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初发2型糖尿病患者血清vaspin水平与颈动脉斑块的相关性

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山东大学学报（医学版） 2011年第10期49卷 79-82,88页

作者：李振作张艳马驰骋刘金波孙宇侯新国陈丽山东大学齐鲁医院内分泌科济南250012 济南市第四人民医院内分泌科济南250031 新泰市第二人民医院内分泌科山东新泰271200 济南市第四人民医院ICU科济南250031

目的探讨初发2型糖尿病(T2DM)患者血清vaspin水平与血糖、血脂、胰岛素抵抗等代谢因素及糖尿病早期颈动脉粥样硬化的关系。方法选择初发T2DM患者69例,根据有无颈动脉斑块分为糖尿病无斑块组(男17例,女15例)和糖尿病伴斑块组(男20例,女17... 详细信息

目的探讨初发2型糖尿病(T2DM)患者血清vaspin水平与血糖、血脂、胰岛素抵抗等代谢因素及糖尿病早期颈动脉粥样硬化的关系。方法选择初发T2DM患者69例,根据有无颈动脉斑块分为糖尿病无斑块组(男17例,女15例)和糖尿病伴斑块组(男20例,女17例),另外选择年龄、性别相匹配的健康查体者为对照组(男15例,女11例)。测定收缩压(SBP)、腰围(WC)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标,采用ELISA方法测定血清vaspin水平。结果校正年龄、性别后,糖尿病无斑块组的血清vaspin水平显著高于对照组[(0.66±0.22)ng/mLvs(0.46±0.12)ng/mL,Pvaspin水平低于无斑块组[(0.52±0.22)ng/mL vs(0.66±0.22)ng/mL,Pvaspin与HOMA-IR呈负相关(r=-0.276,P=0.025)。Logistic回归分析结果显示,SBP和vaspin水平是糖尿病发生颈动脉硬化的独立相关因素。结论血清vaspin水平在初发T2DM人群中升高,血清vaspin水平下降可能与初发T2DM患者颈动脉斑块形成有关联。

关键词： 2型糖尿病 vaspin 大血管病变颈动脉粥样硬化

糖代谢改善对2型糖尿病患者血浆vaspin水平的影响

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中国糖尿病杂志 2012年第9期20卷 650-653页

作者：陈燕李伶杨刚毅李钶李生兵董静重庆医科大学附属第二医院内分泌科 400010 重庆医科大学检验系临床生化教研室

目的观察糖代谢改善对T2DM患者血浆vaspin水平的影响。方法采用ELISA法测定正常人(NGT)及T2DM患者使用预混人胰岛素类似物治疗前后的血浆vaspin水平,分析血浆vaspin水平与BMI、体内脂肪百分比(Fat%)、WHR、血脂、血糖、HbA1c、FFA等的... 详细信息

目的观察糖代谢改善对T2DM患者血浆vaspin水平的影响。方法采用ELISA法测定正常人(NGT)及T2DM患者使用预混人胰岛素类似物治疗前后的血浆vaspin水平,分析血浆vaspin水平与BMI、体内脂肪百分比(Fat%)、WHR、血脂、血糖、HbA1c、FFA等的关系。结果 T2DM患者血浆vaspin水平明显高于正常人[(0.69±0.04)μg/L vs(0.54±0.22)μg/L,Pvaspin水平也明显降低[(0.69±0.04)μg/L vs(0.64±0.39)μg/L,Pvaspin水平与BMI、Fat%和WHR呈明显正相关(r=0.34,Pvaspin水平的独立相关因素。结论预混人胰岛素类似物能有效改善T2DM患者糖代谢,同时降低其血浆vaspin水平。

关键词：糖尿病,2型 vaspin 人胰岛素类似物二甲双胍

vaspin对高脂喂养小鼠肝脏脂质聚集的影响

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中国老年学杂志 2018年第13期38卷 3206-3209页

作者：吴光秀周泽华孙建娟唐亮熊那况小璐肖蓉重庆涪陵中心医院内分泌科重庆408000

目的探究脂肪细胞因子vaspin表达上调对高脂喂养小鼠肝脏脂肪聚集的影响。方法 48只鼠龄7 w的雄性小鼠随机分为普食对照组(NC),普食vaspin组(NV),高脂对照组(HC)和高脂vaspin组(HV)各12只。各组均喂养16 w。NV、HV组于14 w末腹腔注射小... 详细信息

目的探究脂肪细胞因子vaspin表达上调对高脂喂养小鼠肝脏脂肪聚集的影响。方法 48只鼠龄7 w的雄性小鼠随机分为普食对照组(NC),普食vaspin组(NV),高脂对照组(HC)和高脂vaspin组(HV)各12只。各组均喂养16 w。NV、HV组于14 w末腹腔注射小鼠源性vaspin重组蛋白(2 mg·kg^(-1)·d^(-1)),共2 w;NC、HC组腹腔注射等剂量无菌生理盐水。16 w后取小鼠血浆和肝脏样本,测定空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素(FIns)、血脂水平及血浆vaspin浓度变化;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测各组肝脏组织脂肪含量、vaspin mRNA及蛋白、三酰甘油(TG)、代谢相关基因脂肪酸合成酶(FAS)、肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT)^(-1)及激素敏感性脂肪酶(HSL)的mRNA水平的变化。结果与NC组相比,HC组体质量、FBG、PIns、TG、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、血浆vaspin、TC水平及肝脏组织脂肪合成关键基因FAS及ACC mRNA表达均显著升高(均Pvaspin的mRNA水平均显著升高(均Pvaspin、肝脏vaspin水平、血浆HDL-C、脂肪氧化分解关键基因CPT^(-1)及HSL的mRNA水平均显著升高(Pvaspin能够抑制高脂喂养小鼠肝脏脂肪聚集,其调控机制可能与抑制肝脏脂肪合成而促进脂肪氧化分解相关。

关键词：脂肪细胞因子 vaspin 肝脏脂肪变性脂肪代谢

vaspin对高脂喂养大鼠胰岛素抵抗的影响及机制研究

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Vaspin对高脂喂养大鼠胰岛素抵抗的影响及机制研究

作者：杜芳山西医科大学

学位级别：硕士

目的:1、探讨vaspin能否改善高脂喂养大鼠的胰岛素抵抗;2、探讨vaspin是否通过作用于肝脏的IRS/PI3K/Akt及NF-κB信号通路,进而改善高脂喂养大鼠的胰岛素抵抗。方法:30只8周龄雄性SD大鼠,适应性喂养一周后,随机分为正常组（NC组,n=10）... 详细信息

目的:1、探讨vaspin能否改善高脂喂养大鼠的胰岛素抵抗;2、探讨vaspin是否通过作用于肝脏的IRS/PI3K/Akt及NF-κB信号通路,进而改善高脂喂养大鼠的胰岛素抵抗。方法:30只8周龄雄性SD大鼠,适应性喂养一周后,随机分为正常组（NC组,n=10）和模型组（n=20）。正常组喂以正常饲料,模型组以高脂饲料喂养16周建立胰岛素抵抗模型。胰岛素抵抗大鼠随机分为高脂组（HFD组,n=10）和320ng/ml vaspin干预组（HFD+vaspin组,n=10）。HFD+vaspin组经腹腔注射vaspin蛋白溶液,每日1次,共干预8周,NC组和HFD组分别给予相应体积的生理盐水。干预结束后称重并留取血标本,检测血清中空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）的水平,行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）和胰岛素耐受性试验（ITT）评估大鼠糖耐量及胰岛素耐受性,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验评估外周组织胰岛素敏感性的变化。分离大鼠肝脏组织,采用Western blot、RT-PCR检测大鼠肝脏IRS/PI3K/Akt、NF-κB信号通路及下游炎性因子的表达水平。结果:vaspin干预后,血清FBG、FINS、TNF-α、IL-6浓度显著降低（P＜0.05）,而体重、TG、TC水平无明显变化（P＞0.05）;OGTT和ITT曲线下面积均明显减少（P＜0.05）;葡萄糖输注率较高脂组明显增加（P＜0.05）;肝脏组织中p-IRS-2蛋白的表达减少,p-Akt、GLUT-2的表达增加（P＜0.05）;肝脏组织中p-I?Bα、NF-?B蛋白的表达减少,下游炎性因子TNF-α、IL-6 m RNA水平降低（P＜0.05）。结论:vaspin可促进肝脏组织IRS/PI3K/Akt信号通路的传导,改善大鼠的胰岛素敏感性,且vaspin可抑制NF-?B信号分子的表达,减轻机体的炎症状态,进而改善大鼠的胰岛素抵抗状态,最终降低血糖。

关键词： vaspin IRS/PI3K/Akt NF-κB 胰岛素抵抗

vaspin通过AMPK/mTOR自噬信号通路对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能的影响

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Vaspin通过AMPK/mTOR自噬信号通路对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能...

作者：魏姣姣山西医科大学

学位级别：硕士

目的:1.探讨vaspin对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞自噬及其功能的影响。2.探讨vaspin是否通过调控AMPK/mTOR自噬信号通路,进而影响2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能。方法:通过高脂高糖喂养联合单次腹腔注射STZ构建2型糖尿病大鼠模型,将T... 详细信息

目的:1.探讨vaspin对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞自噬及其功能的影响。2.探讨vaspin是否通过调控AMPK/mTOR自噬信号通路,进而影响2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能。方法:通过高脂高糖喂养联合单次腹腔注射STZ构建2型糖尿病大鼠模型,将T2DM大鼠随机分为2型糖尿病组(T2DM组)及vaspin干预组(T2DM+vaspin组),标准饲料喂养的健康同龄SD大鼠作为正常对照组(NC组)。T2DM+vaspin组腹腔注射vaspin溶液,NC组及T2DM组腹腔注射等剂量生理盐水,共干预8周。干预结束后,检测大鼠空腹血糖(FBG)、体重、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC),行腹腔注射葡萄糖(IPGTT)及胰岛素耐量实验(IPITT)评估各组大鼠胰岛素敏感性,高葡萄糖钳夹实验评估大鼠胰岛β细胞功能,HE染色观察胰腺组织病理学形态,免疫组化检测自噬关键蛋白(LC3、P62)及胰岛素水平,Western blot测定自噬信号通路(AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR)及自噬相关蛋白(LC3II/LC3I、P62)水平。结果:干预8周后,T2DM+vaspin组大鼠FBG、TG、TC、葡萄糖及胰岛素耐量血糖曲线下面积较T2DM组降低(Pvaspin组大鼠胰岛形态较T2DM组改善;免疫组化发现T2DM+vaspin组大鼠胰腺组织胰岛素及LC3蛋白水平较T2DM组大鼠升高(Pvaspin组大鼠胰腺组织p-AMPK/AMPK及LC3II/LC3I蛋白比值较T2DM组大鼠升高(Pvaspin可能通过激活AMPK/mTOR信号通路介导2型糖尿病大鼠胰岛β细胞自噬,改善胰岛β细胞功能。

关键词： vaspin 2型糖尿病 AMPK/mTOR信号通路自噬胰岛β细胞功能

vaspin通过PI3K/Akt通路发挥抗炎及血管内皮保护作用减轻LPS致ARDS小鼠肺损伤

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Vaspin通过PI3K/Akt通路发挥抗炎及血管内皮保护作用减轻LPS致ARD...

作者：李雯重庆医科大学

学位级别：硕士

目的探讨vaspin对LPS致ARDS小鼠的保护作用及其可能机制。方法1.将40只雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分组:正常对照组(control组)、LPS干预组(LPS组)、LPS+vaspin组(vaspin组)、LPS+vaspin+wortmannin(PI3K抑制剂)(wortmannin组),每组10只。2.气管插管法滴注LPS造模,24 h后放血处死小鼠。3.苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,肺湿干比重(W/D)评估肺水肿情况,BCA法检测支气管支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量,评估肺组织通透性改变;髓过氧化物酶(MPO)试剂盒检测肺组织MPO活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织中TNF-α及IL-1β含量,免疫组织化学法(IHC)法观察肺组织中血管细胞间粘附分子(VCAM-1)的表达,western blot法检测肺组织cleaved caspase-3的表达和Akt磷酸化水平。结果***滴注24 h后,与control组相比,LPS组肺组织损伤明显,呈现典型的ARDS表现,肺组织W/D值,BALF蛋白含量显著增加(Pvaspin干预明显改善肺组织病理变化(Pvaspin引起的效应被wortmannin阻断。***滴注24 h后,与control组相比,小鼠肺组织MPO活性、TNF-α和IL-1β含量,以及VCAM-1的表达显著增加(Pvaspin干预后小鼠肺组织MPO活性、TNF-α和IL-1β含量,以及VCAM-1的表达显著降低(Pvaspin引起的效应被wortmannin阻断。***滴注24 h后,与control组相比,小鼠肺组织cleaved caspase-3的表达显著增加(Pvaspin干预后小鼠肺组织cleaved caspase-3的表达显著降低(Pvaspin引起的效应变化。***滴注24 h后,与control组相比,LPS组Akt磷酸化水平显著降低(Pvaspin干预可明显增加Akt的磷酸化水平(Pvaspin可通过其介导的抗炎、抗凋亡及血管内皮保护效应对LPS致ARDS肺损伤发挥保护性调控,作用机制至少部分与PI3K/Akt信号通路激活有关。

关键词：急性呼吸窘迫综合征 vaspin 炎症血管内皮 PI3K/Akt

vaspin通过调节自噬依赖性心肌衰老减轻病理性心肌肥厚

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Vaspin通过调节自噬依赖性心肌衰老减轻病理性心肌肥厚

作者：芮海英山东大学

学位级别：硕士

研究背景vaspin,全称为:内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂。内脏脂肪组织分泌vaspin并将其释放入血液循环中发挥生物学效应。既往研究表明,vaspin可通过自分泌、旁分泌和内分泌机制减轻胰岛素抵抗、肥胖、代谢紊乱和肝脏脂肪变性等... 详细信息

研究背景vaspin,全称为:内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂。内脏脂肪组织分泌vaspin并将其释放入血液循环中发挥生物学效应。既往研究表明,vaspin可通过自分泌、旁分泌和内分泌机制减轻胰岛素抵抗、肥胖、代谢紊乱和肝脏脂肪变性等多种疾病的发生发展。回顾vaspin的研究历程,近年来研究发现vaspin分泌到外周血的水平与高血压和动脉粥样硬化等心血管疾病的发生发展密切相关。冠心病病人的血清中vaspin的水平明显低于相同性别年龄的健康人群,且vaspin水平更低的冠心病患者的不良心血管事件发生率更高,说明vaspin是评价冠心病患者预后的重要预测因子。此外,vaspin对缺血/再灌注和糖尿病引起的心肌损伤也有保护作用,其机制与调节凋亡、炎症和自噬有关。然而,vaspin是否能影响病理性心肌肥厚尚不清楚,需要科研工作者进一步的探讨。研究目的1.研究脂肪因子vaspin对病理性心肌肥厚的影响;2.探讨脂肪因子vaspin对心肌细胞早衰的影响;3.探讨脂肪因子vaspin作用于心肌细胞早衰与病理性心脏重构的具体分子调控机制,为临床上抑制心脏恶性重构的进程提供基础实验支持。研究方法一、动物实验1.通过采用基因编辑技术（CRISPR技术）剪切目标基因Serpina12的蛋白编码区,剪切后,小鼠的生殖细胞会进行NHEJ的DNA修复,导致vaspin的蛋白编码区产生移码突变,使得vaspin蛋白丢弃或失活,从而获得vaspin-KO小鼠;2.建立小鼠病理性心肌肥厚模型:C57BL/6野生型和vaspin-KO小鼠,给予皮下注射异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO）（5mg/kg/d,溶于生理盐水）建立心肌肥厚模型,每天1次,连续9天,分为:野生型+盐水组、野生型+ISO组、vaspin-KO+盐水组、vaspin-KO+ISO组。vaspin-KO小鼠病理性心肌肥厚模型中,预先给予Buparlisib（PI3K抑制剂,50mg/kg）和Rapamycin（雷帕霉素）（mTOR抑制剂,20 mg/kg）干预。分组如下:vaspin-KO+Buparlisib溶剂对照、vaspin-KO+Buparlisib、vaspin-KO+雷帕霉素溶剂对照、vaspin-KO+雷帕霉素;3.小动物超声检测ISO皮下注射9天后各组小鼠心功能变化;4.测量各组小鼠ISO处理后的心脏重量及体重,计算比值;5.苏木素-伊红（HE）组织切片染色和麦胚凝集素（WGA）组织切片染色检测ISO皮下注射9天后各组小鼠心肌组织肥大程度;6.天狼猩红（picrosiriusred）组织切片染色和马松（masson）组织切片染色检测ISO皮下注射9天后心脏组织纤维化程度;***-PCR法检测ISO皮下注射9天后各组小鼠心肌中Colla1、Co13a1、ANP、BNP、Myh7、18S等心肌肥厚基因和纤维化基因的mRNA转录水平;***皮下注射9天后各组小鼠心肌组织切片中P16蛋白的表达差异变化通过免疫组化实验技术检测;9.蛋白印迹法检测ISO皮下注射9天后各组小鼠心肌组织中衰老相关分子和自噬相关分子的蛋白的表达水平,例如:P16、P53、P21、γ-H2AX、PI3K、AKT、P-AKT、mTOR、P-mTOR、LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62 和 GAPDH。二、细胞实验1.建立H9C2细胞病理性心肌肥厚模型实验分组:① con,vaspin,ISO,ISO+vaspin;②con,ISO,ISO+vaspin;③con,ISO,ISO+vaspin,ISO+vaspin+氯喹（CQ）;④ISO,ISO+CQ,ISO+vaspin,ISO+vaspin+CQ;2.细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测各组H9C2细胞加入不同刺激后的心肌细胞的衰老水平;3.免疫荧光染色标记各组H9C2细胞加入不同刺激后衰老蛋白P21的表达变化;4.对H9C2细胞转染mRFP-GFP-LC3腺病毒后依据分组加入不同刺激,通过评估细胞内的自噬小体和自噬溶酶体的数量,判断自噬流是否通畅;5.蛋白免疫印迹法检测各组H9C2细胞加入不同刺激后衰老相关分子和自噬相关分子的蛋白的表达水平,例如:P16、P53、P21、γ-H2AX、PI3K、AKT、P-AKT、mTOR、P-mTOR、LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62 和 GAPDH;6.各组H9C2细胞加入不同刺激后通过透射电镜检测细胞内的自噬小体和自噬溶酶体的数量;***-PCR法检测各组H9C2细胞加入不同刺激后ANP、BNP、β-MHC、18S等心肌细胞肥大基因的mRNA转录水平。研究结果***-KO加重了 ISO诱导的心肌组织肥厚与纤维化,且相比于WT小鼠注射ISO,ISO导致的vaspin-KO小鼠的心脏功能更差;***-

关键词： vaspin 病理性心肌肥厚自噬流心肌衰老

活动期溃疡性结肠炎患者血清vaspin水平及其临床意义

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胃肠病学 2014年第5期19卷 291-293页

作者：杨熹庞智皇甫照尹少朋江苏盛泽医院消化内科 215228 江苏省苏州市立医院北区消化内科

背景：脂肪细胞因子与机体内能量稳定相关，并介导多种免疫应答和炎症反应。内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂 vaspin 是近年发现的一种与炎症反应有关的脂肪细胞因子。目的：检测活动期溃疡性结肠炎（UC）患者的血清 vaspin 水平并探... 详细信息

背景：脂肪细胞因子与机体内能量稳定相关，并介导多种免疫应答和炎症反应。内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂 vaspin 是近年发现的一种与炎症反应有关的脂肪细胞因子。目的：检测活动期溃疡性结肠炎（UC）患者的血清 vaspin 水平并探讨其临床意义。方法：选取2008年1月～2013年4月苏州市立医院收治的150例活动期UC 患者，以150名健康体检者作为正常对照组。采用 ELISA 法检测血清 vaspin 水平，并分析其与 UC 临床特征的相关性。结果：UC 患者血清 vaspin 水平显著高于正常对照者[（1．86±0．38）μg/L 对（0．96±0．43）μg/L，P ＜0．01]，并与血清 CRP 水平和疾病活动指数呈显著正相关（r ＝0．628，P ＜0．01；r ＝0．514，P ＜0．05），与血清 ESR水平和病变部位无关（r ＝0．098，P ＞0．05；r ＝0．124，P ＞0．05）。结论：vaspin 可能在 UC 发生、发展的病理生理机制中发挥重要作用。

关键词： vaspin 脂肪因子类结肠炎溃疡性酶联免疫吸附测定

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vaspin改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗

基础医学与临床 2016年第11期36卷 1560-1562页

作者：刘师伟王明明杜芳李欣张丽王军姜茜申竹芳山西医科大学附属大医院内分泌科山西太原030032 山西医科大学研究生学院山西太原030001 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050

胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）是2型糖尿病（type 2diabetes mellitus,T2DM）的主要发病机制之一。内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂（visceral adipose tissue-derived serpin,vaspin）是从OLETF大鼠内脏脂肪组织中分离出来的... 详细信息

关键词：胰岛素抵抗 vaspin 内脏脂肪组织糖尿病大鼠脂肪细胞因子主要发病机制胰岛素增敏正常葡萄糖 visceral adipose