凌岚颜冬梅杭州医学院检验医学院、生物工程学院杭州310013

目的研究wbscr22是否参与调控细胞铁死亡。方法设计合成靶向人wbscr22基因的siRNA(siwbscr22),瞬时转染敲低wbscr22 mRNA;RT-qPCR、Western blotting分别检测wbscr22 mRNA、蛋白表达水平;铁死亡诱导剂Erastin、RSL3单独或联合抗氧化剂NAC、坏死抑制剂NSA、凋亡抑制剂ZVAD-FMK、自噬抑制剂3-MA作用于人结直肠癌细胞系HCT116和RKO、人肺癌细胞系H460、人肝癌细胞系SMMC7721,CCK8法检测细胞死亡率;丙二醛法、菲罗嗪法分别检测细胞脂质过氧化水平、Fe^(2+)浓度。结果siwbscr22瞬时转染显著降低wbscr22 mRNA及蛋白水平;wbscr22敲低显著促进Erastin、RSL3诱导的HCT116、RKO、H460、SMMC7721细胞铁死亡;加入NAC后显著降低Erastin、RSL3诱导的wbscr22敲低细胞铁死亡,而加入NSA、ZVAD-FMK、3-MA对Erastin、RSL3诱导的wbscr22敲低细胞铁死亡无影响;Erastin、RSL3诱导后细胞内的Fe^(2+)浓度无明显变化,脂质过氧化水平显著增加。结论wbscr22基因参与调控肿瘤细胞铁死亡。

关键词： wbscr22 铁死亡肿瘤细胞脂质过氧化 Fe^(2+)

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wbscr22在脑胶质瘤中的表达与临床病理特征及预后关系

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现代生物医学进展 2020年第19期20卷 3668-3672页

作者：黄波刘耀华金瑞日李森李勇南京医科大学附属上海一院临床医学院神经外科上海200080 上海市第一人民医院神经外科上海200080 上海交通大学附属松江医院中心实验室上海201600 上海交通大学附属松江医院神经外科上海201600

目的:探索wbscr22在脑胶质瘤中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法:通过生物信息学数据库,分析wbscr22表达与脑胶质瘤生存的关系、在不同种族脑胶质瘤表达差异。通过免疫组织化学法检测wbscr22在171例脑胶质瘤组织芯片中的表达,... 详细信息

目的:探索wbscr22在脑胶质瘤中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法:通过生物信息学数据库,分析wbscr22表达与脑胶质瘤生存的关系、在不同种族脑胶质瘤表达差异。通过免疫组织化学法检测wbscr22在171例脑胶质瘤组织芯片中的表达,分析其与脑胶质瘤患者临床病理特征及总生存期的关系。结果:生物信息学分析显示脑胶质瘤wbscr22表达高的患者生存期较表达低的患者短(Pwbscr22表达较高加索人、非洲人种表达升高(Pwbscr22的表达存在差异,差异具有统计学意义(Pwbscr22表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)wbscr22高表达患者的总生存期明显短于wbscr22低表达患者的总生存期(Pwbscr22在亚洲人群脑胶质瘤中表达较高,其表达水平与肿瘤分级相关,且脑胶质瘤细胞wbscr22表达水平越高,总生存期越短。

关键词： wbscr22 胶质瘤临床病理

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人源肾细胞(HEK293T)蛋白LGALS1真核表达载体的构建

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现代畜牧科技 2021年第8期40卷 6-9,16页

作者：刘起豪孙延鸣石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

目的:扩增LGALS1、ZFP36L2、wbscr22三种蛋白的基因,构建其真核表达载体,为后续蛋白互作、毒力因子分析等实验奠定基础。方法:根据毒力蛋白基因序列,使用premier 5.0软件设计了三对特异性引物用于基因扩增。以HEK293T细胞中提取出的RNA... 详细信息

目的:扩增LGALS1、ZFP36L2、wbscr22三种蛋白的基因,构建其真核表达载体,为后续蛋白互作、毒力因子分析等实验奠定基础。方法:根据毒力蛋白基因序列,使用premier 5.0软件设计了三对特异性引物用于基因扩增。以HEK293T细胞中提取出的RNA反转录出的cDNA为模板,PCR法扩增三种基因LGALS1、ZFP36L2、wbscr22,连接至pMD19-T载体,构建出pMD19-T-LGALS1、ZFP36L2、wbscr22,分别经Nde I和BamH I,EcoR I和Nde I,BamH I和EcoR I双酶切后连接到pGBKT7真核表达载体中,构建出pGBKT7-LGALS1、pGBKT7-ZFP36L2、pGBKT7-wbscr22。结果:目的基因LGALS1、ZFP36L2、wbscr22扩增成功,pMD19-T-LGALS1、pMD19-T-ZFP36L2、pMD19-T-wbscr22连接成功,双酶切成功,真核表达载体pGBKT7-LGALS1构建成功,pGBKT7-ZFP36L2、pGBKT7-wbscr22构建失败。结论:真核表达载体pGBKT7-LGALS1成功构建,为后续实验的进行提供了便利。pGBKT7-ZFP36L2、pGBKT7-wbscr22构建失败,积累了丰厚的实验经验。

关键词： HEK293T LGALS1 ZFP36L2 wbscr22 真核表达载体

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