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Diverse Functions of vdup1 in Cell Proliferation,Differentiation,and Diseases

Cellular & Molecular Immunology 2007年第5期4卷 345-351页

作者： Sang Yong Kim Hyun-Woo Suh Jin Woong Chung Suk-Ran Yoon Inpyo Choi Stem Cell Research Center Korea Research Institute of Bioscience and BiotechnologyYusongTaejon 305-333Republic of Korea

Vitamin D3 up-regulated protein 1 （vdup1） is a multifunctional protein involved in maintaining cellular homeostasis. vdup1 is induced by a variety of stresses. Inversely, vdup1 is often reduced in various tumor tissues and cell lines. Over-expression of vdup1 inhibits cell proliferation through cell cycle arrest. vdup1 interacts with thioredoxin （Trx） and negatively regulates the expression and antioxidant function of Trx which is involved in redox regulation. vdup1/ mice are more susceptible to carcinogenesis than wild-type mice and are defective in establishing immune system induding the development and function of natural killer cells. Furthermore, vdup1^-/- mice show impaired Kreb cycle-mediated fatty acid utilization. In this review, we have discussed the multifunctional roles of vdup1 in diverse cellular responses, in particular its relation to proliferation, apoptosis, differentiation, and diseases such as cancer and stress-related diseases.

关键词： vdup1 thioredoxin proliferation immune cell

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Phenylacetylglutaminate and Phenylacetate in Combination Upregulate vdup1, Cause Cell Cycle Blockade and Apoptosis in U87 Glioblastoma Cells

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Journal of Cancer Therapy 2012年第3期3卷 192-200页

作者： Sonali S. Patil Stanislaw R. Burzynski Emilia Mrowczynski Krzysztof Grela Sridar V. Chittur Center for Functional Genomics University at Albany Rensselaer USA. Department Cell and Molecular Biology Burzynski Research Institute Stafford USA

Phenylacetylglutaminate (PG) and Phenylacetate (PN) are metabolites of Phenylbutyrate (PB) and are constituents of antineoplaston AS2-1. These are sodium salts of amino acid derivative and carboxylic acid that inhibit the growth of neoplastic cells without growth inhibitory effect in normal cells. The aim of this study was to identify molecular pathways involved in the anti-proliferative effect of antineoplastons. Using a total human genome microarray we have found that 1) Vitamin D3 upregulated protein (vdup1) is significantly upregulated in response to PG and PN in the U87 glioblastoma cells;2) Isobologram analysis shows that PG and PN act in an additive or synergistic manner to effectively suppress proliferation of U87 cells;3) PG and PN cause cell cycle arrest, changes in expression of several cell cycle genes and suppress expression and activity of the G2/M checkpoint kinase, CHK1. The multiple cellular targets possibly make these compounds effective anti-proliferative agents. We propose that PG and PN in combination target important cellular pathways and upregulate vdup1 leading to detachment-induced apoptosis in cancer cells.

关键词： Glioblastoma vdup1 Phenylacetylglutaminate Phenylacetate Apoptosis Drug Combination

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抑癌蛋白Vitamin D3 up-regulated protein 1在肺癌中的表达及其意义

抑癌蛋白Vitamin D3 up-regulated protein 1在肺癌中的表达及其...

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作者：王燕南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景：肺癌作为一种恶性肿瘤,其发病率和死亡率居各种恶性肿瘤榜首,近年来甚是呈上升趋势,已成为21世纪全球面临的最严峻的健康问题之一。在中国,据预测到2025年,肺癌患者将达到100万,居世界第1位。而肺癌的发病机制复杂,是多因素... 详细信息

研究背景：肺癌作为一种恶性肿瘤,其发病率和死亡率居各种恶性肿瘤榜首,近年来甚是呈上升趋势,已成为21世纪全球面临的最严峻的健康问题之一。在中国,据预测到2025年,肺癌患者将达到100万,居世界第1位。而肺癌的发病机制复杂,是多因素、多基因、多阶段共同参与的结果。因此,发现并证实与肺癌相关基因蛋白,可以更深入了解肺癌发生发展机理,提供判断肺癌预后、转移的分子标志物,找到治疗肺癌靶点,从而有效控制肺癌的侵袭、转移,提高病人5年生存率,这是肿瘤研究的重点内容,也是肿瘤防治研究中的一个难点问题。维生素D3上调蛋白（Vitamin D3 up-regulaited protein 1, vdup1）最早被发现在活性维生素D刺激后的HL-60细胞中表达,是一种维生素D相关分子。vdup1作为早期反应基因,具有多种生物学功能,参与了氧化应激,应力信号转导,细胞生长与分化,脂质代谢及粘膜免疫等过程,证实与糖尿病、肿瘤、心血管等复杂疾病密切相关。vdup1是主要氧化还原调控蛋白硫氧还蛋白（thioredoxin, TRX）的关键抑制因子,而TRX和谷胱苷肽（GSH）系统是并行重要的抗氧化调控系统。 vdup1是一种多功能蛋白,主要对细胞的稳定起作用,多种因素可促进其表达。研究证实,vdup1在不同的肿瘤组织和细胞株中有不同程度的下降。vdup1主要涉及细胞的增殖、分化及调亡。vdup1的过表达可以使细胞周期停止从而阻止细胞分化。vdup1与TRX相互作用,负向调节其表达和TRX氧化功能。vdup1-/-小鼠出现明显的免疫系统缺陷,包括自然杀伤细胞的形成和功能构建。vdup1作用主要涉及细胞增值、分化及凋亡。 2003年Song等报道vdup1是一种肿瘤抑制蛋白,参与了多种肿瘤的增殖、侵袭及转移的调控。近年来多项研究证明vdup1可以促进细胞凋亡,参与抑制增生,调控固有免疫细胞从而影响肿瘤等发生发展。在乳腺癌、肾癌、肝癌等肿瘤中证实vdup1具有抑制肿瘤演进和转移的作用。Cristina等以未接受化疗的乳腺癌病人为研究对象,分析vdup1与预后因素,例如组织分化程度、肿瘤大小、年龄及甾体激素受体情况等的相关性,发现vdup1表达量高的病人预后较好,5年中位生存率较高。Kwon发现vdup1-/-小鼠更容易形成肝癌,并导致TNF-α以及NF-κp的升高,推测vdup1可能通过抑制TNF-α和NF-κβ从而负向调节肝癌形成。Jeon等培育vdup1基因敲除小鼠和野生型小鼠的肺成纤维细胞,通过EMSA、免疫沉淀等方法证实抑癌蛋白vdup1可能通过抑制JAB增强p27kip1稳定性,而p27kip1的缺失是被认为与大多数恶性肿瘤的发生相关。这提示我们vdup1与恶性肿瘤的发生、发展呈负相关,可能具有抑制肿瘤的作用。 2006年Filby等研究绵羊胎儿肺膨胀对vdup1表达的影响,发现vdup1位于支气管和肺泡上皮细胞以及一些间叶细胞,在正常肺发育中其表达与细胞增殖成负相关性。所以,vdupI可能是膨胀诱导的肺细胞增殖重要调节因子。Eugene [43]等报道通过与癌旁组织相比,vdup1等转录基因在肺癌组织中的表达量下降。同时发现在人胚胎肺里vdup1等基因表达量是增高的。故肺发展过程中这些变化的基因可以被高度认为是肺癌诊断分级的情报候选分子标志。故本研究拟采用荧光定量PCR、western-blot检测和观察35例肺癌组织及癌旁组织、western-blot检测1种人肺癌细胞株及1种人正常气道上皮细胞株中vdup1的表达情况;分析vdup1在肺癌中的表达及其与各临床病理参数之间的关系,初步探寻早期肺癌的监测指标,为肺癌的诊断、综合治疗方案设计、预后提供一定的理论依据。方法 ***1蛋白在人正常气道上皮细胞和肺癌细胞中的表达研究人正常支气管上皮细胞系16-HBE采用含12%胎牛血清的MEM完全培养基;人腺癌细胞株A549采用10%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养。待细胞90%融合后铺满培养皿后方可进行细胞的全蛋白提取。采用Bradford法测定蛋白含量,波长设定为595nm。算出蛋白浓度后,进行分装。将变性蛋白加入槽内,进行电泳、转膜、封闭,孵育1抗、2抗,最后进行曝光显影,扫描分析数据,最终判定A549人肺腺癌细胞株和人正常气道上皮细胞株16HBE中的vdup1蛋白表达情况。 2. vdup1蛋白在人体正常肺组织和常见肺恶性肿瘤组织的表达研究液氮研钵组织,加入TRIzo1,移入DEPC处理过的离心管,依次加入氯仿、异丙醇及无水乙醇,最后适量无核酸酶的水溶解RNA。取适量RNA溶液用ND-1000微量分光光度计测定其浓度,RT-PCR反应分两步：第一步,逆转录阶段,扩增时取0.5μg的总

关键词：肺癌 vdup1 western blot RT-PCR

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