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霍乱弧菌O139和El Tor 菌株毒力岛区域分子特征的研究

霍乱弧菌O139和El Tor 菌株毒力岛区域分子特征的研究

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作者：王颖芳郑州大学

学位级别：硕士

霍乱是由霍乱弧菌(Vibrio cholerae,vc)引起的急性肠道传染病，在我国被列为甲类传染病之一，也是国际检疫传染病之一，曾引起过七次世界大流行，给人们的生命财产造成了巨大的损失。根据霍乱弧菌O抗原的不同，目前已知至少有206个血清... 详细信息

霍乱是由霍乱弧菌(Vibrio cholerae,vc)引起的急性肠道传染病，在我国被列为甲类传染病之一，也是国际检疫传染病之一，曾引起过七次世界大流行，给人们的生命财产造成了巨大的损失。根据霍乱弧菌O抗原的不同，目前已知至少有206个血清群。1992年以前人们普遍认为只有O1群霍乱弧菌(vc O1)能引起霍乱的爆发、流行，直到1992年10月19日，印度南部Madras市发生了由O139群霍乱弧菌(O139 Vibrio cholerae,vcO139)引起的典型霍乱样腹泻爆发并在较短时间内迅速波及到泰国、巴基斯坦、缅甸、中国、沙特阿拉伯、美国、英国和日本等十多个国家，vc O139才引起全球学者的广泛关注。 WHO已经认定O1群和v139群霍乱弧菌是引起霍乱的病原体。有些学者甚至认为vcO139可能引起第八次霍乱世界大流行。自从1992年vcO139在印度出现以来，有关它的来源一直是研究的热点。毒力基因和遗传背景的研究显示出vcO139和第七次世界大流行的v1群E1 Tor(E1 Tor biotype of Vibrio cholerae,Evc)非常相近，但在抗原结构尤其是脂多糖和荚膜结构vcO139和Evc又有很大的不同，同时在这方面vcO139和某些非v1群的其它血清群菌株相似。目前有关vcO139的来源主要有三种观点：(1)vcO139的出现是Evc发生突郑州大学硕士学位论文霍乱弧菌0139和EI Tor菌株毒力岛区域分子特征的研究变导致其血清型特异性抗原改变的结果;(2)一种以前未检测到的非01群血清群的不产毒菌株在获得一系列的可能是来自Evc的毒力基因后成为霍乱弧菌的产毒血清群;(3) vc0139在环境中本来就存在，只是由于其数量少而未被检测到，但是某些未知的环境条件的改变是其数量迅速增加而成为优势菌群。直到目前为止这三种可能无一能被断然排除或肯定，大多数研究结果支持第一种观点，要明确vc 0 1 39的来源还需进行更深入细致的研究。我国1993年在新疆某地首次爆发了由vc 0139引起的霍乱。很多学者对我国新疆1993年分离的vc 0139的分子生物学特征进行了研究，结果表明新疆分离的vc 0139菌株与印度和孟加拉国分离的vc 0139菌株比较相似，但还有一定的差异。研究表明vc 01和vc 0139之所以能成为病原菌，是因为这些菌株染色体基因组上携带霍乱毒素毒力单元和毒力岛(巧brio cholerae pathogenity island，vPI)。cTX毒力单元能产生霍乱肠毒素并引起霍乱样腹泻，并可以溶源性噬菌体形式存在(命名为CTX巾)和类似质粒的复制形式(RF)存在。而VPI中的topA基因可合成霍乱毒素共调菌毛，它不仅是一个重要的定居因子，而且可以作为CTX中的受体，介导CTX中进入霍乱弧菌，使CTX中进一步整合到霍乱弧菌染色体上使霍乱弧菌编码霍乱毒素。另外，霍乱是严重危害人类健康的传染病，迄今仍无一种理想的疫苗供人类使用。有学者认为认为霍乱弧菌定居小肠依赖于功能性毒素共调菌毛亚单位A基因(toxin eo一re四lated pilus subunitA，tepA)，tepA基因是构成菌毛的主要亚单位，由tcPA产生的抗体能阻断细菌对肠上皮的粘附。tcPA是霍乱毒素(CTX)的受体，由tcPA产生的抗体能诱导抗菌免疫，防止感染，有效保护乳鼠不受霍乱毒素的攻击。所以构建重组质粒PNEB 1 93一tcPA为进一步研究其产物的生物学功能，阐明tcPA在霍乱发病机制中的作用，构建霍乱弧菌基因工程组分疫苗及免疫检测试剂等基础和应用研究具有重要意义。本研究主要分析新疆分离的Evc XJ89079、vc 0139 XJ93006和vc 0139国际标准株M045的VPI区域的分子特征，从而进一步研究vc 0139的来源，及新疆1993年霍乱爆发流行的来源。并构建PNEB193一tcPA重组质粒为为进一步研究TcpA的生物学功能，阐明TcpA在霍乱发

关键词：霍乱弧菌 O139 tcpA vc0815克隆限制性酶切图谱测序

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