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穴位注射对气滞血瘀证雌性大鼠血清NO及子宫组织vegf/kdr表达的影响

中国中医基础医学杂志 2020年第7期26卷 904-907页

作者：万荷天一陈睿唐也笑罗小光贵州医科大学贵阳550004 贵州医科大学附属医院贵阳550004

目的:探讨穴位注射对气滞血瘀证雌性大鼠血清一氧化氮(NO)、子宫组织血管内皮生长因子(vegf)、血管内皮生长因子受体2(kdr)表达的影响及可能的作用机制。方法:建立气滞血瘀证雌性大鼠模型,运用免疫组化和RT-PCR法检测空白组、模型组、... 详细信息

目的:探讨穴位注射对气滞血瘀证雌性大鼠血清一氧化氮(NO)、子宫组织血管内皮生长因子(vegf)、血管内皮生长因子受体2(kdr)表达的影响及可能的作用机制。方法:建立气滞血瘀证雌性大鼠模型,运用免疫组化和RT-PCR法检测空白组、模型组、中药组、穴位注射组大鼠子宫组织vegf/kdr蛋白及mRNA的表达及血清NO的变化。结果:与空白组比较,模型组大鼠子宫组织vegf和kdr蛋白及mRNA表达显著降低,NO显著降低;与模型组比较,中药组和穴位注射组子宫组织中vegf和kdr蛋白及mRNA表达均显著升高,NO明显上升,且2组比较差异无统计学意义。结论:丹红穴位注射能促进气滞血瘀证雌性大鼠血清NO、子宫组织vegf/kdr的表达,改善子宫组织血流状态,从而达到“祛瘀生新”的作用。

关键词：穴位注射气滞血瘀证子宫 vegf/kdr 血清NO

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丹红穴位注射对气滞血瘀证雌性大鼠血清NO、子宫组织vegf/kdr表达的影响

丹红穴位注射对气滞血瘀证雌性大鼠血清NO、子宫组织VEGF/KDR表达...

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作者：万荷天一贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨丹红穴位注射对雌性大鼠气滞血瘀证活血化瘀、祛瘀生新的作用及可能的作用机制。方法:将40只处于6-8周的健康SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、穴位注射组,共4组,每组10只。除空白组外,其余3组大鼠均采用连续18天左... 详细信息

目的:探讨丹红穴位注射对雌性大鼠气滞血瘀证活血化瘀、祛瘀生新的作用及可能的作用机制。方法:将40只处于6-8周的健康SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、穴位注射组,共4组,每组10只。除空白组外,其余3组大鼠均采用连续18天左下腹注射盐酸肾上腺素（Adr）及4h后接受不可预见性刺激复制雌性大鼠气滞血瘀证模型。造模结束后24h进行治疗,中药组以桃红四物汤灌胃,每日1次,共14次;穴位注射组注射丹红注射液,间隔3天1次,共4次。治疗2周后,采用心脏取血法后,摘取大鼠子宫。观察各组大鼠血液流变学、凝血四项、血清NO的变化,运用免疫组化和实时荧光定量PCR法检测大鼠子宫组织vegf/kdr蛋白及m RNA的表达。结果:与空白组相比,模型组大鼠血液流变学全血（高、中、低）粘度、血浆粘度、红细胞压积均显著升高（P＜0.01或P＜0.001）,凝血四项中凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）明显缩短,纤维蛋白原（FIB）含量显著升高（P＜0.01或P＜0.001）,凝血酶原时间（PT）无统计学差异（P＞0.05）,血清NO的表达显著降低（P＜0.01）,子宫组织vegf和kdr蛋白及m RNA表达显著降低（P＜0.05）;与模型组相比,中药组和穴位注射组雌性大鼠血液流变学全血（高、中、低）粘度、血浆粘度、红细胞压积显著降低（P＜0.001或P＜0.05）,TT、APTT明显延长,FIB含量明显减少（P＜0.05或P＜0.01）,PT无统计学差异（P＞0.05）,血清NO含量明显上升（P＜0.01）,子宫组织中vegf和kdr蛋白及m RNA表达均显著升高（P＜0.05）,且两治疗组间无统计学差异。结论:（1）运用丹红注射液穴位注射治疗雌性大鼠气滞血瘀证,通过降低大鼠的血液粘稠度,改善凝血功能,达到活血化瘀的作用;（2）通过促进其血清NO含量的增多、子宫组织vegf、kdr表达的升高,达到祛瘀生新的功效;（3）其作用机制可能是由于血清NO、vegf、kdr是改善子宫组织血流状态的重要因子,三者相互促进,从而达到“活血化瘀”“祛瘀生新”的作用。

关键词：穴位注射气滞血瘀证子宫 vegf/kdr 血清NO

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益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、vegf/kdr表达的影响

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中华中医药学刊 2014年第7期32卷 1563-1565页

作者：曾普华郜文辉潘敏求蒋益兰李勇敏李跃辉唐珍湖南省中医药研究院附属医院肿瘤科湖南长沙410006 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

目的:观察益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、vegf/kdr表达的影响。方法:建立人肝癌移植瘤模型,分为7组,分别以益气化瘀解毒方、黄芪、莪术、重楼、壁虎、顺铂药物干预21 d后,取瘤组织行免疫组化检测。结果:①对MVD的影... 详细信息

目的:观察益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、vegf/kdr表达的影响。方法:建立人肝癌移植瘤模型,分为7组,分别以益气化瘀解毒方、黄芪、莪术、重楼、壁虎、顺铂药物干预21 d后,取瘤组织行免疫组化检测。结果:①对MVD的影响:全方组与除顺铂外的其它组比较有统计学意义(Pvegf表达的影响:全方组与除顺铂外的其它组比较均有统计学意义(P0.05)。④对kdr表达的影响:全方组与其它各组比较均有统计学意义(P0.05)。结论:益气化瘀解毒方能明显抑制人肝癌裸鼠移植瘤MVD、HIF1a、vegf和kdr的表达而发挥抗血管生成作用;各单味药对其作用各有侧重,但作为整方的有机组成从不同环节发挥了协同作用。

关键词：益气化瘀解毒方人肝癌裸鼠HepG2移植瘤 MVD HIF1a vegf/kdr

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The molecular mechanism underlying angiogenesis in hepatocellular carcinoma: the imbalance activation of signaling pathways

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Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International 2003年第4期2卷 529-536页

作者： Zhi-Cheng Zhao Shu-Sen Zheng Yun-Le Wan Chang-Ku Jia Hai-Yang Xie the Department of Hepatobiliary Surgery, First Affiliated Hospital, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310003, China Department of Hepatobiliary Surgery First Affiliated Hospital Zhejiang University School of Medicine Hangzhou 310003 China. zyh037@***

OBJECTIVE: To explore the effect of two dominating signaling pathways, vegf/kdr and angiopoietins/Tie2, on the formation of new blood vessel in hepatocellular carcinoma (HCC) growth and metastasis. METHODS: RT-PCR and Western blot were employed to evaluate the vegf/kdr and angiopoietins/Tie2 expression in samples from 23 patients with HCC. Meanwhile, microvessel density (MVD) was determined as a marker of angiogenesis by counting CD34 positive cells with the method of immunohistochemistry. RESULTS: The two pathways were activated in all HCC samples. The expressions of vascular endothelial growth factor (vegf) and angiopoietin-2 (Ang2) were significantly higher (Pkdr) and Ang1/Tie2 was not observed in all groups, their distinct high levels were seen in hepatoma and its margin compared with normal and cirrhotic liver. vegf and Ang2 expressions were seen up-regulated in HCC with vascular invasion and satellite lesion. CONCLUSIONS: The two signaling pathways, vegf/kdr and angiopoietins/Tie2 are activated in the process of angiogenesis in HCC and modulate the formation of new blood vessels. The imparity of the two signaling pathways' activation is to benefit HCC metastasis. In the two pathways, vegf and Ang2 may play an important role in the process of angiogenesis, and are necessary indicators for the prognosis and metastasis of HCC. This study provides another clue for the exploration of anti-angiogenic agents.

关键词： hepatocellular carcinoma signaling pathway angiogenesis vegf/kdr angiopoietins/Tie2

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蜂毒素治疗小鼠结肠癌的实验研究

蜂毒素治疗小鼠结肠癌的实验研究

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作者：朱晓舟扬州大学

学位级别：硕士

结肠癌是发生于结肠部位的常见的消化道恶性肿瘤,占胃肠道肿瘤的第三位,近年来,结肠癌的发病率与病死率在我国呈上升的趋势,达到或超过了西方发达国家的平均水平,其发病年龄在40岁以上,高发年龄普遍在50～60岁,比西方国家平均提早10岁... 详细信息

结肠癌是发生于结肠部位的常见的消化道恶性肿瘤,占胃肠道肿瘤的第三位,近年来,结肠癌的发病率与病死率在我国呈上升的趋势,达到或超过了西方发达国家的平均水平,其发病年龄在40岁以上,高发年龄普遍在50～60岁,比西方国家平均提早10岁。目前结肠癌临床治疗主要以手术为主,同时有目的的结合放疗和化疗。结肠癌5年生存率为74%,根治手术率为85%。但是对于有些失去手术机会,又不能耐受化疗毒副作用的患者,迫切需要寻找或开发出新型的抗肿瘤药物。蜂毒是蜜蜂工蜂毒腺和副腺分泌的透明毒液,民间利用蜂毒治疗类风湿性关节炎已有悠久的历史。蜂毒素是从蜂毒中提取的一种小蛋白分子,约占蜂毒干重的50%,具有很强的生物活性。随着现代分子生物科学技术的发展,基因工程蜂毒素技术已经很成熟,并通过体内外实验,验证其具有生物学活性。蜂毒素具有抗肿瘤作用,能抑制消化道肿瘤的生长,促进肿瘤细胞的凋亡。国内外关于蜂毒素抑制肿瘤细胞增殖、转移,诱导凋亡的研究尚未完全阐明,课题组前期研究发现蜂毒素能通过线粒体通路抑制胃癌细胞转移,诱导胃癌细胞的凋亡,本研究拟通过细胞、分子、动物水平探究基因工程蜂毒素给药的最佳药物浓度及治疗效果,旨在探讨蜂毒素体内外抑制结肠癌的机制。研究内容分为三部分:第一部分天然蜂毒素抑制小鼠结肠癌CT-26细胞的实验研究目的:通过不同浓度的蜂毒素抑制小鼠结肠癌CT-26细胞的生长,探讨蜂毒素对小鼠结肠癌CT-26细胞的迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法:MTT法检测不同浓度蜂毒素(1、2、4、8和16μg/mL)分别作用小鼠结肠癌CT-26细胞不同时间(1、2、4、8h)后细胞增殖情况;Transwell小室实验检测蜂毒素(1、2μg/mL)作用小鼠结肠癌CT-26细胞lh后迁移能力的情况;流式细胞术检测蜂毒素(1、2μg/mL)作用CT-26细胞1h后诱导细胞凋亡情况;Western Blot检测蜂毒素(1、2μg/mL)作用1h后小鼠结肠癌CT-26细胞线粒体通路中Caspase-9,Caspase-3和PARP的蛋白水平。结果:MTT结果显示蜂毒素能够有效抑制小鼠结肠癌CT-26细胞的生长,随着浓度的增大和作用时间的延长,抑制率逐渐增高,趋近100%,当蜂毒素浓度分别为1和2μg/mL作用1h,抑制率分别达到24.83%、58.16%,与对照组相比差异显著(P<0.01)。Transwell小室实验结果显示,经1和2μg/mL蜂毒素处理细胞1h后,CT-26细胞穿膜数分别为192个和53个,较对照组207个明显减少,并呈一定的浓度依赖性(P<0.01)。细胞凋亡检测结果显示,经1和2μg/mL的蜂毒素处理后1h,CT-26细胞凋亡率分别为8.5%、11.3%,较对照组凋亡率5.3%明显升高并呈一定的浓度依赖性(P<0.01)。Western Blot结果显示,经1和2μg/mL蜂毒素处理小鼠结肠癌CT-26细胞1h后,细胞上清中,Caspase-9相对表达量分别为1.07和0.46,较对照组2.25明显降低,呈一定的浓度依赖性(P<0.01),Caspase-3相对表达量分别为3.72和2.33,较对照组11.03明显降低,呈一定的浓度依赖性(P<0.01),PARP相对表达量分别为1.23、1.10,较对照组1.80明显降低,并呈一定的浓度依赖性(P<0.01)。结论:当蜂毒素浓度分别为1、2μg/mL,作用小鼠结肠癌CT-26细胞1h后,就能明显抑制细胞的增殖、迁移、并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Caspase-9,Caspase-3和PARP蛋白水平直接相关。第二部分携带蜂毒素基因的减毒沙门氏菌体外抑制小鼠结肠癌CT-26细胞的实验研究目的:通过不同浓度的各组菌抑制小鼠结肠癌CT-26细胞的生长,探讨携带蜂毒素基因的减毒沙门氏菌(Mel菌)对小鼠结肠癌CT-26细胞的迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法:MTT法检测不同浓度的Mel菌及减毒沙门氏菌(X4550菌)、携带荧光基因的减毒沙门氏菌(GFP菌)(15、20、25、30、35、40、45和50CFU/细胞)分别作用小鼠结肠癌CT-26细胞24、48h后细胞增殖影响;Transwell小室实验检测Mel菌25CFU/细胞、对照组X4550菌45CFU/细胞和对照组GFP菌30CFU/细胞作用小鼠结肠癌CT-26细胞24h后迁移能力的情况;流式细胞技术检测Mel菌25 CFU/细胞、对照组X4550菌45 CFU/细胞和对照组GFP菌30CFU/细胞作用CT-26细胞24h后诱导细胞凋亡的情况;Western Blot检测经Mel菌25CFU/细胞、对照组X4550菌45CFU/细胞和对照组GFP菌30CFU/细胞作用24h后的小鼠结肠癌CT-26细胞线粒体通路中Caspase-9,Casp

关键词：蜂毒素减毒沙门氏菌结肠癌凋亡 vegf/kdr 动物模型

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通络刮痧对气滞血瘀证大鼠抗氧化作用与子宫组织血管新生的实验研究

通络刮痧对气滞血瘀证大鼠抗氧化作用与子宫组织血管新生的实验研...

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全国科研理论学术研究大会

作者：万荷天一罗小光黄姗马欢万飞贵州医科大学重庆医药高等专科学校

目的:观察通络刮痧对气滞血瘀证雌性大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)浓度、子宫组织血管内皮生长因子(vegf)、血管内皮生长因子受体2(kdr)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组... 详细信息

目的:观察通络刮痧对气滞血瘀证雌性大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)浓度、子宫组织血管内皮生长因子(vegf)、血管内皮生长因子受体2(kdr)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、中药组及刮痧组,每组10只。备制气滞血瘀证动物模型。观察各组大鼠血清SOD、MDA含量的变化,运用实时荧光定量PCR法和免疫组化法检测大鼠子宫组织vegf、kdrmRNA及蛋白的表达。结果:与正常组相比,模型组SOD活性明显降低(Pvegf和kdr蛋白及m RNA表达显著降低(Pvegf和kdr蛋白及m RNA表达均显著升高((Pvegf、kdr的表达,改善子宫组织血管内皮功能,从而达到活血化瘀的作用。

关键词： vegf/kdr 血清SOD/MDA 子宫通络刮痧气滞血瘀证

来源： cnki会议评论

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