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UPLC指纹图谱多模式识别结合多指标成分测定的清热消炎宁胶囊质量控制研究

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中草药 2023年第15期54卷 4856-4865页

作者：韦卓纯林绘彭颖张卉青李健东莞市滨海湾中心医院广东东莞523905

目的建立清热消炎宁胶囊(Qingre Xiaoyanning Capsules,QXC)UPLC指纹图谱及多指标成分定量分析方法,结合化学模式识别技术对多批次制剂进行质量评价。方法通过优化样品前处理及色谱检测方法,建立合适UPLC指纹图谱和含量测定条件。色谱柱... 详细信息

目的建立清热消炎宁胶囊(Qingre Xiaoyanning Capsules,QXC)UPLC指纹图谱及多指标成分定量分析方法,结合化学模式识别技术对多批次制剂进行质量评价。方法通过优化样品前处理及色谱检测方法,建立合适UPLC指纹图谱和含量测定条件。色谱柱为uplc HSS T3柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm);乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;检测波长280 nm;柱温40℃;体积流量0.5 mL/min。采用层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)和聚类热图分析对20批清热消炎宁胶囊进行质量评价。结果清热消炎宁胶囊UPLC指纹图谱及含量测定方法学考察结果均符合测定要求,获得21个共有峰,运用对照品比对方式指认了7个色谱峰;20批样品的相似度均大于0.954,样品间一致性及稳定性良好;由HCA可知,20批样品可大致聚成2类;PCA从21个共有峰中提取了4个主成分,通过OPLS-DA筛选了迷迭香酸、绿原酸、隐绿原酸、丹参素钠、新绿原酸等8个影响样品质量差异性较大的化合物;7个定量成分线性关系均良好(r≥0.9998),平均加样回收率98.41%~101.18%,RSD均不大于1.81%;聚类热图分析结果表明,20批样品可聚为2类。结论建立的同一色谱条件下的清热消炎宁胶囊UPLC指纹图谱结合多指标成分定量方法专属性强、简便、准确,可为其整体质量控制和品质评价提供参考依据。

关键词：清热消炎宁胶囊 UPLC指纹图谱聚类分析主成分分析正交偏最小二乘-判别分析定量分析聚类热图分析质量控制迷迭香酸绿原酸隐绿原酸丹参素钠新绿原酸

基于UPLC指纹图谱和黄酮醇苷含量的不同来源银杏叶的质量比较

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中草药 2022年第13期53卷 4125-4131页

作者：黄申朱波张巧艳林榴芬尤金玲蒙雄裕张泉龙秦路平浙江中医药大学药学院浙江杭州310053

目的比较不同产地、性别、树龄银杏Ginkgobiloba叶在同一采收期的质量,为其资源评价提供依据。方法收集5个产地共36批的银杏单株叶样品,采用超高效液相色谱法测定芦丁、槲皮素、异鼠李素和山柰素含量。用国家药典委员会中药色谱指纹图... 详细信息

目的比较不同产地、性别、树龄银杏Ginkgobiloba叶在同一采收期的质量,为其资源评价提供依据。方法收集5个产地共36批的银杏单株叶样品,采用超高效液相色谱法测定芦丁、槲皮素、异鼠李素和山柰素含量。用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件处理分析,建立银杏叶药材UPLC指纹图谱。结合主成分分析及偏最小二乘判别分析探讨不同性别银杏叶的质量差异。结果各组样品相似度均大于0.85,雌株之间相似度低于雄株;产地、性别和树龄对银杏叶的化学成分组成和比例有一定的影响,成熟植株指纹图谱相似度变化幅度大于苗期植株;HM居群与其它居群样品的物候期不同。结论不同产地雌雄株银杏叶的性状特征存在差异。LT居群银杏叶质量较佳且更稳定;苗期植株稳定性高于成熟植株;不同性别银杏叶质量差异标志物有所差异。为控制银杏叶内在质量建立了UPLC指纹图谱快速检测方法,并进行指纹图谱相似度评价,结合主成分分析及偏最小二乘判别分析方法用于分析不同性别银杏叶的质量,为银杏叶的质量比较和资源评价提供了科学依据。

关键词：银杏叶 UPLC指纹图谱黄酮醇苷质量差异芦丁槲皮素异鼠李素山柰素

基于UPLC指纹图谱和多成分定量评价不同产地升麻药材质量

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中草药 2022年第17期53卷 5497-5503页

作者：周湘媛陈万发丁青马懿飞曹斯琼霍文杰魏梅秦升李振雨广东一方制药有限公司广东佛山528244 广东省中药配方颗粒企业重点实验室广东佛山528244 中国中药控股有限公司广东佛山528303

目的采用超高效液相色谱法(uplc)建立升麻药材指纹图谱,并同时测定3种有效成分的含量,评价不同产地升麻药材质量的差异。方法采用uplc法进行测定,色谱柱为Agilent SB C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱... 详细信息

目的采用超高效液相色谱法(uplc)建立升麻药材指纹图谱,并同时测定3种有效成分的含量,评价不同产地升麻药材质量的差异。方法采用uplc法进行测定,色谱柱为Agilent SB C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,波长为320 nm,柱温为35℃,进样量为1μL;建立15批升麻药材指纹图谱,通过对照品比对并结合质谱分析,对共有峰进行鉴定,并对3种成分的含量进行测定;对15批升麻药材指纹图谱进行相似度评价及主成分分析(principal component analysis,PCA),利用正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)寻找不同产地升麻药材的差异性成分。结果升麻药材指纹图谱有16个共有峰,指认出其中3个峰,分别为咖啡酸、阿魏酸和异阿魏酸;除辽宁产区的3批样品外,其余12批相似度均大于0.95;PCA将15批升麻药材划分为2类,OPLS-DA法确定7个差异标志物,差异显著性排序,分别为峰7>峰11>峰9>峰8>峰10>咖啡酸>峰4。辽宁产区咖啡酸、阿魏酸和异阿魏酸总含量明显高于其它产地。结论该方法能有效地分析不同产地升麻药材质量的差异性,为不同产地升麻药材质量的评价提供参考。

关键词：升麻药材 UPLC指纹图谱多成分定量差异标志物咖啡酸阿魏酸异阿魏酸

UPLC指纹图谱结合化学计量学方法比较当归和欧当归药材的成分差异

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中草药 2022年第22期53卷 7214-7220页

作者：王亚丹陈明慧闫建功马萧姚令文戴忠马双成中国食品药品检定研究院北京100050 河北中医学院河北省中药炮制技术创新中心河北石家庄050200 甘肃省药品检验研究院甘肃兰州730070

目的建立当归Angelica sinensis和欧当归Levisticum officinal药材的指纹图谱,结合化学计量学方法寻找二者的成分差异,从而为建立欧当归掺伪当归的鉴别方法提供依据。方法采用uplc法建立指纹图谱,色谱柱为Waters Cortecs T3柱(100 mm... 详细信息

目的建立当归Angelica sinensis和欧当归Levisticum officinal药材的指纹图谱,结合化学计量学方法寻找二者的成分差异,从而为建立欧当归掺伪当归的鉴别方法提供依据。方法采用uplc法建立指纹图谱,色谱柱为Waters Cortecs T3柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm);流动相为0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为0.4 mL/min;柱温35℃;检测波长为210 nm。采用相似度评价、主成分分析(principal component analysis,PCA)和层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)对2种药材的指纹图谱进行评价,寻找2者的成分差异。采用uplc-MS/MS及NMR波谱等技术对主要差异性成分进行鉴定。结果从当归和欧当归指纹图谱中分别识别出23个和19个共有峰,与当归指纹图谱共有模式相比,当归样品组内有3批样品相似度较低,为0.59~0.80,其余样品相似度均大于0.99,而欧当归与之相比,相似度在0.53~0.94,且组内差异较大。PCA和HCA结果显示,当归和欧当归可明显分为2组,对区分贡献较大的色谱峰有6个,鉴定为色氨酸、阿魏酸、E-藁本内酯、欧当归内酯A异构体、绿原酸和法卡林二醇,其中后2种成分在欧当归中含量较高,其余成分在当归中含量较高。结论建立的UPLC指纹图谱结合化学计量学评价方法,简便可行,可有效区分当归和欧当归并揭示其差异性成分,为当归的质量控制及掺伪欧当归鉴别方法建立提供依据。同时首次从欧当归中分离得到法卡林二醇,该化合物为欧当归区别于当归的主要成分。

关键词：当归欧当归 UPLC指纹图谱化学计量学法卡林二醇色氨酸阿魏酸 E-藁本内酯欧当归内酯A异构体绿原酸

马鞭草药材UPLC指纹图谱建立及指标性成分的测定

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天然产物研究与开发 2023年第4期35卷 551-561页

作者：李振雨梁月仪吕渭升黄爽杨洁卢晓莹陈向东孙冬梅广东一方制药有限公司广东省中药配方颗粒企业重点实验室佛山528244

建立马鞭草药材指纹图谱,并对4种有效成分的含量进行测定,为马鞭草药材质量控制提供参考。采用超高效液相色谱(uplc)法建立马鞭草药材指纹图谱,并利用高分辨质谱对共有峰进行指认,以15批马鞭草药材指纹图谱共有峰的相对峰面积为变量,进... 详细信息

建立马鞭草药材指纹图谱,并对4种有效成分的含量进行测定,为马鞭草药材质量控制提供参考。采用超高效液相色谱(uplc)法建立马鞭草药材指纹图谱,并利用高分辨质谱对共有峰进行指认,以15批马鞭草药材指纹图谱共有峰的相对峰面积为变量,进行化学计量学分析,并对15批马鞭草药材有效成分戟叶马鞭草苷、马鞭草苷、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量进行测定。结果显示,马鞭草药材指纹图谱有16个共有峰,并指认出其中6个成分,聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)将15批药材分为3类,正交偏最小二乘法-判别式分析(OPLS-DA)共筛选出7个VIP>1.0的差异性成分。含量测定结果显示,不同产区的马鞭草药材戟叶马鞭草苷、马鞭草苷、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量存在较大的差异。该方法能有效分析不同产地马鞭草药材的质量差异,为不同产地马鞭草药材质量的评价提供参考。

关键词：马鞭草 UPLC指纹图谱化学计量学分析含量测定

基于uplc多指标含量测定和指纹图谱的不同种质金银花药材质量评价研究

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中草药 2024年第3期55卷 947-955页

作者：王淑张翠翠郭凤丹孙新茹李圣波林慧彬管仁伟山东省中医药研究院山东济南250014 山东亚特生态技术股份有限公司山东临沂276017

目的建立金银花药材超高效液相色谱(uplc)指纹图谱,并对有效成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的含量进行测定,为不同种质金银花药材的质量... 详细信息

目的建立金银花药材超高效液相色谱(uplc)指纹图谱,并对有效成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、马钱苷、当药苷、断氧化马钱子苷、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的含量进行测定,为不同种质金银花药材的质量评价提供参考。方法采用超高效液相色谱仪,Thermo AccucoreTM C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.6μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,体积流量为0.3 mL/min,梯度洗脱,分段检测波长324 nm(0~13.5 min)、238 nm(13.5~18 min)、354 nm(18~27 min)、324 nm(27~40 min),柱温30℃,进样量2μL;通过对照品比对,对共有峰进行鉴定,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件构建指纹图谱,进行相似度评价;通过主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial leastsquares discrimination analysis,OPLS-DA)比较不同种质金银花药材的质量差异;并对不同种质金银花药材12种成分的含量进行测定。结果建立10种不同种质金银花指纹图谱,标定共有峰11个,并指认了9个化学成分,分别为新绿原酸(1号峰)、绿原酸(2号峰)、隐绿原酸(3号峰)、马钱苷(4号峰)、断氧化马钱子苷(5号峰)、木犀草苷(7号峰)、异绿原酸B(8号峰)、异绿原酸A(9号峰)、异绿原酸C(11号峰);相似度评价结果显示,10种金银花指纹图谱相似度在0.723~0.996,除S23的相似度为0.723以外,其余金银花相似度均大于0.91;运用PCA和OPLS-DA将6批金银花明显区分,OPLS-DA筛选出4个差异性标志物,根据VIP值排序,分别为断氧化马钱子苷>新绿原酸>马钱苷>隐绿原酸;含量测定结果显示,不同种质金银花的各发育期成分含量变化不同。结论通过金银花UPLC指纹图谱与多成分化学模式识别研究相结合,可有效评价不同种质金银花药材的质量差异性,为不同种质金银花药材的质量控制提供参考。

关键词：金银花 UPLC指纹图谱新绿原酸绿原酸隐绿原酸马钱苷断氧化马钱子苷木犀草苷异绿原酸B 异绿原酸A 异绿原酸C 模式识别质量评价

不同基原厚朴UPLC指纹图谱及化学模式识别研究

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中草药 2022年第1期53卷 244-249页

作者：李振雨陈万发王利伟魏梅孙冬梅赵书运吕渭升李定发广东一方制药有限公司广东佛山528244 广东省中药配方颗粒企业重点实验室广东佛山528244 中国中药控股有限公司广东佛山528303 广州市药品检验所广东广州510160

目的建立厚朴Magnolia officinalis、凹叶厚朴M. officinalis var. biloba 2种基原厚朴药材的超高效液相色谱(uplc)指纹图谱,为厚朴药材的质量控制提供参考。方法采用uplc法,色谱柱为Waters Acquity uplc■BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为0.4 mL/min;波长294 nm;柱温30℃;进样量为1μL。通过相似度评价、聚类分析(cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别式分析(orthogonal partial least squares method-discriminant analysis,OPLS-DA)和t检验对2种基原厚朴的指纹图谱进行评价。结果厚朴、凹叶厚朴指纹图谱均具有9个共有峰,通过与对照品比对,指认出其中2个共有峰,分别为厚朴酚、和厚朴酚。13批厚朴指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.907~0.993,6批凹叶厚朴与厚朴对照指纹图谱的相似度为0.770~0.895;CA将19批厚朴归为3类,并结合PCA和OPLS-DA发现4个差异性标志物,经t检验,2种基原厚朴4种差异性标志物的含量具有显著差异(P<0.05);凹叶厚朴中峰2、4、7代表的化学成分含量高于厚朴,而厚朴中和厚朴酚含量要高于凹叶厚朴。结论该方法操作简单,专属性强,为2种基原厚朴药材的区分和质量控制提供参考。

关键词：厚朴凹叶厚朴 UPLC指纹图谱化学模式识别聚类分析主成分分析厚朴酚和厚朴酚

UPLC指纹图谱结合多元统计分析的吴茱萸与制吴茱萸成分变化研究

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天然产物研究与开发 2022年第8期34卷 1301-1310页

作者：杨文惠吕渭升孙冬梅罗文汇杨洁何民友潘礼业李振雨广东一方制药有限公司广东省中药配方颗粒企业重点实验室佛山528244 江西一方天江药业有限公司南昌330000

建立吴茱萸及制吴茱萸指纹图谱,并结合多元统计分析吴茱萸与制吴茱萸中化学成分的变化。采用超高效液相色谱(uplc)技术。色谱柱为YMC Triart C(100 mm×2.1 mm,1.9μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水(梯度洗脱),流速为0.30 mL/min,柱温为30℃... 详细信息

建立吴茱萸及制吴茱萸指纹图谱,并结合多元统计分析吴茱萸与制吴茱萸中化学成分的变化。采用超高效液相色谱(uplc)技术。色谱柱为YMC Triart C(100 mm×2.1 mm,1.9μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水(梯度洗脱),流速为0.30 mL/min,柱温为30℃,检测波长为254 nm,进样量为1μL。建立吴茱萸与制吴茱萸UPLC指纹图谱,并采用相似度计算和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)对指纹图谱进行分析评价,以变量重要性投影(VIP)值大于1为标准筛选吴茱萸炮制前后的差异性成分。以平均峰面积为变量,对吴茱萸和制吴茱萸差异成分色谱峰的平均峰面积进行配对t检验。吴茱萸指纹图谱共标识出27个共有指纹峰,指认了其中8个化学成分,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、金丝桃苷、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱。制吴茱萸经炮制后指纹图谱新增甘草酸色谱峰。相似度结果显示,江西产区相似度较低;湖南产区次之;广西产区较高。正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)共找到6个差异性标志物,差异显著性排序分别为甘草酸>吴茱萸碱>峰3>峰1>绿原酸>峰2。除甘草酸为新增成分外,吴茱萸炮制后其余5种化学成分的含量均有一定程度降低。吴茱萸炮制后,峰21(吴茱萸碱)平均峰面积明显降低,P<0.05,峰28(甘草酸)为新增成分,其余5个差异性化学成分的平均峰面积均有不同程度的降低,但无明显统计学意义。本分析方法专属性强,重复性好,初步探讨了吴茱萸与制吴茱萸药理作用与化学成分的相关性,一定程度上阐释了吴茱萸炮制前后药理作用改变与化学成分变化之间的联系,可为吴茱萸和制吴茱萸质量及炮制研究提供数据参考。

关键词：吴茱萸制吴茱萸 UPLC指纹图谱相似度正交偏最小二乘判别分析

基于UPLC指纹图谱结合色度值的槐花炮制前后变化规律研究

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南京中医药大学学报 2023年第7期39卷 657-668页

作者：黄瑶陈巧华方朝缵邓怡芳王文丽胡懿张志鹏广东一方制药有限公司广东省中药配方颗粒企业重点实验室广东佛山528244

目的分析槐花炮制前后UPLC指纹图谱与色度值的差异及动态变化规律,为槐花生品、炒槐花、槐花炭的鉴别及炮制工艺研究提供参考。方法建立槐花炮制前后样品的UPLC指纹图谱,采用分光测色仪测定色度值,结合相似度评价、单因素方差分析、聚... 详细信息

目的分析槐花炮制前后UPLC指纹图谱与色度值的差异及动态变化规律,为槐花生品、炒槐花、槐花炭的鉴别及炮制工艺研究提供参考。方法建立槐花炮制前后样品的UPLC指纹图谱,采用分光测色仪测定色度值,结合相似度评价、单因素方差分析、聚类分析、主成分分析以及正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等方法,研究槐花生品、炒槐花、槐花炭的差异性,同时分析槐花炮制过程中指纹图谱与色度值的动态变化规律。结果槐花炮制前后指纹图谱和色度值差异明显。槐花生品、炒槐花、槐花炭分别标定了15、16、14个共有峰,指认了峰2、峰3、峰8、峰9、峰10、峰11、峰14、峰15分别为5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷、槲皮素、山柰素,其中峰1和峰2(5-羟甲基糠醛)为炮制后新增的特征峰,峰17则在炮制后缺失;槐花炮制前后色度值发生明显变化,其中槐花炭的色度值L^(*)、b^(*)、E^(*)远低于槐花生品和炒槐花,炒槐花的色度值a^(*)稍高于槐花生品和槐花炭,依据色度值可区分槐花生品、炒槐花和槐花炭样品;聚类分析和主成分分析均可将槐花生品、炒槐花和槐花炭进行区分;OPLS-DA结果表明,芦丁和槲皮素是槐花生品、炒槐花、槐花炭主要的差异成分(VIP值>1)。槐花生品在炮制46 min内,峰1~峰16的峰面积/称样量/1000比值均呈现先增大后减小的规律,峰17则呈现一直减小的规律。以饮片色泽为评价指标,炒制温度为160℃时,炒槐花、槐花炭的炒制时间应分别以4~6、14~18 min为宜。结论建立的UPLC指纹图谱和色度值的测定方法可为槐花生品、炒槐花、槐花炭的鉴别以及炮制工艺研究提供参考。

关键词：槐花生品炒槐花槐花炭 UPLC指纹图谱色度值化学模式识别