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中华检验医学杂志 2013年第1期36卷 82-84页

作者：宁明哲沈翰周万青张之烽张葵童明庆南京大学医学院附属鼓楼医院检验科 210008 南京医科大学第一附属医院检验科

碳青霉烯类抗生素是临床治疗肠杆菌科细菌尤其是产超广谱β内酰胺酶（extended spectrum beta lactamase，ESBL）及AmpC酶等多重耐药菌株引起感染的最有效的抗菌药物之一。近年来，随着碳青霉烯酶的出现，给肠杆菌科细菌的治疗带来一定... 详细信息

碳青霉烯类抗生素是临床治疗肠杆菌科细菌尤其是产超广谱β内酰胺酶（extended spectrum beta lactamase，ESBL）及AmpC酶等多重耐药菌株引起感染的最有效的抗菌药物之一。近年来，随着碳青霉烯酶的出现，给肠杆菌科细菌的治疗带来一定困难。

关键词：弗氏柠檬酸杆菌 TEM-1 vim-2 产超广谱β内酰胺酶碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌多重耐药菌株临床治疗

产质粒型vim-2金属酶的铜绿假单胞菌的研究

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现代检验医学杂志 2008年第2期23卷 40-42页

作者：王德王辉孙宏莉宁永忠孙自庸彭黎明北京大学深圳临床医学院北京大学深圳医院检验科广东深圳518036 北京协和医院检验科北京100730 北京大学第三医院检验科北京100000 武汉同济医院检验科武汉430000

目的分析一株来自临床的多重耐药铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药机制。方法对来自于临床的一株铜绿假单胞菌用琼脂稀释法测其对8种抗生素的MIC,等电聚焦电泳试验分析该株菌产生的β-内酰胺酶类型,用聚合酶链反应(PCR)扩增以及对PC... 详细信息

目的分析一株来自临床的多重耐药铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药机制。方法对来自于临床的一株铜绿假单胞菌用琼脂稀释法测其对8种抗生素的MIC,等电聚焦电泳试验分析该株菌产生的β-内酰胺酶类型,用聚合酶链反应(PCR)扩增以及对PCR产物测序来确证该β-内酰胺酶基因。结果经分子生物学方法证实该株菌携带vim-2型金属β-内酰胺酶基因。结论vim-2型金属β-内酰胺酶基因的表达是此株铜绿假单胞菌多重耐药的重要原因之一。

关键词：铜绿假单胞菌 vim-2 聚合酶链反应(PCR) 金属β-内酰胺酶

铜绿假单胞菌vim-2型金属β-内酰胺酶基因的克隆及原核表达重组质粒的构建

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中国微生态学杂志 2006年第3期18卷 174-175,178页

作者：朱家馨陈瑞周宇麒黄静张天托江丽芳中山大学附属第三医院呼吸内科广东广州510630 中山大学附属第二医院呼吸内科中山大学基础医学院微生物学教研室

目的扩增铜绿假单胞菌vim-2型金属β-内酰胺酶基因,导入载体pMD18-T和pGEX-4T-1构建重组质粒pMD18-T/vim-2和pGEX-4T-1/vim-2。方法采用PCR技术从铜绿假单胞菌扩增vim-2基因,先将其亚克隆入pMD18-T载体后测定核苷酸序列。再将vim-2基因... 详细信息

目的扩增铜绿假单胞菌vim-2型金属β-内酰胺酶基因,导入载体pMD18-T和pGEX-4T-1构建重组质粒pMD18-T/vim-2和pGEX-4T-1/vim-2。方法采用PCR技术从铜绿假单胞菌扩增vim-2基因,先将其亚克隆入pMD18-T载体后测定核苷酸序列。再将vim-2基因克隆至表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠埃希菌JM109。用限制性酶切分析、PCR、序列分析等进行重组质粒鉴定。结果扩增出801 bp的vim-2基因,构建重组质粒pMD18-T/vim-2和pGEX-4T-1/vim-2。结论成功扩增801 bp的vim-2基因,该基因与国外同类酶的核苷酸同源性100%。重组质粒pGEX-4T-1/vim-2构建成功。

关键词：铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶 vim-2 PCR

介导vim-2型金属β内酰胺酶的整合子的研究

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中国抗感染化疗杂志 2003年第6期3卷 347-350页

作者：韩立中蒋燕群蒋晓飞彭涛朱月秋洪秀华倪语星上海第二医科大学附属瑞金医院临床微生物科 200025 上海市第六人民医院上海第二医科大学检验系

目的 :分析 1株对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌的耐药机制。方法 :用改良的三相水解试验分析该菌株所产的 β内酰胺酶 ,并进行初步分类 ;用聚合酶链反应 (PCR)扩增该菌的耐药基因 ,用PCR 限制片段长度多态性 (RFLP)初筛整合子并分型 ,用... 详细信息

目的 :分析 1株对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌的耐药机制。方法 :用改良的三相水解试验分析该菌株所产的 β内酰胺酶 ,并进行初步分类 ;用聚合酶链反应 (PCR)扩增该菌的耐药基因 ,用PCR 限制片段长度多态性 (RFLP)初筛整合子并分型 ,用长片段PCR扩增整合子的可变区并测序 ,以确认 β内酰胺酶基因种类及其转移特性。结果 :发现铜绿假单胞菌RJ2 1 3携带一个整合子介导的blavim 2基因。结论 :在上海和中国大陆地区首次发现铜绿假单胞菌产生的整合子介导vim 2型金属 β内酰胺酶。

关键词：铜绿假单胞菌 β内酰胺酶金属β内酰胺酶整合子 vim-2

B组碳青霉烯酶基因bla_(vim-2)的基因环境分析

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国际检验医学杂志 2014年第12期35卷 1529-1530页

作者：袁敏龚林刘佳徐建国李娟中国疾病预防控制中心传染病预防控制所细菌耐药室/传染病预防控制国家重点实验室北京102206

目的探讨blavim-2基因的基因环境。方法采用"Blast"比对分析GenBank数据库中blavim-2基因所处的基因环境。分析blavim-2基因分布的种属、地域及基因环境特征。结果所有的blavim-2基因都以基因盒的形式定位于Ⅰ型整合子内部。blavim-2基... 详细信息

目的探讨blavim-2基因的基因环境。方法采用"Blast"比对分析GenBank数据库中blavim-2基因所处的基因环境。分析blavim-2基因分布的种属、地域及基因环境特征。结果所有的blavim-2基因都以基因盒的形式定位于Ⅰ型整合子内部。blavim-2基因大多在假单胞菌属中检出,偶尔在肠杆菌中检出。结论不同国家、不同菌属报道的blavim-2的基因环境有极大的相似性。

关键词： vim-2 基因碳青霉烯酶肠杆菌属假单胞菌属

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老年人亚胺培南耐药铜绿假单胞菌耐药性研究

中华微生物学和免疫学杂志 2011年第8期31卷 718-723页

作者：肖震范芳华朱杰于小妹周欢琴俞云松浙江医院检验科杭州310013 邵逸夫医院

目的明确我院老年病人临床分离铜绿假单胞菌的耐药性、同源性及耐碳青霉烯菌株的基因型。方法收集我院2006年5月—2009年5月自临床老年病人分离的262株铜绿假单胞菌，纸片扩散法测定其对16种抗菌药物的耐药性；琼脂稀释法和Etest法测定... 详细信息

目的明确我院老年病人临床分离铜绿假单胞菌的耐药性、同源性及耐碳青霉烯菌株的基因型。方法收集我院2006年5月—2009年5月自临床老年病人分离的262株铜绿假单胞菌，纸片扩散法测定其对16种抗菌药物的耐药性；琼脂稀释法和Etest法测定耐碳青霉烯菌株对14种抗菌药物的MIC值，PCR扩增及克隆测序分析金属酶基因型。脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析携带金属酶基因型菌株的同源性。结果262株铜绿假单胞菌中筛选到104株耐碳青霉烯。104株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌对氨苄西林／舒巴坦、头孢哌酮／舒巴坦两个含舒巴坦制剂药物耐药率分别为78．9％和35．9％，对多黏菌素E耐药率最低为6．0％，对米诺环素耐药率58．3％，其余抗菌药物耐药率均大于70．0％；104株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中12株携带金属酶基因，10株检测到有携带vim-2基因的1类整合子。PFGE分型中12株菌株属于5个克隆株。结论在我院流行的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中，金属酶基因不是最主要的基因型，金属β内酰胺酶均为vim-2型金属酶，耐药基因盒分布于不同的1类整合子中，整合子播散是最主要的流行方式。

关键词：亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶 vim-2 整合子

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铜绿假单胞菌耐药性与产β内酰胺酶的关系

中华结核和呼吸杂志 2005年第4期28卷 258-262页

作者：王杰周建英俞云松浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染科杭州310003

目的分析临床分离的93株铜绿假单胞菌的耐药性与β内酰胺酶类型的关系。方法采用K B法测定亚胺培南等16种抗菌药物对93株铜绿假单胞菌的体外抗菌活性;采用等电聚焦电泳(isoelectricfocusing,IEF)、三维试验、2巯基丙酸抑制试验、聚合酶... 详细信息

目的分析临床分离的93株铜绿假单胞菌的耐药性与β内酰胺酶类型的关系。方法采用K B法测定亚胺培南等16种抗菌药物对93株铜绿假单胞菌的体外抗菌活性;采用等电聚焦电泳(isoelectricfocusing,IEF)、三维试验、2巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应(PCR)分析β内酰胺酶类型。结果阿米卡星敏感性最高为82.8%,其次依次为头孢吡肟(81.7%)、头孢哌酮/舒巴坦(81.7%)、头孢他啶(80.6%)、美罗培南(77.4%)、亚胺培南(71.0%)。三维试验结果表明,14株(15.1%)产碳青霉烯酶,其中2株产金属酶;15株(16.1%)产AmpC酶,其中2株同时产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)。等电聚焦电泳显示产AmpC的细菌均具有9.0的条带;19号和54号菌株有一个6.3的条带。2巯基丙酸抑制试验筛选金属酶2株阳性,与三维试验结果相符。设计金属酶vim2特异性引物,PCR反应结果阳性,经克隆测序证实为vim2型金属酶。结论铜绿假单胞菌感染中产β内酰胺酶较常见,其中产碳青霉烯酶和AmpC酶占一定比率,是造成临床上铜绿假单胞菌对碳青霉烯类和头孢菌素第3、4代耐药的主要原因。

关键词：耐药性聚合酶链反应(PCR) 头孢哌酮/舒巴坦超广谱β内酰胺酶铜绿假单胞菌感染 β内酰胺酶类等电聚焦电泳产AmpC酶碳青霉烯酶体外抗菌活性 2-巯基丙酸亚胺培南抑制试验试验结果特异性引物 vim-2 PCR反应碳青霉烯类

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶研究

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亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶研究

作者：郑慧娟浙江大学

学位级别：硕士

金属β-内酰胺酶(metallo-beta-lactamase简称金属酶、MBL)的给临床抗感染治疗带来了极大困难。金属β-内酰胺酶属于Ambler分子分类中的B类,其水解底物广,能够分解除单环酰胺类抗生素氨曲南以外的所有β-内酰胺类抗生素。铜绿假单胞菌(P... 详细信息

金属β-内酰胺酶(metallo-beta-lactamase简称金属酶、MBL)的给临床抗感染治疗带来了极大困难。金属β-内酰胺酶属于Ambler分子分类中的B类,其水解底物广,能够分解除单环酰胺类抗生素氨曲南以外的所有β-内酰胺类抗生素。铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),又称绿脓杆菌,是常见的医院感染致病菌。近年来由于β-内酰胺类抗生素、免疫抑制剂、抗肿瘤化疗药物的广泛应用,该菌的耐药性越来越严重。已有文献报道铜绿假单胞菌中存在IMP、vim、SPM-1和GIM-1四类金属β-内酰胺酶。为了解亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的耐药性及其金属酶的基因分型,本实验收集国内五个地区临床分离的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌140株。通过Etest法和琼脂稀释法测定菌株的最低抑菌浓度(MIC)值,采用纸片协同方法筛选金属酶,并通过PCR法、Southern杂交等方法对金属酶进行基因定位及整合子检测,同时采用PFGE对产金属酶菌株进行同源性分析。结果显示金属酶筛选共检出产金属酶菌株12株。PCR扩增14株菌株vim-2基因阳性,其中12株扩增出两种不同长度的整合子,分别携带aacA4、vim-2及aacA4、vim-2、aadB基因盒。通过接合试验及质粒抽提物电转化传递金属酶基因均未获成功。14株携带vim-2基因的铜绿假单胞菌PFGE谱分析共有七种

关键词：亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶 vim-2 整合子

碳青霉烯酶耐药基因bla_(IMP-4)的基因环境分析

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中国医药生物技术 2015年第1期10卷 84-86页

作者：袁敏李娟中国疾病预防控制中心传染病预防控制所细菌耐药室传染病预防控制国家重点实验室北京102206

可转移金属酶即 B组碳青霉烯酶已成为近年来耐药领域关注的热点[1]。中国学者有限的研究报道显示 B组碳青霉烯酶中 IMP家族如 IMP-4、IMP-9亚型，vim家族中 vim-2亚型在中国地区分离的金属酶阳性的菌株中占一定的比例，这些耐药基因在... 详细信息

可转移金属酶即 B组碳青霉烯酶已成为近年来耐药领域关注的热点[1]。中国学者有限的研究报道显示 B组碳青霉烯酶中 IMP家族如 IMP-4、IMP-9亚型，vim家族中 vim-2亚型在中国地区分离的金属酶阳性的菌株中占一定的比例，这些耐药基因在临床分离的菌株间传播甚至偶尔造成医院感染爆发的事实是确定的[2-4]。这些基因的传播机制是我们亟需解释的问题--是由携带耐药基因的广宿主质粒在菌与菌之间穿梭，还是由含有耐药基因的 DNA片段通过转座、整合或同源重组的方式在不同菌属中播散。

关键词：碳青霉烯酶耐药基因基因环境 vim-2 中国学者临床分离传播机制 DNA片段