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vegf-c基因修饰的淋巴结移植促进淋巴内皮细胞再生的初步研究

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中国修复重建外科杂志 2013年第5期27卷 619-623页

作者：陆南杭张勇冯自豪亓发芝复旦大学附属中山医院整形外科上海200032

目的探讨采用vegf-c基因修饰的淋巴结移植对移植淋巴结周围组织内淋巴内皮细胞再生的影响。方法取成年雄性SD大鼠36只,体重200.1～271.5 g,选取一侧采用带血管蒂淋巴结同侧原位移植方法制备腋窝淋巴结移植模型后,随机分为两组(n=18),分... 详细信息

目的探讨采用vegf-c基因修饰的淋巴结移植对移植淋巴结周围组织内淋巴内皮细胞再生的影响。方法取成年雄性SD大鼠36只,体重200.1～271.5 g,选取一侧采用带血管蒂淋巴结同侧原位移植方法制备腋窝淋巴结移植模型后,随机分为两组(n=18),分别将1.5×108PFU带Flag标签的vegf-c基因过表达腺病毒载体及空载腺病毒载体注射入实验组及对照组大鼠移植淋巴结中。术后3 d,免疫荧光染色观察淋巴结内带Flag标签蛋白的表达情况;术后1、2、4周,免疫荧光染色观察移植淋巴结周围组织内Prox-1蛋白的表达并计算其荧光密度值;术后2、4周,通过测定患肢皮下注射偶氮蓝后大鼠血液在620 nm波长下吸光度(A)值,观察淋巴回流功能改善情况,以正常大鼠(正常组)及淋巴结移植大鼠(空白对照组)作为对照。结果术后3 d实验组及对照组移植淋巴结内均可检测到带Flag标签蛋白的表达。术后1、2、4周,实验组移植淋巴结周围组织内Prox-1蛋白荧光密度值呈进行性增加,且均明显强于对照组(P0.05);实验组及对照组间比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论 vegf-c基因修饰的淋巴结移植能显著促进移植淋巴结周围组织内淋巴内皮细胞的再生,但在4周内不能改善大鼠患肢淋巴回流功能。

关键词：淋巴结移植 vegf-c 淋巴内皮细胞大鼠

vegf-c在食管鳞癌和神经胶质瘤中的表达及其意义

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癌症 2003年第11期22卷 1166-1169页

作者：逄小红田铧刘执玉李盛梅刘书涛田广平山东大学医学院解剖学教研室山东济南250012

背景和目的;近几年研究发现,某些恶性肿瘤能表达血管内皮生长因子c(vascular endothelial growth factor-c,vegf-c),vegf-c是迄今发现的惟一特异性促淋巴管生长因子。目前恶性肿瘤组织中vegf-c的表达与肿瘤淋巴转移的关系方面的研究资... 详细信息

背景和目的;近几年研究发现,某些恶性肿瘤能表达血管内皮生长因子c(vascular endothelial growth factor-c,vegf-c),vegf-c是迄今发现的惟一特异性促淋巴管生长因子。目前恶性肿瘤组织中vegf-c的表达与肿瘤淋巴转移的关系方面的研究资料尚少。本研究拟通过检测、比较vegf-c在两种不同转移特性的恶性肿瘤即人食管鳞癌和神经胶质瘤组织中的表达,分析恶性肿瘤组织中vegf-c的表达与肿瘤淋巴转移的关系。方法:采用免疫组化法检测vegf-c在72例食管鳞癌(其中淋巴结转移29例;无淋巴结转移43例)和23例神经胶质瘤组织(病理学诊断为星形细胞瘤,Ⅰ～Ⅳ级)中的表达,并对vegf-c的表达与临床病理因素之间的关系作进一步的分析研究。结果:神经胶质瘤组织中未见vegf-c抗原表达;食管鳞癌组织vegf-c阳性表达率为38.88％(28/72),其中vegf-c阳性表达率在有淋巴结转移组为62.07％(18/29),在无淋巴结转移组为23.26％(10/43),在浸润深度T_2、T_3期为58.82％(20/34),在T_1期为21.05％(8/38),结论:vegf-c阳性表达与食管鳞癌的淋巴结转移、浸润深度有关。vegf-c是促进食管鳞癌经淋巴转移的重要因素。

关键词： vegf-c 食管鳞癌神经胶质瘤血管内皮生长因子c 肿瘤淋巴转移

vegf-c/vegfR-3/iNOS Signaling in Osteosarcoma MG63 cells Mediates Stimulatory Effects on Human Umbilical Vein Endothelial cell Proliferation

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chinese Medical Sciences Journal 2021年第1期36卷 35-42页

作者： Jie Lv Jie Yuan chaojian Xu Jiaqi Hao Yichuan Qin Xiaoqiang Wang Yongfeng Wang Department of Orthopaedics the Second Hospital of Shanxi Medical UniversityTaiyuan 030001China

Objectives To assess the effects of vascular endothelial growth factor-c(vegf-c)/vascular endothelial growth factor receptor-3(vegfR-3)signaling on nitric oxide(NO)production and inducible nitric oxide synthase(iNOS)expression in human osteosarcoma MG63 cells and the subsequent impact on the proliferation of human umbilical vein endothelial cells(HUVEcs).Methods MG63 cells were treated with vegf-c alone(vegf-c group),vegf-c+iNOS inhibitor aminoguanidine(AG;AG group),and vegf-c+vegfR-3 inhibitor MAZ51(MAZ51 group);untreated MG63 cells were used as *** production was evaluated by a colorimetric method involving nitrate ***,mRNA and protein levels of iNOS were examined by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PcR)and Western *** explore the effect of vegf-c/vegfR-3/iNOS signaling of MG63 cells on proliferation of HUVEcs,we set up six groups:HUVEcs,HUVEcs+MG63,HUVEcs+vegf-c,HUVEcs+MG63+vegf-c,HUVEcs+MG63+vegf-c+AG,and HUVEcs+MG63+vegf-c+MAZ51 *** proliferation of HUVEc cells was assessed by cell counting Kit-8(ccK-8),5-ethynyl-2'-deoxyuridine(EdU)incorporation assay,and proliferating cell nuclear antigen(PcNA)expression *** vegf-c treatment enhanced iNOS expression at both gene and protein levels(mRNA:LSD-t=4.152,Pcreased NO release of MG63 cells(LSD-t=3.774,Pcreased these effects(mRNA:LSD-t=9.183,Pction:LSD-t=10.326,Pco-incubation of HUVEcs with MG63 cells and/or vegf-c significantly promoted HUVEc proliferation(EdU:LSD-t=5.374,PcNA:LSD-t=9.267,Pcts of HUVEc induced by MG63 cells and vegf-c attenuated by the treatment of AG(EdU:LSD-t=10.770,PcNA:LSD-t=19.94O,P<0.001)or MAZ51(Ed

关键词： osteosarcoma vegf-c vegfR-3 iNOS tumor angiogenesis

vegf-c及其受体Flt-4在乳腺癌细胞增殖及转移中的作用

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癌症 2003年第10期22卷 1053-1056页

作者：刘芳张雅洁广州医学院第一附属医院病理科广东广州510120 广州医学院病理学教研室广东广州510182

背景与目的:血管内皮细胞生长因子-c(vascularendothelialgrowthfactor-c,vegf-c)是vegf家族成员之一,是惟一可与淋巴管内皮细胞表面受体vegfR-3(即fms-liketyrosinekinase-4,Flt-4)结合并调节淋巴管生理功能的因子。目前发现vegf-c/Flt-4系统在多种肿瘤的转移中起调控作用,但对该系统在乳腺癌方面的研究国内外报道很少。本实验旨在探讨vegf-c/Flt-4在乳腺癌增殖及转移中的作用和意义。方法:采用免疫组织化学方法对101例乳腺癌组织切片染色,观察乳腺癌组织中vegf-c、Flt-4、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PcNA)的表达情况。结果:101例乳腺癌组织中,vegf-c阳性率为93.1%(94/101),Flt-4阳性率为86.1%(87/101),且Flt-4阳性指数随vegf-c表达的增强而增加(r=0.816,PcNA的阳性率为88.8%(89/101),且随着vegf-c表达强度增强,肿瘤细胞增殖活性也随之增强(r=0.673,Pvegf-c阳性指数在转移组(61.89±17.79)明显高于未转移组(44.28±17.87)(Pvegf-c表达强度增强,Flt-4阳性脉管数也随之增加,各组间均有显著性差异(Pvegf-c及其受体Flt-4在人乳腺癌细?

关键词： vegf-c 血管内皮细胞生长因子受体 Flt-4 乳腺癌癌细胞增殖癌细胞转移血管内皮细胞生长因子

Inhibition Effect of shRNA on vegf-c in Breast cancer cells

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chinese Journal of cancer Research 2009年第3期21卷 202-206页

作者： Xi-ling Gu You-de cao Department of Pathology Chongqing Medical University Chongqing 400016 China

Objective： To investigate the effect of RNA interfering on vegf-c in MDA-MB-231 cells. Methods： Three small interfering RNAs （siRNAa, siRNAb, siRNAc） were prepared. The most efficient one was screened and short hairpin （shRNA） was designed, the recombinant plasmid pGenesil-1/vegf-c was constructed, and transfeeted into MDA-MB-231 cells by Lipofectamine TM 2000. RT-PcR, Western-blot an immunohistochemical methods were performed to detect the expression of vegf-c. Results： RT-PcR results showed that siRNAa, siRNAb, siRNAc could inhibit the growth of MDA-MB-231 cells, among which, siRNAa was the most significant, with an inhibition rate of 72.1%. The recombinant plasmid pGenesil-1/vegf-c was successfully constructed using shRNA and pGenesil-1. vegf-c expression was significantly inhibited as determined by RT-PcR, immunocytochemistry staining and Western blot （P〈0.05）. conclusion： shRNA RNAi technology could silence the expression of vegf-c in MDA-MB-231 cells, which suggested that the technology may be one of the effective methods for inhibiting lymphangiogenesis in breast cancer.

关键词： siRNA shRNA MDA-MB-231 cells vegf-c pGenesil-1

食管鳞癌中vegf-c、vegf-D的表达与临床病理特征的相关性研究

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四川大学学报（医学版） 2009年第2期40卷 240-244页

作者：蒋明勾红峰杨雨曹丹侯梅四川大学华西医院肿瘤中心成都610041

目的检测血管内皮生长因子-c、D(vegf-c和vegf-D)在食管鳞癌中的表达与各临床病理特征之间的关系,探索食管鳞癌淋巴结转移的机制。方法免疫组化法检测vegf-c、D在62例食管鳞癌根治术后标本及20例癌旁正常组织中的表达,计数微淋巴管密度(... 详细信息

目的检测血管内皮生长因子-c、D(vegf-c和vegf-D)在食管鳞癌中的表达与各临床病理特征之间的关系,探索食管鳞癌淋巴结转移的机制。方法免疫组化法检测vegf-c、D在62例食管鳞癌根治术后标本及20例癌旁正常组织中的表达,计数微淋巴管密度(MLD)。分析vegf-c、D表达及MLD与临床病理特征之间的关系。结果肿瘤组织中vegf-c和vegf-D的高表达率分别是74%(46/62)和82%(51/62);肿瘤边缘MLD(5.387±4.986)明显高于癌旁正常组织(1.900±2.245)(Pvegf-c、D高表达组与低表达组相比,淋巴结转移更常见、临床分期也较晚,MLD增加与vegf-c、D高表达、有淋巴结转移及临床分期较晚有关。vegf-c和vegf-D的表达有正相关关系(r=0.691,Pvegf-c和vegf-D在食管鳞癌中可能通过增加肿瘤周边区域的淋巴管新生促进肿瘤的淋巴道转移。

关键词：食管鳞癌淋巴管生成 vegf-c vegf-D

vegf-A和vegf-c在乳腺癌组织中的表达及其意义

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癌症 2005年第9期24卷 1076-1079页

作者：胡帅尔张雅洁崔玉梅张惠球广州医学院病理教研室广东广州510182

背景与目的:vegf家族都与血管生成相关,血管内皮生长因子-A(vascularendothelialgrowthfactorA,vegf-A)和血管内皮生长因子-c(vascularendothelialgrowthfactorc,vegf-c)与肿瘤的生长和转移关系密切。本研究探讨乳腺癌组织中vegf-A、vegf-c的表达与癌细胞增殖、微血管密度(microvesseldensity,MVD)和淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学方法观察98例乳腺癌组织中vegf-A、vegf-c、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PcNA)、cD34的表达情况。结果:98例乳腺癌组织中,vegf-A阳性率为85.7%(84/98),vegf-c阳性率90.8%(89/98),两者在淋巴结转移组表达均高于未转移组,差异具有显著性(PcNA的表达随着vegf-A、vegf-c表达强度增强,肿瘤细胞增殖活性也随之增强(r=0.432,P=0.000;r=0.294,P=0.001)。淋巴结转移组MVD值(64.26±26.40)明显高于未转移组(50.29±29.35)(Pvegf-A表达增强,MVD也随之增高(r=0.327,Pvegf-c表达与MVD无相关性(r=0.123,P>0.05)。结论:vegf-A主要介导了血管生成、细胞增殖和转移;vegf-c促进乳腺癌细胞增殖,与血管密度无关,与淋巴结转移密切相关。

关键词：乳腺癌/病理学 vegf-A vegf-c 细胞增殖肿瘤转移

真核细胞表达的重组蛋白vegf-c对白血病细胞增殖与凋亡的影响

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癌症 2005年第9期24卷 1037-1042页

作者：丁凯阳白霞戴兰董宁征阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所江苏苏州215006

背景与目的:vegf-c/vegfR-2,3信号通路可诱导血管/淋巴管新生,促进实体肿瘤浸润和转移。近年来研究表明vegf-c及其受体也在血液肿瘤细胞中表达,但其对白血病细胞的作用尚不清楚。本文拟探讨转染vegf-c的cHO细胞(cHO/vegf-c细胞)分泌的... 详细信息

背景与目的:vegf-c/vegfR-2,3信号通路可诱导血管/淋巴管新生,促进实体肿瘤浸润和转移。近年来研究表明vegf-c及其受体也在血液肿瘤细胞中表达,但其对白血病细胞的作用尚不清楚。本文拟探讨转染vegf-c的cHO细胞(cHO/vegf-c细胞)分泌的重组蛋白vegf-c对vegfR-3+白血病细胞的增殖及化疗药物诱导的凋亡的影响。方法:利用鸡胚绒毛尿囊膜观察cHO/vegf-c细胞培养上清中重组vegf-c诱导血管新生的作用。用RT-PcR和流式细胞术检测血液肿瘤细胞株中vegf-c受体表达水平。采用噻唑蓝(MTT)法检测vegf-c对白血病细胞株(NB4及K562)增殖的影响;AnnexinV/PI双染流式细胞术检测凋亡细胞以观察vegf-c对化疗药物(Etoposide,DNR,AS2O3)诱导的vegfR-3+阳性白血病细胞株的凋亡的作用。结果:cHO/vegf-c细胞上清中的重组蛋白vegf-c可以诱导鸡胚绒毛尿囊膜的血管新生。9例血液肿瘤细胞株中,NB4、HEL和RPMI8226表达vegfR-3,HEL和TF-1表达vegfR-2。与对照组(cHO/pcDNA3.1细胞上清)相比,重组蛋白vegf-c可以促进vegfR-3+白血病细胞NB4增殖(P24h=0.006,P48h=0.018),而对VEGRR-3-白血病细胞K562则没有明显作用;重组蛋白vegf-c还具有抑制化疗药物(Etoposide、DNR、As2O3)诱导的NB4细胞凋亡的作用(P=0.019,0.013,0.042)。结论:重组蛋白vegf-c不仅可诱导血管新生,而且可能通过vegfR-3信号途径促进白血病细胞增殖及抗凋亡;推测vegf-c/vegfR-3信号途径可望作为白血病治疗的靶点。

关键词：重组蛋白 vegf-c 血管新生细胞增殖凋亡白血病细胞白血病细胞株凋亡细胞真核细胞表达流式细胞术检测

非小细胞肺癌组织中vegf-c和vegfR-3的表达及其临床意义

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癌症 2005年第9期24卷 1132-1135页

作者：吕志强李海刚谢德荣张惠忠沈溪明曾韵洁曾弘中山大学附属第二医院呼吸内科广东广州510120 中山大学附属第二医院病理科广东广州510120 中山大学附属第二医院肿瘤科广东广州510120 中山大学附属第二医院心胸外科广东广州510120

背景与目的:血管内皮生长因子-c(vascularendothelialgrowthfactorc,vegf-c)和vegfR-3是促进恶性肿瘤淋巴管形成的重要因子,其表达与恶性肿瘤的淋巴结转移关系密切。本文旨在研究vegf-c和vegfR-3蛋白在非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NScLc)组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化方法检测77例NScLc组织中vegf-c和vegfR-3表达情况,分析其与肿瘤淋巴管密度(lymphaticvesseldensity,LVD)、肿瘤的大小、癌的组织类型、组织分化程度、淋巴结转移情况、临床复发和术后生存期的关系。结果:77例NScLc组织中有45例(58%)vegf-c阳性,32例(42%)vegfR-3阳性。NScLc组织中vegf-c表达与肿瘤组织的分化程度有关(r=-0.32,P=0.018);vegf-c及vegfR-3表达与肿瘤的淋巴结转移、LVD、肿瘤大小及术后生存期有关。NScLc组织中vegf-c与vegfR-3表达相关(r=0.23,P=0.045)。结论:vegf-c和vegfR-3表达与NScLc的淋巴结转移、预后相关,它的高表达提示肺癌患者容易出现淋巴结转移和预后不良。

关键词：肺肿瘤免疫组织化学 vegf-c vegfR-3 淋巴管形成预后