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uplc-q-orbitrap hrms技术分析荔枝叶不同极性部位化学成分及体外降血糖活性比较

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现代食品科技 2024年

作者：梁洁陆春莲黄冬芳郑飘雪梁炎丽谢晶晶彭嘉文马玉明魏江存秦祖杰广西中医药大学药学院广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西国际壮医医院

采用超高效液相色谱-四级杆-静电场路线阱高分辨质谱法（uplc-q-orbitraphrms）解析荔枝叶不同极性部位的化学成分；比较荔枝叶不同极性部位体外降血糖活性的强弱。PNPG法（p-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside）、DNS法（3,5-dinitro s... 详细信息

采用超高效液相色谱-四级杆-静电场路线阱高分辨质谱法（uplc-q-orbitraphrms）解析荔枝叶不同极性部位的化学成分；比较荔枝叶不同极性部位体外降血糖活性的强弱。PNPG法（p-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside）、DNS法（3,5-dinitro salicylic acid）考察荔枝叶不同极性部位对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶活性的抑制作用。化学成分鉴定结果表明荔枝叶不同极性部位中含29个化合物，分别为有机酸类8个，黄酮及其苷类10个，原花青素类3个，含氮类5个，香豆素类1个，糖苷类1个，其他类1个；体外降血糖活性比较考察结果发现，乙酸乙酯萃取相的抑制活性最强，IC50分别为54.50、122.20μg/m L。原儿茶酸、木犀草苷、表儿茶素、山柰酚等成分可能是乙酸乙酯萃取相体外降血糖活性作用的物质基础，这为后续的荔枝叶质量控制研究奠定了前期基础。

关键词：荔枝叶不同极性部位化学成分 uplc-q-orbitrap hrms 降血糖

基于uplc-q-orbitrap hrms结合网络药理学探讨半夏泻心汤入血成分及治疗脾虚型溃疡性结肠炎的作用机制

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天然产物研究与开发 2024年

作者：朱海燕杨福权左秦川房智彦黄丽莉淮文英王艳秋张天娥成都中医药大学基础医学院广元市中医医院蒲江县中医医院广州中医药大学深圳医院(福田) 中医药和干细胞研究中心(成都)

研究通过建立脾虚型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）模型，采用液相芯片对大鼠血清中炎性细胞因子进行高通量检测，同时以HE染色对结肠组织进行炎症分级评分，验证半夏泻心汤（Banxia Xiexin Tang，BXT）对脾虚型UC的药理作用... 详细信息

研究通过建立脾虚型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）模型，采用液相芯片对大鼠血清中炎性细胞因子进行高通量检测，同时以HE染色对结肠组织进行炎症分级评分，验证半夏泻心汤（Banxia Xiexin Tang，BXT）对脾虚型UC的药理作用。随后利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱（uplc-q-orbitrap hrms）对BXT入血成分进行分析，并结合网络药理学，探究BXT治疗脾虚型UC的作用机制。结果显示，UC能够增加大鼠血清中细胞因子白细胞介素-1α（interleukin-1α，IL-1α）、白细胞介素-10（interleukin-10，IL-10）、白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）、干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）表达水平；BXT可降低血清炎性细胞因子含量，且BXT高剂量组（20 g/kg）下降最明显，无明显炎细胞浸润，表明BXT对脾虚型UC具有一定的治疗作用。大鼠血清中发现入血成分共20个；网络药理学筛选出BXT治疗UC相关靶点87个，涉及炎症反应、炎症反应调节、微生物反应等生物过程，参与了IL-17、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF等信号通路。综上可知，BXT治疗脾虚型UC可能与抑制肠道炎症、调节肠道微生物及保护肠道屏障等多个途径相关，从而达到治疗UC效果。

关键词：半夏泻心汤脾虚型溃疡性结肠炎 uplc-q-orbitrap hrms 入血成分网络药理学作用机制

基于uplc-q-orbitrap hrms代谢组学和16S rRNA基因测序探讨骨疏丹补肾机制

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沈阳药科大学学报 2024年第6期41卷 675-685,698页

作者：佟琳冯啟圣张静陆晴石伟赵龙山熊志立沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016

目的整合代谢组学和肠道微生物组学的研究策略探讨骨疏丹(Gushudan, GSD)预防氢化可的松诱导的肾阳虚证(kidney-yang deficiency syndrome, KYDS)大鼠的补肾作用机制。方法分别采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(uplc... 详细信息

目的整合代谢组学和肠道微生物组学的研究策略探讨骨疏丹(Gushudan, GSD)预防氢化可的松诱导的肾阳虚证(kidney-yang deficiency syndrome, KYDS)大鼠的补肾作用机制。方法分别采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)的非靶向代谢组学和16S rRNA基因测序分析的肠道微生物组学方法,分析正常对照组、肾阳虚证模型组、骨疏丹给药组和阳性对照组大鼠粪便代谢物谱与肠道菌群组成,采用Pearson相关分析探讨内源性差异代谢物与差异菌群之间的相关性。结果基于uplc-q-orbitrap hrms的代谢组学方法在正负离子模式下共发现骨疏丹参与调控肾阳虚症的22种差异代谢物,如色氨酸、鹅去氧胆酸、肌酐和油酸酰胺等,主要涉及氨基酸代谢、胆汁酸代谢、能量代谢和脂质代谢。基于16S rRNA测序分析发现骨疏丹在属水平显著上调普雷沃氏菌(Prevotellaceae)的相对丰度(P<0.05),显著下调颤杆菌(Oscillibacter)的相对丰度(P<0.05)。相关性分析结果表明甘胆酸和鹅去氧胆酸与在属水平显著改变的普雷沃氏菌(Prevotellaceae)显著正相关(P<0.05),而与考拉杆菌(Phascolarctobacterium)显著负相关(P<0.05)。二十二碳六烯酸与毛螺菌(Lachnospiraceae)显著负相关(P<0.05)。结论骨疏丹通过良性调节内源性代谢和肠道菌群结构发挥补肾作用,为中药通过肠-肾轴治疗疾病提供新的思路和方法。

关键词：肾阳虚证骨疏丹代谢组学肠道菌群 uplc-q-orbitrap hrms 16S rRNA基因测序

基于uplc-q-orbitrap hrms结合网络药理学研究地黄抗抑郁成分及其作用机制

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中国中药杂志 2022年第4期47卷 1051-1063页

作者：韩德恩岳中胜李红伟刘改枝蔡邦荣田萍河南中医药大学药学院河南郑州450046 河南省中医药研究院河南郑州450004

通过网络药理学结合分子对接技术研究地黄抗抑郁的有效成分及作用机制。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术鉴定地黄主要成分,利用SwissTargetPrediction平台预测药物成分相关靶点,利用GeneCa... 详细信息

通过网络药理学结合分子对接技术研究地黄抗抑郁的有效成分及作用机制。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术鉴定地黄主要成分,利用SwissTargetPrediction平台预测药物成分相关靶点,利用GeneCards、OMIM、TTD数据库搜集与抑郁症相关联的靶点,利用STRING数据库构建靶点蛋白相互作用网络;通过Metascape数据库进行GO功能分析及KEGG通路富集分析。借助Cytoscape 3.7.2软件构建"成分-靶点-疾病"以及"成分-靶点-通路"网络,分析获取网络中的关键靶点与其对应成分,并利用分子对接进行初步验证。地黄包括环烯醚萜类、紫罗兰酮类、苯乙醇苷类三大类85个化学成分。网络分析结果显示,地黄抗抑郁的主要成分为梓醇、密力特苷、genameside C、栀子新苷、6-O-对香酰基筋骨草醇、京尼平龙胆双糖苷、jiocarotenoside A1、neo-rehmannioside、地黄苷C、吉奥诺苷C、吉奥诺苷D、毛蕊花糖苷、地黄苷、肉苁蓉苷F、leucosceptoside A 15个化合物,对应AKT1、ALB、IL6、APP、MAPK1、CXCL8、VEGFA、TNF、HSP90AA1、SIRT1、CNR1、CTNNB1、OPRM1、DRD2、ESR1、SLC6A4这16个抗抑郁核心靶点。分子对接发现,氢键和疏水作用可能是其主要作用的形式。地黄抗抑郁症的重要靶点显著富集于神经活性配体-受体相互作用、神经退行性病变-多种疾病通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路、5-羟色胺能突触、阿尔茨海默病等24个信号通路中。

关键词： uplc-q-orbitrap hrms 地黄抑郁症网络药理学分子对接

木芙蓉叶乙酸乙酯部位抗氧化与抗炎作用研究及uplc-q-orbitrap hrms分析

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天然产物研究与开发 2023年第9期35卷 1528-1539页

作者：黄李璐夏厚林冯丽萍叶磊严鑫熊静冯五文胡攀成都市中草药研究所成都610016 成都中医药大学药学院成都611137

研究木芙蓉叶乙酸乙酯部位的抗氧化与抗炎作用,并对其化学成分进行分析鉴定。采用CCK-8法测定木芙蓉叶不同极性部位对细胞存活率的影响,木芙蓉叶不同极性部位浓度为25~200μg/mL,对HaCaT细胞和RAW 264.7细胞无毒性。利用H 2 O 2诱导HaCa... 详细信息

研究木芙蓉叶乙酸乙酯部位的抗氧化与抗炎作用,并对其化学成分进行分析鉴定。采用CCK-8法测定木芙蓉叶不同极性部位对细胞存活率的影响,木芙蓉叶不同极性部位浓度为25~200μg/mL,对HaCaT细胞和RAW 264.7细胞无毒性。利用H 2 O 2诱导HaCaT细胞氧化应激反应,发现木芙蓉叶乙酸乙酯部位能最显著降低细胞内ROS含量(Puplc-q-orbitrap hrms)对乙酸乙酯部位的化学成分进行快速的分析,鉴定出28个化学成分:10个黄酮类、9个有机酸类、2个香豆素类、2个酚类、2个核苷类及3个其他类成分,黄酮类成分和有机酸类成分是其中主要化学成分,为其主要的活性物质基础,为进一步研究木芙蓉叶的药效物质基础以及开发利用提供了一定的理论基础。

关键词：木芙蓉叶乙酸乙酯部位抗氧化抗炎 uplc-q-orbitrap hrms 化学成分

基于uplc-q-orbitrap hrms技术的乔林与叶林杜仲叶次生代谢产物比较研究

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天然产物研究与开发 2022年第8期34卷 1385-1399页

作者：申梦园吴蓓段涵琪杨放晴王福陈鸿平刘友平西南特色中药资源国家重点实验室成都中医药大学药学院成都611130

本文应用超高效液相-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术,对乔林杜仲叶与叶林杜仲叶进行次生代谢产物分析,并比较其次生代谢产物差异。通过多级离子碎片信息结合mzCloud网络数据库、中药高分辨质谱数据库(OTCML)... 详细信息

本文应用超高效液相-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术,对乔林杜仲叶与叶林杜仲叶进行次生代谢产物分析,并比较其次生代谢产物差异。通过多级离子碎片信息结合mzCloud网络数据库、中药高分辨质谱数据库(OTCML),对照品比对及文献数据库进行准确定性。从乔林杜仲叶与叶林杜仲叶中共鉴定出次生代谢物62种,包括黄酮类9种,苯丙素类9种,环烯醚萜类2种,有机酸类21种,香豆素类5种,其他类成分16种,其中香豆素类成分为首次在杜仲叶中发现的成分。通过主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对各样品数据进行处理,结果乔林杜仲叶与叶林杜仲叶能够很好地区分,根据变量重要性投影(VIP)值>1筛选出两种栽培方式的杜仲叶在相对含量上存在差异的成分有10个,其中独立样本t检验中存在显著差异(P<0.05)的成分有D-(-)-奎尼酸、柠檬酸、4-甲基伞形酮、4,5-二咖啡酰奎宁酸、3′,4′-二羟基苯丙酮。该方法可准确、高效地测定杜仲叶中的化学成分及其相对含量变化,为杜仲叶的品质评价提了供理论依据。

关键词：乔林杜仲叶叶林杜仲叶次生代谢产物 uplc-q-orbitrap hrms 化学模式识别

基于uplc-q-orbitrap hrms技术的制川乌-白芍药对化学成分研究

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中药材 2023年第4期46卷 911-918页

作者：敬丽佳萧文科甘彦雄孟宪丽陈小睿郑世超成都中医药大学药学院四川成都611137 成都中医药大学智能医学学院四川成都611137

目的:研究制川乌-白芍配伍前后的成分差异。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术,对制川乌-白芍药对及其单味药定性分析。使用Thermo Scientific AccucoreTMC18色谱柱(100 mm×3 mm, 2.6... 详细信息

目的:研究制川乌-白芍配伍前后的成分差异。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术,对制川乌-白芍药对及其单味药定性分析。使用Thermo Scientific AccucoreTMC18色谱柱(100 mm×3 mm, 2.6μm)分离样品,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,通过Mass Range的正、负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能,对制川乌-白芍药对及其各饮片的水煎液快速分析;利用目标化合物的二级碎片离子信息对比mzVault、mzCloud数据库和对照品及相关文献报道的化合物质谱信息。结果:制川乌-白芍药对供试品共检测到184个化合物,其中56个可能为配伍后新生成的化合物,包含生物碱类化合物8个、黄酮类化合物9个、酚酸类化合物15个、苯丙素类化合物8个、其他类化合物16个。结论:该研究发现川乌配伍白芍后可产生新的化合物,为进一步研究制川乌-白芍药对的药效物质提供参考。

关键词：制川乌白芍 uplc-q-orbitrap hrms 药对

基于uplc-q-orbitrap hrms技术的真武汤化学成分分析

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中药材 2022年第5期45卷 1134-1142页

作者：田萍马开梁瑞峰张薇张迪文韩德恩河南省中医药研究院河南郑州450004 河南中医药大学药学院河南郑州450046

目的:应用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术,对真武汤中的化学成分进行定性分析。方法:色谱柱为Waters ACqUITY uplc^(■)HSS C_(18)(150 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,... 详细信息

目的:应用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术,对真武汤中的化学成分进行定性分析。方法:色谱柱为Waters ACqUITY uplc^(■)HSS C_(18)(150 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;进样量5μL;柱温30℃。采用电喷雾离子源,正、负离子扫描模式下采集质谱信息,运用Compound Discoverer 3.0软件将未知化合物的一级、二级质谱信息与对照品、参考文献及数据库中的化合物质谱信息进行比对分析。结果:从真武汤中共指认出120个化合物,包括生物碱类、内酯类、单萜苷类、三萜酸类、姜辣素类、有机酸类、倍半萜类、香豆素类、醛类及苷类化合物。其中22个化合物经对照品验证。结论:该方法可快速、准确分析真武汤的化学成分,为真武汤药效物质基础研究提供实验依据。

关键词：真武汤 uplc-q-orbitrap hrms 生物碱类内酯类单萜苷类三萜酸类姜辣素类

基于uplc-q-orbitrap hrms和GC-MS技术的抗病毒颗粒化学成分分析

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中国医院药学杂志 2023年第2期43卷 134-144页

作者：田世民谢锦尚强黄浩洲李东张定堃韩丽郑川成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室四川成都611137 四川光大制药有限公司四川彭州611930 四川省抗病毒中药产业化工程技术研究中心四川彭州611930 国家中药现代化工程技术研究中心川药资源分中心四川彭州611930 成都中医药大学附属医院四川成都610072

目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(uplc-q-orbitrap hrms)技术和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术快速鉴定抗病毒颗粒的化学成分。方法:uplc-q-orbitrap hrms采用Thermo Scientific AccucoreTMC18色谱柱(3 mm×100 mm, 2.6μm),以甲醇-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱;正、负离子模式下采集数据。根据精确质荷比和二级碎片离子信息,结合对照品和文献数据对抗病毒颗粒的醇溶性成分进行快速鉴定。GC-MS选用Agilent HP-5毛细管色谱柱(30 m×250μm, 0.25μm),载气为氮气;质谱采用EMV模式:增益因子1.00。将色谱峰信息与NIST标准质谱库进行检索对比,对抗病毒颗粒的挥发性成分进行快速鉴定。结果:从抗病毒颗粒中共鉴别出了155个化合物,包括木脂素类8个、黄酮类15个、香豆素类9个、生物碱类9个、有机酸类31个、糖类6个、萜类38个、氨基酸类6个、核苷类7个、苯乙醇苷类11个和其他类化合物15个。结论:建立了抗病毒颗粒uplc-q-Exactive MS和GC-MS的分离鉴定方法,为阐释该复方的药效物质基础提供了依据。

关键词：抗病毒颗粒 uplc-q-orbitrap hrms GC-MS 化学成分裂解规律