检索结果-南通市图书馆

中华医学杂志 2016年第12期96卷 944-948页

作者：张琼霞王希成陈树鹏秦鑫添广东药科大学附属第一医院肿瘤科广州510080 中山大学肿瘤防治中心、华南肿瘤学国家重点实验室

目的观察分析去泛素化蛋白酶usp37在乳腺癌中表达及其预后的关系。方法应用Western印迹检测usp37在5例乳腺癌新鲜组织中表达情况，采用免疫组织化学检测533例乳腺癌蜡块标本usp37表达并评分。用ROC方法确定usp37表达最佳临界值；检测US... 详细信息

目的观察分析去泛素化蛋白酶usp37在乳腺癌中表达及其预后的关系。方法应用Western印迹检测usp37在5例乳腺癌新鲜组织中表达情况，采用免疫组织化学检测533例乳腺癌蜡块标本usp37表达并评分。用ROC方法确定usp37表达最佳临界值；检测usp37表达情况与患者临床特征之间相关性。结果usp37免疫组化反应产物主要是定位于细胞质，偶尔见于细胞核，在正常乳腺组织中，usp37低表达或者不表达，而在533例乳腺癌组织标本中，usp37高表达率为50．7％（270／533），低表达或阴性表达率为49．3％（263／533），癌组织中usp37较对应癌旁组织明显高表达。usp37高表达与乳腺癌淋巴结分期、分子分型和增殖标志物Ki67正相关。单因素和多因素分析都表明usp37可以作为乳腺癌总生存（OS）、无复发生存时间（RFS）和无转移生存时间（MFS）独立预后因子。另外，usp37还可以辅助乳腺癌分子分型，预测不同预后亚组。结论usp37在乳腺癌组织中高表达，且过表达usp37可以作为乳腺癌独立预后不良因子。

关键词：乳腺肿瘤 usp37 肿瘤标志物

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

usp37稳定SREBP1a促进胆固醇摄取和脂质沉积

引用

华中科技大学学报（医学版） 2024年第2期53卷 148-153页

作者：王曼丁虎华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科武汉430030

目的筛选影响胆固醇调节元件结合蛋白1a(cholesterol regulatory element binding protein,SREBP1a)蛋白稳定性的去泛素化酶,并探索其调控机制。方法通过去泛素化酶库筛选显著影响SREBP1a表达的去泛素化酶,免疫蛋白印记实验和实时荧光定... 详细信息

目的筛选影响胆固醇调节元件结合蛋白1a(cholesterol regulatory element binding protein,SREBP1a)蛋白稳定性的去泛素化酶,并探索其调控机制。方法通过去泛素化酶库筛选显著影响SREBP1a表达的去泛素化酶,免疫蛋白印记实验和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)评估去泛素化酶对SREBP1a以及升脂基因表达的影响;通过红色荧光蛋白标记人源低密度脂蛋白(human Dil-low density lipoprotein,Human Dil-LDL)摄取和油红O染色等实验技术检测细胞摄取低密度脂蛋白(LDL)和脂质沉积情况。结果去泛素化酶库筛选发现泛素特异肽酶37(ubiquitin specific peptidase 37,usp37)可显著增加肝细胞SREBP1a蛋白表达水平,促进胆固醇摄取及脂质沉积。usp37基因敲除可显著降低SREBP1a蛋白表达水平,抑制升脂基因表达及脂质沉积。结论去泛素化酶usp37通过稳定SREBP1a蛋白表达,促进胆固醇摄取及脂质沉积,揭示了SREBP1a翻译后调控的新模式。

关键词：去泛素化脂质沉积低密度脂蛋白摄取 usp37 SREBP1a

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

去泛素化酶usp37促进肺癌细胞迁移的分子机制

去泛素化酶USP37促进肺癌细胞迁移的分子机制

引用

作者：李梦莹上海交通大学

学位级别：硕士

在肺癌病人中研究发现,肺癌经常转移到其他器官,最常涉及到的转移部位是神经系统（39%）、骨（34%）、肝（20%）、呼吸系统（18%）和肾上腺（8%）,导致患者的存活期显著缩短。转录因子Snail蛋白家族有五个亚家族,包括Snaill（Snail）、S... 详细信息

在肺癌病人中研究发现,肺癌经常转移到其他器官,最常涉及到的转移部位是神经系统（39%）、骨（34%）、肝（20%）、呼吸系统（18%）和肾上腺（8%）,导致患者的存活期显著缩短。转录因子Snail蛋白家族有五个亚家族,包括Snaill（Snail）、Snai12（Slug）、Snail3（Smuc）、Scratch1 和 Scratch2。Snail 蛋白是一种常见的增强癌细胞发生上皮-间质转化（EMT）过程的关键转录因子,具有促进癌细胞迁移和转移的功能,但是,Snail蛋白不稳定,可以通过泛素化修饰介导的蛋白酶体途径进行快速降解,而去泛素酶（DUB）通过调节泛素化修饰介导的水解过程抑制Snail降解。我们的研究表明,usp37去泛素化蛋白酶是去泛素化酶家族成员之一,可以通过降低泛素水平,抑制Snail的降解。进一步研究发现usp37与Snail共同存在细胞核中;在生物学上,usp37的表达上调促进了肺癌细胞的迁移,而Snail蛋白敲低则消除了 usp37的影响。这些数据表明,usp37是对Snail特异的一种去泛素酶,这在肿瘤治疗中也是一个潜在的治疗靶点。

关键词：去泛素化 usp37 Snail 细胞迁移肺癌

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

去泛素化酶usp37调控DNA损伤应答分子机制研究

去泛素化酶USP37调控DNA损伤应答分子机制研究

引用

作者：常一鸣锦州医科大学

学位级别：硕士

目的DNA损伤应答系统缺失与恶性肿瘤发生息息相关,深层次的研究DNA损伤应答原理,了解DNA损伤应答机制能够更加方便的了解肿瘤发生机制,从而研发新型药物治疗肿瘤,为临床提供有力的理论基础。人类Rec Q解旋酶BLM参与DNA损伤反应、DNA代... 详细信息

目的DNA损伤应答系统缺失与恶性肿瘤发生息息相关,深层次的研究DNA损伤应答原理,了解DNA损伤应答机制能够更加方便的了解肿瘤发生机制,从而研发新型药物治疗肿瘤,为临床提供有力的理论基础。人类Rec Q解旋酶BLM参与DNA损伤反应、DNA代谢和遗传稳定性。BLM的功能缺失或突变会导致遗传不稳定以及Bloom综合征。但是目前癌症中调控BLM的分子机制还不清楚。本研究旨在证明去泛素化酶usp37与BLM相互作用,usp37去泛素化并稳定BLM,从而维持DNA损伤反应。方法1.在人类去泛素化酶库中筛选与BLM相互作用的去泛素化酶,转染酶库中的质粒至HEK-293T细胞48小时后,用10μM的MG132处理细胞4小时,收集细胞进行免疫共沉淀(Co-IP)实验,Western Blot检测与BLM产生互作的去泛素化酶。2.收集HEK293T细胞,用Ig G、usp37抗体或BLM抗体进行免疫沉淀,Western Blot检测内源性usp37与BLM的相互作用。3.使用慢病毒Sh RNA构建usp37 sh RNA稳定敲低的细胞株,Western Blot检测敲低usp37后BLM蛋白水平。4.构建usp37第350位氨基酸酶催化失活突变体(usp37C350A),将野生型HA-usp37-WT与点突变HA-usp37-CA质粒转染进usp37 sh RNA稳定敲低的细胞株中,裂解细胞,进行Western Blot检测BLM蛋白水平。5.在usp37sh RNA稳定细胞株中分别回补usp37-WT,usp37-CA。使用蛋白酶体抑制剂MG132及放线菌酮CHX处理,Western Blot检测BLM与usp37的蛋白水平。6.在对照组(Ctrl)或usp37sh RNA稳定细胞株中转染His-Ub,细胞在收获前用MG132处理6小时,使用Ni-NTA珠子拉下His标记的泛素,使用相应抗体检测BLM多聚泛素化水平。7.在指定的时间点收集顺铂处理的对照或usp37sh RNA稳定敲低的HEK293T细胞,Western Blot检测BLM蛋白水平以及BLM泛素化水平。8.构建usp37第114位磷酸化失活型突变体S114A以及模拟持续磷酸化突变体S114E,在usp37稳定敲低的细胞中,回补稳定表达usp37WT、S114A、S114E突变体,Western Blot检测BLM泛素化水平。9.使用顺铂处理usp37敲低稳定细胞,免疫荧光检测细胞中γ-H2AX foci形成。结果1.正反内源性IP实验证实usp37与BLM发生互作。2.慢病毒Sh RNA敲低usp37后显著降低BLM蛋白水平并增加BLM多聚泛素化水平。3.慢病毒Sh RNA敲低usp37的细胞中回补usp37 WT可恢复BLM蛋白水平,但回补usp37 CA突变不可以,并且在CHX处理下回补usp37-WT的细胞BLM蛋白稳定性增加。4.体内体外泛素化实验表明usp37敲低细胞中BLM的多聚泛素化增加,通过K48连接方式去泛素化BLM。5.使用顺铂处理细胞诱导DNA损伤后,usp37和BLM之间的互作增强。***37 S114磷酸化增强UPS37和BLM之间互作,ATM对usp37的S114磷酸化促进了usp37的活性从而促进了usp37对BLM的去泛素化水平的调控。7.顺铂处理后,usp37敲低细胞中的γ-H2AX FOCI数量增加,而且呈现时间依赖性,但是,在BLM敲除细胞中,同时敲低usp37并没有进一步促进γ-H2AX foci的形成。结论***双链断裂促进ATM磷酸化并增强usp37与BLM之间的结合。2.敲低usp37会增加BLM多聚泛素化水平,加速其蛋白水解,并削弱其在DNA损伤反应中的功能。

关键词： DNA损伤 BLM usp37 去泛素化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

去泛素化酶usp37通过稳定SAMHD1抑制HIV-2/SIV感染与复制

去泛素化酶USP37通过稳定SAMHD1抑制HIV-2/SIV感染与复制

引用

作者：崔文喆吉林大学

学位级别：硕士

作为一种宿主限制性因子,不育α基序和组氨酸/天冬氨酸残基结构域蛋白1(Sterile Alpha Motif and HD-Domain Containing Protein 1,SAMHD1),在抗病毒免疫中扮演着重要角色。SAMHD1通过发挥脱氧核糖核苷三磷酸水解酶活性与核酸外切酶活性... 详细信息

作为一种宿主限制性因子,不育α基序和组氨酸/天冬氨酸残基结构域蛋白1(Sterile Alpha Motif and HD-Domain Containing Protein 1,SAMHD1),在抗病毒免疫中扮演着重要角色。SAMHD1通过发挥脱氧核糖核苷三磷酸水解酶活性与核酸外切酶活性,下调胞内dNTPs池丰度并切割病毒单链RNA来阻断人类免疫缺陷病毒(HIV)的复制。然而围绕着SAMHD1的激活与抑制,HIV与宿主免疫系统间展开了一场特殊的“军备竞赛”。有研究表明,HIV-2/SIV辅助蛋白Vpx可招募CRL4 E3泛素连接酶复合体诱导靶蛋白SAMHD1多聚泛素化,进而通过26S蛋白酶体进行降解,实现病毒的免疫逃逸。众所周知,泛素化-去泛素化的动态调控是维持细胞内蛋白稳态的关键机制,去泛素化酶(Deubiquitinating Enzymes,DUBs)可以介导底物蛋白泛素链的剪切和泛素分子的回收,从而抑制底物蛋白的降解,或改变底物蛋白的功能和活性。因此,我们期望获得到一种高效的特异性去泛素化酶,拮抗Vpx诱导的SAMHD1泛素化,为抗HIV药物的研发和预防手段提供新的作用靶点和策略。本研究以拮抗Vpx降解SAMHD1为切入点,获得了高效稳定SAMHD1表达的去泛素化酶——usp37。并且进一步过表达/敲低usp37观察对SAMHD1稳定性的影响;分析usp37对不同亚型病毒Vpx的作用;验证usp37与SAMHD1的互作关系;探索usp37调控SAMHD1的多聚泛素链类型;构建usp37与SAMHD1的截短体进行结构域功能分析;评估磷酸化缺陷对usp37活性的影响;最终验证usp37在天然免疫中调控作用。经研究发现,在HEK293T细胞中共转染SAMHD1、SIVmac239-WT与usps表达质粒,去泛素化酶usp37可显著恢复SIVmac239-WT重组病毒降解的SAMHD1蛋白表达。同时,在THP-1细胞中敲低usp37,使SIVmac239-eGFP病毒的感染性增强,这进一步证明了usp37对SAMHD1具有稳定调节功能。鉴于SIVmac239对SAMHD1的降解主要依赖于Vpx蛋白,因此使用Vpx进行重复验证。结果显示,usp37不仅恢复了SIVmac239-Vpx降解的SAMHD1蛋白表达,同时可以抑制不同亚型重组病毒Vpx对SAMHD1的降解作用。在探索usp37调控SAMHD1的机制方面,我们发现usp37与SAMHD1特异性结合,而非通过CRL4 E3复合体间接互作。并且usp37靶向作用于K48和K63连接的多聚泛素链来稳定SAMHD1蛋白表达,尤其偏好作用于K48连接的多聚泛素链。此外,usp37调控SAMHD1依赖其酶活性中心(C350)和UIM基序(UIM2、3),当二者共同缺失则完全丧失去泛素化酶活性,而磷酸化缺陷对usp37的去泛素化功能并未产生显著影响。最后,我们验证了usp37在天然免疫调控中具有抗病毒活性与下调逆转子稳定性功能。发现过表达usp37可有效抑制SIV对THP-1细胞中SAMHD1的降解过程,具有显著的抗SIV活性。此外,usp37通过稳定SAMHD1表达可以有效抑制逆转座子LINE-1 eGFP的转座过程,有助于维持细胞基因组的稳定。综上所述,我们的研究发现usp37通过与SAMHD1相互作用并去泛素化,稳定SAMHD1蛋白的表达。在此过程中,usp37的酶活性中心和UIM基序是其抑制Vpx降解SAMHD1所必须的结构域。此外,usp37通过稳定SAMHD1抑制HIV-2/SIV复制和LINE-1逆转座活性。上述发现为寻找对抗HIV感染的策略提供了新的思路。

关键词： SAMHD1 usp37 HIV-2/SIV 去泛素化酶泛素化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞周期蛋白usp37作为非小细胞肺癌预后因子的研究

引用

热带医学杂志 2014年第8期14卷 1021-1024,F0004页

作者：陈树鹏吴少云李耀英中山大学肿瘤防治中心实验研究部广东广州510060 华南肿瘤学国家重点实验室广东广州510060

目的研究细胞周期蛋白usp37作为重要的细胞周期调控因子在肿瘤中的表达情况及其临床意义。方法应用Western blot方法确定usp37在非小细胞肺癌新鲜组织标本中的表达情况,采用免疫组化检测217例非小细胞肺癌蜡块标本usp37的表达并评分。用... 详细信息

目的研究细胞周期蛋白usp37作为重要的细胞周期调控因子在肿瘤中的表达情况及其临床意义。方法应用Western blot方法确定usp37在非小细胞肺癌新鲜组织标本中的表达情况,采用免疫组化检测217例非小细胞肺癌蜡块标本usp37的表达并评分。用ROC的方法确定usp37表达的cut-off point;检测usp37表达的情况与病人临床特征之间的相关性。结果 usp37在非小细胞肺癌组织中比其对应的癌旁组织明显高表达。usp37的高表达与非小细胞肺癌的淋巴结分期和Ki67相关。单因素和多因素分析都表明usp37可以作为非小细胞肺癌总生存及无病生存的独立预后因子。结论 usp37在非小细胞肺癌组织中高表达,而且过表达usp37可以作为非小细胞肺癌总生存时间和无疾病进展生存时间的独立预后因子。

关键词： usp37 非小细胞肺癌肿瘤标志物

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：