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大黄素通过调控miR-29a-5p/vegfb介导的细胞凋亡抑制多柔比星诱导的心脏毒性

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世界科学技术-中医药现代化 2023年第6期25卷 2025-2035页

作者：张肇锋汤若晗张良南京中医药大学药学院/江苏省中药药效与安全性评价重点实验室南京210023

目的研究大黄素(Emodin)对抗多柔比星(Doxorubicin,DOX)诱导的心脏毒性的作用和可能的机制。方法使用低、中、高剂量(5、15、25μmol·L^(-1))的大黄素预孵育H9C2细胞8 h,然后使用2.5μmol·L^(-1) DOX处理心肌细胞16 h建立心脏毒性损... 详细信息

目的研究大黄素(Emodin)对抗多柔比星(Doxorubicin,DOX)诱导的心脏毒性的作用和可能的机制。方法使用低、中、高剂量(5、15、25μmol·L^(-1))的大黄素预孵育H9C2细胞8 h,然后使用2.5μmol·L^(-1) DOX处理心肌细胞16 h建立心脏毒性损伤模型。采用MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测H9C2细胞中心肌肌钙蛋白(cTnT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平以及Caspase-3和Caspase-9活性;使用TUNEL法检测H9C2细胞凋亡水平;采用RT-qPCR法检测miR-29a-5p和血管内皮生长因子B(Vascular endothelial growth factor-B,vegfb)表达量;Western blot检测vegfb蛋白及其他凋亡相关因子表达水平;在转染miR-29a-5p模拟物和抑制剂后,RT-qPCR和Western blot法检测vegfb对miR-29a-5p的靶向性;H9C2细胞转染miR-29a-5p模拟物,在大黄素15μmol·L^(-1)剂量下,MTT法检测H9C2细胞活力、RT-qPCR和Western Blot法检测vegfb表达水平。结果与DOX组相比,大黄素低、中、高剂量组均显著提高了H9C2细胞活力(Pvegfb表达水平显著升高(Pvegfb表达水平显著升高,凋亡相关因子Bax表达水平显著降低、Bcl-2和Bcl-xl表达水平显著升高(Pvegfb表达水平分别降低和升高(Pvegfb表达水平明显降低的现象也被逆转(Pvegfb介导的心肌细胞凋亡显著降低了DOX诱导的心脏毒性。

关键词：大黄素多柔比星 H9C2细胞凋亡 miR-29a-5p vegfb

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脂肪组织特异表达vegfb186动物模型构建及vegfb186在脂肪发育、能量代谢中的作用研究

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脂肪组织特异表达VEGFB186动物模型构建及VEGFB186在脂肪发育、能...

作者：张静东北师范大学

学位级别：硕士

肥胖症(Obesity)可以导致心理疾病和多种生理疾病,发病率呈现急剧上升趋势。当机体内存储能量大于消耗能量时,使得脂肪组织积累过度,或者由于脂肪细胞内分泌失调导致脂肪大量积累,诱发肥胖及其它并发症。脂肪组织分为负责储存能量的白... 详细信息

肥胖症(Obesity)可以导致心理疾病和多种生理疾病,发病率呈现急剧上升趋势。当机体内存储能量大于消耗能量时,使得脂肪组织积累过度,或者由于脂肪细胞内分泌失调导致脂肪大量积累,诱发肥胖及其它并发症。脂肪组织分为负责储存能量的白色脂肪组织(WAT)和负责产热、维持体温、体重的棕色脂肪组织(BAT)以及近年来发现的过渡型米色脂肪组织。血管内皮生长因子vegfb通过可变剪接产生vegfb和vegfb两种亚型,二者的结构和功能有着明显的区别。目前发现vegfb可以影响脂肪组织发育、脂肪酸的转运,在能量代谢过程中可能起着重要作用,因此关于vegfb在脂肪发育和能量代谢上的研究也越来越多。但是它的两种亚型在这两方面的研究却并不多,二者各起着什么作用,哪一种更加重要,还都不清楚,尤其是缺乏有效的、在脂肪中特异表达的vegfb亚型动物模型。本论文首先以实验室先期建立的vegfb缺失(vegfb)和脂肪特异性启动子AP2驱动的vegfb过表达转基因小鼠为基础,通过两次杂交最终构建出AP2-vegfb/vegfb小鼠模型,成功将AP2-vegfb转入vegfb鼠中,从而研究只有vegfb表达时在脂肪发育和能量代谢上的作用。鉴于有研究报道AP2启动除了在脂肪组织表达外,也在一些非脂肪细胞中表达,特异性不够理想。本论文利用另一脂肪特异的Adiponectin基因启动子(AdipoQ)构建重组载体AdipoQ-vegfb,通过受精卵原核注射方法,向小鼠转入vegfb,成功构建了AdipoQ-vegfb过表达小鼠模型,并对比AP2-vegfb进行研究,发现二者有着相同和不同之处。AdipoQ-vegfb小鼠是更好的研究vegfb在脂肪组织中生理功能的理想动物模型。实验结果发现,AP2-vegfb,AdipoQ-vegfb以及AP2-vegfb/vegfb这三种转基因小鼠与野生型相比,小鼠的体重均减轻,体内WAT堆积减少并且变轻,通过H&E染色发现脂肪细胞尺寸变小和数目增加,有明显的白色脂肪棕色化现象。转基因小鼠脂肪组织发育伴随着组织中基因的改变,WAT发育有关的因子LEPTIN等表达下调,BAT发育相关基因表达UCP-1等表达量升高,也印证了脂肪组织棕色化的趋势。除此之外,与对照组相比较,转基因小鼠脂肪酸转运蛋白FATP表达下调,脂肪组织中的脂肪酸减少,影响了脂肪组织的积累,这可能是造成小鼠体重减轻的重要原因之一。在能量代谢方面,转基因小鼠的体温都有一定幅度的升高,显示代谢速率加快;其次,小鼠血液中甘油三酯和胆固醇的含量虽然都在正常范围之内,与对照组相比均下降,说明血脂水平降低;而且小鼠葡萄糖抵抗和胰岛素抵抗敏感性也升高,代谢提高。另外,在AdipoQ-vegfb和AP2-vegfb过表达小鼠中,vegfb在WAT中的表达水平前者明显高于后者,而且AdipoQ-vegfb体重要比同一期的AP2-vegfb小鼠更轻,体温也要偏低,说明vegfb在脂肪组织发育和能量代谢方面具有明显的调控作用。

关键词：肥胖脂肪组织 vegfb vegfb186 转基因小鼠能量代谢脂肪发育

跑台运动对腹主动脉缩窄诱导的晚期心衰大鼠骨骼肌凋亡和vegfb及其受体表达的影响

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跑台运动对腹主动脉缩窄诱导的晚期心衰大鼠骨骼肌凋亡和VEGFB及...

hsa-miR-374a-3p与vegfb在结直肠癌中的相关性和作用

第十一届全国体育科学大会

作者：李灵杰张靓陈雪飞李世田北京师范大学体育与运动学院

研究目的:观察跑台运动对AAC诱导的心衰大鼠骨骼肌凋亡和vegfb及其受体表达的影响及机制探讨。研究方法:210g SD雄性大鼠随机分为对照组和AAC手术组,AAC手术四周后随机分为AAC12组和AAC4+E8组。跑台训练持续4周,每周5次,每次40min,跑速1... 详细信息

研究目的:观察跑台运动对AAC诱导的心衰大鼠骨骼肌凋亡和vegfb及其受体表达的影响及机制探讨。研究方法:210g SD雄性大鼠随机分为对照组和AAC手术组,AAC手术四周后随机分为AAC12组和AAC4+E8组。跑台训练持续4周,每周5次,每次40min,跑速12米/分钟。测定大鼠体重、心重和肌肉重量,超声心动方法检测大鼠心脏功能,HE染色方法观察心肌、腓肠肌和比目鱼肌结构变化,TUNEL荧光染色法观察腓肠肌细胞凋亡变化,免疫组化法观察腓肠肌vegfb及其受体VEGFR1和NRP1的蛋白表达水平,real-timePCR方法分别测定腓肠肌和比目鱼肌vegfb,VEGFR1,NRP1,MAFbx,Mu RF1,MSTN,Bax,Bcl2和caspase3的m RNA表达。研究结果:1),与对照组相比,AAC大鼠心脏左心室质量显著增大（P＜0.05）,左心室舒张末期前壁厚度显著增大（P＜0.05）,左心室收缩末期内径显著增大（P＜0.001）,左心室射血分数显著降低（仍大于50%）（P＜0.001）,左心室缩短分数显著降低（P＜0.01）,ANP（P＜0.001）和BNP（P＜0.01）m RNA表达显著升高;与AAC组相比,八周的跑台运动显著降低大鼠心脏左室质量（P＜0.05）,左心室舒张末期前壁厚度显著降低（P＜0.05）,左心室收缩末期内径显著降低（P＜0.05）,左室射血分数显著增加（P＜0.05）,左室缩短分数显著增加（P＜0.05）,心肌ANP（P＜0.01）m RNA表达显著降低,BNP差异不具有显著性。2),与对照组相比,AAC12大鼠比目鱼肌肌纤维规则性被打破,比目鱼肌重量与体重比显著降低（P＜0.01）,萎缩因子Mu RF1（P＜0.001）,MAFbx（P＜0.05）的m RNA表达显著增加;与AAC12组相比,八周跑台运动逆转AAC大鼠肌纤维的不规则性,显著提高比目鱼肌重量与体重比值（P＜0.001）,萎缩因子Mu RF1的m RNA表达显著降低（P＜0.05）。与对照组相比,AAC大鼠腓肠肌重量与体重比值显著降低（P＜0.05）,萎缩因子Mu RF1（P＜0.05）和MSTN（P＜0.01）的m RNA表达显著增加;八周跑台运动显著增加腓肠肌重量与体重的比值（P＜0.05）,萎缩因子Mu RF1 mRNA表达显著降低（P＜0.05）,MSTN表达显著降低（P＜0.001）。3),与对照组相比,腓肠肌Bax（P＜0.01）、caspase3 mRNA表达显著增加（P＜0.001）,caspase9 mRNA表达显著增大（P＜0.001）,TUNEL染色凋亡细胞增多;八周跑台运动显著降低腓肠肌Bax（P＜0.01）、caspase3（P＜0.001）、caspase9（P＜0.001）m RNA表达,三组间比目鱼肌Bax、caspase3、caspase9m RNA的表达差异不具有显著性。4),与对照组相比,AAC12大鼠腓肠肌vegfb和比目鱼肌vegfbm RNA差异不具有显著性,腓肠肌VEGFR1（P＜0.05）和NRP1（P＜0.01）m RNA表达显著下调;与AAC12组相比,八周跑台运动显著上调腓肠肌VEGFR1（P＜0.05）和NRP1m RNA（P＜0.001）的表达,显著上调腓肠肌VEGFR1蛋白的表达,NRP1的m RNA表达和蛋白水平在三组间差异不具有显著性。研究结论:跑台运动可以部分改善晚期心衰大鼠心脏结构重塑,显著提高晚期心衰大鼠心功能,可以显著抑制骨骼肌萎缩和凋亡,跑台运动显著上调腓肠肌VEGFR1的m RNA和蛋白表达。

关键词：跑台运动 vegfb 骨骼肌凋亡心衰

来源： cnki会议评论

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解剖科学进展 2023年第3期29卷 295-298页

作者：朱亚雯达静徐凤霞姜树中陆翠华南通市第六人民医院消化内科江苏南通226001 南通大学附属医院消化内科江苏南通226006

目的探讨hsa-miR-374a-3p与vegfb在结直肠癌中的相关性和作用。方法 TCGA数据集分析vegfb在结直肠癌中的表达和对生存曲线的影响;免疫组织化学方法检测59例结直肠癌组织中vegfb蛋白的表达;ELISA方法检测结直肠正常细胞和结直肠癌细胞中... 详细信息

目的探讨hsa-miR-374a-3p与vegfb在结直肠癌中的相关性和作用。方法 TCGA数据集分析vegfb在结直肠癌中的表达和对生存曲线的影响;免疫组织化学方法检测59例结直肠癌组织中vegfb蛋白的表达;ELISA方法检测结直肠正常细胞和结直肠癌细胞中vegfb的表达。重组人vegfb蛋白或vegfb抗体处理后,MTT法检测细胞活力;膜联蛋白V-PE和7-氨基放线菌素D(7-AAD)染色法检测细胞凋亡水平;FASAria细胞分选仪检测细胞周期。miRNA测序检测细胞中miRNA总体表达水平;实时荧光定量PCR检测miRNA-374a-3p与vegfb mRNA的表达水平;荧光素酶报告实验验证miRNA-374a-3p与vegfb-3′-UTR的靶向关系。结果 vegfb在结直肠癌组织中的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常组织。vegfb高表达患者的中位生存期明显低于低表达患者。与结直肠正常细胞相比,结直肠癌细胞vegfb表达水平明显升高。vegfb蛋白处理后,结直肠正常细胞NCM460的细胞活力水平上升、细胞凋亡水平下降。结直肠癌组织中miR-374a-3p与vegfb的表达水平存在负相关。miR-374a-3p靶向vegfb mRNA的3′端非编码区。敲低miR-374a-3p后,细胞中vegfb的mRNA和蛋白表达水平均上升,细胞活力上升,细胞凋亡减少。结论 miR-374a-3p与vegfb的表达水平在结直肠癌中存在负相关,vegfb/miR-374a-3p轴调控结直肠癌细胞的增殖与凋亡。

关键词： miR-374a-3p vegfb 结直肠癌凋亡细胞活力

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一种新的内皮细胞生长因子──vegfb

生理科学进展 1996年第4期 294-294页

作者：张曼周爱儒

一种新的内皮细胞生长因子──ＶＥＧＦＢ以前的研究表明血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＶＦＧＦ）特异地作用于血管内皮细胞，强烈地促进内皮细胞的分裂增殖，在新血管形成中起... 详细信息

一种新的内皮细胞生长因子──ＶＥＧＦＢ以前的研究表明血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＶＦＧＦ）特异地作用于血管内皮细胞，强烈地促进内皮细胞的分裂增殖，在新血管形成中起重要作用。最近Ｏｌｏｆｓｓｏｎ等又...

关键词：内皮细胞生长因子 vegfb 分裂增殖血管内皮细胞

跑台运动对高脂饮食喂养的肥胖小鼠比目鱼肌脂质沉积和血管内皮生长因子B表达的影响

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中国运动医学杂志 2017年第9期36卷 773-778页

作者：张靓马谨高海宁李灵杰北京师范大学体育与运动学院北京100875 沈阳体育学院运动人体科学学院

目的:观察跑台运动对高脂饮食诱导的肥胖小鼠骨骼肌脂质沉积和血管内皮生长因子B(vegfb)及其受体表达的影响。方法:32只5周龄健康雄性C57BL/6小鼠,随机分成对照组(n=8)和高脂喂养组(n=24),分别进行普通饲料和高脂饲料喂养,8周后筛选肥... 详细信息

目的:观察跑台运动对高脂饮食诱导的肥胖小鼠骨骼肌脂质沉积和血管内皮生长因子B(vegfb)及其受体表达的影响。方法:32只5周龄健康雄性C57BL/6小鼠,随机分成对照组(n=8)和高脂喂养组(n=24),分别进行普通饲料和高脂饲料喂养,8周后筛选肥胖小鼠16只,随机分为高脂安静组和高脂运动组,每组各8只。高脂运动组跑台训练方案为:跑速25 m/min,每次60 min,每周5次,持续8周,对照组和高脂安静组不进行运动。小鼠处死前测定体重,小鼠比目鱼肌油红O染色观察脂质沉积,免疫组化法观察比目鱼肌血管内皮生长因子受体-1(VEGFR1)和辅受体Neuropilin-1(NRP1)的表达水平,Real-time PCR方法测定比目鱼肌vegfb和受体VEGFR1、NRP1的mRNA表达,以及vegfb上游调节因子PGC-1αmRNA表达。结果:与对照组相比,高脂饮食喂养小鼠体重显著增加(Pvegfb、VEGFR1、NRP1和PGC-1αmRNA表达无显著变化。与高脂安静组小鼠相比,高脂运动组小鼠体重显著降低(Pvegfb、NRP1和PGC-1αmRNA表达无显著变化。结论:跑台运动对肥胖小鼠比目鱼肌VEG-FB的表达无显著作用,但显著上调其受体VEGFR1的表达,提示运动减轻骨骼肌脂质沉积的作用可能与运动增强比目鱼肌vegfb/VEGFR1作用相关。

关键词：跑台运动骨骼肌脂质沉积 vegfb 肥胖比目鱼肌

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活性肽RL-QN15促糖尿病足溃疡修复的作用及机制研究

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活性肽RL-QN15促糖尿病足溃疡修复的作用及机制研究

作者：孙丹丹昆明医科大学

学位级别：硕士

【目的】糖尿病足溃疡(Diabetic Foot Ulcers,DFUs)的伤口治疗是一个复杂且极具挑战性的工作,现有的糖尿病足溃疡伤口的治疗策略远不能满足临床需求,因此开发新型候选药物和探索新的治疗靶点至关重要。然而,目前有关多肽作为分子探针解... 详细信息

【目的】糖尿病足溃疡(Diabetic Foot Ulcers,DFUs)的伤口治疗是一个复杂且极具挑战性的工作,现有的糖尿病足溃疡伤口的治疗策略远不能满足临床需求,因此开发新型候选药物和探索新的治疗靶点至关重要。然而,目前有关多肽作为分子探针解析糖尿病足溃疡发生发展机制的研究甚少。本研究使用泽蛙皮肤源性活性多肽RL-QN15作为外源性分子探针,探究其可能的“细胞信号通路-micro RNA-细胞行为事件-糖尿病足溃疡创面愈合作用轴”调控机制,为临床治疗糖尿病足溃疡提供新思路,挖掘潜在的药物靶点。【方法】首先,我们在体外模拟高糖环境,利用细胞划痕实验、细胞增殖和Transwell迁移实验探索RL-QN15在高糖环境下促Ha Ca T细胞创伤修复活性、增殖和迁移能力。其次,我们通过建立了DFUs大鼠模型探索RL-QN15在体内促伤口愈合的作用。接下来,利用RNA测序、体外转染模型、q RT-PCR、Western蛋白印迹、双荧光素酶报告基因检测分析研究RL-QN15促进DFUs愈合的潜在机制。随后,利用细胞划痕实验、细胞增殖实验和Transwell迁移实验分析研究转染后角质形成细胞增值和迁移能力的后续变化。【结果】RL-QN15可以显著促进高糖环境下Ha Ca T细胞的划痕修复活性、迁移和增殖能力,加速DFU大鼠模型的伤口愈合。组织病理学结果显示,RLQN15可以促进伤口处的再上皮化和血管再生。通过RNA测序,我们发现了一种新的促进创伤修复miRNA-miR-4482-3p。通过抑制和过度表达miR-4482-3p验证其生物活性,我们发现,抑制miR-4482-3p的表达增强了Ha Ca T细胞的迁移和增殖能力以及vegfb的表达,在用miR-4482-3p模拟物处理的角质形成细胞中发现相反的变化趋势。此外,我们还证明了RL-QN15促进Ha Ca T细胞的迁移和增殖能力以及vegfb的表达是通过p38MAPK和smad3信号通路抑制miR-4482-3p表达介导的。双荧光素酶报告基因检测结果也证明hsa-miR-4482-3p与vegfb两者间存在结合作用。【结论】本研究证明了RL-QN15是治疗糖尿病足溃疡有效的干预措施,其机制是通过p38MAPK和smad3信号通路抑制miR-4482-3p的表达,最终促进了再上皮化和血管生成,从而加速DFUs的伤口愈合。这项研究在证明RL-QN15作为分子探针在促进DFUs伤口愈合的临床应用提供了初步的理论基础。

关键词： RL-QN15 糖尿病足溃疡伤口愈合 miR-4482-3p vegfb

新型异甜菊醇衍生物KFH-08的促血管新生作用及机制研究

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新型异甜菊醇衍生物KFH-08的促血管新生作用及机制研究

作者：宋来思广东工业大学

学位级别：硕士

研究目的课题组大量研究表明KP-4具有心肌保护能力,我们前期研究也发现KP-4保护心肌缺血,并且发现其促进血管新生。为了进一步提高心肌保护活性,本课题组前期以KP-4为先导化合物合成了一系列衍生物,最终筛选出安全性更高、药效更强的KFH... 详细信息

研究目的课题组大量研究表明KP-4具有心肌保护能力,我们前期研究也发现KP-4保护心肌缺血,并且发现其促进血管新生。为了进一步提高心肌保护活性,本课题组前期以KP-4为先导化合物合成了一系列衍生物,最终筛选出安全性更高、药效更强的KFH-08,并且发现其心肌保护作用依赖于VEGF信号通路。鉴于VEGF信号通路和血管新生的密切关系,我们猜测KFH-08同样具有促血管新生活性。因此,在本研究中,我们将探究KFH-08的促血管新生活性及分子机制,具体包括:1)探究KFH-08的先导化合物KP-4保护心肌缺血和促进血管新生的能力;2)探究KFH-08促进血管新生的能力;3)探究KFH-08促血管新生的分子机制;4)构建vegfb敲除斑马鱼系来探究KFH-08作用的分子机制。研究内容***-08的先导化合物KP-4保护心肌缺血并促进血管新生构建大鼠慢性心肌缺血模型,给予KP-4处理4周后,对心脏位置进行超声和血流动力学分析来评估KP-4心肌缺血保护作用;同时,使用免疫组化法和小动物活体成像系统(μCT)对KP-4处理后的冠脉血管密度进行评价,发现KP-4可能具有促血管新生活性;最后通过体内外模型验证了这一猜想。***-08促进血管新生在体外,使用Tg[flk:EGFP]转基因斑马鱼胚胎原代细胞培养技术;在体内,使用VRI抑制Tg[flk:EGFP]转基因斑马鱼血管新生模型,评估KFH-08体内外的促血管新生活性。最后使用Tg[flk:EGFP]/Tg[gatal:d Red]双转基因斑马鱼模型评价新生成血管的功能。***-08激活与血管新生、MAPK、NOTCH相关基因和线粒体基因的表达使用Tg[flk:EGFP]转基因斑马鱼系,构建VRI抑制斑马鱼血管新生模型,使用RNA seq检测所有基因的表达水平,探究KFH-08促血管新生可能的分子机制。进一步通过RT-q PCR法检测VEGF信号通路相关基因的表达水平。***/Cas9构建vegfb敲除斑马鱼系和心血管发育的初探使用CRISPR/Cas9技术敲除Tg[flk:EGFP]转基因斑马鱼的vegfb基因,对子代斑马鱼进行三代基因测序和筛选,获得敲除vegfb的纯合子斑马鱼(vegfb),初步探究敲除vegfb对斑马鱼心血管发育的影响。研究结果1、在大鼠慢性心肌缺血模型中,KFH-08的先导化合物KP-4显著提高射血分数(EF)、左室收缩分数(FS)、心脏收缩指数(CI)、左室内压上升最大速率(Max dp/dt)和左室收缩压(LVSP),明显改善心脏的收缩功能,具有心肌缺血保护能力。意外的是,KP-4显著增加心肌细胞毛细血管密度和心脏冠状动脉血管数量,可能具有促进血管新生的能力。进一步通过体内外实验证明了这一猜想,在体外,KP-4促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖,增加HUVEC分叉数量和长度;在体内,提高斑马鱼体节间血管出芽率、血管数量和长度。2、KFH-08显著促进血管内皮细胞分化和增殖,明显促进VRI抑制后的斑马鱼体节间血管和头部血管的恢复。进一步对新生成血管的功能性进行研究,发现恢复的体节间血管中有血流流过,血管功能正常。因此,KFH-08具有明显的促血管新生活性。3、使用RNA seq探究KFH-08促血管新生可能的分子机制,发现KFH-08激活了与血管新生、MAPK、NOTCH相关基因和线粒体基因的表达。进一步通过RT-q PCR法发现KFH-08显著提高VEGFA、vegfb和VEGFR1基因表达量。4、使用CRISPR/Cas9成功构建能够稳定遗传的vegfb敲除的斑马鱼系,初步研究发现敲除vegfb导致斑马鱼胚胎血管损伤和心脏心包膜水肿,影响心血管发育。结论1、KFH-08的先导化合物KP-4保护大鼠心肌缺血并促进血管新生;2、KFH-08具有更强的促进血管新生活性;3、KFH-08促血管新生活性可能与VEGFA、vegfb和VEGFR1有关;4、成功构建稳定遗传的vegfb敲除斑马鱼系,并发现敲除vegfb导致斑马鱼胚胎血管损伤和心包膜水肿。

关键词： KFH-08 心肌缺血 vegfb 血管新生斑马鱼